微量NAG酶释放法鉴定牛血清促进细胞生长的活性

目的　检查牛血清促进细胞生长的活性。方法　微量NAG酶释放法。结果　在同一实验条件下 ,试验血清 (990 5 0 7,990 40 2 )与对照血清 (990 40 5 )对促进K5 6 2细胞生长的活性没有明显差别 ,但血清的促进细胞生长活性随着储存时间的增加而降低 ,如试验血清 (970 6 2 1)。结论　利用微量NAG酶释放法可以筛查新生牛血清促进细胞生长的活性     

应用人癌性胸水上清液替代牛血清培养肿瘤细胞的探讨

在人癌性胸腹水中除含有肿瘤细胞外,还含有大量的淋巴细胞及其它组织细胞。这说明胸腹水中有许多能维持细胞生长,刺激细胞增殖的因素。在目前的组织培养中一般采用培养液中加10～20％的小牛血清,因血清来源不同,效果也差别较大,且价格较高。我们采用来源方便的临床病人的癌性     

牛血清促进细胞生长活性的鉴定——微量滴定法

在肿瘤科研中,体外细胞培养技术得到了广泛的应用。体外细胞培养的成败往往取决于血清的质量。不同批号的血清质量差异较大,必须先行质量鉴定方可使用。其检测方法虽有多种,但因较为繁琐费时,许多实验室仍在寻求一种既简便易行,又能正确鉴定促进各种不同类型细胞生长活性的常规检测手段。姜述德建立了微量滴定法,我们在此基础上加以改进,现报告如下。 检侧细胞:人喉癌上皮样细胞HEP—2和人胚肺二倍体成纤维细胞SL—7。前者用含10％小牛血清RPMI1640培养液,后者用含10％小牛清血MEM培养液。     

神经元特异性烯醇化酶在非小细胞肺癌中的意义

随着研究的进一步深入,非小细胞肺癌（NSCLC）的神经内分泌化逐步引起人们的重视,现对肿瘤标志物神经元特异性烯醇化酶在非小细胞肺癌鉴别诊断、化疗疗效评估、预后监测等方面的作用作一介绍.     

胃泌素释放肽前体对小细胞肺癌诊治的临床意义

胃泌素释放肽前体(pro-gastrin-releasing peptide,ProGRP)是一种较新的应用于小细胞肺癌检测的肿瘤标志物,血清ProGRP水平测定对小细胞肺癌的诊断具有较高的敏感度和特异度,较神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)更适宜用于小细胞肺癌的早期诊断.其在小细胞肺癌治疗过程中的疗效评价及复发监测上也体现了优越性.临床研究发现,肾小球滤过率降低是其假阳性的主要因素.临床上联合检测ProGRP和NSE,对小细胞肺癌的早期诊断、疗效评价、复发监测价值更大.     

检测SCLC患者血清胃泌素释放肽前体和神经特异性烯醇化酶的临床意义

小细胞肺癌(small cell lung cancer，SCLC)具有增殖快、易产生远处转移的特点，绝大多数发生于肺门处，胸片检查不易被诊断，发现时患者多属中晚期，但其对化疗敏感，治疗成功率较高，因此SCLC的早期诊断及治疗尤为重要。酶联免疫吸附试验(enzymelinked immunosorbent assay，ELISA)检测3种血清     

参与肿瘤侵袭和转移的细胞外基质降解酶

 肿瘤细胞在侵袭和转移过程中必需穿透一系列天然组织屏障—基底膜和细胞外基质。合成及分泌大量基质降解酶,降解细胞外基质是肿瘤细胞侵袭、转移的重要步骤［1］。     

神经元特异性烯醇化酶在非小细胞肺癌中的意义

随着研究的进一步深入,非小细胞肺癌(NSCLC)的神经内分泌化逐步引起人们的重视,现对肿瘤标志物神经元特异性烯醇化酶在非小细胞肺癌鉴别诊断、化疗疗效评估、预后监测等方面的作用作一介绍.     

胃泌素释放肽前体在小细胞肺癌诊断及预后的临床价值

胃泌素释放肽前体（ProGRP）作为一种新的小细胞肺癌的肿瘤标志物，双抗体夹心酶联免疫吸附测定（ELISA）方法显示对小细胞肺癌诊断具有较高的敏感性和特异性。相比神经元特异烯醇化酶（NSE）更适宜用于小细胞肺癌的早期诊断。ProGRP在小细胞肺癌治疗与预后监测上也体现了优越性。临床研究发现，肾小球滤过率降低是假阳性的主要因素。临床上联合检测ProGRP和NSE，对小细胞肺癌的早期诊断、监测疗效及预后价值更大。     

苯丙氨酸解氨酶抑制肝癌细胞生长的实验研究

苯丙氨酸解氨酸（PAL）是高等植物本丙酸类化合物代谢过程中的一个关键酶，它催化L一苯丙氨酸生成反式苯丙烯酸，降解了肿瘤细胞所需的特异代谢前体，从而达到抑制肿瘤细胞生长的目的。一般认为PAL对底物依赖性肿瘤（如白血病）具有抑制作用，但对肝癌细胞是否有同样的作用尚未见报道。据此，本文初步研究了PAL对肝癌BEL－7402细胞的作用。材料与方法1．试bJMTT（3－（4，5－dmethylthiazol）2，5－diphenyltetrazollumbromide3，十二烷基硫酸钠（SDS）为Sigma产品；其它均为国产试剂（AR）。2．k细胞肝癌BEL刁402细胞由兰州大学…     

胃泌素释放肽前体在小细胞肺癌诊断及预后的临床价值

胃泌素释放肽前体(ProGRP)作为一种新的小细胞肺癌的肿瘤标志物,双抗体夹心酶联免疫吸附测定(ELISA)方法显示对小细胞肺癌诊断具有较高的敏感性和特异性。相比神经元特异烯醇化酶(NSE)更适宜用于小细胞肺癌的早期诊断。ProGRP在小细胞肺癌治疗与预后监测上也体现了优越性。临床研究发现,肾小球滤过率降低是假阳性的主要因素。临床上联合检测ProGRP和NSE,对小细胞肺癌的早期诊断、监测疗效及预后价值更大。     

过氧化物酶体增殖物激活受体γ激动剂15d-PGJ2抑制垂体腺瘤细胞生长的研究

目的：观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ（peroxisome proliferator-activated receptor-γ,PPARγ）激动剂15d—PGJ2对垂体腺瘤细胞生长和激素分泌的影响,并探讨其可能的作用机制。方法：采用MTT和ELISA法检测15d—PGJ2对大鼠垂体腺瘤细胞系GH3细胞增殖和生长激素分泌的抑制效应,进一步应用电镜、FCM及Western blot分别检测细胞凋亡、细胞周期以及caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果：15d—PGJ2呈剂量和时间依赖性方式抑制GH3细胞增殖和GH分泌,与对照组相比,差异有统计学意义,P〈0．05。15d-PGJ2干预后,GH3细胞出现典型的凋亡形态学表现;Q和S期的细胞比例下降,而G1期的细胞比例明显增加;细胞中Bax和caspase-3蛋白表达水平明显增加,而Bcl-2蛋白表达水平下调,且表现出剂量依赖效应。与对照组相比,差异均有统计学意义,P〈0．05。结论：15d-PGJ2可能通过诱导细胞凋亡和细胞周期停滞来抑制垂体腺瘤细胞生长和激素分泌,这为垂体腺瘤的防治提供一个新的分子靶点。     

口虾蛄提取物对人鼻咽癌细胞明胶酶分泌及活性的影响

目的研究口虾蛄提取物对人鼻咽癌细胞（CNE-2Z）明胶酶分泌及活性的抑制作用。方法采用明胶酶谱法,检测口虾蛄提取物对CNE-2Z细胞明胶酶分泌及活性的影响。结果口虾蛄提取物能以量效方式抑制CNE-2Z细胞明胶酶B分泌及其活性。结论口虾蛄提取物可能通过抑制明胶酶B分泌和活性,从而降低CNE-2Z细胞侵袭能力。     

T细胞酶联免疫斑点法在诊断肺癌合并肺结核中的应用及有效性分析

目的探讨T细胞酶联免疫斑点(TSPOT-TB)法在诊断肺癌合并肺结核中的应用。方法选取2016年2月至2018年4月间上海复旦大学附属中山医院青浦分院收治的226例肺部疾病患者,包括138例单纯肺结核患者、54例单纯肺癌患者和34例肺癌合并肺结核患者。三组患者使用TSPOT-TB、结核菌素纯蛋白生物(PPD)实验、结核抗体和鳞状细胞癌抗原(SCC)检测后,比较不同检测方法阳性率。结果结核组TSPOT-TB阳性率84. 8%,肺癌组1. 9%,肺癌合并结核组85. 3%,结核组与合并组比较,差异无统计学意义(P> 0. 05),两组均高于肺癌组,差异均有统计学意义(均P <0. 05)。PPD结果分析发现,结核组PPD阳性率93. 5%,肺癌组46. 3%,肺癌合并结核组88. 2%,结核组与合并组比较,差异无统计学意义(P> 0. 05),两组均高于肺癌组,差异均有统计学意义(均P <0. 05)。结核抗体结果分析发现,结核组结核抗体阳性率67. 4%,肺癌组37. 0%,肺癌合并结核组67. 6%,结核组与合并组比较,差异无统计学意义(P> 0. 05),两组均高于肺癌组,差异均有统计学意义(均P <0. 05)。SCC结果分析发现,结核组SCC阳性率0. 0%,肺癌组27. 8%,肺癌合并结核组29. 4%,肺癌组与合并组比较,差异无统计学意义(P> 0. 05),两组均高于结核组,差异均有统计学意义(均P <0. 05)。结论 TSPOT-TB能有效鉴别肺癌与肺结核,与肿瘤标志物联合检测时,鉴别肺癌合并肺结核和单纯肺结核均有较高的灵敏性和特异性。     

TGF-β1对人早孕细胞滋养层细胞和绒毛膜癌JAR细胞明胶酶mRNA表达的影响和意义

目的:探讨TGF-β1和明胶酶在妊娠滋养细胞疾病(GTD)发病机制中的作用。方法:RT-PCR法检测TGF-β1诱导的人正常早孕细胞滋养细胞(CTB)和绒毛膜癌JAR细胞中明胶酶CMMP2和MMP97及其抑制剂(TIMP1和TIMP2)mRNA的表达。结果:TGF-β1上调CTB细胞MMP2的表达,但对MMP9的mRNA表达无明显作用(P>0.05)。TGF-β1能显著上调JAR细胞MMP2和MMP9的mRNA表达(P<0.01)。随着TGF-β1浓度的增加,TGF-β1能明显诱导CTB细胞TIMP1和TIMP2的mRNA表达水平上调(P<0.01);然而这种转录水平在TGF-β1处理或未处理的绒毛膜癌细胞中均为极低表达甚至无表达。结论:TGF-β1与明胶酶在GTD的发生、发展中起了协同促进其侵袭、浸润和恶化进展的作用。     

非小细胞肺癌血清标志物PACAP的蛋白质组学筛选和鉴定

背景与目的早诊断早治疗可以提高肺癌的长期生存率,血清标志物可能有助于肺癌的早期诊断。本研究在组织培养的基础上,应用蛋白质组学方法筛选潜在的肺癌血清标志物。方法采用差异蛋白质组学技术对肺腺癌和肺组织培养液中的差异蛋白质进行初步鉴定。选取其中的半胱天冬酶凋亡前衔接蛋白(proapoptotic caspaseadapter protein,PACAP)做更进一步的研究,用Western blot验证PACAP在培养液上清中的表达情况并检测它在不同类型血清中的表达情况,用ELISA检测不同类型血清标本中PACAP的表达情况。结果共得到差异蛋白点19个,鉴定出14个。PACAP在双向电泳中表达差异较大,Western blot显示PACAP在肺癌组织培养液及肺癌患者血清中的表达均明显增高。ELISA显示PACAP在肺腺癌和肺鳞癌患者血清中的表达水平高于在小细胞肺癌、肺良性肿瘤和健康人血清中的水平(P<0.05)。结论 PACAP是潜在的非小细胞肺癌血清标志物。     

肝素酶多肽抗体对HCCLM6肝癌细胞生长及侵袭的影响

目的 探讨自行研制的肝素酶多肽抗体对人肝癌HCCLM6细胞生长和侵袭的影响.方法 采用二苯基溴化四氮唑蓝(MTT)法检测细胞生长曲线,平板克隆形成试验检测细胞集落数,流式细胞仪检测细胞周期,通过肝素酶活性测定和Transwell侵袭小室试验,了解自行研制的3种肝素酶多肽兔多克隆抗体(P1、P2和P3多肽抗体)对HCCLM6肝癌细胞生长及侵袭的影响.结果 与正常兔IgG对照组比较,P1、P2和P3多肽抗体对HCCLM6肝癌细胞的生长、细胞周期及增殖活性均无明显影响.终浓度为100μg/ml的P1、P2多肽抗体与HCCLM6细胞共培养后,肝素酶活性分别降低42.9%和39.1%(P<0.01),Transwell侵袭小室中48 h穿膜细胞数明显减少,抑制率分别为52.5%和36.6%(P<0.05).结论 肝素酶P1和P2多肽抗体能抑制人肝痛HCCLM6细胞的肝素酶活性和侵袭能力,P3多肽抗体对肝癌细胞的肝素酶活性和侵袭能力无影响;肝素酶P1、P2和P3多肽抗体对HCCLM6细胞的生长、细胞周期和增殖能力均无明显影响.     

乙酰肝素酶的外源性表达对大肠癌HT29细胞侵袭性的影响

背景与目的:乙酰肝素酶(heparanase,Hpa)基因表达与恶性肿瘤及肿瘤细胞的侵袭、转移和血管生成能力密切相关。本研究旨在通过增强肿瘤细胞中外源性Hpa基因的表达,探讨该基因对大肠癌细胞HT29转移侵袭能力的影响。方法:Hpa全长基因真核表达载体转染HT29细胞,MTT法检测转化细胞增殖能力,Boyden小室体外侵袭实验比较转染前后细胞侵袭能力的变化,通过转化细胞裸鼠异种接种成瘤和实体瘤回盲部原位种植转移模型建立,观察Hpa基因外源性表达对HT29细胞侵袭性的影响。结果:转染Hpa基因细胞HT29-Hpa较未转染细胞HT29和转染空载细胞HT29-KZ生长速度明显加快;Boyden小室体外侵袭实验显示,HT29-Hpa细胞穿膜数(45.5±0.5)较HT29细胞(29.3±0.1)和HT29-KZ细胞(30.1±0.2)增多,差异具有显著性(P<0.01)。转染细胞裸鼠皮下瘤生长速度明显加快,同期内HT29-Hpa细胞形成的皮下瘤(12mm×9mm×10mm)较HT29细胞皮下瘤(6mm×8mm×6mm)大,HT29-Hpa细胞皮下瘤回盲部原位种植致肝转移率(71.43%)较HT29细胞肝转移率(14.29%)增高,两者间有显著性差异(P<0.01)。结论:Hpa基因外源性的表达能促进肿瘤细胞的生长、侵袭和转移。