IkB激酶的研究进展

IkB激酶是核因子-kB/Rel蛋白参与一系列基因表达调控过程中最为关键的激酶。IkK包括分子量85kD的IkKα和分子量为87kDβ的IkK其多肽分为激酶区、亮氨酸拉链样结构和螺旋环状结构。正常情况下，IkK以IkKα，IkKβ和NIK三聚体复合物形式存在；NIK激活后可活化IKK而使IkBs磷酸化，其中IkKβ使IkKαSer32/36和IkKβSer19/23等效磷酸化，而IkKα使IkKαser32-36和IkBβSer23磷酸化。它们对IkKβSer19磷酸化都很弱；IkKα使IkBα磷酸化诱导其降解和NF-kB活化速度较IkKβ快但其强度仅为后者的1/20。     

诱导型一氧化氮合酶在糖尿病性阴茎勃起功能障碍大鼠阴茎的表达

目的:探讨诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在糖尿病性阴茎勃起功能障碍(ED)发病进程中的可能作用.方法:注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,分别在注射8周和12周后观察阴茎勃起次数,取大鼠阴茎,用ABC免疫组织化学方法检测阴茎iNOS的分布与表达,免疫印迹检测阴茎iNOS蛋白量的变化.结果:糖尿病大鼠的阴茎勃起次数低于对照组,并随病程延长降低;与对照组比较,糖尿病组阴茎内iNOS阳性细胞数和平均光密度、iNOS蛋白量升高,并随病程延长而进行性升高.结论:糖尿病组大鼠阴茎iNOS表达的升高与ED相关.     

改良阴茎海绵体压力测定方法在建立糖尿病性ED大鼠模型中的应用研究

目的　评价改良阴茎海绵体压力（intracavernous pressure, ICP）测定方法在建立糖尿病性勃起功能障碍（erectile dysfunction, ED）大鼠模型中的应用。 方法　将40只8周龄雄性SD大鼠随机分为糖尿病组及正常对照组,检测大鼠ICP及颈动脉压力（arterial pressure, AP）,改良法采用带倒刺的穿刺针刺入阴茎脚。 结果　在糖尿病组及正常对照组中,与传统方法比较,采用改良阴茎海绵体压力测定方法所测的ICP与AP结果均无统计学意义（P ＞ 0.05）,但改良法穿刺针不易脱出,保证了实验顺利进行,成功率大大提高（传统法成功率75%,改良法100%）。 结论　改良的带倒刺的穿刺针刺入阴茎脚测定大鼠阴茎海绵体压力具有稳定、准确、方便和不易脱出的特点,对筛选糖尿病性ED大鼠动物模型、评价大鼠阴茎勃起功能具有重要意义。     

氧化应激与诱导性一氧化氮合酶在糖尿病性阴茎勃起功能障碍中的作用

目的:探讨氧化应激与诱导性一氧化氮合酶(iNOS)在糖尿病性阳茎勃起功能障碍(ED)中的可能作用。方法:注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,分别在注射8周和12周后观察阴茎勃起次数、取大鼠阴茎和血浆,测定血清丙二醛(MDA)水平、总抗氧化能力(T-AOC)、一氧化氮合酶(NOS)和iNOS活力以及用免疫组织化学ABC方法检测阴茎iNOS的表达。结果:糖尿病大鼠的阴茎勃起次数明显低于对照组,并随病程延长降低;糖尿病大鼠血清MDA、iNOS水平明显高于对照组;糖尿病大鼠T-AOC水平明显低于对照组;与对照组比较,糖尿病组阴茎内iNOS阳性细胞数和平均光密度值随病程延长而升高。结论:糖尿病性阴茎勃起功能障碍与氧化应激水平、血清iNOS活性以及阴茎iNOS的表达升高相关。     

Raf激酶抑制蛋白和p-ERK在糖尿病肾病大鼠肾组织中的表达及意义

 目的:探讨Raf激酶抑制蛋白(Raf kinase inhibitor protein,RKIP)和磷酸化细胞外信号调节激酶(phosphorylated extracellular signal-regulated kinase, p-ERK)在糖尿病肾病大鼠肾组织中的表达及意义。方法:40只Sprague-Dawley （SD）大鼠随机分为2组:正常对照组（N组）和糖尿病肾病组（M组）。苏木精-伊红（hematoxylin-eosin, HE）和过碘酸-雪夫（periodic acid-Schiff,PAS）染色观察肾组织病理改变,免疫组化方法检测各组肾组织RKIP和p-ERK1/2表达,Western blotting 检测各组RKIP和p-ERK1/2的表达。结果:M组大鼠随着病程的延长,血糖升高,出现蛋白尿,肾重增加,肾组织内p-ERK1/2明显增高,RKIP降低,与N组相比有显著差异(P<0.05)。结论: RKIP表达的减少及p-ERK的表达增加可能促进糖尿病肾病的进展。     

RhoA/Rho激酶在2型糖尿病大鼠肝脏纤维化中的作用

目的阐明RhoA/Rho激酶在糖尿病大鼠肝纤维化中的作用。方法通过高脂饮食和小剂量链脲佐菌素(STZ,30 mg/kg)腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型。实验分为对照组、糖尿病组和法舒地尔干预组(法舒地尔10 mg/(kg·d),分两次腹腔注射)24周末。测定血糖、血脂、谷草转氨酶和谷丙转氨酶;Masson染色和羟脯氨酸测定评估肝胶原沉积;RT-PCR测定转化生长因子β1(TGF-β1)和结缔组织生长因子(CTGF)mRNA表达;免疫组化测定TGF-β1蛋白表达;Western blot测定肝组织肌球蛋白磷酸酯酶靶点亚单位1磷酸化(p-MYPT1)水平。结果与对照组比较,糖尿病组大鼠血糖、血脂和转氨酶显著增高,肝组织大量胶原沉积,p-MYPT1水平、TGF-β1与CTGF mRNA表达显著上调(P0.01)。与糖尿病组比较,法舒地尔干预组大鼠转氨酶降低,肝胶原沉积明显减轻,p-MYPT1水平、TGF-β1与CTGF mRNA表达显著下降(P0.01)。结论高血糖激活了肝组织RhoA/Rho激酶,通过调控TGF-β1/CTGF表达,在糖尿病肝纤维化中起着重要作用。     

糖尿病大鼠神经生长因子的表达与阴茎勃起功能障碍的关系

目的：探讨糖尿病(DM)大鼠神经系统中 NGF 的表达与阴茎勃起功能障碍(ED)的相关性。方法：建立糖尿病大鼠模型,分别于造模1～4月注射阿扑吗啡(APO)作阴茎勃起功能试验,然后取大鼠的大脑、胸腰段交感干、阴茎和前列腺,用免疫组织化学法和荧光免疫组化法显示 NGF 阳性神经元或神经纤维,并作图像分析。结果：糖尿病1个月时尚无 ED 出现,但各处的 NGF 阳性神经元及纤维开始下降,与对照组相比有显著性差异,随着病程延长差异更明显;2个月时 DM 大鼠阴茎勃起次数与对照组已有显著差异3个月和4个月时差异非常显著。结论：糖尿病性早期中枢和周围神经系统内 NGF 减少,NGF 的减少与糖尿病性 ED 的发生发展密切相关。     

单纯治疗慢性前列腺炎对其合并ED的影响

目的探讨单纯治疗慢性前列腺炎对其合并阴茎勃起功能障碍(ED)的影响。方法选择415例前列腺炎继发ED的患者进行单纯针对前列腺炎的治疗,通过前列腺炎症状评分(NIH-CPSI)、前列腺液常规评价前列腺炎的治疗效果,采用国际勃起功能评分问卷(IIEF-5)评分评价ED的治疗效果。结果慢性前列腺炎经综合治疗2个月后,患者的NIH-CPSI评分及前列腺液白细胞计数均显著降低(P0.05)。前列腺炎治愈或好转后,IIEF-5评分显著增加,部分患者勃起恢复正常,中、重度ED患者显著减少,性欲下降患者明显减少,少数有射精障碍的患者得到改善。其差异均具有显著性(P0.05)。结论单纯治疗慢性前列腺炎可使大部分患者并发的ED明显改善,而对少数前列腺炎好转后ED症状改善不明显者,可联合应用PDE5i等药物治疗。     

Rho激酶在糖尿病血管内皮功能改变中的作用

目的: 探讨Rho激酶激活在糖尿病血管内皮功能损伤中的作用。方法:利用正常SD大鼠、基因型糖尿病动物模型和高脂饮食诱发的小鼠肥胖模型,用器官浴槽和肌动描记方法对血管功能进行检测,用免疫印迹方法对血管组织中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)磷酸化水平进行测定,用ELISA方法对血管组织中血栓烷受体(TP受体)激活物进行测量。结果: TP 受体激活可以抑制正常血管的内皮依赖性舒张,使最大舒张值(E_max)由正常组的(78.8±10.6)% 降到 (17.9±5.1)%; Rho激酶抑制剂预处理翻转了TP受体的抑制作用,E_max值为 (62.0±11.2)%;抑制eNOS抵消了Rho激酶抑制剂对血管功能的改善作用。与此相一致,TP受 体激活可以抑制正常血管eNOS磷酸化水平,并且该作用被Rho激酶抑制剂所翻转。此外,抑制Rho激酶可以使糖尿病小鼠和肥胖小鼠的血管内皮依赖性舒张作用得到改善,E_max值显著增加。并且,与对照组相比,糖尿病动物血管组织中血栓烷B₂和前列腺素F_2α水平升高。结论:Rho激酶参与了糖尿病血管内皮功能紊乱的调节,可能与TP受体激活和抑制eNOS活性有关。     

硫化氢对糖尿病大鼠ED的影响和机制研究

 目的：观察硫化氢（H 2S）对糖尿病（DM）大鼠勃起功能障碍（ED）的影响。方法：将70只SD雄性大鼠分为2组,60只腹腔注射链脲佐菌素（STZ）建立DM大鼠模型,10只注射生理盐水为正常对照。阿朴吗啡诱导勃起后检测DM造模成功大鼠的勃起功能情况,将存在ED的36只大鼠随机分成3组：糖尿病对照组（DM组）、糖尿病+硫氢化钠组（DM+NaHS组）和糖尿病+西地那非组（DM+sildenafil组）。DM+NaHS组每天腹腔注射NaHS （50 μmol/kg）,DM+sildenafil组每天给予西地那非（5 mg/kg）灌胃,DM组每日腹腔注射生理盐水,注射体积为0.25 mL。持续饲养12周后,观察各组大鼠勃起功能情况,采集各组大鼠动脉血,测定血液中H 2S含量及各组阴茎海绵体组织胱硫醚γ-裂解酶（cystathionine γ-lyase, CSE）活性及CSE表达水平。结果：STZ诱发的DM造模成功率为81.7%（49/60）,DM大鼠发生ED的比例为73.5%（36/49）,与DM组比,DM+NaHS组和DM+sidenafil组大鼠勃起功能良好,3个实验组大鼠勃起率分别为(33.3±5.5)%、（54.5±5.3）%和(63.6±9.1)%。与正常大鼠组比,各组DM大鼠阴茎海绵体中CSE活性与表达水平均有下降,其中DM+NaHS组大鼠的CSE活性及表达水平显著低于DM组（P<0.05）和DM+sildenafil组（P<0.05）。结论：STZ诱导的糖尿病大鼠中ED发生率较高,H 2S对糖尿病合并ED大鼠勃起功能有一定的促进作用。外源性给予H 2S可以反馈性抑制大鼠阴茎组织中CSE的活性和表达。     

糖尿病性勃起功能障碍大鼠阴茎和脊髓nNOS及AchE表达的变化

目的：观察大鼠糖尿病性勃起功能障碍（ED）与腰骶段脊髓和阴茎神经源性一氧化氮合酶（nNOS）和乙酰胆碱酯酶（AchE）阳性神经元或神经纤维变化的相关性。方法：注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,4周和12周后注射阿扑吗啡（APO）进行大鼠阴茎勃起功能实验,取大鼠阴茎和腰骶段脊髓,用ABC免疫组织化学法和组织化学法分别显示nNOS和AchE阳性神经元或神经纤维。结果：与对照组相比,糖尿病4周时,大鼠阴茎勃起次数无显著性差异;12周时显著性减少;糖尿病4周时,脊髓和阴茎nNOS和AchE阳性神经元或神经纤维均无显著变化,而12周时均显著减少。结论：糖尿病性ED的出现伴随脊髓和阴茎内NO和乙酰胆碱的减少。     

阴茎勃起功能障碍药物治疗

勃起功能障碍是中老年男性常见多发病,近几年来其治疗的进展比较快,也引起了广泛关注。目前常用的一线口服治疗药物包括西地那非、伐地那非和他达拉非,临床效果相似但各有其特点。二线治疗包括阴茎海绵体血管注射疗法和尿道内用药,但因使用时有侵袭性而受限。目前所有的治疗方法都存在着不同程度的不良反应,基因治疗可能是未来ED治疗的发展方向。     

Cardiac autonomic function during sleep in psychogenic and organic erectile dysfunction

The present study investigated the sympathetic/parasympathetic balance during non-rapid eye movement (NREM) and rapid eye movement (REM) sleep in patients with psychogenic and organic erectile dysfunction. The cardiac autonomic balance was assessed from the power of the low frequency (LF) and high frequency (HF) spectral components of heart-rate variability in 11 patients with psychogenic erectile dysfunction and 11 patients with organic erectile dysfunction as determined by monitoring sleep-related erections. Spectral analysis of heart-rate variability was calculated for at least four successive 4-min epochs of electrocardiogram recordings during NREM sleep and for all available 4-min epochs during REM sleep. Statistical analysis revealed that organic patients had a significantly higher LF/HF ratio (P < 0.01) during both stages of sleep, which resulted from a significantly lower power in the HF component (P < 0.004) and higher power in the LF component (P < 0.01) in these patients, in both REM and NREM sleep stages. These results demonstrate that patients complaining of daytime sexual dysfunction and found by sleep-related erection monitoring to suffer from organic erectile dysfunction, have altered cardiac autonomic balance during both stages of sleep.     

糖尿病大鼠阴茎的氧化应激与阴茎勃起功能障碍的关系

目的 探讨氧化应激在糖尿病性阴茎勃起功能障碍（ED）中的作用。 方法 注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,分别在注射8周和12周后观察阴茎勃起次数;取大鼠阴茎,测定阴茎丙二醛水平、总抗氧化能力,免疫印迹法检测阴茎核因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白量的变化。 结果 糖尿病大鼠的阴茎勃起次数明显低于对照组,并随病程延长降低;糖尿病大鼠阴茎丙二醛水平明显高于对照组,总抗氧化能力水平明显低于对照组;与对照组比较,糖尿病组大鼠阴茎内Nrf2蛋白量随病程延长而降低。 结论 糖尿病性阴茎勃起功能障碍与阴茎氧化应激水平升高相关。     

内源性一氧化氮合酶抑制物在糖尿病大鼠勃起功能障碍中的作用

目的:探讨内源性一氧化氮合酶(NOS)抑制物非对称性二甲基精氨酸(ADMA)在糖尿病大鼠勃起功能障碍中的作用及其机制。方法:采用高脂饲养加小剂量链脲佐菌素腹腔注射诱导8周病程的2型糖尿病大鼠模型;麻醉下分离大鼠阴茎海绵体,用器官浴槽方法检测海绵体对乙酰胆碱的内皮依赖性舒张反应以反映其勃起功能;检测血清ADMA含量;检测海绵体组织NOS活性及一氧化氮(NO)和环磷酸鸟苷(c GMP)含量;用Western blot检测海绵体ADMA信号通路蛋白和磷酸二酯酶5(PDE5)的表达;检测超氧化物歧化酶活性和脂质过氧化产物丙二醛含量以评价氧化应激。结果:糖尿病大鼠血糖升高,胰岛素敏感性降低,表明糖尿病大鼠模型建立成功;与正常对照组比较,糖尿病大鼠海绵体舒张功能明显降低,血清ADMA浓度升高,海绵体组织NOS活性及NO和c GMP含量降低,ADMA生成酶蛋白精氨酸甲基转移酶1表达上调,ADMA代谢酶二甲基精氨酸二甲胺水解酶1、2及ADMA靶酶内皮型NOS和神经元型NOS表达下调,PDE5蛋白表达上调,氧化应激增加;体外用ADMA孵育正常大鼠离体海绵体,亦可产生与糖尿病大鼠海绵体相似的舒张功能障碍及NO和c GMP含量减少。结论:内源性NOS抑制物ADMA蓄积是导致糖尿病大鼠勃起功能障碍的重要原因,其机制可能与减少NO生成、增加氧化应激有关。     

Therapeutic effect of Low intensity Extracorporeal Shock Wave Therapy (Li-ESWT) on diabetic bladder dysfunction in a rat model

Objectives: Low intensity extracorporeal shock wave therapy (Li-ESWT) has proven to be effective and safe for the treatment of various urological disorders including erectile dysfunction and chronic pelvic pain syndrome. In this study, we elucidated the therapeutic effect and possible mechanisms of Li-ESWT on diabetic bladder dysfunction (DBD) in a rat model.Materials and Methods: In all, thirty-two female Sprague-Dawley rats were divided into three groups: normal control (NC), diabetes mellitus (DM) control, and DM Li-ESWT. The two DM groups were given high fat diets for one month, followed by 2 intraperitoneal injections of streptozotocin (STZ) 30 mg/kg separated by one week. Body weight and fasting blood glucose were monitored every week. Only rats with fasting blood glucose 140 mg/dL or more were considered diabetic and used in the subsequent portions of the study. The Li-ESWTs were applied toward the pelvis of the rats twice a week for 4 weeks with energy flux density (EFD) 0.02 mJ/mm², 500 shocks, at 3Hz. All rats underwent plasma insulin tolerance test, conscious cystometry, leak-point pressure (LPP) assessment, and immunohistochemical studies.Results: DM groups had significantly lower insulin sensitivity and higher body weight. Conscious cystometry also revealed voiding dysfunctions. In the DM Li-ESWT group, the rats had significantly improved voiding functions that were reflected in longer micturition intervals and higher LPP compared to DM control. Immunofluorescence in DM control groups showed increased tyrosine hydroxylase (TH) expression and decreased neuronal nitric oxide synthase (nNOS) expression in the longitudinal urethral smooth muscles. Besides, rats had dilations and deformities of suburothelium capillary network of the bladder, revealing the deterioration of the nerve function of the urethra and destruction of the vascularization of the bladder. However, the DM Li-ESWT group exhibited recovery of the nerve expression of the urethra and vascularization of bladder.Conclusions: Li-ESWT ameliorates the bladder dysfunction and urinary continence in the DBD rat model, reflected in restoration of the nerve expression of the urethra and the vascularization of the bladder. Non-invasive Li-ESWT could be an alternative therapeutic option for DBD.