Sonic hedgehog和β-连环蛋白在胰腺癌组织中的表达及其相关性研究

目的 研究胚胎发育信号通路Sonic hedgehog(SHH)和WNT/β-catenin在胰腺癌组织中的表达及其临床意义.方法 逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western印迹法检测胰腺癌组织及癌旁组织中SHH和β-catenin的mRNA和蛋白表达情况.结果 SHH mRNA和蛋白在胰腺癌组织中的阳性率分别为81.6%和79.6%,与癌旁组织相比,差异有统计学意义(P＜0.05).β-catenin蛋白在胰腺癌组织中的阳性率为71.4%,与癌旁组织相比,差异有统计学意义(P＜0.05).而β-catenin mRNA在胰腺癌组织和癌旁组织中的表达水平均较低,差异无统计学意义(P＞0.05).SHH和β-catenin蛋白表达与年龄、肿瘤大小、组织学类型和肿瘤部位等病理因素均无关(P＞0.05),而在不同淋巴结转移状况和TNM分期的病例组中,二者表达差异有统计学意义(P＜0.05).配对资料的Spearman相关分析显示,SHH表达与β-catenin表达呈正相关关系(r=0.352,P＜0.05).结论 SHH和WNT/β-catenin信号通路在胰腺癌组织中呈活化状态,二者之间的交叉对话对胰腺癌的发生发展可能起重要作用.     

胚胎发育信号通路Sonic hedgehog在胰腺癌组织中的表达及意义

目的 研究胚胎发育信号通路Sonic hedgehog(SHH)在胰腺癌组织中的表达及其临床意义.方法 逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术和免疫组化方法检测胰腺癌组织及癌旁组织中SHH mRNA和蛋白的表达情况.结果 78.9%(30/38)胰腺癌组织中检测到SHH mRNA)18.4%(7/38)癌旁正常组织SHH mRNA阳性.免疫组化结果显示:84.2%(32/38)胰腺癌组织SHH蛋白呈阳性表达;癌旁胰腺组织SHH阳性率为21.1%(8/38).两组差异有显著意义(P<0.01).SHH蛋白表达与年龄、肿瘤大小、TNM分期、淋巴结转移状况、组织学类型和肿瘤部位均无关(P>0.05).结论 SHH信号分子在胰腺癌组织中表达增高,SHH信号途径可能在胰腺癌发生发展过程中起重要作用.     

食管鳞状细胞癌组织中酪氨酸激酶受体B和脑源性神经生长因子蛋白及mRNA的表达及意义

目的 探讨酪氨酸激酶受体B( TrkB)和脑源性神经生长因子(BDNF)蛋白及mRNA在食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中的表达及其意义.方法 应用免疫组织化学及原位杂交法检测59例ESCC、27例癌旁不典型增生组织及36例正常食管黏膜组织中TrkB和BDNF蛋白及mRNA的表达.结果 ESCC组织中TrkB蛋白及mRNA的阳性表达率分别为71.2％和64.4％,显著高于癌旁不典型增生组织(阳性率分别为48.1％和33.3％)及正常食管黏膜组织(阳性率均为0.0％),组间比较差异有统计学意义(P＜0.05);此外,BDNF蛋白和mRNA在ESCC组织中的阳性表达率分别为76.3％和69.5％,也显著高于癌旁不典型增生组织(阳性率分别为55.6％和40.7％)及正常食管黏膜组织(阳性率均为0.0％),组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).TrkB和BDNF蛋白及mRNA的表达均与ESCC的分化程度、浸润深度和淋巴结转移密切相关(P＜0.05).进一步相关分析结果显示,TrkB mRNA和蛋白的表达均与BDNF mRNA和蛋白的表达呈正相关(P＜0.05).结论 TrkB和BDNF蛋白及mRNA表达与ESCC的发生、发展和转移密切相关.     

胰腺癌中CIP2A与p-Akt、N-cadherin、MMP-9的表达及其临床意义

目的:探讨胰腺癌组织中蛋白磷酸酶2A癌性抑制因子(CIP2A)、p-Akt、N-cadherin及MMP-9蛋白的表达及其临床意义。方法:采用免疫组织化学法检测42例胰腺癌及癌旁组织中CIP2A、p-Akt、N-cadherin和MMP-9的表达情况,分析其与临床病理因素的关系。结果:CIP2A在胰腺癌及癌旁组织中的表达率分别为71.4%、7.7%,差异有统计学意义(P0.05);p-Akt在胰腺癌及癌旁组织中的表达率分别为66.7%、11.5%,差异有统计学意义(P0.05)。N-cadherin在胰腺癌及癌旁组织中的表达率分别为59.5%、7.7%,差异有统计学意义(P0.05)。MMP-9在胰腺癌组织及癌旁组织中的表达率分别为61.9%、15.4%,差异有统计学意义(P0.05)。CIP2A、p-Akt在胰腺癌组织中的表达与分化程度、TNM分期、淋巴结转移明显相关(均P0.05),N-cadherin、MMP-9在胰腺癌组织中的表达与分化程度、TNM分期、神经浸润、淋巴结转移明显相关(P0.05)。胰腺癌组织中,CIP2A和p-Akt、N-cadherin和MMP-9的表达均呈正相关(均P0.05);p-Akt与N-cadherin及MMP-9的表达均呈正相关(P0.05);N-cadherin与MMP-9的表达呈正相关(P0.05)。结论:CIP2A参与了胰腺癌恶性进展,可能通过PI3K/Akt信号通路诱导上皮间质转化,促进胰腺癌增殖、侵袭和转移。CIP2A有望成为治疗胰腺癌的一个靶向治疗基因。     

人RUNT相关转录因子3、细胞周期素在胰腺癌组织中mRNA水平的表达及其与临床病理因素的关系

目的 探讨人RUNT相关转录因子3(RUNX3)、细胞周期素(Cyclin D1)基因在胰腺癌组织和癌旁组织中mRNA表达水平与临床意义.方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测RUNX3、Cyclin D1基因在42例胰腺癌组织及其癌旁组织中mRNA表达水平,并分析RUNX3、Cyclin D1基因mRNA表达与临床病理因素的关系.结果 (1)RUNX3基因在42例胰腺癌组织中mRNA表达量相对值为:0.2469±0.0708;相应癌旁组织中相对值为:0.7091±0.1764,两者差异有统计学意义(t=15.7036,P＜0.01).(2) RUNX3基因mRNA表达水平在分化程度、淋巴结转移、临床分期等病理因素的差异有统计学意义(P＜0.05),而与性别、年龄等因素无明显相关(P＞0.05).(3) Cyclin D1基因在42例胰腺癌组织中mRNA表达量相对值为:0.7769±0.1456;相应癌旁组织中相对值为:0.2860±0.1224,两者差异有统计学意义(t=18.9158,P＜0.01).(4) Cyclin D1基因mRNA表达水平在分化程度、淋巴结转移、临床分期等病理因素的差异有统计学意义(P＜0.05),而与性别、年龄等因素无明显相关(P＞0.05).(5)胰腺癌中RUNX3基因的mRNA表达抑制与Cyclin D1基因的过表达呈明显相关(r=-0.320,P＜0.05).结论 RUNX3基因在胰腺癌组织中mRNA 表达抑制,Cyclin D1基因在胰腺癌组织中mRNA过表达,RUNX3表达抑制或缺失及Cyclin D1过表达与胰腺癌的发生、发展有关.     

硫氧化还原蛋白在胰腺癌中的表达及意义

目的 探讨硫氧化还原蛋白在胰腺癌及癌旁组织中的表达情况及其临床意义.方法 分别采用RT-PCR和Western印迹检测胰腺癌及癌旁组织中硫氧化还原蛋白的mRNA和蛋白表达量.结果 RT-PCR结果 显示硫氧化还原蛋白mRNA在胰腺癌组织中过表达(RI=0.80±0.08),在癌旁组织中低表达(RI=0.39±0.15);Western印迹结果 同样提示硫氧化还原蛋白在胰腺癌组织中的表达(PrI=0.81±0.10)明显高于癌旁组织(PrI=0.30±0.11),两者相比差异具有统计学意义(P<0.05).进一步结合临床资料分析,发现胰腺癌组织中硫氧化还原蛋白表达量与性别、病变部位和组织分化程度无关(P>0.05),而与肿瘤TNM分期密切相关,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 硫氧化还原蛋白在缺氧和氧化应激环境下促进肿瘤细胞存活和胰腺癌的进展,在胰腺癌的发生发展过程中起到重要的介导作用.     

Hh信号通路相关因子Shh、Ptch1、Gli1 mRNA的表达及意义

目的探讨前列腺癌、癌旁前列腺组织以及正常前列腺增生组织中Hedgehog(Hh)信号通路相关因子Shh、Ptch1、Gli1 mRNA的表达及意义。方法选择2017年2月至2019年2月本院收治的42例前列腺癌患者作为研究对象, 设为观察组。所有患者均拟手术治疗, 术中取癌组织与癌旁组织(距离病灶≥3 cm);选择同期手术治疗的39例前列腺增生患者的手术标本, 设为对照组。利用免疫组化和qRT-PCR技术检测前列腺增生、前列腺癌和癌旁组织中Hh信号通路相关因子Shh、Ptch1和Gli1蛋白及mRNA的表达情况, 分析比较Hh信号通路在前列腺增生、前列腺癌和癌旁组织中表达的差异及其机制。结果观察组的癌旁组织与对照组的Shh、Ptch1和Gli1蛋白阳性率比较, 差异均无统计学意义(均P>0.05);观察组的癌组织中Shh、Ptch1和Gli1蛋白阳性率均高于对照组(均P<0.05)。观察组的癌旁组织与对照组的Shh、Ptch1和Gli1 mRNA表达水平比较, 差异均无统计学意义(均P>0.05);观察组的癌组织中Shh、Ptch1和Gli1 mRNA表达水平均高于观...     

SHH蛋白在胰腺癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨胚胎发育信号通路蛋白SHH在胰腺癌组织及其临床意义。方法:用免疫组化法检测45例胰腺癌组织与30例胰腺良性病变组织中SHH的表达,并分析SHH表达与胰腺癌患者临床病理特征及预后的关系。结果:胰腺癌组织中的SHH蛋白阳性表达率明显高于胰腺良性病变组织(66.67%vs.0.00%,P0.05)。胰腺癌组织中的SHH蛋白的阳性表达与是否患者的淋巴节转移、肿瘤分化程度、TNM分期明显有关(均P0.05)。SHH表达阳性表达胰腺癌患者与SHH表达阴性患者的3年生存率及中位生存时间差异均无统计学意义(26.67%vs.20.00%;18.4个月vs.15.6个月,均P0.05)。结论:SHH在胰腺癌组织中的阳性表达率增高,其阳性表达可能与患者的疾病进展有关,但与患者的远期预后关系尚不明确。     

胰腺癌组织smad4mRNA,TGF-β1和TGF-βR1的表达及意义

目的研究胰腺癌组织中smad4mRNA,TGF-β1和TGF-βR1的表达及其生物学意义.方法采用原位杂交方法检测癌及癌旁组织的smad4mRNA,免疫组化方法检测TGF-β1和TGF-βR1.结果 53例胰腺癌smad4mRNA,TGF-β1和TGF-βR1表达阳性率明显地低于25例癌旁上皮(均P＜0.05).高分化腺癌smad4mRNA,TGF-β1和TGF-βR1表达阳性率明显高于低分化腺癌(P＜0.05～0.01),无转移癌明显高于转移癌(P＜0.05～0.01).三者在胰腺癌中表达阳性率均存在密切相关系.结论 smad4mRNA,TGF-β1和TGF-βR1表达与胰腺癌的发生发展、生物学行为和预后有密切关系,检测三者表达水平对早期发现胰腺癌及指导临床治疗和评估预后可能有较重要价值.     

CD55在胰腺癌中的表达及其意义

目的 探讨CD55在胰腺癌组织中的表达及其意义.方法 用实时荧光定量聚合酶链反应( qRT- PCR),免疫组化及Western blot检测CD55在12例胰腺癌及对应癌旁组织中的表达.结果 qRT - PCR结果显示CD55 mRNA在胰腺癌组织中的表达水平明显高于癌旁组织(P＜0.05)；免疫组化染色显示胰腺癌组织中细胞阳性率(100%呈强阳性)明显超过癌旁组织(仅16.7%呈弱阳性)(P＜0.05)；Western blot检测结果显示在91.7%胰腺癌组织中CD55蛋白的表达量高于癌旁组织.结论 CD55在胰腺癌中相对高表达,对胰腺癌的发生发展可能有重要影响.     

Toll样受体2和低氧诱导因子-1α在胰腺癌中的表达及意义

目的 研究Toll样受体2(TLR2)和低氧诱导因子-1α(HIF-1α)在胰腺癌中的表达及其临床意义.方法 采用实时荧光定量PCR检测30例新鲜胰腺癌及相应癌旁组织标本中TLR2和HIF-1αmRNA水平,应用免疫组化检测TLR2、HIF-1α在65例胰腺癌及相应38例癌旁组织中的表达,分析其与临床病理特征间的关系以...     

Ezrin在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的 探讨Ezrin在胃癌发生及发展过程中的作用.方法 收集2008年6月至2009年5月第三军医大学西南医院全军普通外科中心收治的60例胃癌患者的胃癌组织及正常胃黏膜组织标本,分别采用RT-PCR和Western blot法检测标本中Ezrin mRNA及蛋白的表达情况,分析Ezrin与患者性别、年龄、肿瘤分化程度、病理分期、浸润深度及淋巴结转移间的关系.采用t检验、x2检验、Spearman等级相关检验进行统计学分析.结果 60例正常胃黏膜组织中有33例(55％) Ezrin mRNA表达水平升高,45例(75％)Ezrin蛋白表达水平升高;60例胃癌组织中有21例(35％) Ezrin mRNA表达水平升高,22例(37％) Ezrin蛋白表达水平升高.Ezrin mRNA及蛋白在正常胃黏膜组织中的表达水平分别为1.30±0.04和3.57±0.45,在胃癌组织中的表达水平分别为0.53±0.36和0.96±0.18,两者比较,差异有统计学意义(t=5.309,22.617,P＜0.05).胃癌组织中Ezrin mRNA及蛋白表达水平呈正相关(r=0.602,P＜0.05).Ezrin mRNA和蛋白表达在胃癌不同病理分期、不同浸润深度、有无淋巴结转移方面差异有统计学意义(x2=6.41,6.49,4.62;5.40,8.87,4.12,P＜0.05),而在性别、年龄和分化程度方面差异无统计学意义(x2=0.50,0.07,1.07;0.01,1.16,1.96,P＞0.05).结论 胃癌组织中Ezrin表达水平降低,这可能是胃癌的发生、发展及转移的机制之一.     

表皮生长因子受体与乳酸脱氢酶在胰腺癌中的表达及意义的TIMER数据库分析

目的:应用生物信息学方法探讨表皮生长因子受体(EGFR)及乳酸脱氢酶(LDHA)在胰腺癌局部免疫微环境中的表达及意义。方法:运行TIMER(Tumor IMmune Estimation Resource)数据库,获取178例胰腺癌患者的临床信息,以及患者组织标本中EGFR、LDHA、胰腺癌相关信号分子的表达以及各亚群免疫细胞浸润数据,通过人类蛋白表达图谱,搜索EGFR、LDHA以及胰腺癌相关信号分子的蛋白表达丰度。采用Log-rank检验及Cox比例风险回归模型分析EGFR与LDHA表达以及各亚群免疫细胞与其他临床因素对患者预后的影响,并分析EGFR与LDHA与两者与胰腺癌相关信号分子的关系。结果:胰腺癌组织中EGFR与LDHA mRNA的表达水平均明显高于正常胰腺组织(均P0.05);在胰腺癌组织中,EGFR和LDHA mRNA呈正相关(P0.001)。EGFR mRNA高表达、LDHA mRNA高表达、低水平CD4~+T细胞的胰腺癌患者总体生存率较差(均P0.05)。LDHA是胰腺癌的独立预后因素(P0.001)。EGFR与胰腺癌相关信号分子P38、FOXM1、PD-L1、CSF1、CSF1R表达呈明显正相关,而LDHA与FOXM1、CSF1、CSF1R表达呈明显正相关(均P0.001)。EGFR、LDHA、P38、FOXM1和CSF1R蛋白在胰腺癌组织的表达丰度高于正常胰腺组织。结论:在胰腺癌组织中,EGFR与LDHA的表达升高,两者尤其是LDHA,可能通过对胰腺癌相关信号分子表达及局部免疫微环境的调控,从而影响患者预后。     

胰腺癌组织中类肝素酶的表达及其临床意义

目的 探讨类肝素酶1(heparanasel,Hpal)在胰腺癌中的表达及其与胰腺癌发生、发展的关系.方法 采用real-time PCR、Western blot法检测37例胰腺癌组织中Hpal基因和蛋白的表达情况,并分析其与胰腺癌临床病理参数之间的关系.结果 real-time PCR检测结果 显示,Hpal mRNA在胰腺癌中相对表达量为23.53±4.13、在正常胰腺组织中为4.08±2.14、在癌旁组织中为16.93±3.06(P<0.01).Western blot检测结果 显示,Hpal蛋白在正常胰腺组织中的相对表达量为0.36±0.14、在胰腺癌旁组织中为1.21±0.37、在胰腺癌组织中为1.76±0.28(P<0.05).胰腺癌组织中Hpal mRNA与Hpal蛋白表达均高于癌旁组织和正常胰腺组织.胰腺癌组织中Hpal mRNA表达与胰腺癌TNM分期、浸润神经和血管以及淋巴转移有关(P<0.05),但是与组织学分化程度、肿瘤大小无关(P>0.05).结论 胰腺癌组织中Hpal蛋白呈高表达,Hpal蛋白的高表达可能与胰腺癌的发生及发展有关.     

Notch信号通路在胃癌组织中的表达及其意义

目的 探讨Notch信号通路在胃癌组织中的表达及意义.方法 收集北京大学人民医院胃癌及正常胃黏膜组织标本63例,采用组织芯片免疫组化技术检测胃癌组织与正常胃黏膜中Notch信号通路相关蛋白的表达,分析这些蛋白与胃癌各临床病理指标之间的关系.结果 本组63例胃癌组织中Notch信号相关蛋白Notchl、Jaggedl、Deltal和NFKB的表达水平(分别为37%、29%、14%、27%)明显高于正常胃黏膜组织(分别为5%、2%、3%、2%)(P值均＜0.01).胃癌组织中Notchl蛋白的表达与胃癌的分化程度有关(X2=3.944,P＜0.05).胃癌组织中Jaggedl蛋白的表达与NFKB的表达相关(r=0.486,P＜0.01).结论 Notchl信号通路过表达可能参与胃黏膜的癌变过程,而且Notchl的表达与胃癌恶性程度负相关,表明Notch信号通路在胃癌组织中的双重效应.     

Sonichedgehog在肝细胞癌中的表达及其预后价值

目的 探讨Sonic hedgehog(SHH)在肝细胞癌(HCC)和癌周肝组织中的表达及其临床意义.方法 检测145例HCC和癌周肝组织SHH的表达,了解其表达与患者根治性切除术后预后的关系.检测4种肝癌细胞株以及正常肝细胞株SHH mRNA的含量.结果 SHH主要表达于肝细胞和肝癌细胞的胞质,肝癌与癌周肝组织表达差异无统计学意义(P＞0.05).癌和癌周高表达的患者总体生存率显著高于低表达患者(P＜0.05).肝癌细胞株SHH表达量显著高于正常肝细胞株(P＜0.01).结论 SHH在HCC和癌周肝组织中高表达,其表达可用于区分患者预后,SHH可能参与HCC的发生和发展.     

DNA甲基转移酶在肝癌中的表达及其临床意义

目的 探讨DNA甲基转移酶(DNMTs)在肝癌中的表达及其临床意义.方法 收集2007年7月至2008年4月中山大学附属第一医院行根治性切除的50例肝癌患者的肝癌组织、癌旁组织、肝硬化组织和慢性肝炎组织.采用RT-PCR和免疫组织化学方法检测肝癌组织及癌旁组织中DNMT1、DNMT3a、DNMT3b mRNA与蛋白表达水平,采用配对t检验和Mann-Whitney U检验比较肝癌组织与癌旁组织,肝硬化组织与慢性肝炎组织DNMTs mRNA表达的差异,x2检验和Fisher确切概率法分析肝癌组织DNMTs蛋白表达与临床病理因素的相关性,Kaplan-Meier法分析患者无瘤生存时间,不同患者无瘤生存时间的比较采用Log-rank检验.结果 肝癌组织中DNMT1、DNMT3a、DNMT3b mRNA的表达水平分别为癌旁组织的2.57、2.29和4.86倍(t=3.94,2.72,4.06,P＜0.05).肝癌组织中DNMT1、DNMT3a、DNMT3b mRNA的表达分别是肝硬化组织和慢性肝炎组织的2.38、2.14、4.66倍和6.12、4.58、12.99倍.DNMT1、DNMT3a、DNMT3b mRNA在肝癌组织的表达显著高于其在肝硬化组织和慢性肝炎组织中的表达(U=587.5、730.0、562.5,65.5、64.5、71.0,P＜0.05).DNMT1蛋白表达与肿瘤大小、数目、有无血管侵犯、TNM分期有关(x2=5.24,4.08,4.08,14.13,P＜0.05);DNMT3a蛋白表达与肿瘤大小、数目、TNM分期有关(x2=4.08,5.95,4.08,P＜0.05).DNMT1和DNMT3a低表达者平均肿瘤复发时间分别为9.4个月和8.7个月,显著长于高表达者的5.0个月和3.2个月,两者比较,差异有统计学意义(x2=3.89,9.91,P＜0.05).结论 DNMTs在肝癌发生、发展中起重要作用;DNMT1与DNMT3a高表达与肿瘤切除术后复发密切相关,可望成为肝癌预后的重要预测因子.

Abstract：

Objective To investigate the expression of DNA methyltransferases (DNMTs) in liver cancer and its clinical significance. Methods The specimens of liver cancer tissues, adjacent tissues, cirrhotic tissues and chronic hepatitis tissues were collected from 50 patients who received radical resection at the First Affiliated Hospital of Sun Yat-Sen University from July 2007 to April 2008. The mRNA and protein expressions of DNMT1,DNMT3a and DNMT3b in liver cancer tissues, adjacent tissues, cirrhotic tissues and chronic hepatitis tissues were detected by real-time quantitative PCR and immunohistochemical staining. The mRNA expression of DNMTs in the liver cancer tissues was compared with those in the adjacent tissues, cirrhotic tissues and chronic hepatitis tissues by using t test and Mann-Whitney U test. The correlation between the protein expression of DNMTs in the liver cancer tissue and the clinicopathological features was analyzed by chi-square test or Fisher exact test, and the tumor-free survival time was analyzed by using Kaplan-Meier method and the difference in tumor-free survival rate between different patients was analyzed by Log-rank test. Results The mRNA expressions of DNMT1, DNMT3a and DNMT3b in the liver cancer tissue were 2.57, 2.29 and 4.86 times higher than those in the adjacent tissues (t = 3.94, 2. 72, 4. 06, P ＜ 0.05 ). The mRNA expressions of DNMT1, DNMT3a and DNMT3b were 2.38,2.14 and 4.66 times higher than those in the cirrhotic tissues, and 6.12, 4.58 and 12.99 times higher than those in the chronic hepatitis tissues. The mRNA expressions of DNMT1, DNMT3a and DNMT3b in the liver cancer tissue were significantly higher than those in the cirrhotic tissues and chronic hepatitis tissues ( U = 587.5,730. 0,562.5; 65.5, 64.5, 71.0, P ＜ 0.05). The protein expression of DNMT1 was correlated with the size, number,TNM stages and vascular invasion of tumors ( x2 = 4.08, 5.95, 4.08, P ＜ 0.05 ). The protein expression of DNMT3a was correlated with the size, number and TNM stages of tumors (x2 = 4.08, 5.95, 4.08, P ＜ 0.05 ).The mean tumor recurrence time of patients with low expressions of DNMT1 and DNMT3a were 9.4 and 8.7 months, which were significantly longer than 5.0 and 3.2 months of those with high expressions of DNMT1 and DNMT3a (x2 =3.89, 9.91, P＜0.05). Conclusions DNMTs play an important role in hepatocarcinogenesis.High expressions of DNMT1 and DNMT3a are correlated with the postoperative recurrence of liver cancer, which are valuable prognostic factors for liver cancer.