前列腺癌组织中miR-21的表达及临床意义

目的探讨miR-21在前列腺癌组织中的表达及临床意义。方法采用原位分子杂交技术检测90例前列腺癌组织及69例良性前列腺增生组织中miR-21的表达,并复习相关文献。结果 miR-21在90例前列腺癌及69例良性前列腺增生中的阳性率分别为71.1%、24.6%。miR-21在前列腺癌组织中的表达明显高于良性前列腺增生组织(P0.05)。miR-21表达与Gleason评分有关(P0.05),与其他临床病理学因素无关。结论 miR-21在前列腺癌组织中表达上调,提示miR-21可能在前列腺癌的发生、发展过程中发挥重要作用。     

前列腺癌组织中BMP-4的表达及临床意义

目的探讨骨形态发生蛋白-4(bone morphogenetic protein-4,BMP-4)在前列腺癌组织中的表达,分析其表达下调对前列腺癌细胞增殖和侵袭的影响。方法采用免疫组化En Vision法检测58例前列腺癌及40例前列腺良性增生(benign prostatic hyperplasia,BPH)组织中BMP-4蛋白的表达;利用Western blot法检测前列腺癌细胞(LNcap、PC-3、Du145)和BPH细胞中BMP-4蛋白的表达;将BMP-4 siRNA和对照siRNA分别转染LNcap,分为未处理组、对照siRNA组和BMP-4 siRNA组,采用Western blot法检测三组LNcap细胞中BMP-4、MMP-2和MMP-9的表达量;利用CCK8分别检测三组细胞的增殖能力;采用Tanswell小室实验检测三组细胞的侵袭能力。结果前列腺癌组织中BMP-4蛋白阳性率高于BPH组织(P 0. 05),BMP-4蛋白在前列腺癌细胞中的表达量高于BPH细胞。BMP-4 siRNA组细胞中BMP-4蛋白表达低于未处理组和对照siRNA组; BMP-4 siRNA组细胞增殖能力及细胞侵袭能力均低于未处理组和对照siRNA组。BMP-4 siRNA组细胞中MMP-2和MMP-9蛋白表达量低于未处理组和对照siRNA组。结论 BMP-4高表达于前列腺癌组织中,与前列腺癌细胞增殖和侵袭相关,有望成为前列腺癌潜在的治疗靶点。     

前列腺癌中Bad蛋白的表达及其意义

目的探讨Bad蛋白在前列腺癌中的表达及其临床意义。方法选择前列腺癌和癌旁良性前列腺增生(benign prostate hyperplasia, BPH)各48例及21例前列腺上皮内瘤(prostate intraepithelial neoplasms, PIN),采用免疫组化SP法观察Bad蛋白在前列腺上皮及间质细胞中的表达,采用化学发光法检测血清PSA值,分析Bad蛋白与前列腺癌、PSA值的相关性。结果 Bad蛋白在前列腺癌和PIN中的阳性率分别为83.3%、66.7%,高于癌旁BPH的33.3%,差异有统计学意义(P均0.01);Bad蛋白在前列腺癌和BPH间质细胞中的阳性率分别为52.1%和25.0%,差异有统计学意义(P0.05);Bad蛋白在Gleason评分≤7和7的前列腺癌中阳性率分别为66.7%和92.6%,差异有统计学意义(P0.05);血清PSA值与Bad蛋白表达无相关性(P均0.05)。结论前列腺癌组织中Bad蛋白高表达,并与Gleason评分有关,提示Bad蛋白在前列腺癌的发生、发展中发挥重要作用。     

前列腺特异性膜抗原在前列腺癌中的表达及临床意义

目的 研究前列腺特异性膜抗原(PSMA)在前列腺癌中的表达及其与Gleason分级之间的关系,同时探讨其在前列腺癌诊断中的价值.方法 采用免疫组化EnVision法检测PSMA在前列腺癌、前列腺上皮内瘤变(PIN)和良性前列腺增生症(BPH)中的表达.结果 PSMA在BPH、PIN和前列腺癌中均表达.在BPH中,PSMA阳性表达部位在前列腺腔缘或顶端/胞质表达,而在PIN中表达模式为胞质伴胞膜阳性,前列腺癌为顶端/胞质、胞质伴胞膜阳性或胞质表达阳性.PSMA在分化差前列腺癌中多为胞质表达,而在分化好的癌中为顶端/胞质和胞质伴胞膜表达.PSMA表达强度在PIN和前列腺癌中明显高于BPH(P＜0.05),同时PSMA染色强度与Gleason评分呈正相关(P＜0.05).结论 PSMA与Gleason分级密切相关,PSMA表达模式和染色强度的改变对PIN和前列腺癌诊断具有参考价值.     

前列腺癌中EZH2 mRNA及蛋白表达与细胞增殖的关系

目的 探讨EZH2 mRNA和蛋白在前列腺癌中的表达及其与肿瘤细胞增殖的关系.方法 通过组织芯片技术,应用原位杂交和免疫组化方法检测48例前列腺癌中EZH2 mRNA和蛋白的表达以及Ki-67增殖指数,同时检测15例良性前列腺增生组织(BPH)和12例高级别上皮内瘤变(HGPIN)中EZH2 mRNA和蛋白的表达.结果 前列腺癌组织中EZH2蛋白和mRNA阳性率分别为87.50%和81.25%,均高于BPH和HGPIN,差异有显著性(P<0.05).EZH2蛋白与mRNA表达之间差异无统计学意义(P>0.05).EZH2蛋白的表达与Gleason分级、TNM分期相关(P<0.05),与患者年龄和术前血清前列腺特异抗原(PSA)水平无关(P>0.05).EZH2 mRNA的表达与TNM分期相关(P<0.05),与患者年龄、术前PSA水平及Gleason分级无关(P>0.05).EZH2蛋白表达程度与Ki-67细胞增殖指数呈明显正相关(r=0.746,P<0.05).结论 EZH2 mRNA及其蛋白在前列腺癌中表达上调,通过促进肿瘤细胞增殖使得肿瘤发生、发展,有望成为预测前列腺癌恶性程度进程的参考指标.     

前列腺癌组织中Apaf-1和Caspase-9表达及临床意义

目的检测凋亡蛋白酶活化因子-1(Apaf-1)和细胞凋亡蛋白酶-9(Caspase-9)在前列腺癌(prostatic carcinoma,PCa)和良性前列腺增生(benign prostatic hyperplasia,BPH)中的表达,探讨Apaf-1、Caspase-9表达与PCa临床病理特征的关系。方法采用免疫组化SP法检测45例PCa和60例BPH组织中Apaf-1和Caspase-9蛋白的表达。结果 PCa组中Apaf-1和Caspase-9的阳性率明显低于BPH组,差异有统计学意义(P<0.05);Apaf-1和Caspase-9的表达与患者年龄及远处转移无关,与病理分级及临床分期相关(P<0.05)。结论 Apaf-1和Caspase-9在PCa组织中低表达,二者呈正相关(rs=0.645,P<0.01),Apaf-1和Caspase-9可能与PCa的发生、发展密切相关。     

前列腺癌组织中miRNAs的表达及意义

目的研究前列腺癌组织中6种miRNAs的表达及其意义,并探讨它们在前列腺癌诊断中的应用价值。方法采用核酸分子原位杂交(in situ hybridizationI,SH)技术,结合组织微阵列平台分别检测38例良性前列腺增生(benign prostate hyperpla-sia,BPH)和52例前列腺癌(prostatic cancer,PCa)中6种miRNAs的表达情况。结果 6种miRNAs在PCa中的表达率与BPH比较差异均有统计学意义(P<0.05)。6种miRNAs的表达均与PCa的Gleason评分相关(P<0.05);与患者的年龄及血清PSA水平均无明显相关性(P>0.05)。miR-15b、miR-182和miR-96的表达与PCa的临床分期相关(P<0.05);miR-96的表达与肿瘤累及前列腺叶数相关(P<0.05)。结论 miRNAs与PCa的发生、发展以及生物学行为有关,并可能作为PCa诊断及判断预后的生物标记物。     

EAF2表达与前列腺癌上皮-间质转化的关系及临床意义

目的探讨EAF2表达与前列腺癌上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)的关系及临床意义。方法采用免疫组化EnVision法检测82例前列腺癌及46例良性前列腺组织中EAF2和EMT标志蛋白的表达,分析蛋白表达与前列腺癌临床病理特征的相关性。结果 EAF2在前列腺癌组织中的阳性率(40.24%)明显低于良性前列腺组织(69.57%),差异有统计学意义(P0.05)。EAF2表达与前列腺癌临床分期、WHO/ISUP分组以及患者生存相关(P0.05)。EAF2与E-cadherin表达呈正相关(r=0.363,P=0.001),与vimentin(r=-0.255,P=0.021)和N-cadherin(r=-0.271,P=0.014)表达呈负相关。结论 EAF2表达与前列腺癌的EMT表型、患者预后及生存具有相关性。     

抗AGR2单克隆抗体的制备、鉴定及初步应用

目的:制备鼠抗AGR2单克隆抗体(mAb)并对其特性进行鉴定及其初步应用研究。方法:以AGR2-MBP融合蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备鼠抗AGR2的mAb,并用Protein-G亲和层析法纯化mAb。用间接ELISA法测定mAb的效价,以Western blot鉴定mAb的特异性。用免疫荧光、免疫沉淀和MTT法对mAb进行初步应用研究。结果:获得1株可持续、稳定分泌抗AGR2的mAb的杂交瘤细胞。杂交瘤细胞分泌的mAb的Ig亚类(型)为IgG1(κ),腹水mAb的效价达1×10-6。Western blot检测显示,在Mr为20000处有1条清晰的带。免疫荧光显示,该mAb可与乳腺癌细胞中的AGR2蛋白结合。免疫沉淀证实该mAb可与天然状态的AGR2有效结合。MTT实验显示该mAb对乳腺癌细胞MCF7的生长有抑制作用。结论:制备出的鼠抗AGR2的mAb效价高、特异性良好,可抑制细胞的生长,有一定的应用价值,为进一步研究AGR2的功能及其在乳腺癌、前列腺癌等癌症的诊断和治疗中的作用提供了工具。     

AGR2 associates with HER2 expression predicting poor outcome in subset of estrogen receptor negative breast cancer patients

Expression of the AGR2 oncogene was shown to be associated with estrogen receptor positive tumors. This gene contributes to enhanced cellular proliferation, drug resistance, metastasis development and may also serve as a predictor of poor prognosis. However, our analysis of AGR2 expression in a subset of estrogen-receptor negative tumors revealed that AGR2 could also be upregulated in hormone-independent manner. AGR2 expression was shown to be significantly increased in HER2 positive breast tumors on both the mRNA and the protein level. Moreover, in a subset of estrogen- and progesterone-receptor negative and simultaneously HER2-positive cases, increased AGR2 expression significantly correlated with worse patient prognosis. Subsequent analysis of independent data sets either collected in our institute or obtained from Oncomine cancer microarray database confirmed all these findings.     

AGR2对毒胡萝卜素作用下人肺癌NCI-H460细胞增殖及凋亡的影响

目的:观察anterior gradient 2(AGR2)基因在内质网应激诱导剂毒胡萝卜素作用下对人肺癌NCIH460细胞增殖能力及凋亡的影响。方法:通过慢病毒介导的shRNA建立AGR2基因沉默的稳定细胞系;采用集落形成实验检测AGR2在毒胡萝卜素作用下对细胞增殖能力的影响;流式细胞术分析在毒胡萝卜素作用下AGR2对细胞凋亡的影响。结果:成功构建AGR2基因沉默的稳定细胞系,Western blot结果显示AGR2的蛋白表达水平显著降低(P0.01);在未经药物处理条件下,AGR2基因缺失对NCI-H460细胞集落形成率及凋亡无显著影响;毒胡萝卜素作用24 h后,AGR2基因沉默的细胞集落形成率远低于对照组(P0.05);流式细胞术检测结果显示AGR2基因缺失提高了毒胡萝卜素诱导的细胞凋亡率(P0.05)。结论:AGR2基因缺失不影响正常条件下NCI-H460细胞的存活及凋亡能力,但可使毒胡萝卜素作用下细胞的增殖能力显著下降,细胞凋亡率显著提高。本研究揭示了AGR2在内质网应激状态下促进肺癌细胞增殖和减轻细胞凋亡的作用,为进一步探讨AGR2在肺癌发生发展及耐药性中的作用提供了理论依据。     

EZH2在维吾尔族妇女宫颈癌中的表达及临床意义

目的观察EZH2(Enhancer of Zeste Homolog 2)蛋白在维吾尔族妇女宫颈癌和对照组中的表达,探讨其与维吾尔族妇女宫颈癌临床病理因素之间的关系。方法应用免疫组化和Western blot法检测维吾尔族妇女正常宫颈或慢性宫颈炎和宫颈癌组织中EZH2蛋白的表达。结果用免疫组化检测出EZH2在维吾尔族正常宫颈和宫颈癌中的阳性率分别为28.89%和61.02%,Western blot法检测显示EZH2/GADPH在宫颈癌中为1.172 2,对照组为0.994 4,差异均具有统计学意义。宫颈癌组中EZH2与年龄、临床分期、病理分级均无关。结论 EZH2在维吾尔族妇女宫颈癌中过表达,在宫颈癌的发生、发展过程中起一定作用,其检测对宫颈癌的早期诊断有一定的参考价值。     

肾脏特异性钙黏蛋白在肾上皮性肿瘤的表达及其临床病理意义

目的探讨肾脏特异性钙黏蛋白（Ksp—cadherin）的新抗体在肾细胞癌和肾嗜酸细胞腺瘤中的表达意义。方法收集166例肾脏肿瘤标本,其中肾原发性透明细胞癌120例、乳头状肾细胞癌20例（I型乳头状肾细胞癌15例,Ⅱ型乳头状肾细胞癌5例）、嫌色细胞癌18例、嗜酸细胞腺瘤8例。使用Ksp—cadherin、CD10、波形蛋白、上皮细胞膜抗原（EMA）、CK7进行免疫组织化学（EnVision法）染色。结果Ksp-cadherin的表达率分别是透明细胞癌23％（27／120）,乳头状肾细胞癌20％（4／20）,嫌色细胞癌18／18,嗜酸细胞腺瘤6／8。CD10、波形蛋白在透明细胞癌和乳头状肾细胞癌有高表达,CK7主要表达于嫌色细胞癌和乳头状肾细胞癌,EMA在这4种肿瘤均有高表达。此外,CDl0在肾嫌色细胞癌中也有表达,但其表达于胞质,而在其他肿瘤的表达在细胞膜。Ksp—cadherin在肾透明细胞癌的表达程度与其分期分级呈正相关。结论Ksp—cadherin局限表达于远端肾小管及其起源的肾脏肿瘤。在嫌色细胞癌和嗜酸细胞腺瘤中有高度的特异和敏感性,在透明细胞癌中的表达和分期分级有关,在肾脏常见的上皮性肿瘤中具有鉴别诊断和预后价值。     

miR-143在胃癌中的表达及其临床病理意义

目的:分析miR-143在胃癌中的表达及其与临床病理特征的关系。方法:分别取胃癌手术标本32例及其癌旁组织,提取总RNA,采用茎环逆转录实时定量PCR方法检测miR-143在胃癌及其癌旁正常组织中的表达量,并分析其与临床病理特征关系。结果:与癌旁组织比较,miR-143在胃癌组织中表达显著下调(P0.05);miR-143的表达与细胞分化程度(P0.05)及淋巴结转移(P0.05)相关,与性别、年龄、血型、肿块位置、肿块大小、肿块侵润深度及肿瘤淋巴结转移分期无关。低分化胃癌组织的miR-143表达明显低于中高分化的标本(P0.05);有淋巴结转移胃癌组织的miR-143表达明显低于无淋巴结转移的胃癌组织(P0.05)。ROC曲线分析显示,miR-143评价胃癌细胞分化程度的特异性和敏感性可达75.0%和79.2%。结论:miR-143表达下调可能与胃癌的发生发展有关,miR-143可作为评价低分化胃癌的辅助指标。     

Trop-2在结直肠癌组织中的表达及其意义

目的 探讨人滋养层细胞表面抗原-2(Trop-2)在结直肠癌中的表达及其意义.方法 用免疫组化法检测84例结直肠癌组织标本及其相对应的癌旁正常组织中的Trop-2表达情况,分析其表达与临床病理特点的关系,进一步采用Westem blot检测34例手术标本的Trop-2表达情况.结果 Trop-2在结直肠癌组织中的表达高于癌旁正常组织(P ＜0.05);Trop-2表达量:直肠癌(RC)组＞左半结肠癌(LSCC)组＞右半结肠癌(RSCC)组(P＜0.05),Dukes'C+D组＞A+B组(P＜0.05),淋巴结转移组＞无淋巴结转移组(P＜0.05),远处转移组＞无远处转移组(P＜0.05);与性别、年龄、分化程度无关.结论 Trop-2在结直肠癌组织中高表达,与Dukes分期、淋巴结转移、远处转移和肿瘤所在部位有关.     

大肠腺癌中Sema4D和VEGFR2的表达及意义

目的探讨Sema4D和血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)在大肠腺癌组织中的表达及其临床意义。方法运用组织芯片和免疫组化SP法检测115例大肠腺癌组织、19例大肠腺瘤组织和12例正常大肠黏膜组织中Sema4D与VEGFR2的表达,并分析其与临床病理特征的关系。结果 Sema4D在正常大肠黏膜表达阳性率8.33%,在腺瘤和腺癌中阳性表达率为15.79%和39.13%,差异有统计学意义且与淋巴结转移、Dukes临床分期明显相关(P<0.05)。VEGFR2在正常大肠黏膜中阳性率16.67%,在腺瘤和腺癌中表达率为21.05%和51.3%,差异有统计学意义其表达与淋巴结转移、浸润程度、Dukes临床分期明显相关(P<0.05)。结论大肠腺癌中Sema4D与VEGFR2的表达可能在大肠腺癌的发生、发展中发挥重要作用。