射频消融对原发性肝癌患者外周血T细胞亚群及NK细胞变化的影响

目的探讨射频消融(RFA)对原发性肝癌患者外周血T细胞亚群及自然杀伤(NK)细胞的影响。方法回顾性分析接受RFA治疗的45例原发性肝癌患者的临床资料,同时随机抽选31例健康体检者为对照组,采用流式细胞仪检测RFA组治疗前后及对照组外周血T细胞亚群〔CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、细胞毒性淋巴细胞(CTL)〕及NK细胞水平的变化。结果 45例原发性肝癌患者全部完成RFA治疗,随访3¹0个月,30例(66.67%)无瘤生存,15例(33.33%)术后3个相继出现肝内新发病灶,患者肝区疼痛、腹胀、食欲、精神等自觉症状明显改善;治疗前RFA组CD3+、CD4+、CTL及NK细胞水平,CD4+/CD8+比值(61.5±12.5、32.9±10.9、10.2±6.5、1.4±0.6、4.6±2.1)均显著低于健康对照组,CD8+T细胞水平(27.6±6.3)高于对照组(P<0.05);治疗后1、2 w RFA组CD3+、CD4+、CTL、NK细胞水平,CD4+/CD8+比值(72.3±10.8、39.6±11.6、15.2±6.1、1.7±0.7、10.9±5.2,73.3±11.6、39.0±12.1、13.8±6.6、1.8±0.5、12.1±5.7)均明显高于治疗前,CD8+T细胞水平(22.5±6.1、22.0±5.8)明显低于治疗前(P<0.05);治疗1 w与治疗2 w比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 RFA治疗可以通过调节原发性肝癌患者的T细胞亚群水平,升高NK细胞而改善患者的免疫抑制状态。     

射频消融术对肝细胞肝癌患者特异性T淋巴细胞活性的影响

目的观察射频消融治疗对肝细胞肝癌患者特异性T淋巴细胞活性的影响。方法20例肝细胞肝癌患者随机分为两组:对照组(n=10)和射频组(n=10),所有患者均给予统一肝动脉插管化疗栓塞治疗(TACE),射频组加用射频消融术(RFA)。在治疗前、治疗后4w、8w分别采血样本。用APAAP法和LDH释放改良法分别检测外周血T细胞亚群及NK细胞活性。结果治疗前两组患者外周血T细胞亚群及NK细胞活性无显著差别(P>0.05);对照组治疗后4w外周血CD3、CD4、NK细胞活性略有升高,CD8略有下降,与治疗前相比无显著差别(P>0.05);射频组治疗后4w外周血CD3、CD4明显升高,CD8较前下降,CD4/CD8比值升高,与对照组相比,存在显著差异(P<0.05);与治疗前相比也存在差别(P<0.01),这种趋势一直持续到治疗后8w。结论RFA治疗后原发性肝癌患者显示明显T细胞刺激反应CD3、CD4,T细胞活性急剧增加。     

小肝癌患者外周免疫状态变化及手术、射频消融治疗的影响

目的观察小肝癌患者外周免疫状态的变化及手术切除、射频消融治疗的影响。方法采用流式细胞术检测健康人及小肝癌患者手术切除和射频消融前后外周血NK细胞、T淋巴细胞亚群的比例及其CD25、perforin分子。结果小肝癌患者手术切除和射频消融前NK细胞的比例低于健康人(P均<0.05),低杀伤功能的CD56brightNK细胞亚群的比例则高于健康人(P均<0.05);手术切除肿瘤后NK细胞比例上升(P<0.05),而射频消融后CD56brightNK细胞比例降低(P<0.01)。小肝癌患者手术切除前和射频消融前CD2+5辅助性T细胞(Th细胞)的比例高于健康人(P均<0.01),手术切除或射频消融后降低(P均<0.05),但仍高于健康人(P均<0.01);与健康人相比,小肝癌患者T细胞比例升高(P<0.05),而Th细胞及杀伤性T淋巴细胞(Tc细胞)的比例、perforin+NK细胞及perforin+T淋巴细胞的比例相近(P均>0.05),手术切除或射频消融治疗后没有明显改变(P均>0.05)。结论小肝癌患者外周免疫细胞亚群比例及功能分子表达水平发生改变,手术切除或射频消融后获得一定恢复。     

原发性肝癌患者射频消融治疗前后外周血T细胞亚群及NK细胞的变化

目的观察原发性肝癌患者射频消融（RFA）治疗前后T细胞亚群及NK细胞的变化。方法23例原发性肝癌患者接受RFA治疗;采用流式细胞仪检测患者和23例健康体检人群外周血CD3＋T细胞、CD4＋T细胞、CD4＋/CD8＋、CTL细胞及NK细胞水平。结果原发性肝癌患者CD3＋T细胞、CD4＋T细胞、CTL细胞、NK细胞的比例及CD4＋/CD8＋比值分别为61.9±13.8%、33.3±5.0%、10.3±4.9%、4.4±1.3%和1.4±0.6,均显著低于健康人群（75.7±12.3%、41.1±10.1%、19.7±5.8%、16.7±8.2%、1.7±0.6,P〈0.05）;CD8＋T细胞的比例为25.5±5.1%,高于健康人（21.7±6.7%,P〈0.05）;RFA治疗后1周和2周,CD3＋T细胞（72.1±9.8%、73.3±7.3%）、CD4＋T细胞（39.6±10.9%、39.0±10.0%）、CTL细胞（14.8±9.6%、12.3±7.4%）、NK细胞（11.1±4.9%、12.8±8.1%）均较治疗前上升,而CD8＋T 细胞（22.6±5.8%、22.0±9.6%）比例下降,CD4＋/CD8＋比值（1.7±0.8、1.9±0.4）上升,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论原发性肝癌患者大多处于免疫抑制状态,RFA治疗可调节其T细胞亚群的平衡,升高NK细胞水平。     

非霍奇金淋巴瘤患者化疗前后T淋巴细胞亚群变化及临床意义

目的探讨非霍奇金淋巴瘤(NHL)患者化疗前后外周血T淋巴细胞亚群及NK细胞的变化及临床意义。方法选取初诊病理确诊为NHL的患者60例作为NHL组,同期健康体检者60名为对照组,采用流式细胞术检测两组对象T细胞亚群及NK细胞的表达情况,比较对照组与NHL组不同病理类型患者化疗前后表达的差异。结果 NHL患者化疗前CD3+、CD4+、NK细胞百分比显著低于对照组(P0.05);CD8+、调节性T细胞(Treg细胞)百分比显著高于对照组(P0.05)。化疗后,NHL患者CD3+、CD4+、NK细胞百分比显著增高(P0.05);CD8+、调节性T细胞(Treg细胞)百分比显著降低(P0.05)。B-NHL组患者CD3+、CD4+、CD8+细胞百分比显著高于Treg组患者(P0.01);NK、Treg细胞百分比显著低于Treg组患者(P0.01)。化疗前,化疗有效和无效患者T淋巴细胞亚群及NK细胞表达情况比较差异无统计学意义(P0.05)。化疗后,化疗有效患者T淋巴细胞和NK细胞表达情况明显改善(P0.05),而化疗无效组患者无明显变化(P0.05);化疗有效患者CD3+、CD4+、Treg细胞百分比显著高于化疗无效患者(P0.05或0.01)。结论细胞免疫功能低下是非霍奇金淋巴瘤发病的一个重要因素,不同病理类型患者外周血T细胞亚群及NK细胞表达情况以及化疗效果不同,检测患者T细胞亚群及NK细胞表达情况有助于判断治疗效果和预测预后。     

50例肝癌患者外周血淋巴细胞亚群比例与肝功能损伤的关系

目的探讨肝癌患者外周血CD3~+T淋巴细胞、CD4~+T淋巴细胞、CD8~+T淋巴细胞、NK细胞亚群与肝功能损伤的关系。方法回顾性分析上海交通大学医学院附属仁济医院50例肝癌住院患者(原发性肝癌10例,继发性肝癌30例,合并其他肝脏疾病10例)外周血淋巴细胞亚群比例。以10例合并其他肝脏疾病患者作为疾病对照组,40名健康体检者作为健康对照组,结合患者的肝功能指标进行差异性和相关性分析。结果原发性肝癌患者淋巴细胞亚群比例与合并其他肝病组及健康对照组比较差异均无统计学意义。继发性肝癌患者CD4~+T淋巴细胞比例显著低于健康对照组[(29.18±2.11)%比(35.68±0.56)%,P0.05],NK细胞比例显著高于健康对照组[(21.45±1.69)%比(15.78±0.72)%,P0.01],其淋巴细胞亚群比例与合并其他肝病组比较差异均无统计学意义。原发性肝癌患者肝细胞损伤者CD4~+T淋巴细胞比例显著高于未损伤者[(45.90±5.96)%比(30.93±1.76)%,P0.05],CD4~+T淋巴细胞比例与ALT、AST均呈高度正相关(r=0.941、r=0.903,均P0.01),肝脏代谢功能受损者CD8~+T细胞比例显著低于正常者[(27.00±4.63)%比(34.01±7.98)%,P0.05],CD8~+T细胞比例与STB、PT均呈显著负相关(r=-0.596、r=-0.577,均P0.05)。继发性肝癌患者肝细胞损伤者CD4~+T细胞比例显著低于未损伤者[(23.22±3.28)%比(33.24±2.29)%,P0.05],CD8~+T细胞比例显著高于未损伤者[(34.70±4.26)%比(25.84±1.99)%,P0.05],CD4~+/CD8~+比值与ALT、AST均呈显著负相关(r=-0.470、r=-0.424,均P0.05),肝脏代谢功能受损者CD4~+T细胞比例显著高于正常者[(35.64±2.84)%比(25.56±2.57)%,P0.05],CD4~+/CD8~+比值与STB、PT均呈显著正相关(r=0.400、r=0.481,均P0.05)。结论肝癌患者外周血淋巴细胞亚群比例与肝功能损伤密切相关,机体免疫平衡状态的维持对于保护肝癌患者肝脏功能具有重要意义。     

原发性肝癌患者外周血中NK细胞亚群及杀伤功能的研究

目的对原发性肝癌患者外周血NK细胞数目、亚群及其杀伤功能进行检测,分析原发性肝癌外周血中NK细胞的特点及机制。方法临床确诊原发性肝癌(HCC)患者110例,健康对照69例,采用流式细胞仪检测外周血NK细胞的数目及亚群;将IL-2活化的PBMC与CFSE标记的K562细胞混合,流式细胞仪检测NK细胞的杀伤活性。结果 1)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期原发性肝癌患者外周血NK细胞占淋巴细胞的比率均显著低于健康对照(P均<0.01);2)与健康对照相比,Ⅰ、Ⅱ期原发性肝癌患者外周血CD56bright NK细胞占淋巴细胞的比率无显著变化(P>0.05),Ⅲ期原发性肝癌患者CD56bright NK细胞占淋巴细胞的比率显著升高(P<0.05);3)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期原发性肝癌患者外周血CD56dimNK细胞占淋巴细胞的比率显著低于健康对照(P均<0.01);4)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期原发性肝癌患者外周血NK细胞CD56bright/CD56dim NK cells值显著高于健康对照(P均<0.01);5)原发性肝癌患者外周血NK细胞裂解杀伤靶细胞K562细胞的活性与健康对照相比显著降低(P<0.05)。结论原发性肝癌患者外周血NK细胞数量显著降低,可...     

中晚期HCC患者T淋巴细胞亚群和红细胞免疫功能变化及介入治疗对其的影响

目的探讨中晚期原发性肝癌(HCC)患者介入治疗前后T淋巴细胞亚群和红细胞免疫功能变化特点。方法对40例原发性肝癌患者(观察组)及40名正常体检者(对照组)采用微量全血直接免疫荧光法检测T淋巴细胞亚群,采用受体黏附法检测红细胞免疫功能。结果观察组总T细胞(CD3+)、辅助/诱导T淋巴细胞(CD4+)、CD4+/CD8+和肿瘤红细胞花环(DTER)、红细胞C3b受体花环(RBC-C3bRR)显著低于对照组(P<0.05,P<0.01),红细胞免疫复合物花环(RBC-ICR)显著高于对照组(P<0.01)。TACE治疗后CD3+、CD4+、CD4+/CD8+及RBC-C3bRR均值较治疗前稍有降低,RBC-DTER治疗后较治疗前升高,但无统计学意义,RBC-ICR治疗后较治疗前明显升高(P<0.05)。结论中晚期原发性肝癌患者T淋巴细胞亚群及红细胞免疫功能低下,介入治疗后细胞免疫功能降低,提示对中晚期原发性肝癌患者介入治疗后应重视细胞免疫功能调节治疗。     

原发性肝癌和乙型肝炎肝硬化患者外周血淋巴细胞凋亡率、T细胞亚群和NK细胞的水平变化和临床意义

目的通过检测乙型肝炎肝硬化和合并乙型肝炎病毒感染的原发性肝细胞癌患者的外周血的粒细胞、单核细胞、NK细胞、T细胞及其亚群和淋巴细胞及其凋亡率,探讨两者在细胞免疫方面的差异.方法用Ficoll Hypaque离心法分离外周血单个核细胞(PBMNC),流式细胞仪检测外周血T细胞及其亚群、NK细胞和淋巴细胞、单核细胞和粒细胞,AnnexinV/FITCKit检测凋亡细胞.结果乙型肝炎肝硬化患者的外周血单核细胞、粒细胞、淋巴细胞、CD3-CD16 CD56 NK细胞、CD3 T细胞、CD3 CD4 T细胞、CD3 CD4 T细胞和CD4 CD8 T细胞比值,均与正常对照组无显著性差异(P＞0.05);但淋巴细胞凋亡率明显低于对照组(P＜0.01).原发性肝癌外周血CD3-CD16 CD56 NK细胞、单核细胞和CD4 /CD8 T细胞比值与肝硬化组和正常对照组比较,均无显著性差异(P＞0.05),而粒细胞明显升高(P＜0.05);CD3 T细胞、CD3 CD4 T细胞和CD3 CD8 T细胞均较另两组明显减少(P＜0.05),淋巴细胞及其凋亡率均明显低于另两组(P＜0.01).结论乙型肝炎肝硬化患者的外周血细胞免疫只发生不显著的变化,但淋巴细胞的凋亡率明显降低.原发性肝癌外周血的细胞免疫和淋巴细胞凋亡率均明显低下.     

肝癌患者应用微创介入治疗对T细胞免疫功能的影响研究

目的探究肝癌患者应用微创介入治疗对患者T细胞免疫功能的影响。方法回顾性分析2014年1月-2014年12月我院收治的122例肝癌患者的临床资料,根据所采用治疗方式的不同将其分为射频消融(RFA)组和手术组,各61例。对术后两组患者相关免疫指标表达情况进行比较分析。结果治疗2周后,RFA组CD3+、CD4+以及CD4+/CD8+和NK细胞数目均比治疗前明显升高(P0.05);治疗4周后,这些指标依然呈现升高趋势(P0.05);手术组在治疗2周后CD3+、CD4+以及CD4+/CD8+和NK细胞数与治疗前相比没有明显差别(P0.05),而治疗4周后上诉指标较治疗前明显升高(P0.05),但均较同期RFA组低(P0.05)。RFA组CD8+细胞数目与治疗后均较治疗前明显降低,但治疗4周后降低的更加明显,而手术组CD8+细胞数目确在治疗4周后开始明显降低,并且RFA组较同期手术组下降的更明显(P0.05)。RFA组在经过2周的治疗后,除RBC-ICR比医治前明显下降外,RBC-C3bRR、RBC-TRR均明显升高(P0.05);手术组医治4周后上述指标才开始明显改善(P0.05),但都较同期RFA组改善的差(P0.05)。RFA组在经过2周的治疗后血清中TNF-α、IL-2及IFN-γ的浓度均比医治前明显升高(P0.05),医治4周后这些指标依然升高(P0.05);手术组在医治4周后血清中TNF-α、IL-2及IFN-γ的浓度与医治前比较才有明显升高(P0.05),但均较同期RFA组低(P0.05)。结论同手术方法相比,肝癌患者采用RFA医治,可以明显改善其淋巴细胞及其细胞免疫功能,对Th1型细胞的分泌具有促进作用,有利于肝癌患者的治疗。