肾移植患者术后巨细胞病毒感染的预防、诊断和治疗

目的探讨肾移植术后患者巨细胞病毒(CMV)感染的预防、诊断和治疗。方法采用回顾性分析的方法,分析复旦大学附属中山医院2002年10月~2004年9月进行的同种异体肾移植病例中发生巨细胞病毒感染的患者。结果78例发生了巨细胞病毒感染的患者经过一系列积极治疗措施后,大部分病例治愈,仅有18例死亡。结论肾移植患者术后应重视巨细胞病毒感染的综合防治。     

病毒载量检测在婴幼儿巨细胞病毒感染中的诊断价值

目的 评估全血及尿液巨细胞病毒(CMV)载量检测在婴幼儿巨细胞病毒感染及判断预后的价值.方法 在血清学检测CMV-IgM或者CMV-IgG滴度≥40阳性患儿中筛选PP65抗原阳性CMV活动性感染婴幼儿50例,用更昔洛韦抗病毒治疗,一个疗程前后检测全血及尿液CMV荧光定量及治疗后PP65抗原.结果 治疗前全血CMV荧光定...     

肾移植术后巨细胞病毒视网膜炎的诊断和治疗

目的：探讨肾移植患者巨细胞病毒（CMV）视网膜炎的诊断和治疗。方法；对肾移植术后合并巨细胞病毒视网膜炎2例进行调查，并复习文献。结果：肾移植患者应用单克隆抗T淋巴细胞抗体／抗胸腺依赖T淋巴细胞球蛋白（OKT3／ATG）者，或多次激素冲击治疗者，或硫唑嘌呤（AZA）导致粒细胞减少者，CMV视网膜炎发病机会增高；更昔洛韦对CMV视网膜炎的治疗有效，但要有足够的疗程。结论：早期发现，及时处理对CMV视网膜炎的治愈有重大意义。     

pp65和gB抗原检测在造血干细胞移植后人巨细胞病毒感染中的临床价值

目的通过对患者人巨细胞病毒(Human cytomegalovirus,HCMV)磷蛋白65(Phosphoprotein 65, pp65)和包膜糖蛋白B (Glycoprotein B,gB)的研究,评价其在造血干细胞移植(Hematopoietic stem cell transplantation,HSCT)后HCMV感染中的临床意义。方法回顾性分析2010年11月-2015年7月于浙江大学医学院附属第一医院行HSCT的17例血液病患者的临床资料,包括患者术后24个月内检测的HCMV pp65、gB抗原、免疫球蛋白M(Immunoglobulin M,IgM)和免疫球蛋白G(Immunoglobulin G,IgG)抗体。选取患者三个时间段的检测数据,采用SPSS17.0软件分析这些指标在HCMV感染中的关系。结果患者移植后24个月内HCMV pp65与gB抗原呈正相关(P=0.001),HCMV gB抗原与HCMV IgG抗体呈正相关(P=0.016)。HCMV pp65、gB抗原、HCMV IgM和IgG抗体阳性率分别为64.71%、39.22%、11.76%、100.00%,其中,pp65抗原阳性率高于gB,IgG抗体阳性率高于IgM,均有统计学意义(P<0.05)。B时间段HCMV gB抗原阳性率高于A时间段,具有统计学意义(P=0.013)。期间,16例患者先后感染HCMV,占94.12%。不同原发病类型HCMV pp65抗原阳性率差异有统计学意义(P=0.039),急性髓细胞白血病(Acute myeloid leukemia,AML)患者最高,为91.67%;骨髓增生异常综合症(Myelodysplastic syndrome,MDS)患者最低,为33.33%。HSCT后未发生急性移植物抗宿主病(acute graft-versus-host disease,aGVHD)的患者HCMV pp65抗原阳性率高于发生aGVHD的患者(P=0.042)。HCMV pp65抗原阳性率在不同性别、不同年龄、不同供者来源、预处理是否应用抗胸腺细胞球蛋白(Anti-thymocyte globulin,ATG)及有无发生慢性移植物抗宿主病(chronic graft-versus-host disease,cGVHD)之间差异均无统计学意义。HCMV gB抗原阳性率在上述临床特征之间差异均无统计学意义。结论 HSCT后定期监测HCMV抗原和抗体可有效地指导临床合理地抗HCMV治疗和使用免疫抑制剂。     

巨细胞病毒对胎儿新生儿的危害及其诊断方法

人巨细胞病毒是危害胎儿、新生儿的重要病原，通常在健康人群中隐性感染。妊娠期由于免疫功能改变，可促进原发感染的发生和潜在病毒激活，并引起流产、早产、胎儿宫内发育迟缓、婴儿智力发育迟缓、死胎、畸形等多种后果。新药的问世使治疗和预防成为可能。早期诊断并区别活动性感染与隐性感染，则要靠ＰＣＲ检测技术的不断完善。     

PP65抗原血症检测法在发热患儿巨细胞病毒感染中的诊断价值

目的探讨低基质磷酸化蛋白(PP65)抗原血症检测法(AA法)对发热患儿巨细胞病毒(CMV)感染的诊断价值。方法对128例发热患儿(发热时间7~14 d)采用间接免疫荧光染色法检测PP65抗原血症、酶联免疫吸附法(ELISA)检测抗CMV抗体(CMV-IgM)、尿光镜找包涵体等三种方法平行检测128例血标本和尿标本。结果PP65抗原血症、CMV-IgM、尿找巨细胞包涵体的阳性检出率分别为17.2%、8.6%、6.3%。PP65抗原血症与CMV-IgM及尿找巨细胞包涵体的阳性符合率分别为50%(11/22)、36%(8/22)。19例患儿随着病情好转,PP65抗原血症水平从阳性转为阴性,另3例临床痊愈时复查PP65仍为阳性,其中2例2周后复查PP65转为阴性,1例3周后复查转为阴性。结论PP65抗原血症检测法对CMV活动性感染具有早期诊断的意义,可以检测病情变化、指导早期干预治疗。     

TBLB在肾移植术后巨细胞病毒、肺孢子虫肺炎早期诊断中的意义

目的明确经纤维支气管镜肺活检（TBLB）在肾移植术后巨细胞病毒、肺孢子虫肺炎早期诊断中的意义。方法未行机械通气的患者可在密切监护下行TBLB，已行机械通气的患者可通过三通接口边通气边进行TBLB。结果6例经TBLB取活检组织后，再经免疫组织化学检查及六胺银染色后证实，4例为巨细胞病毒肺炎、2例为肺孢子虫肺炎。结论，TBLB在肾移植术后巨细胞病毒、肺孢子虫肺炎早期诊断中具有重要意义。     

流式细胞仪检测CMV-pp65抗原在婴儿巨细胞病毒感染诊断中的应用

巨细胞病毒感染是由人巨细胞病毒（CMV）引起的先天性或后天获得的感染，通常年龄越小，易感性越高，症状也越重，严重者可致畸致死。因此，建立一种早期、敏感的检测方法有助于及时进行抗病毒治疗。本研究通过流式细胞技术（FCM）检测血CMV-pp65抗原，并与尿CMV-DNA-PCR定量测定和血CMV-IgM测定结果进行比较，探讨3种方法对婴儿CMV感染的早期诊断价值。     

TBLB在肾移植术后巨细胞病毒、肺孢子虫肺炎早期诊断中的意义

目的 明确经纤维支气管镜肺活检(TBLB)在肾移植术后巨细胞病毒、肺孢子虫肺炎早期诊断巾的意义.方法 未行机械通气的患者可在密切监护下行TBLB,已行机械通气的患者可通过三通接口边通气边进行TBLB.结果 6例经TBLB取活检组织后,再经免疫组织化学检查及六胺银染色后证实,4例为巨细胞病毒肺炎、2例为肺孢子虫肺炎.结论 TBLB在肾移植术后巨细胞病毒、肺孢子虫肺炎早期诊断中具有重要意义.     

四项生化指标联合检测在糖尿病早期肾损伤诊断中的临床价值

目的探讨血清胱抑素C（CysC）,视黄醇结合蛋白（RBP）和尿液N-乙酰-B氨基葡萄糖苷酶（NAG）,β-半乳糖苷酶（GAL）联合检测,对糖尿病患者早期肾功能损伤的诊断价值。方法使用AU2700全自动生化分析仪用免疫比浊法测定血清CysC,RBP。速率法测定尿NAG,GAL。酶法测定血肌酐,NAG、GAL用肌酐比值法报告。结果100例糖尿病患者4项指标均值都明显高于正常对照组（P〈0．05）。以单项血清CysC、RBP异常为诊断标准,早期肾损伤检出率分别为60％、56％,而联合检测血清CysC、RBP和尿NAG、GAL,早期。肾损伤的检出率可达到85％,联合检查诊断率高于单项诊断率（X2=15．62～25．23,P〈0．01）。结论四项生化指标联合检测大大提高糖尿病早期肾功能损伤的诊断率。     

利尿剂在三聚氰胺及三聚氰酸致大鼠急性肾损伤中的治疗作用

目的 联合三聚氰胺与三聚氰酸灌胃造成大鼠急性肾损伤,观察利尿剂呋塞米的治疗作用.方法 将36只成年雄性SD大鼠随机平均分为3组,分别为A组（正常对照组）,灌胃2 ml蒸馏水,B组（模型组）,灌胃三聚氰胺（100 mg/kg）与三聚氰酸（100 mg/kg）,连续4 d,4 d后改为灌胃2ml蒸馏水,C组（治疗组）：前4 d与B组一样,4 d后为呋塞米（20 mg/kg）;第4天、第11天后各处死6只大鼠,观察大鼠肾脏病理,肾内结晶沉积评分情况、大鼠血和尿多项生化指标的变化.结果 在第4天时,B组和C组分别出现大鼠少尿[（3.39±1.02）ml、（3.20±0.86）ml]、高血肌酐[（153.54±27.08）μmol/L、（160.11±19.55）μmol/L]等急性肾损伤表现,并在肾内观察到三聚氰胺氰尿酸盐晶体.第11天与第4天时肾内结晶评分相比,B组减少了9.52%（P〉0.05）.C组减少了63.63%（P〈0.05）,第11天时,B组尿量[（8.57±1.66）m1]和C组尿量[（25.96±5.97）ml]分别较第4天时尿量[（3.39±1.02）ml、（3.20±0.86）ml]显著增加（P〈0.05）,其中C组[（25.96±5.97）ml]较B组[（8.57±1.66）ml]增加更明显（P〈0.05）;B组和C组血清肌酐[（106.10±5.53）μmol/L、（67.17±12.80）μmol/L]分别较第4天时[（153.54±27.08）μmol/L、（160.11±19.55）μmol/L]显著减低（P〈0.05）,但B组高于A组和C组（P〈0.05）.结论 呋塞米对三聚氰胺与三聚氰酸所致急性肾损伤起一定保护作用.     

The cost-effectiveness of prophylaxis with valaciclovir in the management of cytomegalovirus after renal transplantation

Prophylaxis-based antiviral treatment and intensive monitoring followed by pre-emptive antiviral treatment are both commonly used management strategies to reduce risk of cytomegalovirus (CMV) infection following renal transplantation. This study employed a decision-model approach using published efficacy data and information from a recent survey of French clinical practice to consider the relative costs and outcomes associated with CMV prevention strategies for high-risk patient groups. The cost per case of treating tissue invasive and symptomatic CMV disease was estimated at €15,431 and €10,852, respectively. In the highest infection-risk patient group (positive donor with no previous CMV history) prophylactic oral valaciclovir was shown to avoid the greatest number of CMV disease cases (35 cases per 100 transplanted patients) and reduced the overall CMV-related costs per transplanted patient by around 14% over a wait-and-treat baseline strategy. In contrast, intensive monitoring and pre-emptive treatment resulted in a much higher cost per transplanted patient. This analysis suggests that prophylactic treatment remains the most cost-effective approach to the management of CMV in renal-transplanted patients. Further comparative studies between prophylactic and pre-emptive treatment would be a valuable addition to the current evidence based on CMV prevention.     

难治性肾病肾小管功能损害及缬沙坦干预研究

目的探讨肾小管功能损害在难治性肾病（RNS）中的意义及缬沙坦干预治疗对其影响。方法RNS患者阳例及正常对照68例，79例RNS患者随机分为缬沙坦组和潘生丁组，在常规治疗的基础上，缬沙坦组加缬沙坦（80mg／d），潘生丁组加潘生丁（150mg／d）治疗12周。治疗前后采用ELISA法、生化方法及肾间质病理计量分析法分别检测全部患者肾小管功能（尿RBP、α1-MG、β2-MG、mAlb、NAG）和肾间质病理改变。结果所有RNS患者尿RBP、α1-MG、β2-MG、mAlb、NAG明显高于正常对照组（P〈0．01）。且与肾小管间质损害均呈正相关（r=0．436、0．626、0．499、0．668、0．657，P〈0．01）。干预结果显示缬沙坦组口服缬沙坦后尿系列蛋白均明显降低，而潘生丁组则无明显变化。结论RNS患者均有不同程度的肾间质损害及肾小管功能的损害，而肾小管功能损害与肾间质损害及肾小球损害程度呈正相关。及早对RNS进行ARB干预治疗可改善肾小管功能及延缓RNS的发展。     

巢蛋白在高胆固醇血症大鼠肾小管上皮细胞中的表达与意义

目的探讨巢蛋白在高胆固醇血症大鼠肾小管上皮细胞中的表达及其意义。方法用含4％胆固醇和1％胆酸钠的高脂饲料饲喂大鼠建立高脂模型,观察大鼠血脂、24h尿蛋白、血肌酐和肾小管问质病理改变,免疫组化法检测肾小管上皮细胞巢蛋白和α-平滑肌肌动蛋白表达。结果高脂大鼠血脂、尿蛋白和血肌酐升高,肾小管间质出现损伤和间质纤维化。随时间延长,肾小管上皮细胞逐渐出现巢蛋白和α-SMA表达。巢蛋白表达与总胆固醇、低密度脂蛋白、24h尿蛋白、血肌酐显正相关（r=0．963、0．830、0．944、0．706,P〈0．01）,与肾小管间质损伤指数呈正相关（r=0．974,P〈0．01）,与α-平滑肌肌动蛋白表达呈正相关（r=0．804,P〈0．01）。结论巢蛋白异常表达可能与高胆固醇血症肾间质纤维化和肾小管上皮细胞转分化密切相关。     

Effect of two injections of non-adjuvanted influenza A H1N1pdm2009 vaccine in renal transplant recipients: INSERM C09-32 TRANSFLUVAC trial

Background

Enhancing vaccine immunogenicity in kidney transplant recipients, particularly against influenza, is required since the immunosuppression used to prevent graft rejection limits vaccine immunogenicity. We therefore investigated the immunogenicity and safety of a double dose non-adjuvanted vaccination regimen against influenza H1N1pdm2009 in kidney transplant adult recipients.

Methods

A prospective single-arm study was conducted including 121 renal transplant recipients under triple immunosuppressive regimen. Patients received 2 injections (day 0, day 21) of an inactivated, non-adjuvanted H1N1pdm2009 vaccine. Immunogenicity (hemagglutination-inhibition [HI] antibodies and anti-hemagglutin [HA] specific T cells) was evaluated after one and two injections (day 21, day 42) and at 6 months (day 182).

Results

The seroprotection rate (HI antibody titer ≥ 1/40) was 19% at day 0 (n = 119), 53% at day 21 (n = 118), 60% at day 42 (n = 116) (p = 0.013; day 42 vs. day 21) and 56% at day 182 (n = 113). The seroconversion rate was 24% and 32%, the geometric mean fold rise was 3.7 and 4.6 after the first and second injections, respectively. T-cell immunity to the H1N1pdm2009 vaccine showed a two-fold increase from baseline, though not statistically significant, in H1N1pdm2009-HA-specific CD4+ and CD8+ T cells in 34% and 48% of cases, respectively. No rejection episodes related to vaccination were observed while the donor-specific antibodies and creatinine clearance remained unchanged throughout the study.

Conclusion

Administration of two doses of the non-adjuvanted influenza H1N1pdm2009 vaccine in renal transplant patients is safe and induces a significant seroprotection, not strong enough yet to meet European or US requirements for adults below 60 years, but comparable to seroprotection levels usually observed in the non immunosuppressed elderly population or conferred by a single dose of adjuvanted vaccine in solid organ transplant recipients. These results provide useful indications for future strategies required to improve immunogenicity of vaccines against influenza in transplanted patients.     

糖尿病患者外周血白细胞HCMV pp65基因表达状态研究

目的 建立检测人巨细胞病毒（HCMV）感染的聚合酶链反应／逆转录-聚合酶链反应（PCR／RT-PCR）方法，并探讨糖尿病与HCMV感染的关系。方法 在HCMV65kD低基质磷蛋白基因（pp65）内设计一对引物，建立PCR／RT-PCR法检测727例糖尿病患者及230名健康体检人员（对照组）外周血白细胞HCMVpp65DNA及其mRNA转录水平，同时应用间接免疫荧光法分析外周血白细胞HCMVPP65抗原。结果 糖尿病患者HCMVpp65DNA，mRNA及PP65抗原阳性率分别为36．04％，16．64％和10．04％，与对照组4．78％，2．17％及1．30％相比，差异均有显著性（P〈0．01）。发病年龄〈30岁患者组中HCMVpp65mRNA和PP65抗原阳性率明显高于其他年龄组（P〈0．05）。病程〈1年的糖尿病患者HCMVpp65mRNA和PP65抗原阳性检出率最高，分别为27．54％与15．94％；而HCMVpp65DNA则相反，其最高检出率分别是年龄≥60岁（42．19％）或病程≥15年患者（44．68％）。结论 糖尿病患者易发生活动性HCMV感染，外周血白细胞pp65DNA，mRNA及PP65抗原检测是临床快速诊断HCMV感染的有效手段，联合使用能更有效地提高诊断水平。     

桩蛋白在TGFβ1诱导入肾小管上皮-间充质转分化中的表达及意义

目的探讨不同浓度重组人转化生长因子β1（rhTGFβ1）诱导人近端肾小管上皮细胞（HKCs cells）发生小管上皮-间充质转分化（TEMT）过程中桩蛋白（Pax）的表达及金雀异黄素（Gen）干预来探讨Pax在此过程中的意义。方法将体外培养HKCs细胞随机分为3组：⑴对照（C）组：无血清培养基（FSM）培养;⑵TGFβ1培养（T）组：分别用含不同浓度的TGFβ1（T5组：5ng/ml,T10组：10ng/ml）的FSM培养;⑶T＋G组：TGFβ110ng/ml＋Gen50μmol/L共同培养。48h后用半定量逆转录多聚酶链式反应（RT-PCR）或免疫组化方法检测HKCs细胞E-cadherin、alpha-smooth muscle（α-SMA）和Pax的mRNA或蛋白表达;Western blot分析Pax蛋白表达变化。结果⑴C组：E-cadherin大量表达,αSMA表达阴性,Pax有基础的表达;⑵T组：E-cadherin表达减少,αSMA及Pax表达增加较C组差异均有统计学意义（P〈0.01）,且T10组较T5组差异有统计学意义（P〈0.01）。⑶T＋G组：E-cadherin表达减少及αSMA和Pax表达增加较T10组差异均有统计学意义（P〈0.01）,较C组差异有统计学意义（P〈0.01）。结论TGFβ1启动并介导HKCs细胞发生TEMT过程中能呈剂量依赖性诱导Pax表达增加;Pax参与TGFβ1诱导的TEMT部分是通过酪氨酸激酶（PTK）途径进行信号转导。