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何敏东 《现代临床医学生物工程学杂志》1997,3(1):48-48,50
对122例非甲非乙肝病人采用PCR技术进行了HCV—RNA的检测,并同时采用ELISA法桂测了HCVM作为对比,结果:其中HCV—RNA的阳性率为95.1%(116例),HCVM阳性率为79.5%(97例).结果表明:PCR技术用于检测HCV—RNA方法简便、可靠、敏感性高. 相似文献
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用少量细胞直接进行聚合酶链反应 总被引:2,自引:1,他引:1
基本原理 聚合酶链反应(Polymerase Chain Re-action,PCR)是体外扩增DNA片段的分子生物学技术,目前在基础医学和临床上已有广泛应用。PCR反应要求有一定量的DNA作模板,模板DNA制备方法很多,例如酚-氯仿抽提纯化法;改进的盐析法;DNA粗制品的快速制备法等等。按以上方法制备的DNA作为模板都能得到满意的扩增产物。然而当细胞或组织样品量太少,不能按常规 相似文献
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用原位聚合酶链反应检测尖锐湿疣中人乳头瘤病毒DNA郭华阳周来新汪江华刘斌刘盛华黄松生吴沾芬尖锐湿疣(CA)是由人乳头瘤病毒(HPV)感染引起的最常见的性传播疾病之一,治疗后容易复发。由于HPV的抗原性差或拷贝数低,免疫细胞化学和核酸分子杂交对CA中的... 相似文献
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用聚合酶链反应检测泪液中乙肝病毒DNA[英]/SuCS…//A,ohOPhthalmol.-1994;120.-621~625目的对乙肝病毒经泪液传染的可能性进行评价。对象和方法用聚合酶链反应(PCR)对36例乙肝病毒携带者的泪液和血浆标本进行乙肝病... 相似文献
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采用聚合酶链反应(PCR)技术,对42例肝活切组织石蜡切片中乙型肝炎病毒(HBV)DNA进行检测,并与乙肝表面抗原(HBsAg)的免疫组织化学及血清学检测进行比较,HBV-PCR阳性率为73.8%,高于组织及血清HBsAg阳性率(分别为59.5%和50.0%)。3例病理形态呈肝炎改变,而血清HBsAg(─)的肝组织中有2例检出HBV-DNA,提示PCR的高度敏感性和准确性。83.3%的门脉性肝硬变和87.5%的肝细胞癌组织中HBV-PCR呈阳性,进一步证实了上述两病与HBV的关系密切。我们还发现肝细胞淤胆患者HBV感染率较高,HBV-DNA及组织HBsAg阳性比例各为6/9和4/8。 相似文献
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聚合酶链反应检测石蜡包埋组织中TORCH感染 总被引:4,自引:1,他引:3
本文应用聚合酶链反应检测98例福尔马林固定、石蜡包理组织中TOX、CMV、HSV-I DNA,阳隆率分别为17.24%、23.47%、10.20%。提示TOX、CMV、HSV-T惑染与胎儿畸形、死亡密切相关。本文指出该方法简便、快速,可有效地用于临床陈旧标本的回顾性研究。 相似文献
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目的:建立PCR—ELISA法检测附受体RNA。方法:提取20例银屑病病人和20例正常对照组血液单个核细胞标本中的总RNA,用双标记的PAF—R(Biotion与Digoxin标记)及β-actin(Biotin或Fluorescein标记)引物进行RT-PCR,用ELISA检测PCR产物,用传统的琼脂糖凝胶电泳对照。结果;ELISA法和琼脂糖凝胶电泳法对β-actin检测结果均为阳性;ELISA法检测PAF-R,20例病人标本均为阳性,20例对照组16例阳性;琼脂糖凝胶电泳法检测PAF—R,20例病人标本18例阳性,20例对照组16例阳性。结论:PCR-ELISA引物双标记法检测PAF—R操作简单,有较高的敏感性。 相似文献
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《国外医学:病毒学分册》1995,(4)
用聚合酶链反应检测浓缩河水中甲型肝炎病毒[英]/MoraceG…ZentralblHygUmweltmed.-1993,193(6)-521~527检测环境样本中甲型肝炎病毒(HAV)需要敏感而特异的技术。本文报道用聚合酶链反应(PCR法)检测浓缩的... 相似文献
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用聚合酶链反应检测乙型肝炎病毒DNA 总被引:1,自引:0,他引:1
我们采用聚合酶链反应(PCR)技术检测乙型肝炎患者血清乙型肝炎病毒(HBV)DNA,并用酶标法检测HBVM,从乙型肝炎临床分型和实验室HBVM分组两个角度时行回顾性比较与分析。1 材料和方法1.1 病例选择 168例乙型肝炎病例均来自嘉兴市第二医院和协作单位住院病人,全部检测过HBVDNA和HBVM,男106例,女62例;年龄4~71岁,平均35.4岁。其中急性乙型肝炎26例,慢性乙型肝炎72例,重型肝炎9例,淤胆型肝炎24例,肝炎后肝硬化37例。诊断标准依据1995年北京第五次全国传染病寄生虫病学术会议修订的病毒性肝炎诊断标准。1.2 试剂和… 相似文献
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聚合酶链反应检测心肌炎石蜡包埋组织柯萨奇病毒B3RNA 总被引:2,自引:0,他引:2
报道从心肌炎石蜡包埋组织单一切片(6~8μm)中提取RNA,使用定位于柯萨奇病毒B_3特异编码区(VP_1)的一对引物、通过聚合酶链反应(PCR)进行基因扩增。对PCR扩增产物,采用3′末端生物素标记的柯萨奇病毒B_3的特异寡核苷酸探针进行斑点杂交。结果表明,两例检查的心肌炎标本都是柯萨奇病毒B_3感染引起的病毒性心肌炎。本实验说明,从石蜡包埋的组织标本中提取RNA,进行PCR检测是可行的,为临床病理进行分子生物学研究开辟了一条新途径。 相似文献
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用聚合酶链反应检测食管癌组织中人乳头瘤病毒DNA 总被引:9,自引:1,他引:9
应用聚合酶链反应(PCR)技术对汕头市区68例食管癌的石蜡包埋标本进行人乳头瘤病毒(HPV)DNA序列检测,结果显示,HPVDNA总阳性率为66.18%(45/68),检出型别主要为HPV6、11、16,检出率分别为27.94%、36.76%和27.94%,经统计学处理三型间无显著性差异;HPV-18及未定型别各占8.82%。值得注意的是HPV感染中多重感染占阳性病例的53.33%(24/45)。初步结果表明,汕头市食管癌高发区有较高的HPV感染率,此与食管癌的发生,可能有密切关系。 相似文献
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聚合酶链反应检测流感嗜血杆菌 总被引:6,自引:0,他引:6
以一对来自编码流感嗜血杆菌(Hi)外膜蛋白P6的基因序列的引物,用聚合酶链反应(PCR)扩增Hi各血清型标准菌株及30株临床分离菌株,均获阳性结果。而7种对照菌扩增结果均为阴性。用PCR反应后琼脂糖凝胶电泳检测的方法,由蒸馏水稀释的菌液及鼻咽深部分泌物模拟标本中分别至少可以检测到3~5个及50个Hi菌体。对40例肺炎患儿鼻咽深部分泌物进行Hi检测,结果20例PCR阳性,其中17例培养也阳性。本文作者还首次用PCR法从6例肺炎患儿尿标本中检测到了Hi。研究表明,PCR可用于Hi的检测,该方法敏感、特异、简便、快速,具有良好的应用前景。 相似文献
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用聚合酶链反应检测人肝细胞癌乙型肝炎病毒DNA和丙型肝炎病毒RNA 总被引:1,自引:1,他引:1
为研究乙型肝炎病毒DNA(HBVDNA)和丙型肝炎病毒RNA(HCVDNA)与肝细胞癌的关系,用聚合酶链反应(PCR)和巢式PCR(nested-PCR)分别检测42例肝肿瘤组织中HBVDNA和HCVRNA。结果:1例胆管细胞癌组织HBVDNA和HCVRNA均阳性,1例胆管囊腺瘤HBVDNA阳性。40例肝细胞癌组织中,单纯HBVDNA阳性19例,单纯HCVRNA阳性3例,二者均阳性10例。HBVDNA阳性率72.5%,HCVRNA阳性率32.5%。HBVDNA和HCVRNA感染与肝癌组织学分型无关;且肝细胞癌中HCV感染与HBV未见相关。结果提示,我国HBV感染仍是引起肝细胞癌的主要原因。但由于肝细胞癌患者中HCV的感染率也较高,且有上升趋势,因此HCV可能也是肝细胞癌发生的重要原因之一。 相似文献
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孕妇感染弓形虫是胎儿先天性畸形的危险因素。本文运用被称之为DNA聚合酶链反应的体外基因扩增技术检测30例先天性畸形儿尸检石蜡包埋心肌组织弓形虫。结果表明,30例先天性畸形儿石蜡心肌组织切片经体外扩增后出现阳性条带者13例,而对照组(10例)无一例阳性(0.05>P>0.01)。研究结果进一步支持弓形虫的感染与胎儿先天性畸形有密切关系,本文还讨论了聚合酶链反应技术与其它最新技术比较,聚合酶链反应技术具有微量、特异性强、敏感度高、反应周期短、操作简便,对长期保存并已消失感染性的样品也有效等优点,适应于临床推广。 相似文献
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应用聚合酶链反应(PCR)法对病原体进行检测时,往往需要病原体菌株或含有病原体的标本作为阳性对照物。过去我们曾使用结核菌株和开放性肺结核患者的痰液作为检测结核菌的阳性对照物;使用脊髓灰质炎病毒株作为检测小RNA病毒的阳性对照物。这几种对照物存在着一些缺点,因此,经过探索,我们分别以卡介苗和脊髓灰质炎疫苗代替上述对照物,取得了较好的效果。一、方法将冻干卡介苗一支以1ml蒸馏水溶解,移至2ml的塑料离心管内,放入沸水中加热10min灭活,可按1∶50~1∶100稀释,-18℃保存。扩增时向反应体系内加入3μl即可。同时提取并… 相似文献
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应用通用引物聚合酶链反应技术检测结肠癌组织中… 总被引:2,自引:0,他引:2
应用人乳头瘤病毒通用引物介导的聚合酶反应技术检测了15例结肠癌石蜡包埋病理组织切片中HPVDNA,其中10例呈阳性扩增。12例正常结肠组织经上述PCR检测均呈阴性反应。阳性扩增产物经核酸斑点杂交进行HPV型别分析,HPV16型占4例,18例1例,16/18型5例,未检出其他HPV型别。表明HPV可能对结肠癌的发生具有病原相关性。 相似文献
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目的 应用丙型肝炎病毒(HCV)聚合酶链反应杂交酶联法(HCV-PCR-H ELISA)152份各型肝炎血清进行HCV RNA测定和分析。方法 利用标记生物素的寡核苷酸引物对患者血清进行PCR扩增,扩增产物与结合在微孔反应板的HCV特异探针快速杂交,通过抗生物素-酶联反应判定结果。结果 152份肝炎患者中,HCV RNA的检出率为57.9%(88/152),其中抗-HCV阳性组的检出率为81.8%(72/88)。抗-HCV与HCV RNA的总符合率为78.9%(120/152)。对5例丙型肝炎患者应用α干扰素治疗者追访显示,HCVRNA的消长与抗病毒药物疗效一致。结论 HCV-PCR-H ELISA方法简便、稳定、敏感、特异,为半定量指标,可应用于HCV感染的临床诊断和抗病毒药物疗效判定。 相似文献