食管鳞癌中p16基因启动子区甲基化及其表达

 目的探讨食管鳞癌（ESCC）p16基因甲基化的状况及其表达与食管鳞癌临床病理特征之间的关系。方法采用甲基化特异性PCR方法（MSP）分别检测75例食管癌组织、癌旁组织和切缘组织p16基因启动子区域CpG岛甲基化状态。采用Envision免疫组化法检测食管癌组织及癌旁组织的p16蛋白的表达。结果75例标本中，食管癌组织、癌旁组织和切缘细织p16基因甲基化率分别为41．3％（31／75）、13．3％（10／75）和6．67％（5／75）。癌组织和癌旁组织P16蛋白的阳性表达率分别为29．3％（22／75）和56．7％0（17／30）。31例癌组织p16基因甲基化阳性标本中有2例（6．4％）检测到P16蛋白的表达，而44例癌组织p16基因甲基化阴性标本中有20例（45．5％）检测到P16蛋白的表达。食管癌组织p16基因甲基化率显著高于癌旁组织和切缘组织（P〈0.01），P16蛋白表达与p16基因甲基化呈负相关。p16基因启动子区甲基化与食管癌的组织学分级、肿瘤部位无明显相关，与临床分期、淋巴转移密切相关。结论p16基因甲基化在食管癌发生发展中起着重要作用，食管鳞癌的分期和淋巴结转移与p16基因甲基化之间有密切关系。     

食管鳞状细胞癌组织Bin1基因启动子甲基化状态及其临床意义

目的:探讨食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell cancer,ESCC)患者的食管鳞癌组织、癌旁组织中Bin1基因启动子甲基化状态及其mRNA的表达及其临床意义.方法:采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分别检测58例经病理证实的ESCC患者的食管鳞癌组织、癌旁组织中Bin1基因mRNA的表达情况;用甲基化特异性PCR(MSP)检测上述食管鳞癌组织中Bin1基因启动子甲基化状态,比较ESCC患者Bin1甲基化状态与临床病理分期的关系.结果:ESCC组织中Bin1基因启动子甲基化率明显高于癌旁组织(58.62％ vs 25.86％,x2=12.76,P＜0.01),Bin1甲基化状态与患者TNM分期、肿瘤侵润深度、分化程度、淋巴结转移相关(均P ＜0.05).ESCC组织中Bin1 mRNA的表达水平明显低于癌旁组织[(0.78 ±0.05) vs (1.03±0.03),t=9.643,P＜0.01)];发生Bin1甲基化的组织中Bin1 mRNA表达水平明显低于未发生甲基化的组织[(0.68±0.04) vs (0.85±0.07),t=2.476,P＜0.05].结论:Bin1基因启动子区甲基化状态可能与ESCC的发生密切相关,它是ESCC中Bin1 mRNA低表达或缺失的机制之一,且与ESCC进展和淋巴结转移有关.     

卵巢癌中 CDK10基因启动子甲基化检测的临床意义

目的：分析卵巢癌中受体 O 型蛋白酪氨酸磷酸酶（CDK10）基因启动子甲基化状态及临床意义。方法：应用甲基化特异性 PCR 检测 CDK10基因在50例卵巢癌组织和27例正常卵巢组织中的甲基化状态并结合临床病理资料进行分析。结果：在卵巢癌组织中 CDK10甲基化阳性率为60．0％（30／50）,正常卵巢组织未出现 CDK10甲基化;CDK10甲基化与肿瘤临床分期、病理分型与 Ki －67表达相关（P ＜0．05）。结论：CDK10基因甲基化可能是参与卵巢癌发展的重要分子事件。     

食管鳞癌患者血清RUNX3基因甲基化检测及临床意义

目的检测食管鳞癌患者血清中RUNX3基因启动子区域甲基化状态,探讨用于食管鳞癌早期诊断和预后评估的临床意义。方法留取70例食管鳞癌,20例食管良性病变及10例健康志愿者血清标本,甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）分析RUNX3基因启动子区域甲基化情况,并分析其与临床病理参数之间的相关性。结果70例食管鳞癌患者血清RUNX3基因启动子区域异常甲基化36例,检出率为51．4％,20例食管良性病变患者中有2例为不完全甲基化（10％）,而10例健康志愿者中检出率为0,差异有统计学意义（P〈0．001）;RUNX3基因启动子甲基化与患者临床分期和淋巴结转移相关。结论RUNX3基因启动子甲基化在食管鳞癌患者血清中有着较高的检出率,可望成为食管鳞癌早期诊断和预后评估的分子标志物。     

食管鳞癌组织中TSLC1基因启动子甲基化状态检测的临床意义

目的:探讨肺癌抑癌基因1（TSLC1）在食管鳞癌组织中基因启动子甲基化状态及其与临床病理参数的关系。方法:应用甲基化特异性PCR检测TSLC1基因启动子在98例食管鳞癌组织及相应癌旁组织中的甲基化状态并结合临床病理资料进行分析。结果:在食管鳞癌组织中TSLC1基因甲基化阳性率（55.1%,54/98）显著高于癌旁组织（4.1%,4/98）（P<0.01）。TSLC1甲基化与食管鳞癌临床分期和浸润深度显著相关（P=0.035和0.001）。结论:TSLC1基因甲基化可能是参与食管鳞癌发展的重要分子事件。     

胃癌组织及相关淋巴结中端粒酶逆转录酶基因启动子区域甲基化检测的临床意义

[目的]检测胃癌患者肿瘤组织及其相应的癌旁组织和淋巴结组织中端粒酶逆转录酶(hTERT)基因启动子区域甲基化状态,并探讨其甲基化状态的改变与临床病理特征的关系.[方法]运用甲基化特异性PCR(MSP)方法,检测52例手术切除胃癌组织、癌旁组织及相关淋巴结中hTERT基因启动子区域甲基化状念、以同一标本正常组织作为阴性对照.[结果]正常胃黏膜组织未检测出hTERT表达、胃癌组织及癌旁组织、转移淋巴结中均检测出hTERT表达.转移淋巴结、胃癌组织中hTERT基因的甲基化阳性率分别为81.6％(31/38)、71.1％(37/52),明显高于癌旁组织的29.5％(13/52)(P＜0.01).胃癌组织hTERT基因甲基化阳性率与胃癌的临床分期、组织分化程度、肿瘤大小有相关性(P＜0.05).癌旁组织hTERT基因甲基化阳性率和胃癌的临床分期、肿瘤大小、组织分化程度、淋巴结转移具有相关性(P＜0.05).转移淋巴结hTERT基因 甲基化阳性率则与临床及病理特征无关.[结论]胃癌组织及转移淋巴结中存在hTERT基因启动子区域的异常甲基化调控、可能参与了胃癌的发生与发展.     

肺鳞癌、腺癌中p14 ARF基因启动子区甲基化及蛋白表达的研究

背景与目的 p14^ARF基因是新近发现的抑癌基因，其异常表达与多种人类肿瘤发生有关，启动子区异常甲基化作为p14^ARF基因失活的重要形式可能参与了肿瘤的发生。本研究通过检测肺鳞癌、腺癌中p14^ARF启动子区甲基化状态和蛋白表达，探讨p14^ARF启动子区甲基化与肺癌的关系。方法 通过免疫组织化学（IHC）、甲基化特异性PCR（MSP）和相关限制性内切酶PCR（RF-PCR）方法，检测40例肺鳞癌、腺癌组织中p14^ARF启动子区甲基化状态和蛋白表达水平。结果 癌组织及癌旁正常组织中p14^ARF启动子区甲基化阳性率分别为17．5％（7／40）和2．5％（1／40）（P-0．025）。RE-PCR检测结果相同。癌组织及癌旁正常组织中p14^ARF蛋白阳性率分别为70．0％（28／40）和95．0％（38／40）（P-0．003）。p14^ARF基因启动子区甲基化和蛋白表达均与肿瘤分期、组织类型、分化程度、淋巴结转移等临床病理特征无明显关系（P＜0．05）。p14^ARF启动子区甲基化与蛋白表达呈负相关（r=-0．56，P=0．001）。结论 启动子区甲基化是p14^ARF基因失活的重要机制。p14^ARF启动子区异常甲基化可能参与了非小细胞肺癌的发生，是肺癌发生过程的早期事件。     

PTEN基因甲基化及其表达异常与胃癌的关系

目的：探讨PTEN基因表达、启动子区甲基化与胃癌及其临床病理特征的关系。方法：采用甲基化特异性PCR法（MSP）和逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）法，分析胃癌组织及相应癌旁正常组织中PTEN基因启动子区甲基化及其mRNA表达情况。结果：48．2％（27／56）的胃癌组织和3．6％（2／56）的癌旁胃组织PTEN基因启动子区发生甲基化．癌组织PTEN基因启动子区甲基化率显著增高（P〈0．05）：其中，2例甲基化癌旁胃组织均为胃癌组织中有甲基化的病例．发生淋巴结转移的29例胃癌组织中．19例PTEN基因启动子甲基化；发生淋巴结转移的PTEN基因启动子甲基化显著高于无淋巴结转移组（P〈0．05）。RT—PCR结果显示，所有甲基化的胃癌组织中PTEN mRNA均无表达，结论：胃癌中PTEN基因mRNA失表达与其启动子区甲基化有关，这可能是胃癌发生、发展以及转移的原因之一。     

ECRG4 基因甲基化在食管癌中的检测及临床意义

目的：探讨人食管癌相关基因4（ECRG4）在食管癌中基因启动子甲基化状态及临床意义。方法：应用甲基化特异性PCR检测ECRG4基因启动子在55例食管癌原发组织及癌旁组织中的甲基化状态并结合临床病理资料进行分析。结果：在食管癌组织中ECRG4甲基化阳性率（67．3％，37／55）显著高于癌旁对照组织（5．5％，3／55）（P〈0．01）。ECRG4甲基化与肿瘤病变长度与患者饮酒史密切相关（P〈0．05）。结论：ECRG4甲基化可能是参与食管癌发展的重要分子事件。     

乳腺癌患者外周血及癌组织RASSF1A基因甲基化水平检测临床意义分析

目的：观察乳腺癌、乳腺良性肿瘤患者组织及血浆中RASSFlA基因启动子区异常甲基化状态,并探讨其临床意义。方法：应用甲基化特异性PCR检测2011—06—01—2012—12-31潍坊市人民医院116例乳腺癌和85例乳腺良性肿瘤患者组织及血浆中RASSFlA基因甲基化状态,分析其与患者临床病理因素的关系。结果：116例乳腺癌组织RASSFlA基因启动子甲基化率为71．55％（83／116）,血浆中RASSFlA甲基化率为53．45％（62／116）。85例良性肿瘤组织RASSFlA基因启动子甲基化率为12．94％（11／85）,血浆中未检测出甲基化的RASSFIA。癌组织中RASSFIA甲基化与患者年龄（．）x^2=0．008,P=0．930）、病理类型（x^2=0．010,P=0．995）、临床分期（x2=0．216,P=0．642）和淋巴结转移（x2=0．007,P=0．933）不相关,差异无统计学意义;而血浆RASSFlA甲基化与患者临床分期（x^2=4．796,P=0．029）、淋巴结转移（x^2=5．163,P=0．023）相关,差异有统计学意义。血浆RASSFlA启动子甲基化鉴别诊断乳腺癌与乳腺良性肿瘤的灵敏度为53．45％,特异度为100．00％,准确度为73．13％。结论：乳腺癌患者RASSFlA基因甲基化水平明显升高,检测血浆中RASSFIA基因启动子区甲基化水平有助于乳腺癌与乳腺良性肿瘤的鉴别诊断。     

口腔鳞状细胞癌中TSLC1基因启动子甲基化状态检测的临床意义

目的:探讨肺癌抑癌基因1(TSLC1)在口腔鳞状细胞癌组织中基因启动子甲基化状态及其与临床病理参数的联系.方法:应用甲基化特异性PCR检测TSLC1基因启动子在55例口腔鳞状细胞癌组织及10例正常组织中的甲基化状态并结合临床病理资料进行分析.结果:在癌组织中TSLC1基因甲基化阳性率为76.4％(42/55),正常组织未出现TSLC1基因甲基化.TSLC1基因甲基化与口腔鳞状细胞癌临床分期显著相关(P=0.008).结论:TSLC1基因甲基化与口腔鳞状细胞癌临床分期密切相关,可能是参与口腔鳞状细胞癌发展的重要分子事件.     

卵巢癌中 ECRG4基因启动子甲基化的研究

目的：探讨人食管癌相关基因4（esophageal cancer related gene 4,ECRG4）基因启动子区域在卵巢癌组织中的甲基化状态及临床意义。方法：应用甲基化特异性 PCR 检测 ECRG4基因启动子在50例卵巢癌组织和10例正常卵巢组织中的甲基化状态并结合临床病理资料进行分析。结果：在卵巢癌组织中 ECRG4甲基化阳性率为36%（18/50）,正常卵巢组织未出现 ECRG4甲基化。ECRG4甲基化与肿瘤淋巴结转移及 Ki -67表达密切相关（P <0.05）。结论：ECRG4甲基化可能是参与卵巢癌发展的重要分子事件。     

PTPRO基因启动子甲基化与卵巢癌淋巴结转移的相关性

目的:分析卵巢癌中受体O型蛋白酪氨酸磷酸酶（PTPRO）基因启动子甲基化状态及临床意义。方法:应用甲基化特异性PCR检测PTPRO基因在50例卵巢癌组织和27例正常卵巢组织中的甲基化状态并结合临床病理资料进行分析。结果:在卵巢癌组织中PTPRO甲基化阳性率为66%（33/50）,正常卵巢组织未出现PTPRO甲基化;PTPRO甲基化与肿瘤淋巴结转移与FIGO分期密切相关（P＜0.05）。结论:PTPRO基因甲基化可能是参与卵巢癌发展的重要分子事件。     

DNA修复基因MGMT启动子区过甲基化与食管鳞状细胞癌

目的：O^6－甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶（MGMT）可以转移DNA加合物O^6－甲基鸟嘌呤中的甲基,从而修复DNA损伤,许多肿瘤中发现MGMT基因启动子过甲基化导致该基因失活,我们研究了MGMT基因启动子甲基化状态与食管癌的关系。方法：采用甲基化特异性聚合酶链反应及测序方法分析食管癌。癌旁组织和正常食管上皮中MGMT启动子甲基化状态。结果：在检测的199例食管癌组织中,46例（38．7％）有MGMT基因启动子过甲基化,相应癌旁组织22例中也有5例（22．7％）出现MGMT基因甲基化,而21例正常食管上皮均无此种改变。结论：MGMT基因启动子过甲基化是食管癌中常见的分子事件,可能发生在癌过程的早期阶段。     

Promoter hypermethylation of RASSF1A in esophageal squamous cell carcinoma.

PURPOSE: The RAS association domain family 1A (RASSF1A) gene, a candidate tumor suppressor gene, is frequently inactivated by hypermethylation of its promoter region in several human cancers. The aim of this study was to evaluate the promoter methylation status of the RASSF1A in esophageal squamous cell carcinoma. EXPERIMENTAL DESIGN: We analyzed the methylation status of RASSF1A promoter by methylation-specific PCR in 23 esophageal squamous cell carcinoma cell lines and 48 primary tumors. RESULTS: Hypermethylation of RASSF1A was found in 74% of cell lines and 52% of primary tumors. The presence of hypermethylation was statistically associated with loss of RASSF1A mRNA expression in both cell lines (P = 0.007) and primary tumors (P = 0.003). There was a statistically significant correlation between the presence of hypermethylation and tumor stage (P = 0.009). CONCLUSIONS: Our findings suggest that epigenetic silencing of RASSF1A gene expression by promoter hypermethylation could play an important role in primary esophageal squamous cell carcinogenesis.     

食管癌前病变组织p16及FHIT基因甲基化探讨

目的:探讨食管癌前病变组织p16及FHIT基因启动子区CpG岛的甲基化状况.方法:采用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)方法,对食管癌前病变不同阶段及鳞状细胞原位癌的病变组织进行了甲基化检测,并与同一个体相应的病变旁组织及慢性食管炎和浸润性鳞癌组织的甲基化情况进行了时比分析研究.结果:轻度、中重度不典型增生、鳞状细胞原位癌和浸润癌共95例病变组织中p16基因的甲基化频率分别为22.73%、59.09%、78.57%、64.86%:FHIT基因的甲基化频率分别为22.73%、45.45%、64.29%、67.57%.同一个体相应的95例病变旁对照组织中16例未检测成功,余79例中5例(6.33%)p16基因甲基化,3例(3.80%)FHIT基因甲基化,与病变组织相比,均有统计学差异.10例慢性食管炎组织中1例p16基因甲基化,未发现FHIT基因甲基化.结论:p16及FHIT基因甲基化在癌前病变阶段就已经存在,可能是食管癌发生的早期事件之一.     

新疆哈萨克族和汉族食管癌患者金属硫蛋白-3 CpG岛甲基化的研究

目的： 检测分析和比较新疆哈萨克族和汉族食管癌及癌旁组织中金属硫蛋白-3 (metallothionein-3,MT-3)基因启动区CpG岛的甲基化情况,为寻找新疆哈萨克族食管癌诊断治疗的分子标记物提供线索。方法：采用甲基化特异性聚合酶链反应 (methylation specific polymerase chain reaction,MSP)的方法,检测33例哈萨克族和30例汉族食管癌患者食管癌组织和癌旁组织中MT-3 基因启动子区CpG岛的甲基化发生状况。 结果：33例哈萨克族食管癌组织和癌旁组织标本中MT-3基因启动子区甲基化发生率分别为66.7% (22/33)和27.3% (9/33),差异有统计学意义 (χ2=10.280,P=0.001);30例汉族食管癌组织和癌旁组织标本中MT-3基因启动子区甲基化发生率分别为56.7% (17/30)和26.7% (8/30),差异亦有统计学意义 (χ2=5.554,P=0.018)。哈、汉民族之间癌组织和癌旁组织MT-3基因启动子区甲基化率的差异均无统计学意义 (χ2=0.666,P=0. 414;χ2=0.003,P=0.957)。 结论：MT-3基因启动子区CpG岛的甲基化可能与食管癌的发生与发展有关,但不是哈族食管癌患者的特异性致病因素。