TW近交系小鼠的血液生化及毛色基因检测

目的 建立野生来源TW (Tianjin wild,TW)近交系小鼠的体重和血液生化正常范围并检测其毛色基因纯合性.方法 分别选用F23代TW近交系成年小鼠,进行毛色基因测试,并检测动物的体重及血液生化指标.结果 6周龄前,雌雄TW小鼠体重差异无统计学意义(P＜0.05);6周龄后雄性TW小鼠体重明显高于同期雌性小鼠体重,差异具有统计学意义(P＜0.05).血生化检测指标中,雌雄小鼠的总蛋白和甘油三酯均值不同,差异具有统计学意义(P＜0.05),其他各项差异均无统计学意义(P＞0.05),且与文献报道的其他品系结果不一致.毛色基因测试,F1代小鼠的毛色为白腹野生色,其基因型为AWAWBBccDD.结论 TW小鼠毛色基因已达纯合,且在一些指标上与通用实验小鼠品系不同,具有自身特点.     

野生来源TW小鼠近交系培育及其生物学特性的研究

目的　培育中国特有TW (TianjinWild)野生小鼠来源的实验近交小鼠品系 ,筛选其重要的生物学特征 ,丰富现有实验动物基因库。方法　严格按照国际培育近交系动物标准 ,即每代繁育的雌雄小鼠严格按照同胎雌雄 (兄妹 )进行交配。结果　经过 1 2年的精心培育 ,培育TW小鼠至F2 2代 ,其他 1 5地野生小鼠品系均因故中断。结论　该项研究将为丰富国际现有实验小鼠基因库资源 ,建立抗肺肿瘤特性实验小鼠模型动物奠定坚实基础。     

ApoE^-/-；SAP—Tg小鼠模型的构建

目的为研究SAP蛋白在动脉粥样硬化中的作用及机制,拟构建ApoE^-/-;SAP—Tg小鼠模型。方法分别选取6～8周龄的雄性ApoE^-/-小鼠与血清淀粉样蛋白P转基因（SAP—Tg）6周龄的雌性小鼠杂交,得到的杂交后代以剪尾方式提取基因组DNA,用PCR法检测小鼠的基因型。结果雄性ApoE^-/-小鼠与雌性SAP-Tg小鼠杂交得F1代后自交,在F2代获得ApoE^-/-;SAP—Tg基因型小鼠,模型构建成功。结论将ApoE^-/-小鼠与SAP—Tg小鼠杂交2代后成功建立了ApoE^-/-;SAP—Tg小鼠模型,并可通过筛选出的F2代ApoE^-/-小鼠和ApoE^-/-;SAP—Tg小鼠交配进行繁育筛选工作。     

用同类系小鼠抗原对3种H-2抗血清的滴定及比较分析

抗体效价的测定方法,一直是免疫学和医学领域的一个重要问题。本文作者采用微细胞毒法,用11个同类系小鼠品系(其中8个品系为B10背景的同类系),对自制的3种H-2抗血清(33,31,和23)进行了滴定试验,并对结果进行了比较分析。材料方法一、实验动物:各品系的实验小鼠均取自日本实验动物中央研究所育种室的同类系小鼠和近交系小鼠保种群。二、抗血清:用日本实验动物中央研究所育种室提供的同类系小鼠,经免疫后制成3种H-2抗血清: 1.B10.D_2×A/He F_1αB10.A(5R)制得抗血清33。     

“BG_1”系小鼠自发性肿瘤的病理学观察

自发性肿瘤是近交系动物生物学特性的一个重要表现形式,也是采用近交系动物进行肿瘤研究的基本依据。国内外学者在这一研究领域都已进行了大量的工作。尽管已公布的近交系小鼠大约有500种,但采用全同胞兄妹交配的方式培育新的近交系小鼠,仍是肿瘤学家们感兴趣的工作。由于自发性肿瘤受遗传、年龄、性别等条件的限制,所以不同品系小鼠的自发性肿瘤在数量、年龄、性别上差异很大。我们应用我部自己培育的“BG_1”近交系小鼠进行了自发性肿瘤的病理学观察及研究。通过对第50～57代小鼠的追踪观察,并进行病理组织学形态描述与分析,与其它近交系小鼠作了比较,讨论了“BG_1”小鼠自发性肿瘤的特点。     

野生TW近交系小鼠主要生理指标

目的 建立野生来源TW(Tianjin Wild,TW)近交系小鼠的主要生理、血常规等指标.方法 分别选用F28和F29代TW近交系成年雄性小鼠25只,雌性小鼠31只,检测动物的主要生理、血常规指标.结果 TW小鼠体重雌雄差异无显著性,脏器指标中雌雄性比较仅肾脏重量、肾脏系数差异有显著性(P<0.05);血常规检测指标中,雌雄小鼠在WBC、MCV、MCH、PLT、MONO等5项指标的均值比较差异具有显著性,其他各项均无差别.与ICR、KM、NIH及BALB/c等通用实验小鼠指标比较,TW小鼠的脾脏、脾脏系数和血小板均高于或多倍高于这些通用小鼠品系.结论 TW小鼠在一些主要生理指标上与通用实验小鼠品系不同,呈现自身特点.     

建立小鼠异位心脏移植模型

目的:建立小鼠腹腔异位心脏移植模型.方法:选用建康C57近交系小鼠和BALB/c近交系小鼠,参考大鼠心脏移植Ono式模型,并加以改良.同系移植组(n=20)供、受体均采用BALB/c小鼠;同种异品系移植组(n=20)供体为C57近交系小鼠,受体为BALB/c近交系小鼠.结果:成功建立了小鼠腹腔异位心脏移植模型,供心热缺血时间为(0.9±0.05)min,冷缺血时间为(34.8±0.7)min,手术成功率为90%.同系移植组小鼠心脏移植物获得长期存活(＞100 d);同种异品系移植组小鼠心脏移植物存活期为(7.5±0.1)d.结论:提高供心的摘取技术及受体的血管吻合技术是手术成功的关键.     

小鼠乳腺癌细胞4T1对不同品系小鼠乳腺癌模型的影响

目的:将小鼠乳腺癌细胞4T1接种到两种不同品系的小鼠脂肪垫,观察植瘤小鼠的生物学状态、成瘤大小、转移情况以及生存周期等指标,为建立不同品系小鼠的乳腺癌模型提供参考。方法:将小鼠乳腺癌细胞4T1胰酶消化去除上清,用PBS洗两遍,最后用生理盐水调整细胞数量为1×106个,分别接种到裸鼠和BABL/c小鼠的脂肪垫。比较各组老鼠的成瘤率、成瘤时间以及生存期等实验指标。结果:原位注射1×106个4T1细胞时两组均能成瘤,但是裸鼠的成瘤率高于BABL/c小鼠;裸鼠的成瘤大小明显大于BABL/c小鼠;裸鼠的生存期明显短于BABL/c小鼠;裸鼠出现肺转移结节明显多于BABL/c小鼠。结论:不同免疫能力的小鼠对接种相同数量的细胞数可能会产生不同的实验结果,在选择构建小鼠乳腺癌模型的时候一定要综合考虑所选用品系的小鼠是否会对实验结果带来影响。     

ICR/JCL系小鼠白细胞计数和巨噬细胞吞噬功能测定

ICR/JCL系小鼠为国际通用的封闭群小鼠,具有适应性强、体格健壮、繁殖力强、对实验的反应一致等优点,可用于药理、毒理、肿瘤、放射性、食品、生物制品等的科研、生产和教学,是世界上使用最广泛的小鼠品系之一。近几年,该小鼠引进我国后已成为实验研究中常用品系之一。为了解和掌握该品系的正常免疫功能,作者作了白细胞计数和巨噬细胞吞噬功能测定,并与文献报道的其它品系小鼠的材料进行比较分析。材料和方法 1.动物 2月龄ICR/JCL系小鼠30只,由江苏农学院实验动物场提供,体重18～22g,雌雄各半。剖检巨观无病变。 2.检测项目与方法 (1)由鼠尾静脉采血,按常规方法计白细     

人结肠癌动物皮下实体瘤模型的建立

 摘 要：【目的】 建立临床背景清楚的结肠癌动物皮下实体瘤模型,为结肠癌发病机制及治疗策略的研究提供可靠的实验动物模型。【方法】 采用组织块直接移植法将收集到的12例结肠癌组织临床标本移植到免疫缺陷小鼠右侧肩胛皮下,第1-2代用NOD-Scid小鼠;将每个病例的第二代皮下肿瘤,分别连续皮下接种至NOD-Scid小鼠和BALB/C裸小鼠两组动物中,传代至第5代。观察每个病例在两种品系动物的成瘤时间、标本的成瘤率;进行HE染色和CDX-2及 CK20免疫组化检测。【结果】 本实验NOD-Scid小鼠组的第3代和第5代皮下移植瘤的病例成瘤率分别为92%、58%,BALB/C裸小鼠组的分别为75%、50%。病理切片显示肿瘤组织细胞排列成不规则腺体状,有病理性核分裂相。CDX-2、CK20染色呈阳性。【结论】初步建立了临床背景清楚的人结肠癌的NOD-Scid小鼠和BALB/C裸小鼠皮下移植瘤模型,为进一步研究结肠癌发病机理及治疗策略奠定基础。     

用酶释放试验检测小鼠的自然杀伤细胞活性

用乳酸脱氢酶(LDH)释放试验检测小鼠自然杀伤细胞(NK)活性,以YAC-1为靶细胞,小鼠脾细胞为效应细胞,用分光光度计测定受损靶细胞释放的LDH,探讨靶细胞的最适培养时间和浓度,效靶比例和测定时温度的影响。实验证实了小鼠NK活性水平与鼠龄及鼠的品系有关,并观察到非纯化白细胞介素-2(IL-2)与鼠脾细胞体外共育1h对NK活性有增强作用。     

实验动物遗传质量的控制重点在遗传监测

在生物医学研究领域中使用适当品系的实验动物,将可提供最有价值的无外来遗传和环境变异的资料。选供研究的动物,应在微生物学规定的环境中生产,饲以标准化的饲料,具有明确的遗传背景。规定的环境是:执行定期的微生物群落检测,以检定是否出现已知的病原体。遗传学规定的实验动物品系,是指那些已知的发育特性、生化特性、免疫学特性或者其他可遗传的特性已被鉴定的品系。在深入研究或进行验证时,选用遗传学和微生物学上明确的动物就更加重要了。近交系实验动物遗传质量控制须包括:1.每个品系遗传概貌的结构;2.进行常规检测,证明品系和亚品系的遗传概貌是否符合;3.签发品系和亚品     

禽流感H5N1亚型病毒对五个不同品系小鼠致病性的比较

目的 比较了不同遗传背景小鼠对禽流感H5N1亚型病毒的致病敏感性,为H5N1禽流感模型制作和机理研究提供依据.方法 近交系BALB/c、C57BL/6和封闭群ICR、NIH Swiss和KM Swiss共五个不同品系小鼠.每个品系实验动物30只,分接毒组20只,空白对照组10只,每组雌雄各半.病毒株为A/Goose/Guangdong/NH/2003(H5N1),经测定TCID50为10-4.875/mL.接毒组通过鼻腔接种0.1 mL病毒液,对照组接种正常鸡胚尿囊液.小鼠接毒后连续观察14 d,观察记录临床症状、体温、体重变化,对在实验期间死亡和实验14 d结束后仍然存活的小鼠均进行组织器官病理取材,进行RT-PCR病毒分离检测、HE染色及H5N1抗原特异性免疫组化染色.结果 ①临床症状:H5N1禽流感病毒能感染五个品系的小鼠,引起呼吸急促等症状和一过性体重、体温下降.②死亡情况:小鼠在接毒后第1天即出现死亡,死亡的高峰期集中在接毒后第3～6天.五个品系小鼠死亡率存在差异,BALB/c为70%,ICR为50%,NIH Swiss为40%,C57BL/6为25%,KM Swiss为10%;③病毒分离:各组接毒小鼠在死亡后均进行了病毒分离,死亡小鼠的肺脏均分离到病毒,其他脏器未分离到病毒.④病理变化:实验期间五个品系死亡小鼠肺脏病理改变相近.大体观:死亡小鼠肺部淤血,呈暗红色,体积增大,局部肺组织实变.镜下观:死亡小鼠的共同病理改变为间质性肺炎,具体表现为肺泡腔及间质出血、炎性细胞浸润;间质增生,肺泡隔增宽;肺泡腔中见纤维素性渗出,透明膜形成.⑤免疫组化结果:在死亡小鼠的气管上皮细胞和肺巨噬细胞可观察到H5N1禽流感病毒阳性表达.结论 小鼠作为H5N1禽流感病毒模型具有普适性,不同品系小鼠感染鹅源H5N1禽流感病毒的临床症状、病程和病理变化与人禽流感病例相似.不同品系小鼠的死亡比例有明显差别,可以根据不同的实验目的,选择不同品系的小鼠制作H5N1禽流感动物模型.不同品系的遗传特性对禽流感易感性产生明显的影响,遗传背景可能与H5N1禽流感病毒感染应答机理存在联系:BALB/c和C57BL/6均为近交系,其中BALB/c小鼠的品系特征之一表现为干扰素产量低,接种H5N1病毒后表现为高死亡率(70%),而C57BL/6小鼠的干扰素产量高,接种H5N1病毒后表现为低死亡率(25%),提示不同遗传背景小鼠的干扰素水平与H5N1感染致死具相关性.为进一步研究H5N1禽流感病毒易感性相关基因以及其与宿主免疫反应的关系提供了一个研究基础.     

HBV转基因在C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU3小鼠基因组中的整合分析

目的:分析HBV转基因在乙肝转基因小鼠C57 TgN(HBVadr2.0)SMMU"3号"品系基因组中的整合特征.方法:以F6～F17代乙肝转基因小鼠C57 TgN(HBVadr2.0)SMMU为研究对象,采用基因组DNA PCR、Southern印迹和DNA测序的方法,分析HBV转基因在该品系转基因小鼠基因组中的整合特征.结果:PCR分析显示,F6～F17代乙肝转基因小鼠基因组中均已稳定整合了相同拷贝数的HBV转基因,整合的HBV DNA可通过生殖系在世代间稳定遗传.整合在转基因小鼠基因组中的HBV DNA含有HBVpres、s、c、x基因,Southern印迹证实HBV转基因含有全长HBV基因组DNA,DNA测序结果表明,该品系转基因小鼠所整合的转基因为adr亚型的HBV DNA.结论:C57-TgN(HBVadr2.0)SMMU"3号"品系转基因小鼠基因组中均整合有adr亚型的全长HBV基因组DNA,从DNA水平证实该转基因小鼠品系已具备了乙肝实验动物模型的基本条件.     

IL-2对小鼠脾淋巴细胞体内迁移的影响

目的:观察白细胞介素-2(Interleukin-2,IL-2)对淋巴细胞体内迁移的影响.方法:选用近交系小鼠为实验动物,背部剃毛,皮内注射细胞因子,同时尾静脉输注3H-UR标记的淋巴细胞.20h后,切取注射区皮块,制样后测定样品计数率.经计算后将计数率转换成细胞浓度因子(Cell concentration factor,CCF),用CCF值反应淋巴细胞迁移的水平.结果:IL-2注射区淋巴细胞迁移量与对照组无明显差异(P＞0.05),而且IL-2与肿瘤坏死因子-α联合应用时,亦没有协同作用.结论:提示在复杂的体内环境中,IL-2对小鼠脾淋巴细胞体内迁移无明显诱导作用.     

三冬茶—感冒药方的毒理学研究

目的探讨感冒药方毒性试验的方法与结果.方法急性毒性实验:小鼠间隔4小时ig感冒药方2次,观察毒性反应及7天内存活效.长期毒性实验:SD大鼠分别按1.25、2.5、5.0/kg的3个剂量组ig供试品,每天1次,连续ig30天,检查各组指标数据.结果给药后小鼠无异常反应,7d内无1死亡,小鼠对供试品ig给药最大耐受量为33.6g/kg,相当临床用量的971倍;长期毒性实验和动物恢复期,动物无一死亡,外观体征、行为活动、粪便、摄食和体重增长均未见异常;血常规、血液生化学、重要脏器的脏器系数、与正常对照组比较均未见有明显差异.病理组织学检查,高剂量组与对照组均未见有明显异常改变.结论无论急性毒性实验或长期毒性实验,感冒药方无明显毒性.     

一种检测异基因骨髓移植后供体植活的巢式PCR方法

目的　利用BALB C(H - 2Kd)和C5 7BL 6 (H - 2Kb)小鼠H - 2K等位基因不同 ,建立一种检测异基因骨髓移植 (allo -BMT)后供体植活的方法。方法　分别以供鼠 (BALB C)和受鼠 (C5 7BL 6 )及allo -BMT后小鼠骨髓和脾细胞DNA为模板进行巢式PCR ,并用琼脂糖凝胶电泳分析PCR扩增产物。结果　以供鼠和移植后小鼠骨髓和脾细胞DNA行巢式PCR可扩增出约 42 1bp的特异性片段 ,而未经移植的C5 7BL 6小鼠无此条带 ,与预期结果相符。结论　巢式PCR可敏感检测到不同品系小鼠H - 2K基因间的差异 ,可作为异基因骨髓移植后检测异基因是否嵌合的方法     

小鼠IgE抗体生成的免疫调节 Ⅳ.抗卵清蛋白IgE抗体应答的研究

比较了5个纯种品系小鼠、2个远交系封闭群小鼠以及C_57BL/6N与DBA/2杂交第一代小鼠对OA的IgE抗体应答.除NIH小鼠外所有试验品系小鼠对1μgOA和1mgAl(OH)s免疫均未测出初次和二次IgE抗体;当佐剂剂量增至2mg时,LACA小鼠可产生抗OAIgE抗体,特别是5～10μgOA免疫组可诱导出中等水平的IgE抗体应答,二次应答尤较其它品系小鼠明显;NIH小鼠最初实验表现出良好的IgE抗体应答,但个体差异大,重复性欠佳。文中对多数品系小鼠对OA的IgE抗体应答能力较差的原因进行了讨论。     

Rip1-Tag2；PSGL-1-/-小鼠模型的构建

目的 构建Rip1-Tag2；PSGL-1-/-小鼠模型.方法 将Rip1-Tag2小鼠与P-选择素糖蛋白配体敲除(PSGL-1 KO)小鼠杂交,剪尾提DNA后用PCR法检测小鼠的基冈型.结果 Rip1-Tag2小鼠与PSGL-1KO小鼠杂交3代后,Rip1-Tag2；PSGL-1-/-小鼠模型构建成功.结论 将Rip1-Tag2小鼠与PSGL-1 KO小鼠杂交3代后成功建立了Rip1-Tag2；PSGL-1-/-小鼠模型,并进行繁育.     

槲寄生碱的提取纯化及抗肿瘤研究

槲寄生是一种传统中药 ,近年来 ,有学者发现其有抗肿瘤作用 ,我们通过本研究 ,从实验及临床两方面均证实了槲寄生确有抗肿瘤的作用 ,并未发现明显不良反应 ,现报告如下。1　动物实验1 .1　材料和方法1 .1 .1　材料　选用槲寄生 ( Viscum cloratumNakai)为实验材料 ,经化学提取、纯化 ;选用昆明种小鼠为实验动物 ,进行抗肿瘤及抗炎作用研究。1 .1 .2　方法　选用常规实验方法 ,主要从定性方面进行实验 ,先在酸性水溶液中浸泡粉碎后的槲寄生 ,然后再用碱性沉淀的方法提取出生物碱。具体过程 :选择槲寄生→粉碎→在酸性溶液中浸泡 48h→过滤→…