人类白细胞抗原F在妊娠期肝内胆汁淤积症患者胎盘中的表达及意义

目的:研究人类白细胞抗原F(HLA-F)在妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)患者胎盘组织中的表达,并从免疫学角度探讨其与ICP发病的关系。方法:采用免疫组织化学技术对妊娠晚期(ICP组40例和正常对照组40例)胎盘组织中表达的HLA-F蛋白进行定位;再通过PCR及蛋白质免疫印迹技术,研究ICP患者(轻度20例,重度20例)胎盘组织中HLA-F在核酸分子(mRNA)及蛋白中的表达情况。结果:1妊娠晚期胎盘组织中仅蜕膜板绒毛外滋养细胞(EVCT)膜上有HLA-F蛋白表达。2正常对照组和ICP组间胎盘组织中HLA-F mRNA的表达差异无统计学意义(P0.05);正常对照组和轻度ICP、重度ICP3组间胎盘组织中HLA-F mRNA的表达差异均无统计学意义(P0.05);ICP组胎盘组织中HLA-F蛋白的表达水平低于正常对照组(0.6092±0.3370vs1.3451±0.5540),差异有统计学意义(P0.05);重度ICP胎盘组织中HLA-F蛋白的表达水平显著低于正常对照组(0.5328±0.2762vs 1.3451±0.5540)差异有统计学意义(P0.05);而轻度ICP和正常对照组间胎盘组织中HAL-F蛋白的表达量差异无统计学意义(P0.05)。3ICP非地塞米松组和ICP地塞米松组间胎盘组织中HLA-F mRNA及蛋白的表达差异均无统计学意义(P0.05)。结论:HLA-F蛋白表达于妊娠晚期胎盘组织蜕膜板EVCT细胞膜上;ICP患者胎盘组织中HLA-F蛋白表达水平降低可能是导致ICP患者妊娠免疫耐受平衡紊乱的重要机制之一。     

妊娠期肝内胆汁淤积症孕妇胎盘合体滋养细胞OATP8基因表达及意义的研究

目的:探讨有机阴离子转运多肽8(OATP8)在妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)孕妇胎盘组织中的表达及其意义。方法:研究对象分为ICP轻度组(8例)、ICP重度组(8例)和正常对照组(8例)。采用免疫组化链霉亲和素-生物素-过氧化物酶复合物(SABC)法检测胎盘组织中OATP8蛋白定位表达;采用逆转录(RT)-PCR技术检测OATP8mRNA表达;蛋白印迹法检测OATP8蛋白表达水平。结果:①OATP8蛋白定位在胎盘合体滋养细胞膜上。②3组孕妇胎盘组织中OATP8mRNA的表达:ICP重度组明显高于对照组和ICP轻度组,差异均有统计学意义(P<0.05),ICP轻度组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);③3组孕妇胎盘组织中OATP8蛋白的表达:ICP重度组高于轻度组,差异有统计学意义(P<0.05),ICP轻度组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:ICP孕妇胎盘合体滋养细胞OATP8基因表达水平上调,可能有助于胎盘对胆汁酸或胆红素的清除作用。     

青海高原地区胎儿生长受限患者胎盘组织人类白细胞相关抗原G表达的研究

目的:探讨青海高原地区胎儿生长受限(FGR)患者人类白细胞相关抗原G(HLA-G)mRNA及蛋白的表达及临床意义。方法:收集2015年1~12月在青海大学附属医院产科分娩的20例FGR患者(FGR组)和20例正常妊娠妇女(正常妊娠组)的胎盘组织,采用实时荧光定量PCR及Western blot分析检测HLA-G mRNA及蛋白在两组胎盘组织中的表达差异。结果:FGR组胎盘组织中HLA-G mRNA表达水平(0.449±0.116),明显低于正常妊娠组(0.963±0.226),差异有统计学意义(P=0.000)。FGR组胎盘组织HLA-G蛋白表达灰度值(0.375±0.101),亦明显低于正常妊娠组(0.797±0.177),差异有统计学意义(P=0.002)。结论:青海高原地区FGR患者胎盘组织HLA-G mRNA及蛋白表达水平均明显降低,HLA-G的表达量降低在FGR的发生发展过程中可能起着重要的作用。     

脂联素在子痫前期患者胎盘组织中的表达与其发病的关系

目的 探讨脂联素在子痫前期患者胎盘组织中的表达与其发病的关系.方法 采用免疫组化链霉菌抗生物蛋白-过氧化物连接(SP)法及RT-PCR技术,检测20例正常足月妊娠孕妇(正常妊娠组)、12例轻度子痫前期(轻度子痫前期组)及22例重度子痫前期(重度子痫前期组)患者胎盘组织中脂联素蛋白及其mRNA的表达,并分析其与子痫前期发病的关系.结果 (1)3组孕妇胎盘绒毛合体滋养细胞及细胞滋养细胞胞质内脂联素蛋白均呈阳性表达,且各组内胎盘母面及子面脂联素蛋白的表达水平相互比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).(2)重度子痫前期组胎盘组织中脂联素蛋白的表达水平(30 984±14 604)低于轻度子痫前期组(58 360±8910)及正常妊娠组(53 246±17 554),差异均有统计学意义(P＜0.01).重度子痫前期组中妊娠足月者胎盘组织中脂联素蛋白的表达水平(38 890±20 386)与未足月者(29 319±8997)比较,差异无统计学意义(P＞0.05);但与正常妊娠组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).(3)3组孕妇胎盘组织中均有脂联素mRNA的表达.其中重度子痫前期组胎盘组织中脂联素mRNA表达水平(1.0±0.2)低于轻度子痫前期组(2.9±0.8)及正常妊娠组(3.3±1.1),差异有统计学意义(P＜0.05).结论 重度子痫前期患者胎盘组织中脂联素mRNA表达水平下降导致其蛋白表达水平也下降,提示脂联素的异常表达参与了子痫前期的发病.     

子(癎)前期胎盘组织syncytin及其受体ASCT2的表达

目的研究syncytin及其受体ASCT2在子前期(PE)胎盘组织中的表达。方法胎盘组织来源于广东省人民医院和广州医学院附属第三医院2006年7月至2007年7月住院分娩病例。依孕周匹配,入组孕妇共48例,分为轻度PE组(17例),重度PE组(13例)和正常对照组(18例),应用实时PCR方法检测syncytin及ASCT2mRNA的转录水平,比较检测结果。结果各组均检测到syncytin及ASCT2mRNA。与正常对照组(6.37±2.74)相比,轻、重度PE组胎盘组织syncytinmRNA水平明显降低(1.69±1.34,1.38±1.29),差异有统计学意义(P<0.01);对照组及轻、重度PE组ASCT2mRNA水平(分别为5.51±3.05,3.51±2.93,2.97±1.48)差异无统计学意义(P>0.05);轻、重度PE两组间syncytin及ASCT2mRNA差异均无统计学意义(P>0.05)。结论胎盘syn-cytin表达下调可能与PE发病有关,但其转录水平与病变程度似不相关,其受体ASCT2与PE发生无明显相关性。     

妊娠期肝内胆汁淤积症胎盘组织中OATP-A基因表达的研究

目的:探讨有机阴离子转运多肽OATP-A在正常晚孕妇女及ICP孕妇胎盘组织的表达水平及意义。方法:收集正常晚孕胎盘组织(对照组)、轻度ICP胎盘组织及重度ICP胎盘组织各10例。采用免疫组化、Western blot分别检测胎盘组织中OATP-A的组织学定位及蛋白表达水平。结果:正常组及ICP组胎盘组织中OATP-A表达均定位于胎盘滋养细胞的细胞膜,血管内皮无表达。对照组、ICP轻度组及ICP重度组的OATP-A蛋白表达量分别为0.21±0.02、0.53±0.04、0.79±0.12,ICP轻度组及重度组OATP-A蛋白表达量均高于对照组,两两比较,均有统计学意义(P<0.05)。结论:ICP胎盘组织中OATP-A表达明显升高,可能是对抗胆汁淤积的一种保护性反应,对降低胎儿部分胆汁酸及胆红素水平有重要作用。     

原发性羊水过多产妇胎膜和胎盘组织中水通道蛋白8的表达

目的 探讨水通道蛋白8(AQP8)在原发性羊水过多产妇胎膜和胎盘组织中的表达.方法 收集2005年10月-2007年5月重庆医科大学附属第一医院和重庆市妇幼保健院行足月剖宫产分娩(孕37～40周)的原发性羊水过多产妇12例为羊水过多组,同期因社会因素行剖宫产分娩的正常产妇12例为对照组.采用RT-PCR技术检测两组产妇胎膜和胎盘组织中的AQP8 mRNA表达水平;采用免疫组化技术检测两组产妇胎膜和胎盘组织中的AQP8蛋白表达水平.结果 (1)羊水过多组羊膜、绒毛膜和胎盘组织中的AQP8 mRNA表达水平分别为0.78±0.13、0.58±0.10、0.86±0.15,对照组分别为0.39±0.07、0.45±0.09、0.34±0.09,羊水过多组各组织中AQPS mRNA表达水平均高于对照组,两组分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05).(2)羊水过多组羊膜、绒毛膜和胎盘组织中的AQP8蛋白表达水平分别为0.195±0.024、0.170±0.028、0.193±0.024,对照组分别为0.151±0.018、0.156±0.024、0.152±0.023,其中羊水过多组羊膜、胎盘组织中AQP8蛋白表达水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),而羊水过多组绒毛膜组织中AQP8蛋白表达水平虽高于对照组,但两组比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 原发性羊水过多产妇羊膜和胎盘组织中AQP8mRNA及蛋白的表达水平均显著高于正常产妇,提示AQP8在产妇羊水量的调节中发挥重要作用.     

胎盘组织中尿皮素和促肾上腺皮质激素释放激素2β受体表达变化与先兆子痫发病的关系

目的探讨先兆子痫患者胎盘组织中尿皮素(UCN)和促肾上腺皮质激素释放激素2β受体(CRH R2β)表达与先兆子痫发病的关系。方法应用半定量RT PCR技术测定20例先兆子痫患者(先兆子痫组)和20例正常妊娠妇女(对照组)胎盘组织中UCNmRNA和CRH R2βmRNA的水平;采用免疫组化方法对UCN进行蛋白定位和半定量分析。结果(1)先兆子痫组胎盘组织中UCNmRNA的表达水平为1 14±0 26,高于对照组的0 78±0 46,两组比较,差异有统计学意义(P<0 05)。(2)先兆子痫组胎盘组织中CRH R2βmRNA的表达水平为0 89±0 33,与对照组的0 93±0 50比较,差异无统计学意义(P>0 05)。(3)免疫组化定位结果显示,两组产妇的UCN蛋白表达主要位于合体滋养细胞,少量表达于细胞滋养细胞和血管内皮细胞。蛋白半定量结果显示,UCN在先兆子痫组胎盘合体滋养细胞中的表达强度高于对照组,两组比较,差异有统计学意义(P<0 05 )。结论先兆子痫患者胎盘组织中UCN表达水平升高,而CRH R2β水平则无明显变化,因此UCN的作用加强。这可能是胎盘组织对母体和胎儿应激状态的一种继发性代偿反应,并参与先兆子痫的病理生理过程。     

胎盘内质网应激相关分子伴侣ERdj1与子痫前期发病的关系

目的:探讨胎盘组织中内质网应激相关分子伴侣ERdj1的mRNA及蛋白的表达,及其与子痫前期发病的关系.方法:收集剖宫产分娩36例孕妇的胎盘,其中正常足月妊娠妇女12例(正常对照组),轻度子痫前期患者12例(轻度子痫前期组),重度子痫前期患者12例(重度子痫前期组).应用透射电镜扫描观察子痫前期胎盘组织中滋养细胞内质网超微结构改变,通过RT-PCR技术检测胎盘组织中ERdj1 mRNA的表达,蛋白印迹法检测胎盘组织中ERdjl蛋白的表达.结果:①正常对照组胎盘滋养细胞中内质网体积无明显增大,内质网无肿胀;子痫前期组胎盘滋养细胞中内质网体积增大、扩张及液泡化.②轻、重度子痫前期组ERdj1 mRNA的表达水平(2.1327±0.4855,2.3064±0.1004)显著高于正常对照组(0.2809±0.0064),差异有高度统计学意义(P＜0.01);重度子痫前期组与轻度子痫前期组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).③轻、重度子痫前期组ERdj1蛋白表达水平(3.8412±0.8423,4.9421±0.9810)显著高于正常对照组(1.5678±0.2315),差异有高度统计学意义(P＜0.01);重度子痫前期组与轻度子痫前期组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:子痫前期胎盘滋养细胞内质网有明显扩张及肿胀性改变;内质网应激相关分子伴侣ERdj1参与了子痫前期的病理生理过程,可能是子痫前期发病的重要机制之一.