端粒酶逆转录酶与子宫内膜癌的研究进展

人端粒酶逆转录酶(hTERT)是端粒酶的核心组分,与包括子宫内膜癌在内的多种肿瘤的发生、发展密切相关。hTERT表达和端粒酶活性增高可以促进肿瘤的发生。检测hTERT表达和端粒酶活性有助于子宫内膜癌的诊断。调控hTERT转录,抑制端粒酶活性有望成为治疗子宫内膜癌的新方法。现将hTERT与子宫内膜癌的研究进展作一综述。     

端粒酶逆转录酶在子宫内膜异位症中的表达及意义

目的:研究端粒酶逆转录酶(hTERT)在子宫内膜异位症(EMs)在位内膜及异位内膜组织中的表达,探讨hTERT在EMs发生过程中的作用。方法:应用免疫组化SP法检测54例EMs患者及15例正常子宫内膜中hTERT的表达情况,应用显微镜及相关软件评估hTERT在EMs患者在位内膜及异位内膜组织中的表达,以及其随着月经周期变化的表达情况。分析子宫内膜异位病灶组织中hTERT表达与CA125、月经周期、r-AFs分期及年龄之间的相关关系。结果:EMs异位内膜病灶处hTERT表达水平显著高于在位内膜、正常子宫内膜(P0.05);EMs在位内膜显著高于正常子宫内膜(P0.05)。正常内膜和EMs在位内膜中,月经周期变化对hTERT的表达无明显影响。EMs病灶处hTERT的表达水平与血清中CA125水平呈正相关(r=0.367,P0.05),而与月经周期、r-AFs分期和年龄呈无明显相关性。结论:hTERT在EMs中异常表达,表明hTERT在EMs的发生过程中起着一定的作用。     

人端粒酶逆转录酶在子宫颈癌组织中的表达变化及其意义

目的研究端粒酶在宫颈癌及其癌前病变组织中的表达,探讨人端粒酶逆转录酶(hTERT)作为宫颈癌早期诊断标志物的可能性。方法采用RTPCR方法测定端粒酶mRNA在3株宫颈癌细胞、2株正常的人二倍体细胞、38例宫颈癌、16例宫颈上皮内瘤变(CIN)和20例正常宫颈组织中的表达水平;端粒重复序列扩增酶联免疫吸附法测定端粒酶活性;免疫组化链酶菌抗生物素蛋白过氧化物酶(SP)连接法检测3株宫颈癌细胞、2株正常的人二倍体细胞、21例正常宫颈组织、2例CIN和55例宫颈癌切片中hTERT蛋白的表达水平。结果hTERTmRNA在3株宫颈癌细胞中均表达,而在2株正常的人二倍体细胞中无表达,宫颈癌组织中的阳性表达率为81.6%,高于CIN的37.5%和正常宫颈组织的5.0%,差异有统计学意义(P<0.05);hTERTmRNA的阳性表达率与端粒酶活性有相关性(P<0.01);hTERT蛋白在3株宫颈癌细胞中有表达,2株正常的人二倍体细胞中无表达,正常宫颈组织中阳性表达率为4.8%、CIN为28.0%,均低于宫颈癌组织的65.5%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论宫颈癌组织和细胞中hTERTmRNA和蛋白阳性表达率均高于正常宫颈组织,其有可能作为宫颈癌早期诊断的标志物。     

间皮素mRNA在子宫内膜癌的表达及意义

目的:研究间皮素mRNA表达与子宫内膜癌发生、发展的关系。方法:采用半定量RT-PCR技术检测41例子宫内膜癌组织和14例正常子宫内膜组织中间皮素mR-NA的表达。结果:间皮素mRNA在子宫内膜癌和正常子宫内膜组织中的表达率分别为82.9%(34/41)与78.6%(11/14),相对含量分别为74.95±22.34、54.45±9.01。子宫内膜癌组间皮素mRNA相对含量高于正常内膜组(P=0.005)。手术病理分期Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移、深肌层浸润及低分化组的子宫内膜癌间皮素mRNA相对含量分别高于手术病理分期Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移、浅肌层浸润及高、中分化组(P分别为0.000、0.014、0.01和0.034),而与病理类型无关(P=0.219)。结论:间皮素mRNA过表达与子宫内膜癌的浸润、转移有相关性,检测其表达有助于判断子宫内膜癌的恶性程度和评估预后。     

FISH检测宫颈脱落细胞中hTERC基因制片方法的研究

荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization，FISH）是用已知的标记单链核酸为探针，按碱基互补原则，与待检材料中未知单链核酸进行结合，形成荧光显微镜下可检测的荧光信号，目前多用于检测癌组织，包括乳腺癌、膀胱癌、肺癌、卵巢上皮性肿瘤和鼻咽癌等。近年人们运用此技术检测宫颈脱落细胞中3号染色体长臂端粒酶基因（human telomerase RNA component，位于3q26．3，hTERC）的扩增，     

HPV16 18 E6蛋白在宫颈脱落细胞中的表达研究

目的 探讨人乳头状瘤病毒(human papillomavirus,HPV)16和(或)18 E6蛋白在宫颈脱落细胞中的表达与宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)及宫颈鳞状细胞癌(cervical squamous cell carcinoma,CSCC)的关系.方法 采用免疫印迹(Western blot)方法检测2003年6月至2005年6月中国医科大学第一附属医院CSCC 30例、CIN 52例和16例正常宫颈脱落细胞中HPV16和(或)18 E6蛋白的表达.结果 在上述各组宫颈脱落细胞中HPV16和(或)18 E6表达阳性率分别76.7%(23/30)、51.9%(27/52)和12.5%(2/16);其中在CSCC宫颈脱落细胞中HPV16和(或)18 E6明显高于正常对照组的表达(P＜0.01);CINⅡ、Ⅲ组的表达也显著高于对照组(P＜0.05),而CINⅠ组与正常对照组比较差异无显著性意义(P＞0.05).结论 宫颈脱落细胞标本存在HPV16和(或)18 E6癌基因的表达.宫颈脱落细胞中HPV16和(或)18 E6癌基因的过度表达与CSCC及CINⅡ、Ⅲ密切相关.     

宫颈鳞癌组织中TPX2的表达及其临床意义

目的探讨TPX2蛋白和mRNA在宫颈鳞癌组织中的表达及其与宫颈鳞癌患者临床病理资料之间的相关性。方法 2009年10月至2010年11月在河北医科大学第四医院,采用免疫组织化学法、逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法,对62例宫颈癌、15例正常宫颈组织和30例宫颈上皮内瘤变(CIN)组织进行检测,分析TPX2的mRNA和蛋白质的表达。结果经RT-PCR检测,正常宫颈组织中几乎不表达TPX2mRNA,宫颈鳞癌组织中相对含量为0.441±0.011,两者之间差异具有统计学意义(t=-19.568,P<0.01)。经免疫组化检测,TPX2蛋白在正常宫颈鳞状上皮组织中不表达,在CIN和宫颈鳞癌组织中呈阳性表达,三者之间差异具有统计学意义(P<0.05)。宫颈鳞癌组织中TPX2的表达与组织学分级、FIGO分期及淋巴结转移密切相关(P<0.05),而与年龄无关(P>0.05)。结论 TPX2可能参与了宫颈鳞癌的发生和发展,TPX2可作为宫颈鳞癌早期诊断及预后估计的一个指标。     

Galectin-3在宫颈细胞的表达及其意义

<正>半乳糖凝集素Galectin-3是一种生物体内通过识别特异性半乳糖配基而发挥功能的糖蛋白,在上皮细胞和免疫细胞中广泛表达,参与包括肿瘤细胞黏附、增殖、分化、血管生成、凋亡、肿瘤进展和转移等多种生物功能。现已对结肠癌、甲状腺癌和乳腺癌等多种肿瘤进行了Galectin-3研究,表明它与肿瘤恶性发展有关。妇科肿瘤如子宫颈癌的Galec- tin-3的表达,国内尚缺乏相关的资料。我们应用免     

应用双色间期FISH技术中宫颈脱落细胞取材及制片方法的探讨

目的在双色间期荧光原位杂交技术（FISH）中探讨采集宫颈脱落细胞样本及制片的最佳方法。方法采集在北京大学人民医院门诊就诊174例患者的宫颈脱落细胞,应用新鲜细胞直接涂片（60例）、生理盐水制片（31例）,TCT剩余液体直接制片（37例）、TCT盐水制片（30例）和TCT低渗制片（16例）五种取材制片方法;并应用双色间期FISH法,检测宫颈脱落细胞的TERC基因表达率,对比取材制片的最佳方法。结果在直接涂片法、盐水制片法、TCT制片法、TCT盐水制片法和TCT低渗法五种制片过程中,TERC基因的杂交成功率分别是55.0%、61.3%、37.8%、53.3%和81.3%,其中TCT低渗法杂交成功率与TCT制片组比较,有显著差异（P〈0.05）,与其他方法比较,无明显差异（P〉0.05）;5种制片方法的玻片背景清晰比例分别为38.3%、54.8%、35.1%、60%和75%,各组之间有明显差异（P〈0.05）;5组的无/少信号比例分别为18.3%、16.1%、37.8%、23.3%和18.8%,其中新鲜制片的直接涂片法和盐水制片法与TCT直接制片法比较,有明显差异（P〈0.05）,与其他方法比较无差异（P〉0.05）。结论在应用双色间期FISH技术检测宫颈脱落细胞TERC基因时,以TCT低渗制片和新鲜细胞盐水制片操作方法简单快速,杂交成功率最高。     

人染色体端粒酶基因的扩增率与宫颈癌前病变和宫颈癌的研究

目的:探讨人染色体端粒酶基因(hTERC)扩增率与宫颈癌前病变及宫颈癌的关系.方法:应用荧光原位杂交技术(FISH)检测宫颈上皮内瘤变(CIN)组108例(CIN Ⅰ 39例、CINⅡ37例、CINⅢ32例),宫颈癌组24例和正常对照组33例,共165例宫颈脱落细胞中hTERC基因的表达情况.结果:CINⅡ、CINⅢ和...     

乙酰肝素酶mRNA在卵巢上皮性肿瘤中的表达及其临床病理相关性研究

目的探讨乙酰肝素酶（Hpa）mRNA在卵巢上皮性癌中的表达及与临床病理的相关性。方法应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测41例卵巢上皮性癌、17例卵巢良性肿瘤和22例正常卵巢组织中Hpa mRNA表达，并分析其与卵巢癌临床病理的相关性。结果①卵巢上皮性癌组织、良性肿瘤组织和正常组织Hpa mRNA阳性表达率分别为58．54％、29．41％和22．73％。癌组织Hpa mRNA阳性表达率显著高于良性组及正常组（P〈0．01），良性组与正常组Hpa mRNA阳性表达率比较，差异无显著性（P〉0．05）。②Ⅲ～Ⅳ期卵巢恶性肿瘤患者中Hpa mRNA的阳性表达率显著高于Ⅰ～Ⅱ期患者（P〈0．05）。低分化肿瘤组织中Hpa mRNA的阳性表达率显著高于中、高分化者（P〈0．05）。③Long-rank分析显示Hpa mRNA表达阳性者的累积生存率明显低于阴性者，差异有显著性（P〈0．05）。结论卵巢上皮性癌中Hpa mRNA阳性表达率明显增高，并与卵巢上皮性癌病情进展有关，可作为卵巢上皮性癌转移和预后的一个重要预测指标。     

c-myc基因mRNA在小鼠胚胎着床期间的表达

目的 :研究 c-myc基因 m RNA在胚胎围着床前后的动态变化 ,了解 c-myc基因在胚胎着床及早期分化中的作用。方法 :48只昆明白小鼠 (1 0～ 1 2周 ,体重 2 5～ 30 g,购自上海医科大学动物房 ) ,雌雄 2∶ 1交配后随机分为 7组 ,分别为妊娠 d1、d2、d3、d4、d5、d6和 d7组(n=6 ) ,并以未交配小鼠作为对照组 (n=6 )。每天 1 0∶ 0 0处死小鼠 ,取子宫内膜 ,用 RT-PCR的方法检测内膜 c-myc m RNA的表达。结果 :未孕小鼠内膜及孕 1 d小鼠蜕膜组织 c-myc m RNA无表达 ;孕 d2开始小鼠蜕膜 c-myc表达明显升高 (与正常相比 P<0 .0 1 ) ;随后一直到 d5都维持在一定的水平 (各组相比 P>0 .0 5) ;d6、7又明显上升。结论 :c-myc基因参与了胚胎着床 ,并可能与着床前后的信号传递及胚胎的早期分化有关     

SLP-2 mRNA在子宫内膜癌中的表达及其意义

目的探讨SLP-2mRNA在子宫内膜癌中的表达,及其在子宫内膜癌发生、发展中的作用。方法采用半定量RT-PCR技术检测32例子宫内膜癌组织和28例正常子宫内膜组织中SLP-2mRNA的表达情况;并用表达SLP-2基因的正义和反义质粒,分别转染子宫内膜癌细胞系HEC-1B细胞,RT-PCR技术检测转染前、后HEC-1B细胞中SLP-2mRNA的表达情况,观察转染前、后细胞的形态变化;用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞生长情况,并绘制细胞生长曲线;流式细胞仪检测细胞周期的变化。结果子宫内膜癌组织中SLP-2mRNA的表达水平为1.6±0.7,正常子宫内膜组织为0.7±0.3,两者比较,差异有统计学意义(P<0.05)。表达SLP-2基因的正义和反义质粒成功转入HEC-1B细胞中,正义质粒转染后SLP-2mRNA表达水平增加约2.4倍,细胞生长变快,其中G1期减少12.5%,S期增高8.0%;反义质粒转染后SLP-2mRNA表达水平减少50%,细胞生长变慢,其中G1期增高10.5%,S期减少9.8%。结论子宫内膜癌中SLP-2mRNA的高表达与子宫内膜癌发生、发展有一定关系。     

乙酰肝素酶mRNA在子宫内膜异位症和子宫腺肌病中表达的研究

目的:检测子宫内膜异位症和子宫腺肌病在位及异位子宫内膜组织中乙酰肝素酶(heparanase,Hpa)mRNA的表达,探讨Hpa在子宫内膜异位症和子宫腺肌病发生发展中的作用及意义。方法:采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测50例子宫内膜异位症患者和42例子宫腺肌病患者的异位及在位内膜中Hpa mRNA的表达,并与30例妇女的正常子宫内膜进行比较。结果:(1)子宫内膜异位症组和子宫腺肌病组患者的异位及在位内膜中Hpa mRNA表达差异无显著性(P>0.05)。对照组正常子宫内膜中Hpa mRNA表达明显低于两组患者异位及在位内膜的阳性表达率(P<0.05);(2)Ⅰ~Ⅱ期子宫内膜异位症的异位及在位内膜中Hpa mRNA表达明显低于Ⅲ~Ⅳ期的异位与在位内膜表达(P<0.05)。结论:(1)Hpa与子宫内膜异位症和子宫腺肌病发病有关;(2)Hpa与子宫内膜异位症病情进展有关,是促进子宫内膜异位症病情进展的一个因素。     

hTERC基因表达在宫颈病变中的临床意义

目的探讨应用荧光原位杂交(FISH)技术检测人类染色体端粒酶(hTERC)基因异常扩增在子宫颈病变中的临床意义。方法选择经过液基细胞学(TCT)检查的112例患者为研究对象,根据组织学结果分组,CIN73例、宫颈癌19例、正常20例,用FISH方法检测脱落细胞hTERC基因的表达情况,其中行HPV检查65人,阳性39例,阴性26例。结果在CIN1、CIN2/3和宫颈癌患者宫颈脱落细胞中hTERC基因的表达率分别是16.67%、51.16%和89.47%,CIN1、CIN2/3和宫颈癌与正常组比较,hTERC基因阳性率差异有统计学意义(P0.001),其中,各组间比较差异有统计学意义(P0.05)。在HPV感染的39例患者中,hTERC基因扩增比例58.97%(23/39),而26例HPV阴性的患者中,其扩增比例为23.08%(6/26),两组比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论 hTERC基因的阳性率随宫颈病变级别增高而增加,对宫颈早期病变进展有预测意义。hTERC基因的扩增与HPV感染及宫颈病变程度相关,其扩增可能是HPV感染致端粒酶活性增加的早期事件。     

卵巢癌中微小RNA-210的表达及临床意义

目的：检测上皮性卵巢癌组织中微小RNA-210（miR-210）的表达水平,初步探讨miR-210在卵巢癌发病中的作用。方法：采用多聚腺苷酸加尾实时荧光定量反转录聚合酶链反应［ｐｏｌｙ（Ａ）－RT-qPCR]检测上皮性卵巢癌、良性上皮性卵巢肿瘤及正常卵巢组织标本中miR-210的表达。结果：miR-210在卵巢癌组中表达低于良性卵巢肿瘤组和正常卵巢组,3组间差异有统计学意义（F=893.213,P=0.000）;且随着卵巢癌组织临床分期及组织分化的进展,miR-210表达有下降的趋势。结论：miR-210在上皮性卵巢癌组织中低表达,在卵巢癌发生发展中发挥重要的抑癌基因作用,且与卵巢癌分期、组织分级及淋巴结转移密切相关。