脓毒症时肠道细菌易位发生部位的研究

目的:研究脓毒症时肠道细菌易位发生的部位。方法:将36只大鼠随机分对照组和脓毒症组,各组内随机分为空肠组、回肠组和结肠组。空肠组大鼠于Treitz韧带处空肠置管,距离Treitz韧带20cm处造口;回肠组于回盲部上20cm处肠道置管,末端回肠造口;结肠组行盲肠置管。各组分别于肠道置管口灌入绿色荧光标记的大肠杆菌和乳果糖/甘露醇,于术后行肠道通透性检测,24h后荧光显微镜下观察大鼠肠系膜淋巴结、肝、脾组织中标记细菌的数量,肠系膜淋巴结细菌培养,并在荧光显微镜下观察。结果:空肠组、回肠组和结肠组大鼠肠黏膜的通透性和肠系膜淋巴结荧光细菌计数存在差异,回肠组明显高于空肠组和结肠组。结论:脓毒症时,各肠段细菌易位程度不同,回肠内易位细菌数量最多。     

门静脉阻断致大鼠肠源性感染及微生物酵素的保护作用

目的探讨门静脉阻断下大鼠小肠屏障功能的变化及微生物酵素对其变化的影响,从而为深入研究肠源性感染及其防治提供依据。方法将Wistar大鼠分成对照组(C),阻断组(I)和治疗组(T),每组取0、3、5、7 d4个时相点,检测血D-乳酸、二胺氧化酶(DAO)、肠道菌群微生态、组织(肠系膜淋巴结MLN、肺、肝、脾)细菌培养以及血细菌DNA等。结果与正常对照组比较,阻断组各时间点血液内D-乳酸均显著升高,C0(0.31±0.03)μg/ml与I0(1.31±0.03)μg/ml,C3(0.32±0.03)μg/ml与I3(1.50±0.14)μg/ml,C5(0.32±0.02)μg/ml与I5(1.48±0.10)μg/ml,C7(0.31±0.02)μg/ml与I7(1.08±0.43)μg/ml;血DAO均显著增高C0(0.60±0.13)U/ml与I0(1.57±0.82)U/ml,C3(0.61±0.03)U/ml与I3(1.41±0.20)U/ml,C5(0.60±0.02)U/ml与I5(1.63±0.21)U/ml,C7(0.59±0.13)U/ml与I7(1.04±0.21)U/ml;0、3 d时组织细菌培养阳性率明显增加(分别为65.00%vs0,50.00%vs0);与阻断组比较,治疗组5、7 d时血D-乳酸明显下降,治疗组5、7 d时DAO含量均显著降低,5、7 d时肠道双歧杆菌属、肠道酵母菌属明显升高。结论研究结果表明门静脉阻断可损伤大鼠小肠屏障受损,导致肠道细菌移位,引起肠源性感染。微生物酵素对门静脉阻断下小肠屏障功能有一定的改善作用,能减少肠源性感染。     

精氨酸增强TPN与常规TPN对大鼠肠道细菌易位影响的比较研究

本文比较观察了精氨酸增强ＴＰＮ与常规ＴＰＮ对大鼠肠道细菌易位的影响，结果显示，常规ＴＰＮ１周有２周后肠系淋巴结细菌培养，肠源性细菌阳性率分别为７／１６和１０／１６，与正常对照组比较差异显著（Ｐ〈０．０５；Ｐ〈０．０１）；精氨酸增强ＴＰＮ１周和２周后肠系膜淋巴结细菌培养阳性率分别为３／１６和４／１６，与正常对照组比较无统计学差异，而与常规ＴＮ２周比较差异显著（Ｐ〈０．０５）。细菌学分类埃锲杆菌５８．     

利用生物发光活体成像技术观察肠黏膜损伤状态下细菌易位的初步研究

[目的]临床上各种疾病会导致肠黏膜屏障损伤并伴随大量的细菌易位发生。本实验拟使用发光细菌的小鼠活体成像技术,观察肠黏膜损伤状态下易位细菌的动态移位过程。[方法]构建重组荧光脂酶基因(Lux)的质粒pXen-1、pXen-18,转化大肠杆菌DH5a,筛选阳性细菌克隆,扩增培养后,定量(107)注射到肠黏膜屏障损伤模型小鼠肠腔不同部位内,利用生物发光活体成像技术进行细菌易位的病理生理观察研究。实验分为四组:小肠注射菌实验组和对照组、盲肠注射菌实验组和对照组。其中实验组为肠道缺血再灌注损伤,对照组无任何干预措施。[结果]发光细菌小鼠活体成像观察到,存在肠黏膜损伤的小鼠肠腔内的细菌数量及分布发生明显的改变,提示细菌易位在肠黏膜损伤时起着重要的病理生理作用。注入小肠内的发光细菌数量在试验过程中明显下降,提示小肠肠腔环境可以杀灭一定的细菌。[结论]生物发光活体成像技术,可以直观、可靠、敏感地观察肠道内细菌的存活状态,并可观察肠黏膜损伤状态下细菌易位的动态过程。该技术为肠黏膜屏障损伤细菌易位机制的研究提供了一个有力的工具。     

肝硬化肠道细菌易位防治研究进展

肠道细菌易位参与肝硬化各种并发症如自发性细菌性腹膜炎、肝肾综合征、肝肺综合征及肝性脑病等的发生发展。肝硬化时肠道细菌易位发生主要与三方面因素有关:肠道细菌过度生长,肠壁通透性增加及机体免疫力下降。从抑制肠道细菌过度生长,降低肠壁通透性和提高机体免疫力三方面着手,进行肠道细菌易位防治,可以有效控制肝硬化各种并发症的发生发展。     

微生物酵素预防肝移植术后早期感染的作用

目的 评价口服微生物酵素对肝移植术后早期感染的防治效果和临床意义。方法 对20例同种异体原位肝移植病例，采用口服微生物酵素组与对照组，对比临床症候及大便、尿、痰、胆汁的细菌学检查，观察有益微生物菌群制剂的应用对肝移植术后早期感染的防治效果。结果 应用微生物酵素组消化道功能恢复、肠道菌群失调、粘膜系统一般真菌检查及细菌学培养明显优于对照组，并具有显著性统计学意义。结论 肝移植术后经消化道服用微生物酵素，可有效增强粘膜系统的免疫学功能，对预防和治疗肝移植术后早期细菌及真菌性感染有明显的临床意义。     

大鼠腹部开放伤后海水浸泡对肠道细菌的影响

目的 探讨大鼠腹部开放伤合并海水浸泡对肠道细菌的影响. 方法将50只成年健康Wistar大鼠随机分为5组,每组10只.A组为正常对照组,B组为单纯腹部开放伤组,C组为单纯腹部海水浸泡组,D组为腹部开放伤合并生理盐水浸泡组,E组为腹部开放伤合并海水浸泡组.建立大鼠腹部开放伤合并海水浸泡创伤模型,每组大鼠取全血、肝脏和肠系膜淋巴结,分别制备成血浆、肝和肠系膜淋巴结匀浆进行细菌培养并计数菌落数. 结果大鼠血浆、肝脏和肠系膜淋巴结匀浆上清液细菌培养结果显示,正常对照组和单纯腹部海水浸泡组均无细菌生长;腹部开放伤合并海水浸泡组均有细菌生长,且菌落数显著高于正常对照组或腹部开放伤合并生理盐水浸泡组(P＜0.01). 结论大鼠腹部开放伤合并海水浸袍后肠黏膜屏障功能受损,肠道细菌发生易位.     

HIV感染期间持续性免疫激活与肠道微生物易位关系的研究

由人类获得性免疫缺陷病毒(HIV)感染引起的病理学改变是复杂、多方面的,其中感染过程中导致免疫激活和疾病进展的一个关键因素是微生物易位,在胃肠道表现较早,并出现相应的临床症状。人类和动物感染SIV后,导致细菌易位形成的主要因素包括胃肠黏膜上皮屏障破坏和持续性免疫激活。以下就HIV感染期间持续性免疫激活与肠道微生物易位的关系进行综述。     

生长激素对脓毒症大鼠肠道细菌易位的影响

目的:研究生长激素(GH)对脓毒症大鼠肠道细菌易位的影响.方法:将72只大鼠随机分为对照组、GH组、脓毒症组和脓毒症+GH组,再将各组随机分为空肠组、回肠组和结肠组.空肠组大鼠取Treitz韧带处空肠置管,距离Treitz韧带25 cm处造口;回肠组大鼠自回盲部向上25 cm处置管,末端回肠造口;结肠组大鼠行盲肠置管....     

加强对肠屏障功能障碍的研究

经本文作者及《中华医学杂志》编辑部同意,本刊全文转载黎介寿院士在《中华医学杂志》发表的述评。虽然本文发表于4年前,但至今对中国的肠屏障功能的研究仍有重要指导意义,也反映了此述评的前瞻意义,是国内难得的述评。供本刊读者学习参考。     

肠道细菌移位的研究进展

危重病人肠道内细菌移位可以引发肠源性感染和多器官功能障碍.该文作者简要介绍近年来关于肠道细菌移位发生情况的争议和共识,深入阐述细菌移位发生和转归的机制,旨在为全面认识胃肠道和保护好肠道功能提供新的思路.     

多黏菌素E诱导肠道菌群失调对肠屏障功能和细菌易位的影响

目的:应用多黏菌素E给小鼠灌胃诱导建立肠道菌群失调动物模型,研究肠道菌群失调对肠黏膜屏障和细菌易位的影响。方法:将20只小鼠随机分为两组,每组10只。实验组采用多黏菌素E按0.2 g/kg加入0.2 ml等渗盐水灌胃,1次/d,连续7 d。对照组用等剂量等渗盐水灌胃,1次/d,连续7 d。实验结束次日观察两组小鼠回肠黏膜病理形态、肠道菌群、回肠黏膜组织紧密连接(TJ)蛋白表达和器官(肝、脾、肾、淋巴结)细菌易位率等。结果:实验组小鼠盲肠黏膜和盲肠内容物的肠杆菌数量显著减少。常规病理检查发现,实验组小鼠回肠黏膜充血明显,绒毛稀疏,尖端有少量上皮坏死脱落,与对照组比损伤明显。透射电镜显示,实验组小鼠回肠上皮TJ的电子致密物质明显减少,TJ破坏。回肠黏膜组织中TJ蛋白Claudin-1、Occludin和ZO-1的表达显著下降,器官细菌易位率显著高于对照组。结论:多黏菌素E灌胃能够诱导肠道菌群失调,且导致肠屏障功能损伤和细菌易位。     

应用绿色荧光蛋白标记技术示踪细菌移位的实验研究

目的:利用绿色荧光蛋白(GFP)标记技术明确化疗时是否存在细菌移位.方法:将30只SD大鼠随机分为三组:空白对照组、对照组和甲氨蝶呤(MTX)组,每组10只.给对照组和MTX组大鼠灌饲GFP标记的大肠杆菌TG1对移位的细菌进行示踪,MTX组大鼠皮下注射MTX制作大鼠化疗模型.使用荧光显微镜及质粒酶切电泳鉴定内脏分离出的细菌是否来源于肠道.结果:在应用MTX大鼠的肠系膜淋巴结、肝、脾和肾,均可分离出GFP标记E.coli TG1.结论:MTX能引起细菌移位,在细菌移位的动物实验研究中,GFP示踪技术是一种简单、可靠和有效的方法.     

外科病人手术前后血中细菌DNA检出率的研究

目的用稳定可靠的PCR方法,检测腹部手术前后血中以肠源性细菌为主的DNA并与相关因素进行分析。方法111例择期腹部手术病人在术前,术后第3天、第6天各采血3ml进行检测。患者按手术创伤大小分为三组,又按术后是否存在“全身性炎症反应综合征”（SIR）分为二组,不同组别与PCR阳性率进行对比。结果术前PCR均为阴性。术后第3天PCR阳性率17．1％（19／111）,高于术后第6天PCR阳性率6,3％（7／111,P＝0．004）。大手术组PCR阳性率为32．4％（11／34）,中手术组为13．4％（9／67）,小手术组为10％（1／10）,三组之间有差异（P＝0．02）。术后出现SIRS的病人PCR阳性率为43．9％（18／41）,高于无SIRS组4．3％（3／70,P=0．001）。结论术后禁食输液治疗病人血中可检出细菌DNA,阳性率与手术创伤大小、术后有无SIRS可能有关。     

细菌移位与癌性恶液质的关系及对恶液质患者结局的影响

目的探讨局限型进展期胃癌患者肠道细菌移位与恶液质的关系及其对患者结局的影响。方法选取2008年1月至2009年7月预行手术治疗的胃癌恶液质患者60例，年龄及性别匹配的胃癌非恶液质患者50例，健康对照者55例。采用聚合酶链反应检测外周血细菌DNA片段，酶联免疫吸附实验检测外周血细胞因子浓度，流式细胞法检测外周血免疫学指标。所有入选对象随访两年，计算两年生存率。结果恶液质组细菌移位发生率（15／60，25．0％）显著高于非恶液质组（4／50，8．0％，P=0．019）和健康对照组（0／55，0．0％，P=0．000）。细菌移位阳性的恶液质患者白细胞介素-1α（IL-1α）、IL-6、肿瘤坏死因子-α和干扰素-γ水平均显著高于细菌移位阴性的恶液质患者（P=0．012、P=0．003、P=0．036、P=0．017）和细菌移位阳性的非恶液质患者（P=0．011、P=0．034、P=0．000、P=0．022），并且其两年生存率明显低于细菌移位阴性的恶液质患者（P=0．023）。胃癌患者CD3^＋ T、CD4^＋ T和自然杀伤细胞水平及CD4^＋ T／CD8^＋ T显著低于健康对照组（P=0．023、P=0．031、P=0．016、P=0．041），CD8^＋ T细胞水平显著高于健康对照组（P=0．038）。结论肠道细菌移位可能与局限型进展期胃癌患者恶液质的发生有关，并影响恶液质患者的长期生存。     

Effects of ethanol on gut-associated lymphoid tissues in a model of bacterial translocation: a possible role of apoptosis

Chronic ethanol intake has been shown to be associated with immune suppression and impairment of epithelial barrier function. We investigated the effects of ethanol on intestinal immunity and its relation to bacterial translocation (BT). Male Wistar rats were assigned to one of three groups and received respective diets for 28 days. The ethanol-fed group [(EG); n = 11] received a liquid diet containing 5% [volume/volume (vol./vol.)] ethanol; a pair-fed group [(PFG); n = 11] received an isocaloric diet without ethanol; and a third (control) group [(CG); n = 11] received water and chow ad libitum. On experimental day 29, animals in the EG and the PFG underwent distal ileum ligature and small intestine inoculation of a tetracycline-resistant Escherichia coli strain (Tc^R E. coli R6), by means of gastric intubation, followed by duodenal ligature. One hour after inoculation, mesenteric lymph nodes, right lobe of liver, spleen, and left kidney were excised for bacterial studies. Sections of jejunum and colon were immunostained, with the use of antibodies against immunoglobulin (Ig) A, T cells, macrophages, and proliferating cell nuclear antigen (PCNA). Apoptosis was determined by the terminal deoxynucleotidyltransferase TdT-mediated dUDP-biotin nick end labeling (TUNEL) method. Bacterial translocation rates were greater in the PFG compared with findings for the EG. Lamina propria of the jejunum of the EG showed a reduction in the densities of IgA⁺ cells and T cells compared with findings for the PFG and the CG. Colonic lamina propria of the EG showed reduced densities of IgA⁺ cells and macrophages compared with findings for the PFG and the CG. Apoptotic index was increased in the EG compared with findings for the PFG and the CG, in both jejunum and colon. Proliferation index was not significantly different among groups. Results of the current study show that chronic ethanol ingestion led to a reduction of cellular and humoral components of the intestinal mucosa, possibly by cell loss as a result of ethanol-induced apoptosis. The reduced rates of BT observed after chronic ethanol intake seem to indicate that factors irrespective of immune function might be involved in BT inhibition.     

益生菌在肠内营养中的应用及研究进展

防治肠源性感染的关键在于防止肠内细菌和(或)内毒素的移位,纠正肠内菌群平衡的紊乱和失调,改善肠黏膜屏障功能以及提高肠道局部的免疫功能。而益生菌是具有维持肠内菌群平衡、防止肠黏膜屏障的破坏、增强局部免疫功能、促进和改善消化道蠕动以及吸收等作用的非致病性微生物,可治疗和预防肠源性感染。以下综述益生菌在肠内营养的作用及研究进展。