氟伐他汀对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的影响

[目的]观察氟伐他汀对单侧输尿管梗阻后大鼠肾间质单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达、单核/巨噬细胞浸润及肾间质纤维化程度的影响,探讨他汀类药物的抗炎作用机制及对肾脏的保护作用.[方法]72只SD雌性大鼠随机分成假手术(SOR)组、单侧输尿管梗阻术(UUO)组和单侧输尿管梗阻术(UUO) 氟伐他汀治疗组[T-UUO组, 氟伐他汀20 mg/(kg·d)].于术后d3、d7、d10、d14分别处死各组大鼠.用HE及Masson 染色动态观察肾脏病理变化,免疫组织化学法测定MCP-1 的表达和巨噬细胞浸润情况.[结果]UUO组肾小管-间质MCP-1与单核巨噬细胞抗原ED-1表达较SOR组增加(P＜0.05); 在术后各时间点,T-UUO组大鼠肾小管-间质MCP-1、ED-1的表达及肾间质胶原相对面积较UUO模型组显著减少,但仍高于SOR组(P＜0.05).[结论]氟伐他汀可通过降低MCP-1表达、抑制单核-巨噬细胞浸润,减轻肾间质纤维化而对肾脏有保护作用.     

组织型转谷氨酰胺酶在单侧输尿管梗阻大鼠肾脏中的表达及意义

目的探讨组织型转谷氨酰胺酶（tTG）在单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠肾间质中的表达及其意义。方法雄性Wistar大鼠随机分为假手术组和模型组,采用左侧输尿管结扎术制备肾间质纤维化模型。术后第2周末处死各组大鼠,采用HE和Masson染色观察肾组织病变;采用免疫组化法检测肾间质中tTG和纤维连接蛋白（FN）的表达;采用RT-PCR技术检测tTG mRNA表达。结果 HE显示,模型组大鼠肾间质增宽,炎细胞浸润,纤维组织增多,肾小管明显扩张。Masson染色可见模型组大鼠肾间质胶原明显增多。模型组tTG和FN的基因和蛋白表达均明显高于假手术组（P〈0.01）,并且tTG的蛋白水平与FN水平呈显著正相关（r=0.734,P〈0.05）。结论 tTG可能通过交联细胞外基质蛋白,抵抗降解,参与UUO大鼠肾间质纤维化的发生发展。     

活性维生素D_3对大鼠肾小管间质纤维化的影响及其机制研究

目的:观察活性维生素D_3对大鼠肾小管间质纤维化的影响及其可能机制。方法:将40只雄性SD大鼠随机分为4组:假手术组(Sham组)、模型组(UUO组)、UUO+低剂量活性维生素D_3组(LV组)、UUO+大剂量活性维生素D_3组(HV组),每组10只。采用单侧(左)输尿管结扎法建立梗阻性肾小管间质纤维化大鼠模型。Sham组只游离左侧输尿管而不结扎。LV组与HV组分别予以0.03μg/(kg·d)、0.06μg/(kg·d)活性维生素D_3(溶于花生油)腹腔注射,Sham组和UUO组均予以等体积花生油腹腔注射。术后14 d处死大鼠,采集血、肾脏标本,并检测血清钙、磷、肌酐(SCr)、甲状旁腺激素(PTH)。制作肾脏病理组织切片,行H-E、Masson染色,在光镜下观察肾小管间质损伤及纤维化情况。采用免疫组织化学法检测肾小管间质中α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E钙黏蛋白(E-cadherin)与转化生长因子β(TGF-β)的表达。结果:与UUO组相比,LV组和HV组SCr水平[(39.0±1.83)μmol/L、(36.0±2.11)μmol/L比(43.1±5.55)μmol/L]、肾小管间质纤维化指数(2.00±0.12、1.70±0.10比2.80±0.11)、α-SMA表达(0.22±0.02、0.20±0.03比0.24±0.02)、TGF-β表达(0.26±0.03、0.25±0.03比0.32±0.04)均显著下降(P0.05),E-cadherin表达(0.30±0.08、0.34±0.11比0.22±0.07)明显升高。与LV组相比,HV组SCr水平肾间质纤维化指数、肾间质损伤指数、α-SMA表达、TGF-β表达明显下降(P0.05),E-cadherin表达上升(P0.05)。相关性分析显示,TGF-β、α-SMA表达与肾间质纤维化指数正相关,E-cadherin表达与肾间质纤维化指数负相关;TGF-β表达与α-SMA表达正相关,E-cadherin与TGF-β负相关;α-SMA表达与E-cadherin表达负相关。结论:活性维生素D_3可改善UUO大鼠肾小管间质纤维化,大剂量活性维生素D_3改善作用优于小剂量,其机制可能是:通过抑制TGF-β的过度表达从而抑制UUO大鼠肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化进而改善肾小管间质纤维化。     

血管内皮生长因子与单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化程度的相关性研究

目的观察单侧输尿管梗阻大鼠肾组织中血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达水平,并探讨VEGF与肾间质纤维化的相关性。方法将42只雄性SD大鼠按照随机原则分为假手术组和单侧输尿管梗阻模型组(UUO组),每组21只大鼠。术后第5、15、25天2组各处死7只大鼠,采集血清和24 h尿液,检测血肌酐、尿素氮、24 h尿蛋白定量,留取梗阻侧肾脏进行病理学检查,使用免疫组织化学方法检测VEGF在肾组织的表达水平,观察VEGF表达水平与肾间质纤维化程度及肾功能的相关性。结果术后第5、15、25天,UUO组血肌酐水平与同期假手术组相比明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);术后第5、15天,UUO组尿素氮水平高于同期假手术组,差异有统计学意义(P<0.05)。术后第5天UUO组24 h尿蛋白定量与假手术组比较,差异无统计学意义(P>0.05),但术后第15、25天24 h尿蛋白定量均高于假手术组,差异有统计学意义(P<0.05)。病理学检查结果显示,假手术组大鼠在术后第5、15、25天,肾小管上皮细胞可见较多VEGF蛋白表达;UUO组大鼠术后第5天肾小管间质开始出现少量炎性细胞浸润,少数肾小管出现扩张,部分肾小管可见VEGF蛋白表达,第15、25天肾小管间质见较多炎性细胞浸润,VEFG蛋白表达量呈逐渐降低趋势,术后第25天大量炎性细胞浸润,仅见少许肾小管VEGF呈弱表达,肾间质纤维化区域无VEGF表达。在UUO组中,术后第5天VEGF表达与24 h尿蛋白定量呈正相关(P<0.05);在术后第5、15、25天,VEGF的表达与血肌酐及尿素氮水平均无明显相关性(P>0.05)。结论在单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化模型中,VEGF表达量随肾间质纤维化程度加重逐渐减低,肾间质弥散性纤维化时,肾组织的VEGF几乎无表达,提示VEGF在肾间质纤维化发生发展中可能起重要作用。     

厄贝沙坦对单侧输尿管梗阻大鼠基质金属蛋白酶-2的影响

目的:观察厄贝沙坦对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾组织基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的影响并探讨其可能机制。方法:采用UUO肾间质纤维化模型。将24只大鼠随机分为3组,每组8只,即假手术组、UUO组、厄贝沙坦组。厄贝沙坦组给予厄贝沙坦10mg/(kg·d)治疗。术后2周处死大鼠,光镜下观察Masson和HE染色肾间质纤维化指数,观察肾组织病理改变,并应用免疫组织化学方法检测肾组织MMP-2的表达。结果:(1)UUO组与假手术组相比,血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)水平均显著增加(P<0.05)。(2)与假手术组相比,肾组织行HE染色UUO组可见弥漫的肾小管上皮细胞空泡变性、扩张、部分萎缩,偶见坏死,肾间质增宽,大量的炎细胞浸润和间质纤维化,肾小球病理改变不明显,厄贝沙坦组上述改变均有所减轻。(3)与假手术组相比,Masson染色结果显示UUO组可见肾间质增宽、有大量胶原纤维增生,肾小球病变不明显,厄贝沙坦组上述改变均有所减轻。(4)MMP-2在假手术组大鼠肾间质中呈棕黄色颗粒状表达,UUO组中大鼠肾间质仅有少量表达且着色稀疏,厄贝沙坦组MMP-2表达较假手术组轻,但仍高于UUO组(P<0.05)。结论:...     

促肝细胞生长素对单侧输尿管结扎大鼠肾间质纤维化的干预作用

目的研究促肝细胞生长素（pHGF）对肾间质纤维化大鼠肾组织中HGF、TGF-β1的表达的影响及其改善肾小管间质纤维化可能的机制,为临床防治肾间质纤维化提供实验性理论依据。方法采用单侧输尿管结扎术（unilateral ureteral obstruction UUO）建立肾小管间质纤维化大鼠模型。将54只大鼠随机分为三组：假手术组,UUO组,pHGF干预组。术后3、7、14天分3批处死各组大鼠,分别经免疫组化方法观察各组大鼠肾组织HGF、TGF-β1的表达情况,HE及Masson染色评定各组肾小管间质损害程度。结果UUO组TGF-β1的表达及肾小管间质损伤程度明显高于假手术组（P〈0．05）;而pHGF干预组明显低于UUO组（P〈0．05）;UUO组HGF于第3天表达最高,第7天稍有回落,第14天表达最弱;pHGF干预组术后第3天、第7天、第14天HGF的表达均显著高于同时期UUO组（P〈0．05）,肾小管间质病变程度明显减轻,肾间质相对面积显著减小（P〈0．05）。结论pHGF能够减轻单侧输尿管结扎大鼠肾间质纤维化的程度,这种作用可能通过有效抑制肾间质中TGF-β1的过度表达、促进肾间质HGF的表达而实现。     

阿托伐他汀对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的防治作用

目的 观察阿托伐他汀对单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠模型肾间质纤雏化的作用及机制。方法 采用单侧输尿管结扎术致肾间质纤雏化大鼠模型，将大鼠随机分为3组：假手术组、UUO模型组、阿托伐他汀治疗组。手术后第1、4、7、10、14天处死大鼠，经HE染色、PAS染色、天狼星红染色，免疫组化、Western蛋白印迹分析方法，观察各组α-平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原、结缔组织生长因子、低密度脂蛋白受体相关蛋白及肾小管间质损伤指数。结果 UUO模型组平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原、结缔组织生长因子、低密度脂蛋白受体相关蛋白的表达及肾小管损伤指数均明显高于假手术组（P〈0．01），而阿托伐他汀治疗组明显低于模型组（P〈0．01）。结论 结缔组织生长因子、低密度脂蛋白受体相关蛋白与肾间质纤雏化进展相一致；阿托伐他汀减少单侧榆尿管梗阻侧大鼠肾脏低密度脂蛋白受体相关蛋白的表达，下调单侧榆尿管梗阻侧大鼠肾脏Ⅰ型胶原、平滑肌肌动蛋白的表达，阿托伐他汀通过非降脂途径延缓UUO所致大鼠肾间质纤维化的程度。     

特异性敲除Apelin基因对单侧输尿管梗阻小鼠肾间质纤维化的影响

目的观察多肽Apelin基因缺失对单侧输尿管梗阻(UUO)小鼠肾间质纤维化的影响,探讨在梗阻性肾病肾纤维化形成中Apelin的作用和可能机制。方法利用CRISPR/Cas9技术构建Apelin基因敲除小鼠(KO)共20只,同时选取野生型小鼠(WT)20只,均为8周龄雄性C57BL/6J种系,采用随机数字表法分为:KO+Sham组、KO+UUO组、WT+Sham组、WT+UUO组,每组各10只。分别对小鼠行单侧输尿管结扎(UUO)或假手术(Sham)。术后2周将小鼠处死,取血浆和手术侧肾脏进行检测。采用Masson染色观察肾脏纤维化程度,免疫组织化学染色检测肾脏基质成分纤维连接蛋白(FN)、Ⅰ型胶原(Col-I)的分布和表达情况。采用Western blotting法检测肾小管上皮标志物E-钙黏素(E-cadherin)、间充质标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),以及致纤维化细胞因子--转化生长因子-β1(TGF-β1)及其受体TGFβ-R1的蛋白表达量。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠血浆肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)水平。结果KO+UUO组小鼠肾脏可见明显的肾小管萎缩和肾间质纤维化,基质成分FN和Col-I表达量显著升高。WT+UUO组小鼠肾脏的纤维化程度和基质的表达量均低于KO+UUO组,差异具有统计学意义(P<0.05)。KO+Sham组和WT+Sham组肾脏无明显的纤维化改变和基质的沉积。KO+UUO组小鼠,可见显著的肾小管上皮-间充质转分化(EMT)表现,E-cadherin减少,α-SMA增多,TGF-β1和TGFβ-R1受体的表达量也明显升高。与KO+UUO组相比,WT+UUO组肾小管上皮E-cadherin的表达较多,α-SMA、TGF-β1和TGFβ-R1受体的表达均较低,差异具有统计学意义(P<0.05)。而WT+Sham组和KO+Sham组小鼠上述标志物的表达趋于正常水平。KO+UUO组小鼠血浆Cr、BUN的水平最高,WT+UUO组小鼠上述标志物的水平均低于KO+UUO组,差异具有统计学意义(P<0.05)。KO+Sham组小鼠血浆Cr、BUN与WT+Sham组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论Apelin在正常状态下对肾功能无明显影响,但在输尿管梗阻状态下其基因缺失可能是引起肾间质纤维化加重的因素。     

柚皮素对单侧输尿管梗阻致肾间质纤维化大鼠 KIM-1表达水平的影响

目的：观察柚皮素对单侧输尿管梗阻致大鼠肾间质纤维化肾损伤因子-1（KIM-1）表达水平的影响。方法将24只SD 大鼠随机分为假手术组（Sham 组）、模型组（UUO 组）、柚皮素组（Nar 组）,每组8只。UUO 组及 Nar 组行左侧输尿管结扎术, Sham 组只游离但不结扎和剪断输尿管。造模后分别给予生理盐水、柚皮素25 mg/（kg·d）。14 d 后处死大鼠,处死前收集24 h尿液,ELISA 法检测大鼠尿液 KIM-1水平,取梗阻侧肾制作标本,行 HE 及 Masson 染色,光镜下观察肾间质纤维化程度并半定量对肾小管间质损伤指数进行积分;免疫组化法检测肾间质 KIM-1的表达。结果与 Sham 组比较,UUO 组肾小管间质损伤指数（TDI）升高,差异有统计学意义（P ＜0．05）,尿液、肾组织中 KIM-1水平均升高,差异也有统计学意义（P ＜0．05）。与 UUO 组比较,Nar 组 TDI 降低,差异有统计学意义（P ＜0．01）,尿液、肾组织中 KIM-1水平降低,差异有统计学意义（P ＜0．05）。相关性分析示24 h 尿液及肾组织 KIM-1水平与 TDI 呈正相关（r 分别为0．862、0．866,P 均小于0．01）。结论柚皮素可减轻肾间质纤维化,降低 KIM-1的表达。     

姜黄素对单侧输尿管梗阻大鼠肾小管上皮细胞转分化影响的研究

目的:探讨姜黄素对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾小管上皮细胞转分化的作用。方法:采用UUO致肾间质纤维化大鼠模型。将24只大鼠随机均分为假手术组、模型组和姜黄素组。从制模后2 d起,姜黄素组给予100 mg.kg-1.d-1姜黄素腹腔注射。术后4周心脏穿刺抽血,测定各组大鼠血清尿素氮(BUN)和血肌酐(SCr)值。处死大鼠,用苏木素-伊红(HE)、Masson染色评定肾小管间质纤维化程度;用免疫组化方法检测肾组织内转化生长因子-β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(Vimentin)的蛋白表达部位及表达水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠BUN水平显著增加(P<0.01),肾间质纤维组织相对面积显著扩大(P<0.01),肾组织内TGF-β1、α-SMA和Vimentin的蛋白表达均显著上调(P均<0.01)。姜黄素干预后,上述上调指标都被显著抑制(P<0.05或P<0.01)。结论:姜黄素可能通过抑制UUO大鼠肾小管上皮细胞转分化而减轻肾间质纤维化。     

WISP-1对单侧输尿管梗阻小鼠肾脏纤维化的作用研究

目的探讨Wnt1诱导信号通路蛋白1(WISP-1)在单侧输尿管梗阻(UUO)小鼠肾脏纤维化中的作用。方法通过腹腔注射WISP-1抗体作为处理组,以Ig G作为对照处理组; UUO和正常小鼠作为模型组及正常组。采用苏木素-伊红(HE)染色,高碘酸-雪弗(PAS)染色和Masson三色染色评估肾脏病理改变;免疫组织化学染色法(IHC)和蛋白质免疫印迹法(WB)检测小鼠肾脏WISP-1和胶原蛋白I(Collagen I)的表达。结果模型组及对照处理组较正常组,其梗阻侧肾组织出现不同程度的肾小球硬化、肾间质纤维化、细胞外基质及胶原纤维的沉积,而处理组上述病理损伤显著减轻。IHC和WB显示处理组WISP-1及Collagen I的表达较模型组及对照处理组明显下降。结论抗WISP-1抗体治疗能明显减轻UUO模型小鼠的肾脏纤维化。     

不同剂量氯沙坦对防治肾间质纤维化效果的影响

目的：观察血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂（ARBs）氯沙坦对大鼠单侧输尿管梗阻（UUO）模型肾间质纤维化的影响．探讨超大剂量能否优于常规剂量起到更多的肾脏保护作用：方法：建立大鼠UUO模型，术后3d分为常规剂量治疗组、超大剂量治疗组、UUO组和假手术组。药物干预组分别每天给予氯沙坦50mg／kg、氯沙坦500mg／kg灌胃，假手术组及UUO组每天给予同体积生理盐水灌胃。观察模型第7、14和21天鼠尾袖带血压（TCP）、24h尿蛋白、肾小管损害程度、肾间质纤维化程度、肾间质巨噬细胞数和转化生长因子-β1（TGF-β1）mRNA的表达。结果：随着梗阻时间延长．UUO组TCP逐渐增高、24h尿蛋白、肾间质纤维化程度、肾小管损害程度及肾间质巨噬细胞浸润显著增加，TGF-β1 mRNA含量明显增加，与其余各组相比差异有显著性（P〈0.05）。同时，超大剂量氯沙坦相对于常规剂量，能更有效地控制血压、减少蛋白尿、减轻肾小管损害和肾间质纤维化、减少肾间质单核巨噬细胞浸润，显著抑制TGF-β1 mRNA表达。结论：超大剂量氯沙坦在UUO大鼠模型中较常规剂量起到了更多的肾脏保护作用.     

E-钙粘蛋白和MMP-9在肾间质纤维化大鼠肾组织中的表达及其意义

目的观察E-钙粘蛋白、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在肾间质纤维化(R IF)大鼠肾组织中的表达,探讨E-钙粘蛋白、MMP-9在R IF中的作用。方法选用SD大鼠72只。随机分为正常对照组、假手术组和模型组,制备单侧输尿管梗阻UUO模型。采用病理及免疫组织化学等方法动态观察各组大鼠第1天、第3天、第7天、第14天肾脏组织学变化和E-钙粘蛋白、MMP在肾小管间质中表达情况。结果 UUO模型组大鼠肾小管间质损害明显,肾小管上皮细胞E-cadherin表达逐渐下调,于第14天达最低值。肾小管上皮细胞MMP-9表达上调,第3、7、14天与同期正常对照组、假手术组相比差异显著。肾小管上皮细胞E-钙粘蛋白表达量与肾小管间质损害程度呈负相关,MMP-9表达量与肾小管间质损害程度呈正相关。结论 E-钙粘蛋白表达下调、MMP-9表达上调、E-钙粘蛋白与MMP-9表达失衡可能是肾间质纤维化形成促进因素之一,并可能参与肾间质纤维化形成的全过程。     

还原型谷胱甘肽对单侧输尿管梗阻大鼠羟脯氨酸及氧化应激反应的影响

目的 采用单侧输尿管梗阻(UUO)致肾间质纤维化大鼠模型,探讨还原型谷胱甘肽(GSH)抗肾间质纤维化的部分作用机制.方法 健康Wistar大鼠36只,随机分为假手术(Sham)组、模型组(UUO组)和GSH组,每组12只.UUO组和GSH组大鼠麻醉后开腹分离左侧输尿管,并于靠近肾盂段行左输尿管结扎;Sham组开腹但不行输尿管结扎.GSH组于术前1 d腹腔注射GSH 100 mg·kg-1·d-1,连续给药10 d;Sham组和UUO组给予等量生理盐水.术后10 d处死各组大鼠,取左侧肾脏,行苏木素-伊红(HE)和Masson染色,观察大鼠肾脏组织病理学的改变;用化学比色法测定梗阻侧肾组织羟脯氨酸(Hyp)含量和总抗氧化能力(T-AOC),用黄嘌呤氧化酶法测定总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性;用硫代巴比妥酸法测定丙二醛(MDA)含量.结果 大鼠行UUO 10 d后,梗阻侧肾脏肿大、肾实质变薄,肾间质水肿,弥漫性炎细胞浸润,肾小管扩张或萎缩,部分肾小管腔内有蛋白或细胞管型,间质趋向纤维化.与Sham组比较[Hyp(0.524±0.132)μg/mg,T-AOC(1.48±0.21)U/mg,T-SOD(12.77±0.76)U/mg,MDA(2.65±0.32)nmol/mg],UUO组与GSH组梗阻侧肾脏病理改变明显,且肾组织中Hyp、MDA含量增加,T-AOC降低,T-SOD活性下降(P均＜0.01).与UUO组比较,GSH组梗阻侧肾脏组织病理学改变减轻,且肾组织中Hyp含量减少[(1.598±0.252)μg/mg比(1.027±0.196)μg/mg,P＜0.05],T-AOC升高[(0.67±0.19)U/mg比(0.94±0.17)U/mg,P＜0.05],MDA含量降低[(4.58±0.59)nmol/mg比(3.26±0.34)nmol/mg,P＜0.05],T-SOD活性无明显变化[(9.39±0.87)U/mg比(9.41±0.93)U/mg,P＞0.05].结论 GSH可缓解UUO大鼠肾间质纤维化病理改变,降低梗阻侧肾脏Hyp含量与其抗氧化应激作用,减轻UUO诱导的氧化损伤.     

肾康注射液对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的影响

目的研究肾康注射液对梗阻性肾病大鼠肾小管间质纤维化的防治作用。方法采用单侧输尿管梗阻(UUO)诱导肾间质纤维化的动物模型,以血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂(ARB)作为阳性对照,将大鼠随机分为:模型组(UUO)、肾康组、缬沙坦组,术后第14天处死大鼠,收集血清测定肌酐、尿素氮水平,肾组织用HE染色及免疫组化半定量检测各组肾间质的α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达。结果肾康组、缬沙坦组的肾小管间质TGF-β1、α-SMA的表达均明显低于UUO组;两治疗组组间比较,肾康组对TGF-β1、α-SMA表达的抑制作用同于缬沙坦组。结论中药肾康可减轻肾间质纤维化。     

阿托伐他汀对单侧输尿管梗阻大鼠肾小管间质过氧化物酶体增殖物激活受体γ表达的影响

目的 观察阿托伐他汀对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾小管间质过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)表达的影响.方法 将45只大鼠随机均分为假手术组、模型组及阿托伐他汀组(阿乐组),后两组行左侧输尿管结扎术.阿乐组术前3 d开始给予阿托伐他汀(10 mg·kg-1·d-1)灌胃,其余两组予等量生理盐水灌胃.术后5、10和15 d分别处死各组5只大鼠,取左肾行苏木素-伊红(HE)和Masson染色,动态观察肾脏病理改变,并用免疫组化方法检测肾小管间质中PPARγ的动态表达.结果 组织病理学显示,模型组呈现进行性肾小管间质面积增宽,纤微化程度加重.假手术组PPARγ主要表达于内髓集合管;模型组PPARγ表达则位于肾小管上皮细胞,半定量分析显示UUO后5 d PPARγ已经明显增高,梗阻后10 d达到峰值,15 d PPARγ已降低,但仍高于假手术组(P均＜0.01).阿乐组肾小管间质中PPARγ表达较同期模型组明显增加(P均＜0.01).结论 UUO模型大鼠肾小管间质PPARγ的表达量增加,并在肾小管部位出现PPARγ的表达;阿托伐他汀可增加PPARγ的表达,从而改善肾小管间质纤维化.     

NGAL在肾间质纤维化不质阶段的表达及意义

目的动态观测单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠肾组织中中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白分子（NGAL）的表达变化,探讨NGAL在肾小管间质纤维化发展中的作用机制。方法48只SPF级雄性SD大鼠随机分为UUO模型组及假手术（SOR）组,每组24只,UUO组行左侧输尿管梗阻术,SOR组仅游离左侧输尿管不结扎。术后第1、4、7、14天分别处死每组6只大鼠,取左。肾行HE和Masson染色,并用免疫组化ELiVision^TM—plus法检测肾组织NGAL的表达。结果HE、Masson染色切片示：UUO组间质损伤指数与肾纤维化程度在术后不同时间点明显高于SOR组（P〈0．05）。免疫组化结果显示：SOR组大鼠肾组织中肾小管有一定量NGAL表达,UUO组术后第l天NGAL表达显著升高,第4天与其相比,差异无统计学意义,术后第7天表达量下降,术后第14天时明显低于第7天（P〈0．05）,但仍高于SOR组（P〈0．05）。结论实验大鼠梗阻侧肾组织中NGAL的表达在梗阻早期明显上升,并保持一定高表达状态,但随着梗阻时问延长而下调,提示NGAL可能在肾间质纤维化早期起负向调节作用。     

维甲酸对肾间质纤维化大鼠肾间质结缔组织生长因子表达的影响

目的探讨全反式维甲酸对肾间质纤维化大鼠肾间质结缔组织生长因子(CTGF)的影响及其可能机制.方法采用单侧输尿管结扎(UUO)大鼠模型.将40只SD大鼠随机分为5组:假手术组(A组)、UUO组(B组)、UUO 苯那普利组(C组)、UUO 维甲酸小剂量组(D组)、UUO 维甲酸大剂量组(E组).于造模前1d分别给C、D、E组苯那普利10mg/(kg·d)、全反式维甲酸10mg/(kg·d)和20mg/(kg·d).A、B组给予同等剂量的生理盐水.于术后第14d取术侧肾组织行HE、Masson染色评定各组肾小管间质损害程度,免疫组织化学半定量检测各组肾间质CTGF、转化生长因子-β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及Ⅲ型胶原(colⅢ)的表达.结果各造模组CTGF、TGF-β1、α-SMA及colⅢ的表达及肾小管间质损伤指数明显高于A组(P＜0.05),而全反式维甲酸或苯那普利均能明显抑制此变化.结论维甲酸及苯那普利可能通过下调CTGF而减轻肾间质纤维化.     

PPARγ和α-SMA在单侧输尿管梗阻大鼠肾组织中的表达及其意义

目的 观察单侧输尿管梗阻（UUO）模型大鼠肾组织α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、过氧化物酶体增殖物激活受体（PPART）表达变化及其与肾小管间质纤维化间的关系。方法 36只SD大鼠随机分为假手术组（n=6）和模型组（n=30）。模型组行UU0术，并随机分为3、7、14、21和28d组。相应时间点活杀动物，取肾脏，用常规苏木素-伊红（HE）、Masson、高碘酸-乌洛托品银（PASM）染色，观察肾小管病变程度；用免疫组化法测定UU0大鼠梗阻肾不同时间点α-SMA和PPARγ表达变化及与肾脏病理变化间的关系。结果 病理学结果显示，UUO3和7d时肾小管上皮细胞肿胀，炎症细胞浸润，纤维组织增生尚不明显；14d和21d时肾皮质大量炎症细胞浸润及纤维组织增生；28d时表现为肾小管严重破坏，纤维组织弥漫增生。免疫组化结果显示，PPARγ在假手术组肾组织中几乎无表达；UUO模型大鼠随着病变进展，肾组织PPARγ表达增加，主要分布在肾小管上皮细胞、浸润的单核细胞，3d时表达量开始增加，14d达高峰，此后表达略有减少，但仍显著高于假手术组及3d和7d组。假手术组α-SMA仅表达于血管平滑肌肌层，3d时肾闻质出现表达，14～21d表达显著增加，阳性信号弥漫分布，高峰持续至28d实验结束。结论 PPARγ在UUO大鼠显著升高，其表达与α-SMA的表达量及肾小管间质病变程度早期一致，14d达峰值后表达不再随病变加重而进一步升高。UUO病变早期PPARγ反应性升高可能在肾脏局部炎症和纤维化病程中发挥了重要作用。     

福辛普利联合缬沙坦对梗阻性肾病模型幼鼠MMP-7表达的影响

目的：观察联合应用福辛普利和缬沙坦对梗阻性肾病模型（UUO）大鼠肾小管间质MMP-7表达的影响,初步探讨其在肾间质纤维化中的作用机制。方法：72只Wistar雌性幼年大鼠单侧输尿管结扎制成UUO模型,并随机分为假手术对照组（A组）、UUO模型组（B组）和福辛普利及缬沙坦联合治疗组（C组）,于模型成功后第1,2,3,4周末为实验时间点,检测各组大鼠24h尿蛋白、血尿素氮（BUN）、血肌酐（SCr）。用免疫组化法研究MMP-7在肾组织的分布、表达及变化。结果：光镜下MMP-7在对照组肾小管上皮细胞胞浆呈阴性表达,术后1周UUO组MMP-7在肾小管上皮细胞胞浆区及肾间质细胞表达,在血管内皮细胞有微量表达,2周后表达增强,4周表达最强。治疗组各周MMP-7表达较UUO组下调。结论：联合应用福辛普利和缬沙坦可通过下调MMP-7在肾组织的表达而改善肾功能,延缓肾间质纤维化的进展。