使用聚合酶链反应检测HCV—RNA

对122例非甲非乙肝病人采用PCR技术进行了HCV—RNA的检测，并同时采用ELISA法桂测了HCVM作为对比，结果：其中HCV—RNA的阳性率为95.1％(116例),HCVM阳性率为79．5％(97例)．结果表明：PCR技术用于检测HCV—RNA方法简便、可靠、敏感性高．     

反转录原位聚合酶链反应的建立及用于肝癌组织切片细胞内HCV RNA的检测

反转录原位聚合酶链反应的建立及用于肝癌组织切片细胞内ＨＣＶＲＮＡ的检测褚桂珍，蒋明德，曾维政，张建华，陈泰庆，邓桂英，楚人俊，张大华（成都军区总医院消化内科，成都６１００８３）我们建立了ＩＳＰＣＲ技术，并对２７例ＨＣＣ组织切片进行ＨＣＶＲＮＡ的检测，...     

用少量细胞直接进行聚合酶链反应

基本原理 聚合酶链反应(Polymerase Chain Re-action,PCR)是体外扩增DNA片段的分子生物学技术,目前在基础医学和临床上已有广泛应用。PCR反应要求有一定量的DNA作模板,模板DNA制备方法很多,例如酚-氯仿抽提纯化法;改进的盐析法;DNA粗制品的快速制备法等等。按以上方法制备的DNA作为模板都能得到满意的扩增产物。然而当细胞或组织样品量太少,不能按常规     

用原位聚合酶链反应检测尖锐湿疣中人乳头瘤病毒DNA

用原位聚合酶链反应检测尖锐湿疣中人乳头瘤病毒ＤＮＡ郭华阳周来新汪江华刘斌刘盛华黄松生吴沾芬尖锐湿疣（ＣＡ）是由人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）感染引起的最常见的性传播疾病之一，治疗后容易复发。由于ＨＰＶ的抗原性差或拷贝数低，免疫细胞化学和核酸分子杂交对ＣＡ中的...     

用聚合酶链反应检测泪液中乙肝病毒DNA

用聚合酶链反应检测泪液中乙肝病毒ＤＮＡ［英］／ＳｕＣＳ…／／Ａ，ｏｈＯＰｈｔｈａｌｍｏｌ．－１９９４；１２０．－６２１～６２５目的对乙肝病毒经泪液传染的可能性进行评价。对象和方法用聚合酶链反应（ＰＣＲ）对３６例乙肝病毒携带者的泪液和血浆标本进行乙肝病...     

应用聚合酶链反应技术检测肝组织中的HBV－DNA

采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，对４２例肝活切组织石蜡切片中乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ进行检测，并与乙肝表面抗原（ＨＢｓＡｇ）的免疫组织化学及血清学检测进行比较，ＨＢＶ－ＰＣＲ阳性率为７３．８％，高于组织及血清ＨＢｓＡｇ阳性率（分别为５９．５％和５０．０％）。３例病理形态呈肝炎改变，而血清ＨＢｓＡｇ（─）的肝组织中有２例检出ＨＢＶ－ＤＮＡ，提示ＰＣＲ的高度敏感性和准确性。８３．３％的门脉性肝硬变和８７．５％的肝细胞癌组织中ＨＢＶ－ＰＣＲ呈阳性，进一步证实了上述两病与ＨＢＶ的关系密切。我们还发现肝细胞淤胆患者ＨＢＶ感染率较高，ＨＢＶ－ＤＮＡ及组织ＨＢｓＡｇ阳性比例各为６／９和４／８。     

聚合酶链反应检测石蜡包埋组织中TORCH感染

本文应用聚合酶链反应检测98例福尔马林固定、石蜡包理组织中TOX、CMV、HSV-I DNA，阳隆率分别为17.24％、23．47％、10．20％。提示TOX、CMV、HSV-T惑染与胎儿畸形、死亡密切相关。本文指出该方法简便、快速，可有效地用于临床陈旧标本的回顾性研究。     

酶联免疫法检测PAF受体RNA的聚合酶链反应产物

目的：建立PCR—ELISA法检测附受体RNA。方法：提取20例银屑病病人和20例正常对照组血液单个核细胞标本中的总RNA，用双标记的PAF—R(Biotion与Digoxin标记)及β-actin(Biotin或Fluorescein标记)引物进行RT-PCR，用ELISA检测PCR产物，用传统的琼脂糖凝胶电泳对照。结果；ELISA法和琼脂糖凝胶电泳法对β-actin检测结果均为阳性；ELISA法检测PAF-R，20例病人标本均为阳性，20例对照组16例阳性；琼脂糖凝胶电泳法检测PAF—R，20例病人标本18例阳性，20例对照组16例阳性。结论：PCR-ELISA引物双标记法检测PAF—R操作简单，有较高的敏感性。     

用聚合酶链反应检测浓缩河水中甲型肝炎病毒

用聚合酶链反应检测浓缩河水中甲型肝炎病毒［英］／ＭｏｒａｃｅＧ…ＺｅｎｔｒａｌｂｌＨｙｇＵｍｗｅｌｔｍｅｄ．－１９９３，１９３（６）－５２１～５２７检测环境样本中甲型肝炎病毒（ＨＡＶ）需要敏感而特异的技术。本文报道用聚合酶链反应（ＰＣＲ法）检测浓缩的...     

用聚合酶链反应检测乙型肝炎病毒DNA

我们采用聚合酶链反应(ＰＣＲ)技术检测乙型肝炎患者血清乙型肝炎病毒(ＨＢＶ)ＤＮＡ,并用酶标法检测ＨＢＶＭ,从乙型肝炎临床分型和实验室ＨＢＶＭ分组两个角度时行回顾性比较与分析。1　材料和方法1.1　病例选择　168例乙型肝炎病例均来自嘉兴市第二医院和协作单位住院病人,全部检测过ＨＢＶＤＮＡ和ＨＢＶＭ,男106例,女62例;年龄4～71岁,平均35.4岁。其中急性乙型肝炎26例,慢性乙型肝炎72例,重型肝炎9例,淤胆型肝炎24例,肝炎后肝硬化37例。诊断标准依据1995年北京第五次全国传染病寄生虫病学术会议修订的病毒性肝炎诊断标准。1.2　试剂和…     

聚合酶链反应检测心肌炎石蜡包埋组织柯萨奇病毒B3RNA

报道从心肌炎石蜡包埋组织单一切片(6～8μm)中提取RNA,使用定位于柯萨奇病毒B_3特异编码区(VP_1)的一对引物、通过聚合酶链反应(PCR)进行基因扩增。对PCR扩增产物,采用3′末端生物素标记的柯萨奇病毒B_3的特异寡核苷酸探针进行斑点杂交。结果表明,两例检查的心肌炎标本都是柯萨奇病毒B_3感染引起的病毒性心肌炎。本实验说明,从石蜡包埋的组织标本中提取RNA,进行PCR检测是可行的,为临床病理进行分子生物学研究开辟了一条新途径。     

用聚合酶链反应检测食管癌组织中人乳头瘤病毒DNA

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对汕头市区６８例食管癌的石蜡包埋标本进行人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）ＤＮＡ序列检测，结果显示，ＨＰＶＤＮＡ总阳性率为６６．１８％（４５／６８），检出型别主要为ＨＰＶ６、１１、１６，检出率分别为２７．９４％、３６．７６％和２７．９４％，经统计学处理三型间无显著性差异；ＨＰＶ－１８及未定型别各占８．８２％。值得注意的是ＨＰＶ感染中多重感染占阳性病例的５３．３３％（２４／４５）。初步结果表明，汕头市食管癌高发区有较高的ＨＰＶ感染率，此与食管癌的发生，可能有密切关系。     

聚合酶链反应检测流感嗜血杆菌

以一对来自编码流感嗜血杆菌（Ｈｉ）外膜蛋白Ｐ６的基因序列的引物，用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增Ｈｉ各血清型标准菌株及３０株临床分离菌株，均获阳性结果。而７种对照菌扩增结果均为阴性。用ＰＣＲ反应后琼脂糖凝胶电泳检测的方法，由蒸馏水稀释的菌液及鼻咽深部分泌物模拟标本中分别至少可以检测到３～５个及５０个Ｈｉ菌体。对４０例肺炎患儿鼻咽深部分泌物进行Ｈｉ检测，结果２０例ＰＣＲ阳性，其中１７例培养也阳性。本文作者还首次用ＰＣＲ法从６例肺炎患儿尿标本中检测到了Ｈｉ。研究表明，ＰＣＲ可用于Ｈｉ的检测，该方法敏感、特异、简便、快速，具有良好的应用前景。     

用聚合酶链反应检测人肝细胞癌乙型肝炎病毒DNA和丙型肝炎病毒RNA

为研究乙型肝炎病毒ＤＮＡ（ＨＢＶＤＮＡ）和丙型肝炎病毒ＲＮＡ（ＨＣＶＤＮＡ）与肝细胞癌的关系，用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和巢式ＰＣＲ（ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ）分别检测４２例肝肿瘤组织中ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ。结果：１例胆管细胞癌组织ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ均阳性，１例胆管囊腺瘤ＨＢＶＤＮＡ阳性。４０例肝细胞癌组织中，单纯ＨＢＶＤＮＡ阳性１９例，单纯ＨＣＶＲＮＡ阳性３例，二者均阳性１０例。ＨＢＶＤＮＡ阳性率７２．５％，ＨＣＶＲＮＡ阳性率３２．５％。ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ感染与肝癌组织学分型无关；且肝细胞癌中ＨＣＶ感染与ＨＢＶ未见相关。结果提示，我国ＨＢＶ感染仍是引起肝细胞癌的主要原因。但由于肝细胞癌患者中ＨＣＶ的感染率也较高，且有上升趋势，因此ＨＣＶ可能也是肝细胞癌发生的重要原因之一。     

DNA聚合酶链反应检测畸形儿心肌组织中弓形虫的研究

孕妇感染弓形虫是胎儿先天性畸形的危险因素。本文运用被称之为ＤＮＡ聚合酶链反应的体外基因扩增技术检测３０例先天性畸形儿尸检石蜡包埋心肌组织弓形虫。结果表明，３０例先天性畸形儿石蜡心肌组织切片经体外扩增后出现阳性条带者１３例，而对照组（１０例）无一例阳性（０．０５＞Ｐ＞０．０１）。研究结果进一步支持弓形虫的感染与胎儿先天性畸形有密切关系，本文还讨论了聚合酶链反应技术与其它最新技术比较，聚合酶链反应技术具有微量、特异性强、敏感度高、反应周期短、操作简便，对长期保存并已消失感染性的样品也有效等优点，适应于临床推广。     

聚合酶链反应法检测结核菌及小RNA病毒阳性对照物的选择

应用聚合酶链反应(ＰＣＲ)法对病原体进行检测时,往往需要病原体菌株或含有病原体的标本作为阳性对照物。过去我们曾使用结核菌株和开放性肺结核患者的痰液作为检测结核菌的阳性对照物;使用脊髓灰质炎病毒株作为检测小ＲＮＡ病毒的阳性对照物。这几种对照物存在着一些缺点,因此,经过探索,我们分别以卡介苗和脊髓灰质炎疫苗代替上述对照物,取得了较好的效果。一、方法将冻干卡介苗一支以1ｍｌ蒸馏水溶解,移至2ｍｌ的塑料离心管内,放入沸水中加热10ｍｉｎ灭活,可按1∶50～1∶100稀释,-18℃保存。扩增时向反应体系内加入3μｌ即可。同时提取并…     

应用通用引物聚合酶链反应技术检测结肠癌组织中…

应用人乳头瘤病毒通用引物介导的聚合酶反应技术检测了１５例结肠癌石蜡包埋病理组织切片中ＨＰＶＤＮＡ，其中１０例呈阳性扩增。１２例正常结肠组织经上述ＰＣＲ检测均呈阴性反应。阳性扩增产物经核酸斑点杂交进行ＨＰＶ型别分析，ＨＰＶ１６型占４例，１８例１例，１６／１８型５例，未检出其他ＨＰＶ型别。表明ＨＰＶ可能对结肠癌的发生具有病原相关性。     

聚合酶链反应杂交ELISA对肝炎患者血清HCV RNA的测定和分析

目的 应用丙型肝炎病毒（HCV）聚合酶链反应杂交酶联法（HCV－PCR－H ELISA）152份各型肝炎血清进行HCV RNA测定和分析。方法 利用标记生物素的寡核苷酸引物对患者血清进行PCR扩增,扩增产物与结合在微孔反应板的HCV特异探针快速杂交,通过抗生物素－酶联反应判定结果。结果 152份肝炎患者中,HCV RNA的检出率为57．9％（88／152）,其中抗－HCV阳性组的检出率为81．8％（72／88）。抗－HCV与HCV RNA的总符合率为78．9％（120／152）。对5例丙型肝炎患者应用α干扰素治疗者追访显示,HCVRNA的消长与抗病毒药物疗效一致。结论 HCV－PCR－H ELISA方法简便、稳定、敏感、特异,为半定量指标,可应用于HCV感染的临床诊断和抗病毒药物疗效判定。