松辽平原达乌尔黄鼠鼠疫自然疫源地鼠疫茵基因分型

为了研究松辽平原达乌尔黄鼠鼠疫自然疫源地鼠疫耶尔森菌（以下简称鼠疫菌）的基因组成，采用PCR技术对分离自该疫源地88株鼠疫菌进行了基因分型，其中黑龙江4株、吉林43株、辽宁4株、内蒙37株，鼠疫菌DNA均由青海省地方病预防控制所鼠疫菌专业实验室提供。     

甘宁黄土高原阿拉善黄鼠鼠疫疫源地鼠疫菌的基因分型研究

目的 研究我国甘宁黄土高原阿拉善黄鼠鼠疫疫源地鼠疫菌的基因分型。方法 根据已经证实的22个DFR（差异区段）设计引物，每株鼠疫菌的每个DFR都采用PCR技术进行验证。结果 17株甘宁黄土高原疫源地鼠疫菌株共包括3个基因型，即7、11和13型。7、11和13型所占比例分别为5．9％（1／17）、5．9％（1／17）和88．2％（15／17）。结论 我国甘宁黄土高原阿拉善黄鼠鼠疫疫源地鼠疫菌的基因型主要为13型，而且13型是该疫源地鼠疫菌所特有的基因型。     

天山山地灰旱獭-长尾黄鼠鼠疫疫源地鼠疫菌基因分型研究

目的对天山山地灰旱獭．长尾黄鼠鼠疫疫源地鼠疫菌进行基因分型。方法根据已经证实的22个差异区段（DFR）设计引物，对每株鼠疫菌进行PCR扩增。结果61株天山疫源地鼠疫菌株共包括4个基因型，即1、2、3、4型。基因型1、2和3在北天山疫源地西部鼠疫菌株中都有分布，但尼勒克菌株的基因型全部为1型。南天山疫源地阿合奇和阿图什两个县菌株的基因型存在显著差别，阿合奇菌株基因型与北天山疫源地的菌株比较接近，而3株阿图什菌株的基因型均为4型，与帕米尔高原长尾旱獭鼠疫疫源地鼠疫菌株相同。结论基因分型结果与纪树立的生态分型基本一致。天山疫源地和帕米尔高原疫源地在阿图什县有交叉。     

应用抑制削减杂交技术进行鼠疫耶尔森菌的比较基因组研究

目的确定古典型鼠疫耶尔森菌的特有序列，为建立和完善该菌基因组分型系统提供可靠数据。方法通过抑制削减杂交技术发现差异片段并应用PCR验证。结果发现了5个在不同生物型鼠疫菌问存在差异的DNA片段，其中一个383bp的片段在来自天山山地灰旱獭、长尾黄鼠鼠疫自然疫源地的30株鼠疫菌全部阳性，而来自其它鼠疫自然疫源地的菌株全部阴性，5株假结核耶尔森菌中有2株(生物Ⅰ型和Ⅱ型)阳性。结论该383bp片段为天山山地灰旱獭、长尾黄鼠鼠疫自然疫源地的鼠疫菌所特有，此疫源地的菌株可能是我国较古老的鼠疫菌。     

44株中国田鼠型与24株非田鼠型鼠疫菌的DFR检测分析

目的比较我国两个田鼠鼠疫自然疫源地的44株田鼠型鼠疫菌的基因组组成，研究中国田鼠型鼠疫菌的遗传稳定性。方法根据已经证实的22个差异区段(I)FR)设计引物，每株鼠疫菌的每个DFR都采用PCR技术进行验证。结果22个DFR在两种田鼠型鼠疫菌的分布状态完全一致，即均同时缺失了DFR6、DFR11、DFR12、DFR13、DFR18、DFR19和DFR20，与来源于其他鼠疫自然疫源地非田鼠型鼠疫菌的基因组成有显著差别。结论锡林郭勒高原型鼠疫菌和青藏高原青海田鼠型鼠疫菌在基因组组成上高度一致，田鼠型鼠疫菌的基因缺失可能与其对人不致病有关。     

新疆山地鼠疫自然疫源地鼠疫耶尔森菌基因组分化和演变

目的比较来自我国新疆4大片山地鼠疫自然疫源地的144株鼠疫菌的基因组组成的差别,研究新疆山地鼠疫自然疫源地鼠疫菌的基因分型和进化规律。方法根据已经证实的22个差异区段(DFR)设计引物,每株鼠疫菌的每个DFR都采用PCR技术进行验证。结果新疆4大片山地鼠疫自然疫源地的144株鼠疫菌的基因型DFR图谱可归类为14种,分为7个主要基因组型和7个次要基因组型。西天山北坡灰旱獭-长尾黄鼠鼠疫疫源地存在3个主要基因组型和5个次要基因组型,西段以01型基因组型为主,占种群体的91.7%,02型占8.3%;中段以03型为主,占68.8%,01型占4.2%,02型占20.85%,另有02M1和02M3(02型的突变型)占2.1%,03M1型(03型的突变型)占2.1%;东段以02型为主,89.8%,01型、02M2、02M3和02M4型(02型的突变型)各占2.0%。南天山灰旱獭鼠疫疫源地存在2个主要基因型和1个次要基因型,以4型为主,占66.7%,02型占16.7%, 04M1型(04型的突变型)占16.7%。帕米尔高原-阿赖山红旱獭鼠疫疫源地仅存在04型1种基因型。昆仑山喜马拉雅旱獭鼠疫疫源地分为中昆仑和东昆仑鼠疫自然疫源地,中昆仑山存在2种鼠疫基因组型,以11型为主,占群体的90%,12型占10%;东昆仑山存在3种鼠疫基因组型,以05型为主,占66.7%,02型和11型分别占16.7%。结论新疆山地鼠疫自然疫源地鼠疫菌基因组的演化由3个演化路线组成。西天山北坡鼠疫自然疫源地的鼠疫菌基因组,自西向东在不同的生态地理环境和宿主媒介作用下发生适应性进化和演变,由较为古老的01型基因组逐渐演化为02和03型,最后南下至青海和东昆仑演变为05型,并且在这条演化路线上存在许多演变过程中发生的基因组地域交叉和次要基因组型;南天山和帕米尔高原-阿赖山鼠疫自然疫源地的鼠疫菌的04型基因组型是由01型直接演化而来,并在这一区域形成主要鼠疫基因组型;中昆仑山鼠疫自然疫源地的鼠疫菌基因组型可能是由西藏冈底斯山喜马拉雅旱獭鼠疫源地的鼠疫菌的10型基因组演化而来,形成以11型为主,12型为辅的鼠疫基因组构型特点。     

准噶尔盆地大沙鼠鼠疫自然疫源地鼠疫耶尔森菌质粒谱的研究

目的 了解和掌握准噶尔瓮地大沙鼠鼠疫自然疫源地鼠疫菌质粒谱类型.方法 提取新疆地区不同鼠疫自然疫源地及青藏高原喜玛拉雅旱獭鼠疫自然疫源地、昆仑山喜马拉雅旱獭鼠疫自然疫源地和内蒙古长爪沙鼠鼠疫自然疫源地的39株鼠疫菌质粒DNA,采用琼脂糖凝胶电泳法对其进行质粒谱图型分析.结果 在检测的26株准噶尔盆地大沙鼠鼠疫自然疫源地鼠疫菌中,有23株质粒谱为6×106、45×106、65×106,3株为6×106、45×106和72×106.结论 准噶尔盆地大沙鼠鼠疫自然疫源地鼠疫菌质粒谱分为两个类型:一为6×106、45×106、65×106质粒谱型,是该疫源地的主要质粒谱型,与邻近的北天山灰旱獭.长尾黄鼠鼠疫自然疫源地及内蒙占长爪沙鼠鼠疫自然疫源地、昆仑山喜马拉雅旱獭鼠疫自然疫源地和青藏高原喜马拉雅旱獭鼠疫自然疫源地的鼠疫菌主要质粒谱型一致;二为6×106、45×106和72×106质粒谱型,为少数型,在我国系首次发现.     

准噶尔盆地鼠疫耶尔森菌的基因组型分析

目的 对我国新发现的准噶尔盆地大沙鼠鼠疫自然疫源地的鼠疫菌株进行基因组差异性区段的比较分析,确定该鼠疫疫源地鼠疫菌株的基因组类型.方法 按常规方法提取鼠疫菌染色体DNA,依据已证实的鼠疫菌22个差异性区段(DFR)设计引物,采用PCR技术检测鼠疫菌基因组差异性基因片段的构成.结果 准噶尔盆地鼠疫菌株的差异性区段结构类型为缺失DFRO1、04、06、07、10、13和DFR15～18,不同于其他鼠疫疫源地鼠疫菌株的结构类型.为我国新的鼠疫菌基因组型.结论 准噶尔盆地大沙鼠鼠疫疫源地鼠疫菌株的基因组结构类型为我国新的基因组类型.     

西藏地区鼠疫菌生物学特性的分析

目的：通过对西藏地区29个县（市），不同宿主分离的116株鼠疫菌生化，毒力，毒力因子，质粒及外膜蛋白的分析，了解该疫源地内鼠疫病原体间的群落关系及遗传变异的规律性。方法：各项检查均按常规方法进行。结果：目前该地区仅有岗底斯山型和青藏高原型两种生态型菌株，二者分别占据一定的地理区域，以念青唐古拉山脉为天然屏障，从藏北地区分离的菌株为青藏高原型，藏南地区及其西南部所分离的菌株均为岗底斯山型。结论：西藏地区是以喜玛拉雅旱獭为主要宿主的鼠疫自然疫源地，就其鼠疫菌生物学特性分析表明，藏北高原疫源地可能是青藏高原喜玛拉雅旱獭疫源地的延伸，而藏南谷地可能是由于有天然屏障的存在，形成了自己特定的地理环境，从而表现为相对独立的一块鼠疫自然疫源地。     

我国鼠疫菌质粒种类及组成特征的研究

研究了分离自我国各疫源地的2006株鼠疫菌,共观察到13种质粒,分子量分别为(6、7、13、16、22、23、27、30、45、52、65、73、92)×10~6。不同鼠疫菌株的质粒组成有四种类型;含3种质粒的居多,含4种的次之,为数较少的含2种或5种质粒。由于大质粒分子量的差异以及一些菌株带有附加的质粒或质粒缺失,致使我国鼠疫菌在质粒组成上有16种组合形式,但多数菌株带有分子量为(6、45、65)×10~6的质粒(63.01％)。     

我国鼠疫菌毒力因子的比较与分析

目的 研究自不同生态型和不同鼠疫自然疫源地分离的鼠疫菌4种毒力因子的性状特征。方法 常璺方法检查鼠疫菌毒力因子性状并比较在不同疫源地之间、不同生态型之间的差异。结果 1326株鼠疫菌中仅1株缺失FI、6株缺失PstI,Pgm和WW阳性分别为92.99%、76.47%。结论 自我国不同疫源地、平淡同生态型和不同年代分离的野生型鼠疫菌绝大多数能产生FI和PstI,且不同生态型和不同疫源地分离的菌株这两种毒力因子无明显差别,性状稳定,VW^-和Pgm^-菌株与生态型及疫源地有一定的关系。经长期人工培养传代后。4种毒力因子相比,VW因子较易丧失,该毒力因子具有更不稳定特点。     

2007年清新县鼠疫监测情况分析

目的分析清远市鼠疫疫情、人群及媒介宿主动物监测情况，为制定鼠疫防治措施提供科学依据。方法在全市范围开展鼠疫疫情监测，在清新县设立人间和宿主动物间监测点。采集健康人血，捕捉活鼠进行血清学和病原学检验。对鼠密度和传播媒介鼠体蚤指数进行统计分析。结果2007年监测期间无鼠疫疫情和自毙鼠疫情报告；采集206份健康人血清进行鼠疫间接血球凝集试验（IHA-F1抗体）全部阴性；共捕获8种鼠形动物（活体和死体）381只，其中褐家鼠占70．52％，黄胸鼠占11．28％，板齿鼠占8．66％。黄毛鼠占3．41％，施氏屋顶鼠占3．15％：臭鼩鼱占1．57％，小家鼠占1．05％，青毛鼠占0．26％；家栖鼠占84．51％。野栖鼠占15．49％：雌雄鼠性别比例为1．31：1；总鼠密度为10．76％。家栖鼠密度为10．14％，野栖鼠密度为11．33％；家栖鼠鼠体蚤指数为0．21，野栖鼠鼠体蚤指数为0．16。鼠体蚤总指数为0．2，印鼠客蚤指数为0．15，游离蚤总指数为0；采集活鼠血清318份进行鼠疫IHA-F1抗体检测全部阴性；对病变鼠脏器172份压印培养鼠疫杆菌．结果全部阴性。结论清新县主要鼠种是褐家鼠。主要蚤种是印鼠客蚤，暂未发现鼠类和人群的鼠疫感染情况。但仍存在鼠疫疫源地生态环境所具有的条件．应扩大监测范围．加强鼠疫相关宿主动物和传播媒介的监测工作。     

松辽平原达乌尔黄鼠鼠疫自然疫源地鼠疫菌基因分型

为了研究松辽平原达乌尔黄鼠鼠疫自然疫源地鼠疫耶尔森菌(以下简称鼠疫菌)的基因组成,采用PCR技术对分离自该疫源地88株鼠疫菌进行了基因分型,其中黑龙江4株、吉林43株、辽宁4株、内蒙37株,鼠疫菌DNA均由青海省地方病预防控制所鼠疫菌专业实验室提供。引物设计和PCR扩增方法:在周冬生等鉴定的22个差异区段(DFR)中,有3个位于pMT1质粒中,19个位于染色体上。采用ArrayDesigner2.0软件针对每个DFR各设计1对引物,为了证实pMT1的存在,我们还特意针对pMT1质粒设计了1对引物,引物序列为5′AACACTA TCTCATTCCGCAGTAAAG3′。PCR…     

鼠疫耶尔森菌重组质粒pVAX1/Fl-V的构建及其免疫效果的研究

目的获得含有鼠疫F1和V抗原编码基因的重组真核表达质粒pVAX1／F1-V，并测定其诱导特异性免疫应答的能力。方法PCR扩增鼠疫菌Fl和V编码基因，分别与pGEM-T连接测序，构建pVAX1／F1-V融合重组质粒，转染Cos-7细胞，用Western blot方法鉴定目的蛋白的表达，重组质粒pVAXI／F1．V加GM．CSF佐剂免疫BALB／c小鼠，观察免疫效果，400个半数致死量（uk）强毒鼠疫菌皮下攻毒观察保护率。结果pVAX1／F1-V在Cos-7细胞中表达，免疫鼠体内产生特异性抗体，通过抗体亚型分析、细胞因子等指标的测定表明所构建DNA疫苗以诱发TH1型免疫为主，攻毒保护率达60％。结论成功构建F1-V融合蛋白真核表达载体，具有诱导特异性细胞免疫和体液免疫应答的能力，对强毒鼠疫菌皮下攻毒有一定的保护效力，为鼠疫菌新型疫苗研制奠定了基础。     

2009年泉州市鼠疫监测分析

目的了解泉州市鼠疫宿主动物的种群构成及数量分布情况,为鼠疫防治工作积累基础资料。方法采用夜笼法捕鼠,并对鼠类及捡获蚤类进行鉴定,计算鼠染蚤率和蚤指数;采用鼠疫RPHA和IHA法等检测鼠疫F1抗体。结果 2009年共捕获鼠形动物2134只,鼠种以褐家鼠和黄胸鼠为主,分别占51.15%和26.66%,两者差异有统计学意义（t=2.783,P=0.019）;总鼠密度5.71%,其中山区和沿海地区鼠密度分别为（4.84%±1.51%）、（6.58%±2.01%）,差异无统计学意义（t=1.197,P=0.297）;鼠体总蚤指数和染蚤率分别为1.16和31.52%;印鼠客蚤指数为1.06,游离蚤指数为0.008,这些指标在山区和沿海地区鼠差异均无统计学意义;鼠疫实验室检测用4种方法均未查出鼠疫F1抗体。结论褐家鼠仍是泉州市主要鼠种,主要蚤种是印鼠客蚤,未发现鼠间鼠疫流行迹象。     

滇西南山地农耕区蚤类物种多样性空间分布特征与鼠疫关系

为调查和分析云南西南部山地农耕区蚤类物种多样性空间分布格局、特征及其与人间鼠疫的关系,本文以云南西南部家鼠鼠疫疫源地中的耿马、临沧、陇川、龙陵、盈江、梁河、腾冲和云龙8县市为调查研究的空间范围,对各县市多个乡镇农耕区进行小型兽类及寄生蚤类的调查取样,所获蚤类数据进行群落组织水平的测定和统计学处理,就当地蚤类物种多样性空间分布格局与人间鼠疫之间的关系进行分析和探讨.结果 显示,(1)共捕获小型兽类2890只,隶属于7科19属35种;共采集宿主寄生蚤类2840只,隶属于6科16属27种.其中,印鼠客蚤(44.26％)和缓慢细蚤(20.39％)为数量上的优势种,偏远古蚤(8.56％)、长形病蚤(7.71％)和泸水栉眼蚤(6.76％)3蚤种数量相对较多,为当地的优势种,而其余的蚤种数量都相对较少;(2)蚤类水平分布和海拔分布的聚类分析结果显示均可聚为3类,它们整体反映了各调查样区或取样地点的地理位置、海拔高度和气候环境条件对农耕区蚤类群落和物种的组成、分布具有重要影响;(3)蚤类的Cody指数(β-多样性)沿海拔梯度的增加呈先逐步降低,后再升高的趋势,Sorenson指数随海拔增高呈先升高后降低的单峰分布格局,它们整体反映了滇西南山地农耕区蚤类群落和物种的组成与区系分布在2000～2500 m较高海拔的区域间发生了较大的变化;(4)蚤类的物种丰富度(γ-多样性)沿海拔梯度带变化规律总体呈现了随海拔升高呈先增高后降低的偏单峰分布格局,最大峰值出现在海拔1500～2000 m间,即在云南3类不同气候温层农耕区中,以中暖层气候农耕区蚤类物种丰富度最高;(5)蚤类的物种多样性指数(α-多样性)以腾冲市最高(1.9178),其他依次为梁河(1.6425)、云龙(1.6391)、陇川(1.5071)、龙陵(1.4948)、盈江(1.4778)、临沧(0.9402),而最低为耿马(0.2753);(6)蚤类的物种多样性、丰富度、均匀度、生态优势度和总蚤指数与人间鼠疫病例构成比之间的相关分析结果显示:物种多样性、均匀度与人间鼠疫均呈显著负相关,而生态优势度与人间鼠疫呈显著正相关;但总蚤指数与物种多样性、均匀度、生态优势度、物种丰富度和病例构成比均不相关.结果 表明,在蚤类物种多样性、均匀度高而生态优势度较低的区域,人间鼠疫发生率较低或未发生鼠疫,反之,人间鼠疫的发生率则较高;(7)优势种印鼠客蚤物种多度及其空间分布特征与人间鼠疫的发生与否和流行强度之间都具有重要关系.结果 表明滇西南家鼠鼠疫疫源地农耕区蚤类物种多样性和优势种印鼠客蚤物种多度的空间分布格局和特征与当地人间鼠疫的发生与否、流行强度都存在重要的关系.     

鼠疫耶尔森菌中国分离株菌体脂肪酸成分分析

目的 探讨利用脂肪酸组织对中国鼠疫耶尔森菌菌株进行分型的可能性,获得中国鼠疫耶尔森菌菌株脂肪酸组成的本底资料。方法 选择历年来从我国不同疫源地分离到的58株鼠疫耶尔森菌进行了菌体脂肪酸成分分析。并利用STATISTICA统计软件进行实验菌株的聚类分析。结果 中国鼠疫耶尔森菌菌株的主要脂肪酸分为16：0酸,环式17：0酸,3-羟基14：0酸和ω7c16:1酸以及十八碳单烯酸,与MIDI公司Sherlock系统的菌库中的数据存在一些差异。结论 实验菌株的脂肪酸成分极为接近,聚类图不能充分体现分离株在分离时间,地点以及生物型别上的差异。表明脂肪酸分析目前不适于鼠疫耶尔森菌的分型,根据实验结果,建立了中国鼠疫耶尔森菌菌株的脂肪权组成数据库。     

2007-2008年广州市鼠疫宿主动物及媒介监测结果分析

目的了解广州市鼠疫宿主动物及媒介的种群构成及数量分布情况,为鼠疫防治工作积累基础资料。方法采用夜笼法。对捕获鼠类及捡获蚤类进行鉴定,并计算鼠密度、鼠带（染）蚤率和蚤指数;用鼠疫IHA法检测鼠疫F1抗体。结果捕获鼠形动物1601只,分属2目2科4属7种。其中啮齿目动物1451只,食虫目动物150只,总鼠密度（捕获率）为12.09%,鼠密度（捕获率）为11.50%;在242只鼠形动物中发现染蚤鼠46只,捡获蚤92匹,鼠体表蚤经鉴定为印鼠客蚤、猫栉首蚤、缓慢细蚤、适存病蚤;鼠染蚤率为19.01%,总蚤指数为0.38;黄胸鼠蚤指数为0.63;未查出鼠疫F1抗体。结论褐家鼠仍是广州市主要鼠种。主要蚤种是印鼠客蚤。未发现鼠间鼠疫流行迹象。     

2008-2009年广州市鼠疫宿主动物及媒介监测结果分析

目的了解广州市鼠疫宿主动物及媒介的种群构成及数量分布情况,为鼠疫防治工作积累基础资料。方法采用夜笼法,对捕获鼠类及捡获蚤类进行鉴定,计算鼠密度;计算鼠带（染）蚤率和蚤指数;用鼠疫IHA法检测鼠疫F1抗体。结果捕获鼠形动物1890只,分属2目2科4属7种。其中啮齿目动物1 633只,食虫目动物157只,总鼠密度（捕获率）为11.97%,鼠密度（捕获率）为10.35%;在210只鼠形动物中发现染蚤鼠55只,捡获蚤126匹,鼠体表蚤经鉴定为印鼠客蚤、缓慢细蚤、适存病蚤;鼠染蚤率为26.19%,总蚤指数为0.60;黄胸鼠蚤指数为0.63;未查出鼠疫F1抗体。结论未发现鼠间鼠疫流行迹象,褐家鼠仍是广州市主要鼠种,主要蚤种是印鼠客蚤。     

广州市2009-2010年鼠疫宿主及其媒介监测结果分析

目的了解广州市鼠疫宿主动物及其媒介的种群构成及数量分布情况,为鼠疫防治工作积累基础资料。方法采用夜笼法捕鼠,对捕获鼠类及捡获蚤类进行鉴定,计算鼠密度;计算鼠带（染）蚤率和蚤指数;用鼠疫IHA法检测鼠疫F1抗体。结果捕获鼠形动物1308只,分属2目2科4属9种。其中啮齿目动物1212只,食虫目动物96只,总鼠密度（捕获率）为10.83%,鼠密度（捕获率）为10.03%;在143只鼠形动物中发现染蚤鼠46只,捡获蚤112匹,鼠体表蚤经鉴定均为印鼠客蚤;鼠染蚤率为32.17%,总蚤指数为0.78;黄胸鼠蚤指数为0.59;未查出鼠疫F1抗体。结论未发现鼠间鼠疫流行迹象;褐家鼠仍是广州市主要鼠种;主要蚤种是印鼠客蚤。