中国山东地区妇女宫颈癌组织中人乳头瘤病毒16E6E7基因 …

目的 分析中国山东地区宫颈癌患者ＨＰＶ１６型Ｅ６Ｅ７基因结构特点。方法 从中国山东地区宫颈癌活检组织中提取ＤＮＡ,经ＨＰＶ多重引物ＰＣＲ法鉴定标准中感染ＨＰＶ型别,选感染ＨＰＶ１６型的标本ＤＮＡ为模板进行ＰＣＲ扩增,获得ＨＰＶ１６Ｅ６Ｅ７基因,将其重组入ｐＡＬＴＥＲ－１载体,进行双向测序、分析。结果 构建了含中国山东地区宫颈癌患者组织中ＨＰＶ１６Ｅ６Ｅ７的重组质粒,命名为ＨＰＶ１６Ｅ６Ｅ７－ＳＤ。     

DIG—DNA探针检测宫颈癌组织中HPV—16的E7转化基因

应用地高辛配基（Ｄｉｇ－１１－ｄＵＴＰ标记人乳头瘤病毒１６型（ＨＰＶ－１６）Ｅ７转化基因作探针，分别检测了宫颈癌活检组织、宫颈炎及正常宫颈脱落细胞ＮＤＡ。其检率为：宫颈癌中４２．１％（２４／５７）、宫颈为中２．５％（１／３９）、正常宫颈中５．５％（１／１８）。宫颈组织中ＨＰＶ－１６Ｅ７转化基因的检出率较高，提示该转化基因与宫颈癌的发生可能密切相关。本研究也证实ＤＩＧ配基标记的Ｅ７基因探针具有特异、     

pEGFP-HPV16E6/E7表达载体的构建及转染角朊细胞的瞬时表达

目的：构建ｐＥＧＦＰ－ＨＰＶ１６Ｅ６／Ｅ７表达载体,观察其在角朊细胞中的瞬时。方法：基因重组技术,基因转染技术。结论 ｐＥＧＦＰ－ＨＰＶ１６Ｅ６／Ｅ７表达载体便于观察,转染细胞中ＨＰＶ１６Ｅ６／Ｅ７－ＧＦＰ融合蛋白的表达民政部及蛋白定位,适用于对ＨＰＶ１６Ｅ６／Ｅ７分子生物学特性及致瘤机理的研究。     

HPV感染在高发区与低发区宫颈癌中的检测

收集宫颈癌高发区湖北省五峰县宫颈癌活检组织２５例、宫颈炎２２例，低发区的宫颈癌活检组织４０例、宫颈炎１５例由湖北医科大学附二医院妇瘤科提供。应用ＧＰ－ＰＣＲ（ｇｅｎｅｒａｌｐｒｉｍｅｒｓ－ＰＣＲ）技术检测多型ＨＰＶ感染，发现宫颈癌高发区阳性率为８８．０％（２２／２５），低发区为８７．５％（３５／４０），宫颈炎高发区为３６．４％（８／２２），低发区为６．７％（１／１５）。同时同一份样品进行ＨＰＶ１６型Ｅ７基因的检测，在宫颈癌高发区中检出率为６０．０％（１５／２５），低发区为５２．５％（２１／４０），宫颈炎中为２２．７％（５／２２），而在低发区宫颈炎中没有检测到ＨＰＶ１６Ｅ７基因。结果表明：ＨＰＶ感染在高发区宫颈炎组织中明显高于低发区，两者差异具有显著性。     

HPV16、HPV18感染及p53蛋白过度表达与肺癌的相关性研究

为研究人乳头瘤病毒１６和１８型（ＨＰＶ１６和ＨＰＶ１８）感染及ｐ５３基因突变与肺癌的关系，应用经病理学证实的肺癌活组织，行聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测癌组织中的ＨＰＶ１６、ＨＰＶ１８；并用ＬＳＡＢ免疫组化法检测相应蜡块标本中ｐ５３蛋白的过度表达。在４８例肺癌组织标本中未检出ＨＰＶ１６、ＨＰＶ１８；ｐ５３蛋白表达呈阳性，阳性率为５４．２％（２６／４８），其中鳞癌６６．７％（１８／２７），腺癌５７．１（４／７），小细胞癌３３．３％（１／３），大细胞癌３３．３％（２／６），类癌２０．０％（１／５）。提示肺癌的发生可能与ＨＰＶ１６、ＨＰＶ１８感染无关，而与ｐ５３基因突变有关，尤以与鳞癌和腺癌关系密切     

宫颈癌组织中HPV16E6的基因克隆及其在大肠杆菌中的表达

目的：进行人乳头瘤病毒１６型相关肿瘤的Ｅ６血清学研究。方法：采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）从宫颈癌组织ＤＮＡ中扩增出ＨＰＶ１６Ｅ６基因片段,克隆至测序质粒ｐＧＥＭ－Ｔ中,并用限制性内切酶将ＨＰＶ１６Ｅ６基因切下,克隆至表达质粒ｐＧＥＭＥＸ－１中,经ＩＰＴＧ诱导表达为融合蛋白,分子量约４５ＫＤ。结果：融合蛋白占菌体总蛋白的２５％,免疫印迹检测表明ＨＰＶ１６Ｅ６融合蛋白能被抗ＨＰＶ１６Ｅ６抗体识别。结论：     

宫颈癌及癌旁组织中人乳头瘤病毒DNA检测

目的：探讨人乳头瘤病毒与宫颈癌及癌旁组织的关系。方法：应用原信ＰＣＲ技术对４４例宫颈癌、１８例癌旁组织及３０例慢性宫颈炎和１５例正常宫颈组织中的ＨＰＶ１６ＤＮＡ和ＨＰＶ１８ＤＮＡ进行检测。结果：４４例宫颈癌组织中在６ＤＮＳ阳性３５例，ＨＰＶ１８ＤＮＡ阳性５例。其中ＨＰＶ１６ＤＮＡ和ＨＰＶ１８ＤＮＡ均阳性４例；ＨＰＶ１８ＤＮＡ阳性而ＨＰＶ１６ＤＮＡ阴性１例；ＨＰＶ１６ＤＮＡ阳性而ＨＰＶ１８ＤＮＡ阴性     

人子宫颈癌中的HPV16E6mRNA,p^53 P^21ras和c—myc蛋白表达

为进一步探讨了子宫颈癌的分子发病机制采用ＰＣＲ，ＩＳＨ和ＩＨＣ方法对５１例子宫颈癌组织的ＨＰＶ１６感染，ＨＰＶ１６Ｅ６ｍＲＮＡ，ｐ＾５３，Ｐ＾２１ｒａｓ和ｃ－ｍｙｃ蛋白表达分布进行了研究。结果表明５１例中有ＨＰＶ１６感染者３８例，ＨＰＶ１６Ｅ６ｍＲＮＡ表达者３５例，其阳性细胞主要分布在高分化癌巢之周边部或中，低分化癌之整个癌巢；     

子宫颈组织中人乳头状瘤病毒的PCR检测

探讨人乳头状瘤病毒１６，１８型感染与慢性宫颈炎，宫颈癌的关系。方法聚合酶链反应技术检测２２例正常宫颈，５５例慢性宫颈炎，３０例宫颈癌的子宫颈组织。正常宫颈组织中ＨＰＶ－１６，１８的检出率均为０．００％，慢性宫颈炎分别为１８．１８％和７．２７％，宫颈癌分别为５６．６７％和３．３３％。统计学处理表明，宫颈癌组织中ＨＰＶ－１６的检出率明显高于宫颈炎组织，而且Ⅲ度宫颈糜烂组织中ＨＰＶ－１６的检出率也较Ⅰ，     

宫颈癌组织中HPV16 E6C基因变异的研究

为探讨ＨＰＶ１６ 肿瘤相关抗原Ｅ６ 羧基端基因片段（Ｅ６Ｃ）在宫颈癌组织中的变异性以及采用Ｅ６Ｃ做为肿瘤治疗性疫苗抗原基因的可行性,采用ＰＣＲ方法自１８ 例单纯ＨＰＶ１６ ＤＮＡ 阳性的宫颈癌组织中扩增ＨＰＶ１６ Ｅ６ＣＤＮＡ,经单链构象多态性分析（ＳＳＣＰ）和ＤＮＡ序列测定法检测其基因变异性。ＳＳＣＰ分析结果显示,１８ 例宫颈癌组织中ＨＰＶ１６ Ｅ６ＣＤＮＡ 电泳条带与标准对照ＤＮＡ 条带一致,提示无基因变异现象存在,ＤＮＡ 序列测定也证实Ｅ６Ｃ编码区内无核苷酸突变。该研究证实采用ＨＰＶ１６ Ｅ６Ｃ端基因片段作为ＨＰＶ疫苗候选基因可行,为进一步研制ＨＰＶ１６ ＤＮＡ 疫苗奠定了基础     

RP-HPLC法测定维生素E霜的含量

目的:测定维生素E霜中维生素E的含量。方法:采用反相高效液相色谱法,色谱柱:D iamonsilTM(钻石)C18柱,流动相:甲醇-氯仿(85∶15),流速:1.0 m l.m in-1,检测波长284 nm,柱温40℃。结果:维生素E的平均回收率为99.79%,方法精密度(RSD)为0.20%(n=6)。结论:该法可用于维生素E霜中维生素E的含量测定。     

M(E)CANISMES MOL(E)CULAIRES IMPLIQU(E)S DANS L''''ALT(E)RATION DU PH(E)NOTYPE DES CELLULES (E)PITHELIAL(E)S TUBULAIRES PAR LES CALPA(I)NES EXTRACELLULAIRES

Objectif Rechercher les mécanismes moléculaires par lesquels des calpaines extracellulaires af-fectent l'adhérence et la mobilité des cellules épithéliales HK-2 dérivées du tubule proximal humain. Méthodes Western blot pour détecter le clivage des chaines α des intégrines; dosage radioimmunologique pour mesurer l' AMP cyclique intracellulaire; fluorescence-activated cell sorting (FACS) pour tester l' apoptose cellulaire. La morpholo-gie des cellules HK-2 a été observée et photographiée. Résultats (1) L ' exposition des cellules HK-2 à la calpaine μ n'a pas entrainé de clivage des chaines o3 et αV des intégrines; (2)l' exposition des cellules HK-2 à la calpaine μ entrainait une augmentation progressive de l' accumulation intracellulaire d' AMP cyclique (P<0.05) qui était associée une résistance cellulaire à l'apoptose(P <0. 05 ) ; (3)l'addition d'un inhibiteur pharmacologique de la protéine kinase A(PKA) prévenait totalement les modifications d'adhérence et de mobilité cellulaires induites par calpaine μ Conclusion Les calpaines externalisées peuvent modifier l' adherence et la mobilité cellulaires via un mécanisme qui implique l'accumulation d' AMP cyclique et l' activation de la PKA. Par ces mécanismes, les calpaines externalisées pourraient jouer un role dans l'induction de la réparation au cours de l'insuffucance rénale aiguё.     

纽邦 E100i, E200呼吸机的使用与保养及 C200Ⅰ空压机的改进

为了延长呼吸机的使用寿命 , 避免昂贵的大修 , 良好的维护保养措施是相当重要的 , 本文讨论了上述问题 .     

E化婚姻

热恋中的情人,一旦结为夫妻,生活从浪漫的温情转至实实在在、酸甜苦辣,新的矛盾时刻都会产生,调整婚姻成为围城中的重头戏之一,令人伤透脑筋。而身处网络飞速发展的现今时代,许多人对调整婚姻已有更新颖的认识,他们将围城中的感情交流融入了“网”文化,让它贴切而诙谐地为婚姻添色加彩。于是,生活的压力、尴尬的处境均经过E化处理后转化成了幽默和轻松,干戈变为了玉帛,争吵变为了笑谈,家庭关系变得幸福和睦。     

DETECTION DE LA MUTATION DU GENE HMLH1 DANS LE CANCER COLO-RECTAL PARELECTROPHORESE CAPILAILRE ASSOCIEE A LA FLUORESCENCE LASER-INDUITE

Objectif L'objectif de ce travail est d'etablir une methode d'analyse du polymorphisms de la conformation monochaine (PCMC) , capable de detecter la mutation ponctuelle du gene hMLHI dans le cancer colique en utilisant l'l ctrophor se capillaire associee a la fluorescence laser-induite (FLJ-EC). Methodes Les exons 12 du gene hMLHl du sang peripherique de 42 patients de cancer colo-rectal sporadique et 20 sujets sains temoins sont amplifies par la PCR. Le PCMC des produits du PCR est analyse par FLJ-EC. Les echantillons anor-maux ont ete confirmes par sequen age EC. Les effets de la concentration du milieu (LPA) , de la temperature de separationcet du voltage de separation sur le comportement de EC ont ete aussi studies. Resultats L'analyse de PCMC par la methode FLJ-EC a retrouve une mutation heterozygote chez 4 des 42 patients. La mutation ponctuelle de T1151A a ete objectivee par la sequen age EC de ces echantillons, aucune mutation n'a ete retrouvee chez les 20 sujets sains temoins. La separation des pics d'ADN monochainaux a ete facilitee par une legere augmentation de la concentration de LPA (4%-6% ) , une legere baisse de la temperature de separation (20℃) et une legere elevation du voltage de separation (9kV). Conclusion Une concentration adequate de LPA, une temperature de separation appropriee et un voltage de separation bien approprie ameliorent considerablement l'efficacite du FLJ-EC. L'application de cette methode pour detecter la mutation ponctuelle du gene hMLHl est d'une rapidite, d'une efficacite, et d'uneereproductivit consid rabies. Cette methode de realisation facile reste tres prometteur pour le depistage rapide et massive des mutations genetiques.     

气相色谱法测定维生素E微乳中维生素E的含量

维生素Ｅ微乳由维生素Ｅ，吐温－８０，甘油及水组成，通过绘制相图筛选最佳配方及制备工艺，采用气相色谱法测定微乳中维生素Ｅ的含量，以３％ＯＶ－１７为固定相，８０￣１００目１０１担体，柱温为２６５℃，以三十二烷为内标，线性范围为０．４￣２．０ｍｇ相关系数为０．９９５２，平均回收率为１０１．８％，ＲＳＤ＝０．１％。     

自拟戊肝合剂治疗散发性戊型病毒性肝炎50例

自拟戊肝合剂治疗散发性戊型病毒性肝炎 5 0例 ,治疗 1个月痊愈率达 84 % ;总有效率为1 0 0 % ,与对照组疗效有显著性差异。其具有清肝利胆、泻下退黄、凉血解毒之效 ,能调整免疫功能 ,抑制戊肝病毒 ,消除胆道炎症 ,排除病毒产物 ,促进肝细胞新陈代谢 ,有利于缩短疗程 ,提高治愈率