bc1-2、p53蛋白在肺癌组织中的表达及其意义

恶性肿瘤的异常增殖不仅与促进细胞生长的原癌基因的激活及控制细胞生长的抑癌基因的失活有关，并与细胞凋亡被抑制有重要关系。我们应用免疫组化SP法，对已随访5年以上的125例肺癌患者的组织标本进行了bcl-2和p53基因蛋白产物进行检测和分析，探讨此2种蛋白表达与肺癌临床病理因素及预后的关系。     

bcl-2、p53蛋白在肺癌组织中的表达及其意义

恶性肿瘤的异常增殖不仅与促进细胞生长的原癌基因的激活及控制细胞生长的抑癌基因的失活有关，并与细胞凋亡被抑制有重要关系。我们应用免疫组化SP法，对已随访5年以上的125例肺癌患者的组织标本进行了bcl-2和p53基因蛋白产物进行检测和分析，探讨此两种蛋白表达与肺癌临床病理因素及预后之间的关系。     

bcl-2、p53蛋白在肺癌组织中的表达及其意义

恶性肿瘤的异常增殖不仅与促进细胞生长的原癌基因的激活及控制细胞生长的抑癌基因的失活有关,并与细胞凋亡被抑制有重要关系。我们应用免疫组化SP法,对已随访5年以上的125例肺癌患者的组织标本进行了bcl-2和p53基因蛋白产物进行检测和分析,探讨此2种蛋白表达与肺癌临床病理因素及预后的关系。1材料与方法1.1材料收集青岛市胸科医院和青岛市肿瘤医院病理科1991年～1996年确诊的原发性肺癌手术切除标本125例,其中男性患者86例,女性患者39例,年龄范围26～76岁,平均(57±10.01)岁,术前均未作过放疗和化疗。125例患者术后均随访5年以上,术后0.5…     

nm23和TGFβ_1在人体非小细胞肺癌中的表达及其临床病理关系的探讨

目的　探讨转移抑制基因nm2 3及转化生长因子 β1基因在人非小细胞肺癌 (NSCLC)中的表达水平及其临床病理关系。方法　应用免疫组化方法对 83例人非小细胞肺癌组织中转移抑制基因nm2 3及转化生长因子 β1基因表达蛋白水平进行了研究。结果　nm2 3和TGFβ1表达水平与肺癌的TNM分期、细胞分化程度及肺癌的转移有密切关系 (P <0 .0 5 )。结论　nm2 3、TGFβ1基因表达水平同时降低 ,预示肺癌的转移和预后不良。     

nm23和TGFβ_1在人体非小细胞肺癌中的表达及其临床病理关系的探讨

 目的　探讨转移抑制基因nm2 3及转化生长因子 β1基因在人非小细胞肺癌 (NSCLC)中的表达水平及其临床病理关系。方法　应用免疫组化方法对 83例人非小细胞肺癌组织中转移抑制基因nm2 3及转化生长因子 β1基因表达蛋白水平进行了研究。结果　nm2 3和TGFβ1表达水平与肺癌的TNM分期、细胞分化程度及肺癌的转移有密切关系 (P <0 .0 5 )。结论　nm2 3、TGFβ1基因表达水平同时降低 ,预示肺癌的转移和预后不良。     

肿瘤相关新基因pp4519在肺癌中的表达差异及初步功能研究

目的探讨肿瘤相关新基因pp4519在肺癌细胞系、人肺癌及癌旁组织中表达差异及其初步生物学功能.方法合成肿瘤相关新基因pp4519特异性多肽,免疫家兔制备兔源性多克隆抗体;从体外细胞集落形成试验,生长曲线,裸鼠体内成瘤试验,半定量RT-PCR,蛋白印迹,免疫细胞化学及免疫组化检测pp4519基因的表达差异,以及转染肺癌细胞系的细胞凋亡检测等方法研究pp4519基因对体内外细胞生长和生物学功能的影响.结果 SPC-A1肺癌细胞系的体外集落形成试验表明,pp4519基因转染组集落形成数明显少于空载体组(P<0.05);转染pp4519基因的肺癌细胞系的裸鼠体内成瘤试验结果表明该基因对SPC-A1细胞系的成瘤有明显抑制作用(P<0.01);瞬时转染细胞的流式细胞凋亡检测结果表明该基因具有促进SPC-A1细胞凋亡的作用;半定量RT-PCR,蛋白印迹检测结果表明肺癌及癌旁组织中pp4519 RNA和蛋白表达无明显差异(P>0.05),但免疫组化结果显示PP4519在人肺癌癌旁组织中的表达略高于肺癌.结论 pp4519是一个具有抑制肺癌细胞生长功能的新基因.     

shRNA干扰对肺癌细胞内Skp2和p27水平及其生长的影响

探讨干扰肺腺癌SPC—A—1细胞中skp2（S-phase kinase associated protein，Skp2）基因的发夹结构RNA（small hairpin RNA，shRNA）对肺癌细胞Skp2和p27基因表达的影响及对细胞生长的影响。方法：设计、合成特异性的shRNA序列并与pGenesil-1质粒载体连接转染SPC-A-1细胞，经过稳定筛选后的肺癌细胞，通过RT—PCR和Western印迹法分别检测细胞内Skp2、p27 mRNA和蛋白的表达情况，MTT法检测细胞生长情况并绘制生长曲线。结果：在转染干扰RNA后SPC-A-1细胞内的Skp2 mRNA及蛋白表达下降明显，而p27蛋白水平却明显上升，这与抑制了Skp2表达导致p27降解减少有关。生长曲线表明细胞生长受到了抑制。结论：成功构建了针对脚2基因的shRNA真核表达载体，能有效抑制肺癌细胞生长，并使得Skp2基因表达下降，p27基因的表达增多，为肺癌细胞的基因治疗提供了实验依据。     

miR-133b靶向PKM2基因对肺癌A549干细胞增殖及药物敏感性的影响

背景与目的 已有研究表明miR-133b可抑制肺癌细胞生长,miR-133b表达水平在肺癌组织及患者血清中显著降低,miR-133b通过靶向丙酮酸激酶M2型(pyruvate kinase isozyme type M2,PKM2)基因提高鳞癌细胞的放疗敏感性,但其机制尚未明了.本研究通过提取非小细胞肺癌细胞株A549的CD133+/CD34+干细胞,研究miR-133b对其增殖及顺铂类药物(cisplatin,DDP)敏感性的影响,探讨miR-133b与PKM2基因的关系,以及它们在肺癌干细胞中的作用.方法 使用miRBase和miRNAMap数据库进行miR-133b与PKM2基因的序列比对.应用免疫磁珠分选法从A549细胞中分选出CD133+/CD34+肺癌干细胞,流式细胞仪检测纯度.转染miR-133b进入CD133+/CD34+细胞,qRT-PCR检测验证miR-133b表达情况,CCK8法检测细胞增殖情况;15μg/mL DDP处理转染miR-133b细胞,检测0 h、12 h、24 h、72 h的细胞凋亡情况;采用Western blot检测PKM2蛋白水平的表达.结果 PKM2基因可能为miR-133b的靶基因;流式结果显示CD133+/CD34+细胞的纯度为(92.15+4.27)%.qRT-PCR结果显示,与对照组相比,过表达miR-133b后,miR-133b明显上调,miR-133b抑制表达后,miR-133b明显下调(P<0.05).细胞增殖实验及Western blot结果显示,与对照组相比,miR-133b mimics组细胞的增殖能力显著降低(P<0.05),PKM2蛋白水平明显降低(P<0.05);而抑制miR-133b表达则明显增加细胞的增殖能力及PKM2蛋白水平(P<0.05).DDP处理12 h后miR-133b mimics组细胞的凋亡持续明显高于对照组(P<0.05).miR-133b mimics+DDP组PKM2蛋白的表达明显低于对照组及miR-133b inhibitor组(P<0.05).结论 过表达miR-133b能够通过下调PKM2而抑制肺癌干细胞的生长和增殖,并且可以增强肺癌干细胞对DDP的敏感性.     

肺癌组织中MTS2/p15的表达及意义

抗癌基因是抑制肿瘤形成的一类基因,从肿瘤发生过程看,由随机突变导致抗癌基因失活,要比诱发癌基因激活的概率大,因此从理论上讲,致癌变过程中抗癌基因的作用更为突出[1].p15基因是一种抑癌基因,其基因产物为p15蛋白,对细胞生长起负调节作用.研究表明,非小细胞肺癌(NSCLC)中p15基因优先改变,而小细胞肺癌(SCLC)未见改变[2].肺癌p15蛋白研究尚无报道,本研究应用SABC免疫组化方法检测肺癌组织中p15蛋白表达情况,旨在探讨p15蛋白表达对NSCLC及SCLC的鉴别诊断及对预后判断的价值.     

肺癌患者FLK-1、LRP和MDR1的表达与临床研究

目的:探讨血管内皮生长因子受体 (Flk 1),肺耐药蛋白 (LRP)基因以及多药耐药基因 (MDR1)蛋白与肺癌患者临床及病理指标的关系。方法:用免疫组化技术(ABC法)对原发性肺癌组织中三种基因的表达进行检测。结果: 70例肺癌中,非小细胞肺癌MDR1阳性率 49. 2% (29 /59),明显高于小细胞肺癌 (SCLC) 18. 2% (2 /11)(P<0. 05);非小细胞肺癌LRP阳性率 69. 5% (41 /59),明显高于小细胞肺癌 27. 3% (3 /11) (P<0. 05)。腺癌中MDR1与LRP的表达明显高于鳞癌(P<0. 05)。LRP与Flk 1在NSCLCs中共同表达 49. 2% (29 /59),LRP的表达与肺癌的组织学分级相关,MDR1和LRP的表达与肺癌的组织学类型有关,Flk 1与TNM分期相关,均有统计学意义(P<0. 05)。Flk 1 LRP均阳性、FLK 1 LRP MDR1均阳性、中药治疗、复发与患者的生存率有关(P<0. 05)。结论:FLK 1、LRP和MDR1基因蛋白产物的检测对肺癌患者的诊治和预后评估有积极意义。     

非小细胞肺癌中WWOX蛋白及ErbB2蛋白的联合检测

 目的 探讨WWOX(WW domain-containing oxidoreductase)基因在非小细胞肺癌组织中的表达及与ErbB2蛋白之间的关系。 方法 用免疫组化方法检测50例肺鳞癌,31例肺腺癌及20例癌旁正常组织中WWOX基因蛋白的表达,并分析其与各临床病理指标及ErbB2蛋白之间的相关性。 结果 WWOX基因在72.8%的非小细胞肺癌中失表达或表达减少,而在癌旁正常组织中有80.0%正常表达。WWOX基因的表达与组织类型、细胞分化程度密切相关（P<0.05）,在鳞癌和低分化癌中WWOX基因失表达或表达减少的发生率更高。肺癌中ErbB2的过度表达与肺癌的临床分期、淋巴结转移相关,WWOX蛋白阳性表达与ErbB2负相关(r=–0.239,Ｐ<0.05)。 结论 WWOX蛋白的低表达与ErbB2的过表达可以协同判断预后较差的非小细胞肺癌。     

肺癌P53蛋白表达与DNA含量及预后的关系

P53基因是一种肿瘤抑制基因,对细胞的生长起负性调节作用,其突变失活在肿瘤演进过程中具有重要作用.本文应用免疫组化技术检测了P53蛋白在肺癌中的表达,并用图像分析方法测定DNA含量,初步探讨两者之间的关系及P53蛋白表达的临床病理意义.     

RNA干扰抑制HMGB1基因表达对肺癌细胞L9981增殖和侵袭的影响

背景与目的 研究小干扰RNA抑制高迁移族蛋白B1基因表达对肺癌细胞L9981增值和侵袭能力的影响.方法 设计合成靶向HMGB1基因的siRNA,采用阳离子脂质体试剂瞬时转染肺癌细胞株L9981,利用实时荧光定量PCR和Western blot检测RNA干扰后HMGB1基因的沉默效果,评价siRNA设计的合理性及RNA干扰抑制HMGB1表达的有效性;用细胞活力计数仪测定3组细胞活力;分别在RNA干扰后24、48、72和96小时应用MTF实验检测细胞生存状态,计算生长抑制率并绘制生长曲线;应用boyden chamber法检测侵袭能力的差异.结果 靶向HMGB1的stRNA成功抑制肺癌细胞株L9981中HMGB1基因及蛋白表达,细胞活力检测仪测定RNA干扰48小时后,细胞活力显著下降;MTT测定肺癌细胞生长受到明显抑制;boyden chamber小室细胞侵袭实验结果肺癌穿膜细胞数明显减少.结论 应用siRNA技术能有效的抑制HMGB1基因的表达,同时有效抑制L9981细胞的体外增值和侵袭,为肺癌的生物学治疗提供了新思路.     

《中国肿瘤临床》2005年第32卷索引

(按人体部位及文献分布规律分类)肺肝胃食管肠乳腺卵巢子宫头颈部血液淋巴呼吸系统消化系统内分泌系统泌尿系统生殖系统运动系统神经系统其它肺肿瘤转移相关基因与周围型肺癌CT征象的关系研究32(1):1非小细胞肺癌318例放疗效果的临床因素分析32(1):40肺癌组织中MTS2/p15的表达及意义32(1):51小细胞肺癌c-Kit基因蛋白的表达及其与预后的关系32(2):87231例非小细胞肺癌术后生存和预后分析32(2):92非小细胞肺癌中脆性组氨酸三联体基因异常的探讨32(2):95肺癌组织细胞耐药基因MDR1、LRP表达及临床意义32(3):132人突变K-ras基因修饰lewis肺…     

非小细胞肺癌中p53蛋白表达及其临床意义

目的：为探讨非小细胞肺癌中p53蛋白表达与肺癌组织学类型、分化程度和淋巴结转移的关系。方法：应用免疫级化技术（ABC法），以p53单克隆抗体检测53例非小细胞肺癌组织中p53基因的表达，组织经微波抗原修复后进行免疫染色。结果采用X2检验。结果：p53蛋白在53例非小细胞肺癌中表达阳性率为64．2％，p53蛋白表达与非小细胞肺癌的组织学类型无关（P＞0.05）；与肺鳞癌分化程度有关（P＜0.01）；肺腺癌中与淋巴结转移有关（p＜0.05）。结论：p53基因的表达异常与不同类型的肺癌发生发展相关，提示P53基因在肺癌的形成、分化和转移过程中起不同的调节作用，p53蛋白过度表达则预后差，检测p53蛋白对判断非小细胞肺癌预后具有应用价值。     

非小细胞肺癌中nm23、P-gp基因蛋白表达的研究

目的 研究非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer, NSCLC ）中nm23及多药耐药基因蛋白MDR1产物P-糖蛋白（P-glycoprotein ,P-gp）的表达及其临床意义。方法 用免疫组化二步法对69例非小细胞肺癌进行nm23,P-gp检测分析并随访.结果 69例非小细胞肺癌中nm23及P-gp的阳性表达率为18.84%、17.73%。 nm23蛋白表达与P-gp耐药基因表达无关（P〉0.05）。nm23的表达与淋巴结转移有关（P〈0.01）。耐药基因MDR1产物P-糖蛋白的阳性表达与非小细胞肺癌的组织学类型有关（P〈0.05）；与淋巴结转移及临床分期相关（P≤0.01）；与性别、年龄无关（P〉0.05）。结论部分非小细胞肺癌病人体内存在多药耐药基因MDR1产物P-gp或对P-gp介导的抗癌药物已产生耐药.nm23基因蛋白在非小细胞肺癌中的表达与多药耐药基因蛋白MDR1产物P-gp无关；与非小细胞肺癌的淋巴结转移呈相反关系；对判断肺癌的预后有重要意义。非小细胞肺癌中多药耐药基因P-gp的表达与组织学类型、淋巴结转移、临床分期有关。     

DFMO通过Fas/FasL通路诱导人肺癌细胞凋亡的研究

背景与目的:Fas/FasL系统是细胞凋亡的重要通路。为了解Fas/FasL系统在肿瘤多胺生物合成抑制导致恶性表型逆转中的作用,本研究拟探讨多胺生物合成抑制剂α-二氟甲基鸟氨酸(α-difluoromethylornithine,DFMO)对人肺癌A549细胞生长、凋亡的影响及其与人肺癌相关抗原、rasP21蛋白及Fas/FasL表达的相关性。方法:用MTT法观察细胞生长,流式细胞仪分析细胞周期,DNAladder电泳法观察细胞凋亡,SP免疫组化法及RT-PCR法检测细胞蛋白及基因表达。结果:DFMO可抑制A549细胞生长并诱导凋亡,使G1期细胞增多(61.0±2.08)%,S期细胞减少(21.2±0.88)%,出现DNAladder;同时下调A549细胞人肺癌相关抗原及rasP21蛋白表达,上调Fas基因mRNA及蛋白表达。结论:DFMO通过Fas/FasL通路诱导肺癌A549细胞的凋亡,并可能与人肺癌相关抗原及rasP21蛋白表达调控有关。     

肺癌组织Bax的表达及其与细胞凋亡和增殖的关系

 目的　探讨Bax基因在肺癌中的表达及其与细胞凋亡和增 殖的关系。方法　对38例肺癌组织及21例肺部良性组织,应用TUNEL技术对 细胞凋亡情况进行了检测,应用免疫组织化学法对Bax蛋白和增殖细胞核抗原(PCNA)进行检 测。并分别定义凋亡指数和增殖指数。结果　肺癌组织Bax蛋白及PCNA的表 达明显高于肺部良性组织,P＜0.01;肺癌组织中凋亡指数和增殖指数均高于肺部良性 组织,P＜0.01;而Bax阳性肺癌组织中的凋亡指数明显高于Bax阴性肺癌组织P＜0 .01;结论　Bax蛋白在肺癌中的表达率较高,同时在肺癌中细胞凋亡和细 胞增殖亦较活跃;Bax蛋白过度表达促进细胞凋亡。     

RKIP、MMP-2与非小细胞肺癌侵袭转移的关系

目的 检测非小细胞肺癌组织中Raf激酶抑制蛋白(raf kinase inhibitor protein,RKIP)和基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)的表达及其与临床病理特征及预后的关系.方法 应用免疫组织化学方法(SP法)检测83例非小细胞肺癌及其癌旁正常肺组织中RKIP与MMP-2蛋白的表达情况.结果 83例非小细胞肺癌中,RKIP及MMP 2蛋白的表达率分别为20.5％ (17/83)和69.9％ (58/83),其表达水平与非小细胞肺癌的分化程度、TNM分期、淋巴结或远处转移及术后生存时间有明显关系;RKIP蛋白的表达水平与MMP-2呈负相关(P＜0.05);RKIP蛋白低表达与MMP-2蛋白高表达的病例2年生存率明显降低(P＜0.05).结论 RKIP低表达与非小细胞肺癌的侵袭、转移密切相关,RKIP可能是非小细胞肺癌的一个转移抑制蛋白,RKIP表达下调导致MMP-2的过表达从而促进非小细胞肺癌细胞的侵袭和转移.     

p53、p16、FHIT基因蛋白在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的研究非小细胞肺癌中p53、p16、FHIT基因蛋白的表达及意义.方法应用免疫组化S-P法检测62例非小细胞肺癌标本中p53、p16、FHIT的表达和组织学分型、分期等临床病理参数之间的关系.结果p53与肺癌分期、淋巴结转移及年龄有显著性差异,与分型、吸烟史、性别无关;p16与肺癌分期、淋巴结转移有显著性差异,与分型、年龄、性别、吸烟史均无关.FHIT与肺癌的分型、吸烟史、性别有显著性差异,与分期、年龄、淋巴结转移无关.结论p53、p16基因改变在非小细胞肺癌的发生、发展中起重要作用,p53、p16基因蛋白异常表达可作为评价肺癌预后的有效指标,而FHIT基因表达缺失是常见事件.