广州地区汉族人群HNA-1基因频率分布的研究

目的了解广州地区汉族人群HNA-1基因的多态性及频率分布情况。方法采用序列特异性引物-聚合酶链反应(PCR-SSP)对150名广州地区汉族健康献血者作HNA-1基因分型,计算HNA-1等位基因频率并进行Hardy-Weinberg平衡检验;将结果与国内外部分数据比较。结果广州地区汉族人群HNA-1a、1b等位基因频率分别为0.713、0.287,未发现HNA-1c等位基因;人群基因型以HNA-1aa(50%)纯合子和HNA-1ab(43%)杂合子为主要表达形式;广州地区汉族人群HNA-1基因频率与浙江汉族、西藏藏族、大连汉族、西北回族、日本、韩国、德国、西班牙人群比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论得出了广州地区汉族人群HNA-1的基因频率的分布情况,为临床上相关疾病的诊治和预测提供一定的实验数据基础。     

广州地区汉族人群血小板抗原基因多态性及频率分布

目的 探讨广州地区汉族人群人类血小板抗原(HPA)-7Hita及HPA-12,-18,-19,-20,-21等位基因多态性及其频率分布情况.方法 选取2010年9月至2011年9月于广州血液中心参与志愿无偿献血,且符合《献血者健康要求(GB18467-2001)》的广州地区汉族献血者中,采用系统随机抽样方法随机选择95例献血者作为研究对象.采集并留取献血者血液标本;分别采用序列特异性引物-聚合酶链反应(PCR-SSP)及序列特异性引物-多重聚合酶链反应(multi-PCR-SSP)对研究对象血液标本进行HPA-7Hita及HPA-12,-18,-19,-20,-21等位基因分型检测,并对广州地区汉族人群HPA-7Hita及HPA-12bw、-18bw、-19bw、-20bw、-21bw等位基因频率与不同国家、地区人群进行比较.结果 ①95例广州汉族志愿无偿献血者均为HPA-7a、-12a、-18a、-19a、-20a、-21a,等位基因频率均为100％,均未发现HPA-7Hita及HPA-12bw、-18bw、-19bw、-20bw、-21bw等位基因;②进一步分析调查结果显示,广州地区汉族人群中HPA-7Hita等位基因频率低于日本人群,且差异有统计学意义(P＜0.05),HPA-12bw等位基因频率亦低于德国人群,且差异有统计学意义(P＜0.05);HPA-18bw、-19bw、-20bw、-21bw等位基因频率则分别与法国、巴西、中国、日本的报道相符.结论 本研究初步获得广州地区汉族人群HPA-7Hita及HPA-12,-18,-19,-20,-21等位基因频率分布情况,为临床相关疾病的诊治及预测提供一定实验数据基础及检测方法.     

南京地区汉族人群中人类血小板抗原基因多态性及分析

人类血小板抗原(Ｈｕｍａｎｐｌａｔｅｌｅｔａｎｔｉｇｅｎ,ＨＰＡ)分型对临床上一些因血小板同种免疫反应导致的同种免疫性疾病,如新生儿同种免疫性血小板减少性紫癜(ＮＡＩＴＰ),输血后紫癜(ＰＴＰ)及血小板输注无效(ＰＴＲ)等的诊断和治疗有重要意义[13]。长时期来,人们一直沿用传统的血清学方法进行ＨＰＡ分型,但由于难以获得高质量、特异性抗血清等多种因素的制约,ＨＰＡ分型工作始终无法深入下去。随着对ＨＰＡ基因研究的深入,近年来国外陆续报道将基因检测技术用于血小板分型研究中。本文应用聚合酶链序列特异性引物(ＰＣＲＳＳＰ)…     

中国汉族人群人类血小板抗原HPA-15(Gov)多态性调查

目的研究中国汉族人群人类血小板抗原HPA15(Gov)系统多态性,评估其在血小板配型输注中的作用。方法采用PCRSSP技术对1000名来自不同省份汉族无关献血者进行HPA15系统基因分型。结果HPA15在所调查的7个省份汉族人群中的分布差异无显著性意义,在1000名汉族中HPA15a和15b基因频率分别为0.5320和0.4680,与HardyWeinberg平衡吻合;与其它种族的HPA15分布相比较,也无显著性差异。在随机输血中HPA15a和15b抗原不配合的机会分别为0.1711和0.2029。结论本调查数据表明,随机输血中供受者HPA15抗原不配合比例在中国汉族人群中高达37%,这对研究同种免疫血小板减少症和开展血小板同型输注具有指导意义。     

Human platelet antigen allele frequencies and new mutations on platelet glycoprotein genes in the Chinese Han population

Background and Objectives: The frequencies of human platelet antigens (HPAs) vary between different populations. In this study, we determined the HPA allele frequencies in the Chinese Han population and identified situation of incompatibility possibly leading to alloimmunisation. Methods: A total of 750 volunteer blood donors of the Chinese Han population were genotyped for HPA‐1 to ‐17w systems. HPA genotyping was determined by polymerase chain reaction sequence‐based typing. Results: Among the 17 HPA systems, the allele frequency is different from other populations. We noted the absence of HPA‐7bw to HPA‐14bw, HPA‐16bw and HPA‐17bw alleles in the population. The estimated incompatibility probabilities regarding platelet antigens 1 to 6w and 15 systems after transfusion of random donor platelet were from 0·004 to 0·373. Thirteen glycoprotein alleles were observed in the population. In addition, we identified 16 novel mutations on the glycoprotein genes separated from HPA polymorphisms, including GP1BA (517‐525delAAC), ITGA2B (2722C>T and IVS26+85T>C), ITGA2 (1521C>T, 2474T>G and IVS20+10 G>C), ITGB3 (1476G>A, IVS10+19C>A, 1813G>A, IVS11+21G>A, IVS11+152A>G and IVS11‐104T>C), GP1BB (IVS1‐79G>A, IVS1‐27C>T and 129G>A) and CD109 (2139A>G). Five of them could lead to amino acid deletion, substitution or premature stop codon in corresponding glycoprotein. Conclusions: There was a high degree of polymorphism of the membrane glycoprotein genes related to human platelet alloantigen‐1 to ‐17w systems in the Chinese Han population. These data could have some impact on the diagnosis, prevention and treatment of alloimmune thrombocytopenia.     

SSP法和测序法对广州汉族人群HPA-6多态性调查

目的:调查广州汉族人群HPA-6多态性.方法:采用SSP法和测序法对200例广州汉族无偿血小板献血员进行HPA-6基因分型.结果:HPA-6a和-6b的基因频率分别为0.977 5和0.022 5,符合Hardy-Weinberg平衡.与中国其他地区人群及亚洲其他地区人群比较差异无显著性,但和其他洲人群分布存在统计学差异:在随机输血中HPA-6抗原不配合的机会为0.043 0.结论:获得广州汉族人群HPA-6频率数据.对建立本地血小板供者库和开展血小板同型输注具有指导意义.     

60名上海汉族人群ABO血型系统基因型研究

目的：建立ABO血型系统基因分型方法，研究上海汉族人群ABO血型的基因型分布，并对A等位基因进行较为深入的研究。方法：采用多重聚合酶链反应（PCR）和限制性片段长度多态性（RFLP）方法，单管扩增ABO基因第6和第7外显子，然后用KpnⅠ和MspⅠ两种限制性内切酶同时消化多重PCR产物。结果：在中国汉族符合Hardy-Weinber平衡的随机群体（60人）中，检出A102，A101，B、O1四种等位基因，其基因频率分别为20．8％、2．5％，24．2％，52．5％。基因型频率为BB10．0％、O1O1 21．7％、A102A102 1．7％、A101A102 1．7％、A102O1 33．％、A101O1 3．3％、BO1 25．0％、A102B 3．3％，未检测到O2基因。3名血清学疑为A2亚型的个体中有1名经PCR－序列特异性引物（SSP）法证实存在A467（C→T）及1060位单个碱基C缺失的移码突变。结论：上海汉族人群A型以A102占优势。     

中国人群ABO血型系统基因分型研究与应用

背景ABO血型是输血医学中最重要的血型系统,血型血清学定型技术具有简单实用的特点已广泛应用于ABO血型中的鉴定中,但是血清学试验存在局限性,而基因技术在某种程度上克服了血清学试验的缺点.目的研究中国人群ABO基因多态性,并将基因分型技术用于解决临床输注中血型血清学难题.设计随机选取样品,与常规血型血清学结果相比较,分析基因型结果.单位一所市级血液中心输血医学研究所.对象选择2002-03/2002-12在深圳市血液中心参加捐血的无血缘关系的中国汉族无偿献血者个体260人为研究对象,其中男110人,女150人,年龄18～50岁.1例血清学技术正反定型不符的标本来自本血液中心并调查其家系,6例血清学疑为A2型的标本来自第二人民医院等4个本市医院输血科.方法快速盐析法提取外周血中的DNA,采用聚合酶链反应-序列特异性引物基因方法对ABO血型定型,并且在吸收放散试验、唾液血型物质凝集抑制等血清学试验基础上,用聚合酶链反应-序列特异性引物法扩增ABO血型的等位基因.主要观察指标260人份样品ABO血型系统的基因型及疑难血型样品的血清型与基因型.结果在中国汉族符合Hardy-Weinberg平衡的随机群体(260人)中,检出O1,B,A1O1(A467C)和A1O2/1O3(A467T)4种等位基因,其基因频率分别为0.582 7,0.184 6,0.009 6,0.223 1.在疑难血型鉴定中6份血清学定为A2的标本中,只有2例基因分型确定为A2O1O1,其余均为A1O2/A1O3O1型,在一家系疑难血型鉴定中,兄弟3人均为类孟买型,ABO基因分型分别为A1O2B,A1O2B,A1O2O1.结论ABO聚合酶链反应-序列特异性引物基因分型是一种方便、快速、可靠的技术,可以弥补血型血清学鉴定方法的不足.     

中国汉族人群HLA-DM多态性与强直性脊柱炎疾病关联分析

目的比较中国汉族人群强直性脊柱炎(AS)与健康对照HLA-DMA/HLA-DMB各SNP位点及等位基因多态性,分析可能的AS疾病易感位点及基因。方法选取110名AS患者和1 000名健康无关献血者,利用Taq-Man PCR技术对7个DMA和DMB SNPs(single nucleotide polymorphisms)位点进行了基因分型,运用SPSS软件及Arlequin3.1软件统计基因频率和单体型相关参数。结果 AS组DMA*01∶02基因频率(19.55%)显著低于对照组(28.05%),AS组DMA*01∶02-DMB*01∶01单体型频率(17.51%)也显著低于对照组(26.87%);AS组与对照组DMA p496和DMB p590 SNP位点多态性、DMA*01∶02等位基因以及DMA*01∶02-DMB*01∶01单体型分布差异有统计学意义(P0.05)。结论 DMA*01∶02等位基因和DMA*01∶02-DMB*01∶01单体型可能对于AS疾病具有保护性作用,未来有必要在其他人群中进一步确认并研究其基因功能。     

上海地区中国人群中ABO亚型的研究

目的研究中国人群中各种ABO亚型分布的特点,以及在A、B亚型中不规则ABO抗体的发生率。方法用常规方法对本中心2003~2004年的献血者血样共440617份进行筛选,对于正反定型不符的血样进一步作血清学以及分子生物学分析,并分类。另外,使用抗-H和抗-A1,筛选A2、A2B亚型。结果最常见的亚型为A2和A2B,分别占人群总数的0.156%和0.443%。确认其它ABO亚型(不包括A2,A2B和类孟买)共66例,占人群总数的1.50/万(66/440617)。A、B亚型中分别检出不规则抗-A,抗-B(同时存在A抗原和抗-A或B抗原和抗-B)54例,分别占A亚型和B亚型总数的91%和56%。通过本研究发现“A亚型B”的检出率明显高于期望值(4.08~9.97倍),而这一现象在“AB亚型”中表现不明显(0.865~1.65倍)。结论除A2,A2B之外,中国人群中B亚型明显多于A亚型,而A亚型产生抗-A的比例明显多于B亚型产生抗-B的比例;ABO亚型中普遍存在的不规则抗体现象提示正确鉴定ABO亚型的重要性;各种AB亚型的检出率明显高于期望值,显示了A,B亚型基因之间存在相互作用。     

中国汉族人群Diego血型基因频率调查研究

目的调查研究中国汉族人群的Diego血型基因频率分布。方法用血型血清学方法对1577例非相关的献血者进行Diego血型的筛选鉴定,并对部分标本进行基因分型和基因测序。结果1577例标本Diego血型血清学鉴定结果,Dia+b-1例,Dia+b+47例,Dia-b+1529例。结论汉族人群DI1基因频率为0.0155,DI2基因频率为0.9845。     

The frequency and specificity of human neutrophil antigen antibodies in a blood donor population

BACKGROUND: Transfusion‐related acute lung injury (TRALI) has been associated with both human leukocyte antigen (HLA) and human neutrophil antigen (HNA) antibodies. HNA antibody frequency, specificity, and demographic associations have not been well defined in the blood donor population. STUDY DESIGN AND METHODS: A subset of 1171 donors (388 nontransfused males, 390 HLA antibody–negative females with three or more pregnancies, and 393 HLA antibody–positive females with three or more pregnancies) from a larger Leukocyte Antibody Prevalence Study was tested for immunoglobulin (Ig)G and IgM HNA antibody using a granulocyte immunofluorescence flow cytometry assay. Additional testing on selected samples included monoclonal antibody immobilization of granulocyte antigen–flow cytometry and granulocyte genotyping. RESULTS: Eight samples were HNA antibody positive (prevalence, 0.7%; 95% confidence interval [CI], 0.3%‐1.3%]). Three HNA antibodies (one IgG and two IgM) were found in nontransfused males (prevalence, 0.8%; 95% CI, 0.2%‐2.2%); all were panreactive or nonspecific. One HLA antibody–negative previously pregnant female had an IgG HNA antibody with HNA‐1a specificity (prevalence, 0.3%; 95% CI, 0.01%‐1.4%). Four HLA antibody–positive previously pregnant females demonstrated HNA antibodies, three IgG and one IgM (prevalence, 1%; 95% CI, 0.3%‐2.6%). Two of these were HNA‐1a specific, one HNA‐4a specific, and one nonspecific. CONCLUSIONS: HNA antibodies occur with low frequency in the donor population and are present in both male and female donors. Despite the implementation of TRALI reduction strategies, HNA antibodies are still present in donor blood products. Although our data do not create a case for urgent implementation of donor HNA antibody testing, future new developments for high‐throughput HNA antibody screening, including for HNA‐3a, may warrant reconsideration.     

中国汉族人群人类白细胞抗原新等位基因A*k1155的确认

背景:在国内发现的新等位基因中,大部分都是先采用人类白细胞抗原分型低分辨方法进行分型,如发现反应格局异常后,再进一步用基因测序或基因克隆方法进行确认,这样有可能导致一些新等位基因末被发现.基因测序分型方法被认为是人类白细胞抗原分型的金标准,它可得出精确的核苷酸序列.目的:直接采用基因测序分型方法对中华骨髓库标本进行检测,识别和确认中国汉族人群中新发现的等位基因.方法:应用中国造血干细胞捐献者测序结果可疑为新等位基凼的重采血样5 mL,采用基因测序分型技术,发现一样本HLA-A位点的杂合结果HLA-A*030101/A*110101在外显子上有1个位置与数据库不符,为了区别哪一个为新等位基因,采用基因克隆(TOPOTA Cloning)技术对两个等位基因1-8外显子进行DNA双向测序,发现1个与HLA-A*110101序列相近的新等位基因,分析两者核苷酸序列的差异.并将测序结果与已知人类白细胞抗原等位基因序列比较分析.结果与结论:通过克隆分离杂合等位基因,再进行测序确认发现新的序列与A*110101相比,在第2外显子第330碱基位置上C→G,密码子86AAC→AAG,发生了氨基酸的改变,由天冬酰氨变为赖氨酸.提示该等位基因为新的HLA-A等位基因,2009-10-31被世界卫生组织人类白细胞抗原因子命名委员会正式命名为HLA-A*1155.     

中国汉族人群通用血浆制备方法研究

目的探讨我国人群通用血浆制备的最佳配比方案。方法用试管凝集法确定A、B、AB型血浆两两之间的最佳比例，然后计算出三种血型的搭配比例，以血浆比例、时间、温度3个因素进行正交设计。观察3个因素对混合血浆抗体效价的影响。结果三种血型血浆两两之间的最佳比例分别是A：B=3：1、B：AB=1：3、A：AB=1：2；正交试验结果表明将A：B的比例定位于3：1附近，再按照B：AB=1：3、A：AB=1：2去补偿，抗体效价可降到通用血浆的标准，且时间、温度对血浆抗体效价无影响。结论实验结果表明，A、B、AB三种血型血浆按照接近中国人血型比例6：2．5：1混合，于22℃孵育1h可以得到抗血型抗体IgM效价符合标准的混合血浆。     

中国汉族人群P-选择素基因多态性的研究

目的研究P-选择素(P-selectin)C-2123G、T-1817C、G-1969A、Thr715Pro基因多态性在中国湖北地区健康汉族人群中的分布,比较种族间的基因型及等位基因频率分布差异。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)的分析方法,检测200名健康者P-selectin基因C-2123G、T-1817C、G-1969A、Thr715Pro的基因型并计算其基因型频率及等位基因频率。结果中国汉族人群P-selectin C-2123G位点基因型以GG型频率最高,CG型次之,CC型最少,这种基因多态性分布在男女间无显著性差异(P>0.05)。与德国和英国比较,该位点基因型分布及等位基因频率均存在显著差异(P均<0.001)。P-selectin G-1969A位点基因型以GG型频率最高,GA型次之,未检测到AA型,男女间无显著性差异(P>0.05)。与德国和英国比较,该位点基因型分布及等位基因频率均存在显著差异(P均<0.001)。P-selectin T-1817C位点基因型以TT型频率最高,TC型次之,CC型最少,男女间也无显著性差异(P>0.05)。与英国比较,该位点基因型分布及等位基因频率均存在显著差异(P<0.01)。本次实验中未检测到Thr715Pro基因多态性。结论中国湖北地区汉族人群存在P-selectin启动子区C-2123G、G-1969A、T-1817C基因多态性,这种多态性在同种族男女间无差异,在种族间存在着较大的差异。但不存在Thr715Pro基因多态性。