塞来昔布对胃癌抑制作用的实验研究

目的 :探讨塞来昔布和吲哚美辛对胃癌细胞增殖的抑制作用及可能的机制。方法 :MTT比色实验检测药物对 SGC790 1细胞和 AGS细胞增殖的影响 ,裸鼠移植瘤实验检测药物对胃癌细胞成瘤性的影响 ;流式细胞术检测药物对胃癌细胞凋亡的影响 ;电镜观察药物作用前后胃癌细胞的超微结构的变化。结果 :塞来昔布和吲哚美辛抑制 SGC790 1细胞和 AGS细胞增殖 ,效应呈剂量依赖性 ,两者抑制率比较差异有显著性 (P<0 .0 5 ) ;塞来昔布和吲哚美辛抑制荷瘤裸鼠肿瘤增殖 ,瘤结节重量分别为 (48.3± 2 .88) mg和 (83.3± 2 0 .81) m g,对照组为 (82 6 .7± 77.72 ) mg(P<0 .0 5 ) ;塞来昔布和吲哚美辛可诱导细胞凋亡 ,凋亡细胞分别增加了 30 .4 % (34.5 %比 4 .1% )和 2 3.9% (2 8.0 %比 4 .1% )。塞来昔布可使胃癌细胞超微结构发生良性转化 ,可见有凋亡特征的细胞。结论 :塞来昔布和吲哚美辛可抑制胃癌体内外增殖 ,前者作用更强 ,诱导细胞凋亡是其可能的作用机制之一。     

塞来昔布诱导SGC-7901人胃癌细胞凋亡及其影响端粒酶活性的实验研究

目的探讨选择性环氧化酶-2（COX-2）抑制剂塞来昔布对SGC-7901人胃癌细胞生长、端粒酶活性，细胞凋亡及相关基因的影响，研究其抗肿瘤的作用机制。方法终浓度为100、200及300μmol／L的塞来昔布作用于SGC-7901人胃癌细胞后，采用MTT比色法测定细胞的生长抑制率，采用半定量-TRAP银染法检测端粒酶活性，流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡率及bcl-2表达水平变化。结果不同浓度的塞来昔布对SGC-7901人胃癌细胞均有抑制作用，抑制率与对照组相比，差异均有显著性（P〈0．05）；流式细胞学检测到凋亡峰，细胞阻滞于G0／G1期。同时它也显著抑制胃癌细胞的端粒酶活性，其抑制作用呈时间-剂量依赖性，且端粒酶活性的降低与bcl-2表达水平下降有关。结论塞来昔布能抑制胃癌细胞的增殖，诱导细胞凋亡，降低端粒酶活性，其作用机制与bcl-2表达水平下降有关，此可能是COX-2抑制剂抗肿瘤的机制之一。     

特异性环氧合酶-2抑制剂SC236诱导胃癌细胞株凋亡的实验研究

目的:探讨环氧合酶-2(COX-2)特异性抑制剂SC236诱导胃癌细胞株SGC7901凋亡的机制. 方法: SC236对人胃癌来源的SGC7901细胞进行凋亡诱导.以吖啶橙染色后荧光显微镜下观察凋亡细胞形态并计算凋亡指数.Western blot法检测凋亡调节蛋白Bcl-2、Bak、Bax与CED-9的表达情况.流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果: SGC7901细胞经SC236作用后,细胞中凋亡促进因子Bak的表达水平明显增高、凋亡抑制因子Bcl-2的表达水平显著下降、而凋亡促进因子Bax和凋亡抑制因子CED-9表达水平无明显变化.细胞凋亡指数或凋亡率则随SC236浓度的增加和作用的时间延长而升高.结论: COX-2特异抑制剂SC236可通过上调凋亡促进因子Bak表达和下调凋亡抑制因子Bcl-2表达而诱导胃癌细胞株SGC7901的凋亡.     

特异性环氧合酶-2抑制剂SC236诱导胃癌细胞株凋亡的实验研究

目的：探讨环氧合酶-2（COX-2）特异性抑制剂SC236诱导胃癌细胞株SGC7901凋亡的机制。方法：SC236对人胃癌来源的SGC7901细胞进行凋亡诱导。以吖啶橙染色后荧光显微镜下观察凋亡细胞形态并计算凋亡指数。Western blot法检测凋亡调节蛋白Bcl-2、Bak、Bax与CED-9的表达情况。流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果：SGC7901细胞经SC236作用后,细胞中凋亡促进因子Bak的表达水平明显增高、凋亡抑制因子Bcl-2的表达水平显著下降、而凋亡促进因子Bax和凋亡抑制因子CED-9表达水平无明显变化。细胞凋亡指数或凋亡率则随SC236浓度的增加和作用的时间延长而升高。结论：COX-2特异抑制剂SC236可通过上调凋亡促进因子Bak表达和下调凋亡抑制因子Bcl-2表达而诱导胃癌细胞株SGC7901的凋亡。     

塞来昔布对宫颈癌HeLa细胞凋亡及环氧合酶-2表达的影响

背景与目的:环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,C0X-2)是花生四烯酸转变为前列腺素过程中的关键酶,在多种恶性肿瘤的发生、发展过程中起重要调控作用,近年来其被证实与宫颈癌的发生、发展、浸润、转移、复发和预后关系密切.塞来昔布作为一种选择性COX-2抑制剂,在肿瘤的预防和治疗中己显示其优越性和广阔前景.本研究通过观察塞来昔布对宫颈癌HeLa细胞凋亡和COX-2表达的影响,探讨塞来昔布抗肿瘤的作用机制.方法:体外培养宫颈癌HeLa细胞,以倒置相差显微镜观察不同浓度塞来昔布作用不同时间下的HeLa细胞形态学变化;DAPI荧光化学法及DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡情况;Western blot检测C0X-2蛋白的表达.结果:HeLa细胞经塞来昔布处理后生长相对缓慢,出现典型细胞凋亡形态学改变,并随药物浓度增加及作用时间延长而显著改变.塞来昔布能诱导HeLa细胞凋亡,凋亡率随药物浓度增加而逐渐增高(F=46.810,P=0.002),DNA梯形条带明显,并呈浓度依赖性.塞来昔布呈时间及药物浓度依赖式降低COX-2蛋白的表达.结论:塞来昔布在体外通过抑制COX-2表达,诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡.     

选择性环氧化酶2抑制剂塞来昔布对人卵巢癌细胞系A2780细胞增殖与凋亡的影响

目的 探讨环氧化酶-2抑制剂塞来昔布（celecoxib）对人卵巢癌细胞系A2780细胞增殖与凋亡的影响。方法 采用MTT法观察塞来昔布对A2780细胞的增殖抑制情况;流式细胞仪测定塞来昔布对A2780细胞周期的影响;并用荧光显微镜观察凋亡细胞的形态。结果 塞来昔布对A2780细胞的增殖具有抑制作用,并显示表现出明显的时间和剂量的依赖性;塞来昔布使A2780细胞发生细胞周期的G1期阻滞,细胞凋亡增加,并且在荧光显微镜下可观察到凋亡细胞。结论 塞来昔布抑制A2780细胞增殖并促进细胞凋亡,有可能成为卵巢癌化疗的有效药物。     

环氧合酶-2特异抑制剂诱导胃癌细胞凋亡的机制研究

目的　探讨环氧合酶 - 2 (COX -2 )特异抑制剂SC2 36诱导胃癌细胞凋亡的机制。方法SC2 36处理AGS细胞后 ,吖嘧橙染色观察细胞凋亡 ,免疫印迹法检测凋亡相关蛋白、细胞色素C水平。caspase- 3的激活通过免疫印迹法检测其活性片段、其底物多聚 (ADP 核糖 )聚合酶 (PARP)的裂解和比色法检测其催化活性来确定。结果　SC2 36处理AGS细胞可明显提高前凋亡蛋白Bak的水平 ,促使细胞色素C从线粒体进入胞浆 ,并激活caspase 3。caspase 3的特异抑制剂z DEVD fmk可以抑制SC2 36诱导的凋亡 ,细胞凋亡率由 (33.4± 3.2 ) %下降到 (16 .1± 1.5 ) %。结论　SC2 36至少部分通过上调Bak、促进细胞色素C的释放以及激活caspase 3的途径诱导胃癌细胞凋亡。     

环氧合酶-2抑制剂塞来昔布诱导人肝癌细胞凋亡及其机制

目的：探讨环氧合酶2（cyclooxygenase2,COX2）抑制剂塞来昔布（celecoxib）诱导人肝癌细胞系SMMC7721凋亡的作用及其可能机制。方法：以10、25、50、75、100 μmol/L的塞来昔布处理SMMC7721细胞,MTT法检测肿瘤细胞增殖,Hoechst 33342/PI 双染法检测细胞凋亡的形态特征,流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期变化。RTPCR法检测Fas和Bcl2mRNA的表达,Western blotting检测细胞Fas和Bcl2 蛋白的表达。结果：塞来昔布以剂量依赖的方式抑制SMMC7721细胞增殖。塞来昔布作用后,SMMC7721细胞出现核染色质凝集、核膜破裂等凋亡细胞典型的形态特征。25、50和100 μmol /L塞来昔布诱导SMMC7721细胞的凋亡率分别为(16.32±2.32)%、(38.05±2.47)%、(71.17±3.19)%,并使细胞阻滞于G0/G1期。塞来昔布处理后,SMMC7721细胞Fas mRNA及蛋白表达明显增强（P<0.01）;Bcl2 mRNA表达无明显变化（P>005）,高浓度塞来昔布可下调Bcl2蛋白表达（P<0.01）。结论：塞来昔布能够抑制SMMC7721细胞增殖并诱导凋亡,其机制可能与影响凋亡相关基因表达有关。     

塞来昔布抑制人骨肉瘤细胞的研究

目的　研究塞来昔布(celecoxib)对人骨肉瘤细胞株HOS-8603生长和凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法　采用四唑盐(MTT)比色法检测细胞增殖,以确定塞来昔布对人骨肉瘤细胞株HOS-8603的有效剂量;应用高效液相色谱(HPLC)检测前列腺素E2(PGE2 )含量;光镜形态学观察,流式细胞仪测定细胞周期。结果　塞来昔布抑制人骨肉瘤细胞株HOS-8603生长和诱导凋亡(当celecoxib的浓度为80umol/L时抑制率达到46. 75 ±7. 697% );这种抗增殖作用可能与celecoxib对COX-2的抑制作用有关;且不能被PGE2所拮抗。塞来昔布能够诱导HOS-8603细胞凋亡,当其浓度为80umol/L时,凋亡率增加了44. 7% (46. 0%比1. 3% );但是塞来昔布的这种抑制HOS-8603细胞生长和诱导凋亡作用不能被PGE2 所拮抗。结论　塞来昔布对于人类骨肉瘤可能是一种有效的化学治疗和化学预防药物,塞来昔布并非通过前列腺素E2(PGE2 )途径抑制人骨肉瘤细胞株HOS-8603生长和诱导凋亡。     

环氧化酶2抑制剂对宫颈癌 Hela 细胞中 HPV18- E6和 COX -2表达的影响

目的：探讨环氧化酶2抑制剂 Celecoxib 对宫颈癌细胞 Hela 中 HPV18- E6、COX -2表达及其细胞增殖和凋亡的影响。方法：用不同浓度 Celecoxib 处理 Hela 细胞株后,免疫细胞化学 SP 法检测 HPV18- E6和COX -2蛋白的表达变化。RT - PCR 检测 HPV18- E6及 COX -2 mRNA 表达的改变。MTT 法检测其对细胞增殖的影响。流式细胞仪测定细胞凋亡情况。Hoechst33258染色观察细胞的形态学变化。结果：Celecoxib 作用 Hela 细胞后 HPV18- E6和 COX -2基因 mRNA 及蛋白表达量明显低于对照组,且随着药物浓度增加表达呈梯度下降。各组之间差异具有显著性（P <0.05）,且两者之间具有显著相关性（P <0.01）。Celecoxib 抑制Hela 细胞增殖,作用呈量-效关系（P <0.05）。流式细胞仪显示各实验组凋亡率随浓度升高而增加,与对照组之间有显著差异（P <0.05）。Hoechst33258荧光染色显示经20μmol/ L 药物作用 Hela 细胞24h 后表现为典型调亡小体。结论：COX -2抑制剂 Celecoxib 可以同时下调宫颈癌 Hela 细胞中 HPV18- E6和 COX -2表达、抑制 Hela 细胞的增殖、促进其凋亡。     

The 765G>C Polymorphism in the Cyclooxygenase-2 Gene and Gastric Cancer Risk: an Update by Meta-analysis

Background: The 765G>C polymorphism in cyclooxygenase-2 (COX-2) gene has been extensively investigatedfor association with gastric cancer (GC). However, the results of different studies have been inconsistent. The aimof this study is to comprehensively evaluate the genetic risk of -765G>C polymorphism in the COX-2 gene forGC. Materials and Methods: We searched Pubmed, Embase, Medline, CNKI database, Wanfang database, Weipudatabase, and Chinese Biomedical database, covering all publications (last search been performed on Jan 10,2014). Statistical analyses were performed using Revman 5.2 and STATA 10.0 software. Results: A total of 1,874cases and 3,005 controls in 10 case-control studies were included in this meta-analysis. The results indicated thatthe variant C allele carriers (GC+CC) had a 69% increased risk of GC when compared with the homozygote GG(odds ratio (OR)=1.69, 95% confidence interval (CI), 1.10-2.61 for GC+CC vs GG). In the subgroup analysis byethnicity, significant elevated risks were associated with C allele carriers in Asians (OR=1.75, 95%CI=1.40-2.18,and p<0.00001) and in Indians (OR=8.38, 95%CI=4.34-16.16, and p<0.00001) but not in Caucasians (OR=1.07,95%CI=0.81-1.42, and p=0.62) or in Dutch (OR=0.53, 95%CI= 0.33-0.87, and p= 0.01).In the subgroup analysisby Helicobacter pylori (H. pylori) status, a significantly increased risk was identified among H. pylori (+) (OR=3.58,95%CI=2.33-3.50, and p<0.00001) and H. pylori (-) (OR=2.32, 95%CI=1.46-3.69, and p=0.0004). Conclusions:This meta-analysis suggested that the -765G>C polymorphism in the COX-2 gene could be a risk factor for GCin Asians and Indians.     

β-榄香烯对胃癌SGC-7901细胞c-myc基因表达及端粒酶活性的影响

目的：探讨β-榄香烯对胃癌CGC-7901细胞c-myc基因表达及端粒酶活性的影响。方法：应用β-榄香烯处理人胃癌细胞系SGC-7901后,采有RT-PCR检测c-myc基因mRNA的变化。采用流式细胞仪免疫荧光技术检测c-myc蛋白表达,用端粒酶PCR-ELISA法检测端粒酶活性,结果：β-榄香烯可下调c-myc基因表达及抑制端粒酶活性。结论：β-榄香烯可抑制胃癌细胞端粒酶活性,可能与下调c-myc基因表达有关。     

选择性COX-2抑制剂Celecoxib对胃癌细胞增殖影响的探讨

目的:探讨选择性COX-2抑制剂Celecoxib对胃癌SGC-7901细胞增殖和凋亡的影响.方法:应用MTT法和FCM检测Celecoxib对胃癌SGC-7901细胞增殖、细胞凋亡、细胞周期和COX-2蛋白和bcl-2蛋白表达的影响.结果:Celecoxib呈时间、剂量依赖性抑制胃癌SGC-7901细胞生长,72h细胞最高存活率为48.7%,最低为20.5%;COX-2蛋白含量由26.73±0.06降至5.79±1.44,bcl-2蛋白含量由2.76±0.14降至0.78±0.05,COX-2蛋白和bcl-2蛋白表达的降低呈浓度依赖性;随着药物浓度的增高,细胞凋亡率由3.0%增加到33.0%;G0/G1期细胞比例增加到(87.29±1.34)%,S期和G2/M期细胞比例分别降低到(8.91±0.78)%、(3.80±0.55)%.结论:Celecoxib能够诱导胃癌SGC-7901细胞的凋亡,影响细胞周期的分布,从而有效地抑制胃癌SGC-7901细胞的增殖;Celecoxib诱导胃癌SGC-7901细胞的凋亡可能主要通过抑制COX-2的生物活性来实现,并与bcl-2蛋白表达的下调有关.     

乳腺癌中COX-2表达及其抑制剂塞来昔布对乳腺癌细胞系增生和凋亡的影响

目的为进一步观察COX-2对乳腺癌的作用,我们检测了乳腺癌组织、乳腺癌细胞株MCF-7和B37中COX-2的表达,并观察选择性COX-2抑制剂塞来昔布对乳腺癌细胞株生长和凋亡的影响。方法应用免疫组织化学染色的方法检测132例乳腺癌组织标本中COX-2蛋白的表达;应用免疫细胞化学染色、原位杂交、逆转录多聚酶联反应（RT-PCR）的方法,分别检测COX-2蛋白和mRNA在乳腺癌细胞株MCF-7、B37中的表达;采用MTT法、AO/EB双荧光染色法和流式细胞术,研究塞来昔布对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响。结果52.3%(69/132)的乳腺癌组织标本表达COX-2蛋白;在乳腺癌细胞株MCF-7和B37中均有COX-2的表达,25μmol/L塞来昔布作用72h后,COX-2表达明显减少;25、50、100μmol/L的塞来昔布与MCF-7细胞作用72h,生长抑制率分别为36.3%、57.7%、74.5%。100μmol/L塞来昔布作用72h后,MCF-7细胞凋亡率为38.5％。结论乳腺癌组织和乳腺癌细胞株MCF-7、B37中存在COX-2的表达;塞来昔布可抑制乳腺癌细胞增殖,并促进细胞凋亡,塞来昔布可能作为新的药物治疗乳腺癌。     

胃癌组织COX-2、VEGF-C表达与淋巴结转移及预后关系的研究

目的:探讨环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)、血管内皮生长因子C(VEGF-C)在胃癌组织中的表达及其与淋巴管生成、淋巴结转移及预后的关系.方法:采用免疫组织化学SABC法检测 51例胃癌及相应的癌旁组织COX-2、VEGF-C及受体VEGFR-3表达,计数肿瘤内淋巴管密度(LVD),并结合临床病理特征和随访资料进行分析.结果:胃癌组织COX-2、VEGF-C表达阳性率分别为62.8%(32/51),60.7%(31/51).COX-2表达与VEGF-C(r=O.74,P＜0.05)、临床分期(r=0.34,P＜0.05)、淋巴管密度(r=0.69,P＜0.01)和淋巴结转移(r=0.57,P＜0.01)呈正相关,与病理分化呈负相关(r=-0.58,P＜0.01).VEGF-C表达与淋巴管密度(r=0.45,P＜0.01)、淋巴结转移呈正相关(r=0.46,P＜0.05).随访5年,胃癌组织COX-2表达与生存率呈负相关,COX-2表达阴性组5年生存率(36.8%)显著高于COX-2表达阳性组(15.6%)(P＜0.05).结论:在胃癌组织中,COX-2、VEGF-C高表达,COX-2与VEGF-C、淋巴管密度、淋巴结转移呈正相关.推测COX-2通过诱导VEGF-C表达参与淋巴结转移.胃癌组织COX-2检测可能对推测预后具有重要意义.     

蛇葡萄素对人胃癌细胞SGC-7901裸鼠移植瘤生长的抑制作用

目的观察蛇葡萄素(APS)体内抗人胃癌作用。方法采用人胃癌细胞裸鼠移植瘤模型,将裸鼠随机分成5组,APS三个剂量连续灌胃给药10天,观察肿瘤体积、相对肿瘤体积(RTV)、相对肿瘤增殖率（T/C）、瘤重、抑瘤率(IR),以此评价APS的抗肿瘤作用。结果在人胃癌细胞株SGC-7901裸鼠移植瘤的抑瘤实验APS 600mg/kg、300mg/kg、150mg/kg灌胃给药10天,其相对肿瘤增殖率为52.84%、71.12%、62.14%,其抑瘤率分别为38.8%、27.5%、27.3%。结论APS对人胃癌细胞株SGC-7901裸鼠移植瘤有明显的抑制作用。     

COX-2 iNOS及VEGF在胃不典型增生胃癌中的表达及其意义

目的:探讨COX-2、iNOS及VEGF在胃不典型增生及胃癌中的表达、相互关系及在胃癌中的作用.方法:采用免疫组化Power visionTM两步法对84例胃癌和54例胃不典型增生组织中COX-2、iNOS及VEGF的表达进行检测.结果:COX-2、iNOS及VECF在胃癌中表达的阳性率分别为66.67%、77.38%、61.90%,均高于胃不典型增生组织(P＜0.05).COX-2、iNOS及VEGF表达与肿瘤的大小、淋巴结转移呈正相关,COX-2、VEGF表达与肿瘤浸润深度呈正相关,VEGF与COX-2、iNOS的表达呈正相关(P＜0.05).结论:COX-2、iNOS及VEGF与胃癌的发生、浸润转移相关,COX-2、iNOS通过增强VEGF的表达而促进肿瘤血管生成及转移.     

生存素反义寡核苷酸对胃癌细胞株SGC-7901生长的影响

目的　观察生存素蛋白在胃癌细胞株SGC 790 1中的表达及转染不同浓度的生存素反义寡核苷酸(ASODN )对胃癌细胞SGC- 790 1生长的影响。方法　采用细胞免疫组织化学染色观察生存素蛋白在胃癌细胞株SGC- 790 1中的表达。将胃癌细胞株SGC 790 1分为8个组:空白对照组,脂质体转染组,2 0 0nmol/L、40 0nmol/L、60 0nmol/L无义链转染组,2 0 0nmol/L、40 0nmol/L、60 0nmol/L反义链转染组,转染48h后,采用四氮唑盐(MTT )比色法,测定各组的细胞生长抑制率,并采用流式细胞仪检测60 0nmol/L无义链转染组、60 0nmol/L反义链转染组细胞的凋亡率以及生存素蛋白表达。结果　显示生存素蛋白在胃癌细胞株SGC- 790 1的胞核和胞质中均有表达,但以胞核为主;各组生存素ASODN对胃癌细胞株SGC- 790 1有明显的抑制作用(P <0 .0 1) ,抑制作用呈浓度依赖性,60 0nmol/L反义链转染组抑制率为最高,达40 .0 % ,流式细胞仪检测表明生存素ASODN有明显的诱导细胞凋亡的作用,定量检测结果显示生存素ASODN可以下调生存素蛋白至8.8% (P <0 .0 1)。结论　不同浓度的生存素ASODN均能通过下调生存素蛋白表达来抑制胃癌细胞株SGC- 790 1的生长。     

人参皂苷CK对胃癌细胞株SGC-7901及其内源性VEGF的影响

目的 研究人参皂苷CK对胃癌SGC-7901细胞增殖、细胞周期的影响及其对内源性分泌的血管内皮细胞生长因子(VEGF)的作用。方法 以50、25、12.5、6.25、3.125、1.5625μg/ml的人参皂苷CK作用于胃癌细胞株SGC-7901,通过MTT法检测人参皂苷CK对细胞的抑制作用;采用流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡;ELISA定量检测细胞培养液中内源性VEGF的含量变化。结果 MTT法显示人参皂苷CK对胃癌细胞株SGC-7901有抑制作用,并且呈浓度、时间依赖关系;SGC 7901细胞经人参皂苷作用后出现明显凋亡峰,且细胞周期被阻滞在G0/G1期;人参皂苷CK处理组VEGF含量低于对照组(P<0.05),高浓度组低于低浓度组(P<0.05),且随着作用时间延长,VEGF含量降低。结论 人参皂苷CK可通过诱导凋亡抑制胃癌细胞株SGC-7901生长,并可抑制SGC 7901细胞内源性分泌VEGF,人参皂苷CK可能成为一种潜在的抗胃癌药物。