改良共有引物PCR法检测宫颈癌组织中的人乳头瘤病毒

本文采用人乳头瘤病毒高保守序列区共有引物两步温控ＰＣＲ法检测ＨＰＶ，并应用限制性内切酶进行酶切，确定型别，该法省时特异，简便易行，便于基层推广应用，对宫颈癌的普查筛检和回顾性研究将十分有益。     

人乳头瘤病毒基因型检测方法的研究进展

人乳头瘤病毒(HPV)的不同基因型有不同的致病性,基因型的检测和分型对了解病情、指导治疗和判断预后有重要价值。第2代杂交捕获法(HCⅡ)是目前惟一通过FDA批准的可在临床使用的检测方法,但由于其存在不能分型以及其他不足之处而要求发展更好的分型检测方法。现就人乳头瘤病毒的基因型分型方法的研究进展情况作一综述。     

喉乳头瘤中人乳头瘤病毒DNA的PCR检测

喉乳头瘤中人乳头瘤病毒ＤＮＡ的ＰＣＲ检测董菁，庄坚，余秀葵（汕头大学医学院微生物学教研室，广东汕头５１５０３１）关键词乳头瘤，人乳头瘤病毒，聚合酶链反应喉乳头瘤（Ｌａｒｙｎｇｅａｌｐａｐｉｌｌｏｍａ，ＬＰ）为耳鼻喉科常见病之一，该病虽可自发缓解，但易...     

反向杂交法检测23种人乳头瘤病毒型别的研究

目的建立一种同时检测人乳头瘤病毒（HPV）5种低危型和18种高危型的反向杂交方法。方法将23种HPV型别（低危型：HPV6、11、42、43和44型，高危型：HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、83和MM4型）特异性探针固定于尼龙膜条上，生物素标记的通用引物介导PCR（GP-PCR）扩增HPVDNA，扩增产物与膜条经反向杂交检测HPV型别，并与HC-Ⅱ法及扩增和测序法平行检测136例临床标本，对检测结果进行对比。结果3种方法HPV阳性检出率分别为41．9％、42．6％和加．4％；反向杂交法与后二者检测结果之间均具有良好一致性（Kappa值分别为0．8644和0．9089）；以扩增和测序法为金标准，反向杂交法检测敏感度、特异度和准确性分别为96．36％、95．06％、95．59％。结论本法能一次性检测23种HPV具体型别，敏感度、特异度高，操作简便，结果易于判读，适合临床应用。     

宫颈癌发病与人乳头状瘤病毒16/18型感染的相关性

将官颈癌患者治疗前的活检组织,包括子宫颈鳞癌(n=38),腺癌(n=43),使用亚能生物技术(深圳)有限公司生产的HPV DNA PCR检测试剂盒及美国PE公司PCR扩增仪检测人乳头瘤病毒(HPV)16/18型.81例宫颈癌中64例HPV为阳性,检出率为79.0%;子宫颈鳞癌HPV16型阳性20例(52.6%),HPV18型阳性8例(21.1%);子宫颈腺癌HPV16型阳性8例(18.6),HPV18型阳性28例(65.1%).宫颈癌与HPV感染高度相关(P＜0.05).感染了HPV18型较多向腺癌转化,感染了HPV16型较多向鳞癌转化.     

人乳头瘤病毒PCR

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宫颈癌发病与人乳头状瘤病毒l6/18型感染的相关性

将宫颈癌患者治疗前的活检组织,包括子宫颈鳞癌(n=38),腺癌(n=43),使用亚能生物技术(深圳)有限公司生产的HPVDNAPCR检测试剂盒及美国PE公司PCR扩增仪检测人乳头瘤病毒(HPV)l6/18型。81例宫颈癌中64例HPV为阳性,检出率为79.0%;子宫颈鳞癌HPV16型阳性20例(52.6%),HPV18型阳性8例(21.1%);子宫颈腺癌HPV16型阳性8例(18.6),HPV18型阳性28例(65.1%)。宫颈癌与HPV感染高度相关(P<0.05)。感染了HPVl8型较多向腺癌转化,感染了HPV16型较多向鳞癌转化。     

不同引物介导的聚合酶链反应对人乳头瘤病毒的快速检测与分型

目的 比较通用引物、型特异性引物在检测人乳头瘤病毒（HPV）DNA中的应用。方法 104例尖锐湿疣组织中提取DNA后分别用HPV6b、11、16、18型特异性引物及通用引物MY09／11、GP5^＋／6^＋经聚合酶链反应（PCR）进行扩增。部分标本采用限制性内切酶Pst I来确定HPV11型。结果 GP5^＋／6^＋的检出率高于MY09／11，但差异无显著性（χ^2=3．78，P〉0．05）。GP5^＋／6^＋检出微量HPV DNA的敏感度高于MY09／11。型特异性引物检测HPV感染优于通用引物MY09／11结合酶切分型。结论 型特异性引物检出HPV11单一型感染显著多于HPV6b型，且发现HPV6b、11型同时感染有逐年增高之趋势。GP5^＋／6^＋引物结合型特异性引物可为临床上检测尖锐湿疣HPV型别提供方便易行的选择。     

人乳头瘤病毒基因与宫颈癌关系研究进展

人乳头瘤病毒(HPV)感染亚型和宫颈病变的级别存在一定关系,各亚型对宫颈上皮致病力不同。HPV的多重感染并不少见,其是否增加或促进宫颈病变的发生一直是学者们关注的问题。女性生殖道HPV感染的基因型中,高危型感染和宫颈癌及癌前病变关系密切。     

不同年龄段的女性感染人乳头瘤病毒情况分析

目的了解在不同年龄段人乳头瘤病毒（HPV）感染率,为本区域女性宫颈癌防治提供依据。方法采用荧光定量聚合酶链反应（PCR）对1 212例不同年龄组患者进行低危型HPV和高危型HPV检测。结果在被检测的1 212例患者中,有284例感染HPV,低危型101例,高危型183例,总阳性率23.43%。女性感染者以21～40岁年龄组为主,而感染率在21～30岁年龄组达高峰,31～40岁年龄组以后开始减少,〉50岁年龄组感染率最低。30岁以前以感染低危型HPV为主,30岁以上感染以高危型HPV为主,高危型HPV感染阳性率在30岁以上女性感染率较高。结论 30岁以上女性为高危型HPV感染高发人群,加强该人群高危型HPV检测以便早期干预,早期治疗,降低该人群宫颈癌的发生率和致死率至关重要。     

人乳头瘤529例病毒基因分型检测及临床分析

目的探讨我院就诊患者人乳头瘤病毒(HPV)感染的型别分布比率和年龄特征以及HPV-DNA精细分型的临床应用价值。方法采用中山大学达安基因股份有限公司生产的基于HPV多型别通用引物的人乳头瘤病毒核酸检测试剂盒(简称"组合分型试剂"),对529例21～77岁有性生活史的门诊患者进行HPV-DNA10种亚型组合分型筛查。采用上海之江生物科技技术有限公司生产的"高危型人乳头病毒分型核酸测定试剂盒"(简称"精细分型试剂"),随机抽取51例组合分型试剂筛检阳性患者进行HPV-DNA13种亚型精细分型,以期探讨我院HPV-DNA亚型分布情况。结果组合分型试剂检测的HPV-DNA总感染率:18.34%(97/529)。3种组合型别均有检出:6/11型(1.51%,8/529),HR(16/18/31/33/45/52/56/58)型(17.39%,92/529),16/18型(5.67%,30/529)。529例HPV感染高峰年龄在21～40岁(占24.58%),40～60岁HPV感染者占15.67%,年龄大于60岁感染率占0.10%,各年龄组之间HPV感染率频数分布有统计学差异(P=0.021<0.05),且随着年龄的增高HPV的感染率呈下降趋势。精细分型试剂结果:试剂所囊括的13种HPV亚型均有检出,其中检出率最高的型别是52型(33.33%,17/51),其次为58型(25.50%,13/51);多重感染中以二重感染(27.45%,14/51)较为多见,最多检出五重感染(1.96%,1/51)。两种方法检测HPV型别比对一致性Kappa检验:Z=7.0474,P<0.05,95%置信区间(0.6471,0.9266),表明两种检测方法在HPV-DNA分型检测方面具有很较高的一致性。McNemarχ2差异性检验:P=0.4795>0.05,说明两种检测方法在HPV-DNA分型检测方面的差别没有统计学意义。结论我院HPV-DNA分型检出率为18.34%,感染高峰集中于21～40岁。其中HPV52型检出率最高,多重感染以二重感染为主,最多检出五重感染,精细法与组合法在HPV高危型初筛中具有较高的一致性。     

妇女高危型人乳头瘤病毒核酸定量检测结果分析

目的探讨阳江地区妇女高危型人乳头瘤病毒（HPV）感染情况和年龄分布。方法选取2012年5月至2013年4月在该院妇科就诊的1744例妇女宫颈棉拭子标本,采用实时荧光定量PCR技术检测高危型HPVDNA。将筛查人群分成10个年龄组,分别计算各年龄组高危型HPV阳性率。结果1744例妇女中,共检测出高危型HPV阳性者200例,总阳性率为11．5％（200／1744）,高危型HPV阳性者在大于40~45岁和大于35-40岁2个年龄组的分布率较高,分别是25．O％（50／200）和22．5％（45／200）。结论对妇女进行HPV检查,可为宫颈癌的早期诊断、预防及治疗效果提供实验室诊断依据。     

人乳头瘤病毒与宫颈癌关系的研究进展

在世界女性恶性肿瘤的发病率中,宫颈癌排第二位,而人乳头瘤病毒(Human pap:lilloma virus,HPV)感染是宫颈癌最常见的病因.随着对HPV研究的不断深入,HPV与宫颈癌的关系越来越清晰,本文就HPV的生物学特性,致宫颈癌的主要机制,检测方法及相关疫苗的情况进行阐述.     

人乳头瘤病毒PCR产物酶标-微孔板杂交分型

目的建立聚合酶链反应（ＰＣＲ）产物直接酶标记微孔板反向分子杂交法用于人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）型别鉴定。方法利用ＨＰＶ通用引物介导ＰＣＲ（ＧＰＰＣＲ）扩增靶ＤＮＡ，然后对产物直接标记辣根过氧化物酶复合物（ＨＲＰＰＥＩＱＩ），与预先包被在微孔板上的ＨＰＶ寡核苷酸探针杂交后酶显色法检测。结果ＨＰＶ各型之间无交叉杂交；杂交灵敏度可达１３～７６个病毒ＤＮＡ拷贝，比ＰＣＲ琼脂糖凝胶电泳检测高１０倍；该法重复性好，阳性孔批内ＣＶ为６．３４％，批间ＣＶ为１０．５３％，阴性孔批内ＣＶ为１％，批间ＣＶ为５．７９％；而且杂交影响因素较少。结论该法特异性强、灵敏度高、操作简便，无放射性和ＥＢ染料污染，杂交时间短、仪器读取结果，便于大量常规临床样本定性或定量检测。     

影响人乳头瘤病毒疫苗接种相关因素研究进展

宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤之一,高发年龄为50~55岁,它是迄今为止唯一找出致病原因的癌症。人乳头瘤病毒(HPV)主要通过性传播感染,与宫颈癌的发生、发展密切相关,是宫颈癌发生的最主要原因。现如今子宫颈癌病因明确、筛查方法较完善,是一个可以预防的肿瘤。因此,HPV疫苗的提出是预防/治疗HPV、降低宫颈癌发生率的一种重要措施。HPV疫苗的上市并没有使更多的人群得到及时接种。为了推动HPV疫苗的接种,本文将从多方面探讨影响其接种的相关因素,使得宫颈癌得到有效预防。     

荧光定量PCR检测性病患者人乳头瘤病毒核酸

为了解本地区STD患者中HPV的感染情况,我们对2 0 0 1年9月～2 0 0 2年8月收集的35 7名STD患者标本进行HPVDNA荧光定量检测,结果如下。1　材料和方法1.1　研究对象　本院性病门诊尖锐湿疣(CA)患者10 3例,均为男性,年龄2 1～6 5岁,平均30 .2岁;HPV亚临床感染者2 5 4例,男137例,女     

人类乳头状瘤病毒性肺癌的病因关系研究

目的：研究人类乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）与肺鳞癌发生的病因关系。方法：采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测石蜡包埋肺鳞癌组织标本２０份，肿瘤组织旁鳞状化生上皮标本３０份，正常支气管粘膜３０份中的ＨＰＶＤＮＡ。结果：上述三种村本中，ＨＰＶＤＮＡ的检出率分别为２６％，３７％和１０％，其中以ＨＰＶ１６型所占比例最高，结论：结果表明ＨＰＶ感染与肺鳞癌的性发生有一定的联系，鳞状上皮化生心可视为癌前病变，ＰＣＲ技术     

宫颈上皮内瘤样病变术后人乳头瘤病毒清除率评价

目的 研究宫颈上皮内瘤样病变（CIN）术后人乳头瘤病毒（HPV）的清除率。方法 109例经聚合酶链反应（PCR）技术和组织病理活检确认为宫颈HPV感染的CINⅠ～Ⅲ期女性患者，在冷冻术或锥形切除术（简称锥切术）后3、6、9、12和24个月进行HPV DNA分型，并对其性伴侣进行阴茎HPV DNA分析。结果研究对象中，81％女性患者在入选或接受治疗时HPV DNA阳性。1年后，7例女性（9％）患者的同型HPV DNA仍然阳性。大多数患者治疗3个月后被确认为HPV清除。冷冻术组患者CIN病理分级较低，且较年轻，其HPV清除率较锥切术组的低（P〈0．001）。只有4对性伴侣检测到同型HPV DNA。结论 CIN手术后通常3个月内HPV即被清除，锥切术组HPV清除率明显高于冷冻术组。