The protective action of the Flastem milkvetch seed extract on the genetic damage in bone marrow lymphocytes induced by mitomycin C in mice

目的:探讨沙苑子提取物(Flastem milkvetch seed extract,FMSE)对丝裂霉素C(mitomycin C,MMC)诱导的小鼠骨髓细胞遗传损伤的保护作用.方法:将100只昆明小鼠随机分成5组,每组20只.试验分为正常对照组(生理盐水),模型组(MMC,2.0mg/kg),FMSE低(20 mg/kg)、中(40 mg/kg)、高(80 mg/kg)剂量组.灌胃给药,连续10 d,每天1次.末次灌胃前12h,除正常对照组腹腔注射等体积生理盐水外,其余各组均腹腔注射MMC (2.0 mg/kg).用药结束后,脱颈椎处死小鼠,制备小鼠骨髓细胞悬液,应用彗星电泳、嗜多染红细胞微核形成、骨髓淋巴细胞染色体畸变和有丝分裂指数试验,检测FMSE对MMC所诱导的小鼠骨髓细胞遗传损伤的保护作用.结果:与正常对照组比较,模型组中MMC单独作用时可造成小鼠骨髓淋巴细胞拖尾率及平均尾长、微核率和染色体畸变率显著增加(P均＜0.01),有丝分裂指数显著降低(P＜0.01).而FMSE低、中、高剂量组与MMC联合作用时,与模型组比较,小鼠骨髓淋巴细胞拖尾率及平均尾长、微核率和染色体畸变率显著降低(P均＜0.01),有丝分裂指数显著提高(P＜0.01).结论:FMSE对MMC诱导的小鼠骨髓细胞遗传损伤有明显的保护作用.     

沙苑子提取物对丝裂霉素C致小鼠骨髓细胞遗传损伤的保护作用

目的:探讨沙苑子提取物(Flastem milkvetch seed extract,FMSE)对丝裂霉素C(mitomycin C,MMC)诱导的小鼠骨髓细胞遗传损伤的保护作用。方法:将100只昆明小鼠随机分成5组,每组20只。试验分为正常对照组(生理盐水),模型组(MMC,2.0mg/kg),FMSE低(20mg/kg、中(40mg/kg)、高(80mg/kg)剂量组。灌胃给药,连续10 d,每天1次。末次灌胃前12 h,除正常对照组腹腔注射等体积生理盐水外,其余各组均腹腔注射MMC(2.0 mg/kg)。用药结束后,脱颈椎处死小鼠,制备小鼠骨髓细胞悬液,应用彗星电泳、嗜多染红细胞微核形成、骨髓淋巴细胞染色体畸变和有丝分裂指数试验,检测FMSE对MMC所诱导的小鼠骨髓细胞遗传损伤的保护作用。结果:与正常对照组比较,模型组中MMC单独作用时可造成小鼠骨髓淋巴细胞拖尾率及平均尾长、微核率和染色体畸变率显著增加(P均<0.01),有丝分裂指数显著降低(P<0.01)。而FMSE低、中、高剂量组与MMC联合作用时,与模型组比较,小鼠骨髓淋巴细胞拖尾率及平均尾长、微核率和染色体畸变率显著降低(P均<0.01),有丝分裂指数显著提高(P<0.01),。结论:FMSE对MMC诱导的小鼠骨髓细胞遗传损伤有明显的保护作用。     

海藻多糖对γ-射线诱发的小鼠微核形成率的影响

目的: 观察海藻多糖(PS)的抗辐射效应.方法:观察PS对60Coγ-射线诱发的小鼠外周血淋巴细胞及骨髓嗜多染红细胞微核率的影响.结果:小鼠接受2 Gyγ-射线照射后,外周血淋巴细胞及骨髓嗜多染红细胞微核率明显升高(P＜0.01);20 mg/kg*bw及40mg/kg*bw剂量的PS能使照射小鼠外周血淋巴细胞微核率明显降低(P<0.05); 10 mg/kg*bw、20 mg/kg*bw及40 mg/kg*bw剂量的PS能使照射小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率明显降低(P＜0.05).结论:PS对γ-射线诱发的染色体损伤有明显的保护作用.     

绞股蓝提取物对衰老大鼠DNA损伤的影响

背景与目的探讨绞股蓝提取物对衰老大鼠DNA氧化及烷化损伤的影响。材料与方法成年大鼠颈背部皮下注射D-半乳糖100mg/kg构建衰老动物模型,同时设注射等量生理盐水的正常对照组。已建模的大鼠分为人工合成饲料中添加不同剂量的绞股蓝提取物(200、800、4000mg/kg饲料)及维生素E、C(VE C)各组,8周后采血获取淋巴细胞,用单细胞凝胶电泳法检测淋巴细胞DNA自发损伤及H2O2诱导的氧化损伤;实验结束前1周留取大鼠24h尿液,通过毛细管电泳法检测大鼠尿中O6-甲基鸟嘌呤(O6-MeG)的含量。结果各组大鼠淋巴细胞DNA自发损伤无明显差异(P>0.05)。分别采用5、10和25μmol/LH2O2氧化时,绞股蓝各组及维生素E、C(VE C)组DNA氧化损伤均明显低于衰老对照组(P<0.05),且绞股蓝800、4000mg/kg组DNA氧化损伤与正常对照组及VE C组无显著性差别。衰老对照组尿中DNA烷化损伤代谢产物O-6MeG含量较其他各组偏高,但差别无统计学意义。结论D-半乳糖诱导衰老的大鼠模型DNA抗氧化损伤的能力降低,而DNA烷化损伤无明显改变;在本实验条件下,绞股蓝提取物可有效降低H2O2诱导的DNA氧化损伤,对DNA烷化损伤没有明显作用。     

β-胡萝卜素对丝裂霉素C诱导的小鼠DNA损伤的保护作用

目的:研究β-胡萝卜素(βC)和维生素E(V-E)对丝裂霉素C(MMC)诱导的小鼠DNA损伤的保护作用.方法:选择雄性昆明种小鼠48只,随机分4组,其中正常对照(A)分别喂予基础饲料和阳性对照组(B),另外2组分别喂含V-E(200 mg/kg·bw)的基础饲料(C组)和含天然β-胡萝卜素晶体(200 mg/kg*bw)的基础饲料(D组).喂养4周后,除A组外,间隔24 h按1 mg/kg*bw腹腔注射MMC(A组注射同等剂量的生理盐水).12 h后,处死小鼠,无菌条件下取出脾脏、胸骨,观察小鼠脾细胞双链DNA剩余率和骨髓嗜多染红细胞微核发生率.结果:A、B、C、D组脾细胞双链DNA剩余率(%)分别为66.44±5.97,43.06±5.95,58.69±8.28,63.26±7.95,B组明显低于A、C、D组(P＜0.01);A、B、C、D组小鼠骨髓嗜多染红细胞微核发生率(‰)分别为1.87±0.83,31.00±6.32,17.37±2.88,15.25±4.68,B组明显高于A、C、D 3组(P＜0.01).结论:βC和V-E可抑制MMC诱导小鼠脾细胞DNA断裂和骨髓细胞微核发生的作用.     

半叶马尾藻多糖对小鼠S180肉瘤的抑制作用及其机制

背景与目的:由于目前使用的化疗药物在肿瘤治疗中副作用较大,严重制约了化疗药物在肿瘤治疗方面的应用。本实验目的是研究野生半叶马尾藻多糖(SP)对S180肉瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用和机制,为寻找低毒和高效的治疗肿瘤药物提供有价值的实验资料。方法:称重法检测SP对小鼠S180肉瘤的抑瘤率,流式细胞术分析SP对S180肉瘤小鼠胸腺细胞和脾淋巴细胞周期的影响,3H-TdR和3H-TyR掺入法测定S180肉瘤小鼠胸腺细胞、脾淋巴细胞DNA合成及蛋白质合成,脾淋巴细胞转化实验检测SP对S180肉瘤小鼠的免疫增强作用。结果:在肿瘤接种前10天给予小鼠SP50、100和200mg/kg,抑瘤率分别为28.7%、32.9%和50.3%,其中100mg/kg和200mg/kg的SP组与NS对照组比较抑瘤率有显著性差异(P<0.05)。小鼠接种肿瘤细胞后,脾脏和胸腺明显缩小,其脏器指数与正常对照组比较有显著性差异(P<0.05)。SP可以缓解小鼠脾淋巴细胞和胸腺细胞在接种肿瘤细胞后发生的G1期阻滞。各浓度SP组小鼠胸腺细胞3H-TdR掺入值显著高于NS对照组。200mg/kgSP组小鼠脾细胞DNA合成及100mg/kg和200mg/kgSP组小鼠脾细胞蛋白质合成显著高于NS对照组,说明SP对肿瘤接种后引起的小鼠脾细胞DNA和蛋白质合成显著降低也有拮抗作用。各浓度SP组刀豆素A(concanavalinA,ConA)和脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖显著高于NS对照组。结论:SP对S180肉瘤小鼠肿瘤生长有抑制作用,其机制可能是通过提高小鼠的脾淋巴细胞和胸腺细胞的数量和功能而实现的。     

邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯对小鼠肺细胞DNA的损伤作用

目的： 探讨邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯(DEHP)对小鼠肺细胞DNA的损伤作用。方法：以生理盐水作为阴性对照组,用不同浓度DEHP(5、25、125、625 μmol/L)对小鼠肺细胞进行体外染毒,应用单细胞凝胶电泳技术检测肺细胞DNA的断裂程度。结果：当DEHP的浓度为125和625 μmol/L时,肺细胞尾部DNA百分含量、尾矩和Olive 尾矩与阴性对照组相比均升高,差异具有统计学意义(P＜0.05)。结论：DEHP在体外可造成小鼠肺细胞的DNA断裂损伤。     

运用单细胞凝胶电泳研究稀土元素钬对小鼠骨髓细胞DNA的损伤

背景与目的:探讨稀土元素钬对小鼠骨髓细胞DNA的损伤.材料与方法:给小鼠灌胃氧化钬的盐酸溶液,24h后取股骨骨髓细胞进行单细胞凝胶电泳,观察有无染色体损伤和DNA损伤.结果:试验表明在20～80 mg/kg剂量范围内,彗星细胞的尾长随剂量的增加而增长,而头长则随剂量的递增而缩短,并且在40～80 mg/kg剂量范围内与阴性组差异存在显著性;同时,拖尾率与DNA损伤率也随剂量的增加而升高.结论:稀土元素钬对小鼠骨髓细胞DNA具有一定的损伤作用.     

Schisandra Chinensis extract on immune injury by radiation

目的:研究中药五味子(Schisandra Chinensis,SC)提取物对辐射所致小鼠免疫功能的影响,探讨SC对辐射所致免疫功能损伤的保护作用.方法:将48只BALB/c小鼠随机分为4组,分别为SC预处理组(SC灌胃后照射)、生理盐水组(NS灌胃后照射)、SC对照组(只给SC,不照射)和正常对照组(只给NS,不照射).6 Gy 60Co照射后24 h进行外周血白细胞和淋巴细胞计数;流式细胞仪检测小鼠外周血中CD4+、CD8+T细胞的百分比,用免疫浊度法检测小鼠血清IgG及补体C3的含量.结果:与正常对照组相比,NS组照射24 h后外周血白细胞总数[(3.73±1.05)x 109]和淋巴细胞数量[(2.06±0.57)×10]均明显下降(P＜0.01),而SC预处理组白细胞总数[(6.43±0.76)×10]和淋巴细胞数量[(4.15±0.95)×109]较NS均明显升高(P＜0.01);照射后小鼠外周血中CD3+、CD4+和CD8+T细胞百分比、IgG及补体C3水平较正常对照组明显降低(P＜0.01);SC预处理组较NS组小鼠外周血中CD4+和CD8+T细胞绝对值、IgG及补体C3水平均明显升高(P＜0.01).结论:SC提取物能够预防辐射所致淋巴细胞减少和免疫功能损伤.     

硒对丝裂霉素C致淋巴细胞遗传损伤的影响

背景与目的:观察硒对丝裂霉素C(mitomycin-C,MMC)诱导的人外周血淋巴细胞遗传损伤是否具有保护作用.材料与方法:在体外培养的淋巴细胞中,24 h时分别加入不同剂量的硒0、1、6和10 μmol/L,MMC 0和0.1 mg/L,培养72 h后,分别采用染色体畸变分析(CA)、姐妹染色单体互换技术(SCE),以及彗星试验(SCGE),对硒能否抑制MMC诱导的外周血淋巴细胞遗传损伤进行检测.结果:(1 μmol/L和6 μmol/L硒+MMC)组的淋巴细胞平均尾长、SCE互换率和CA畸变率低于阳性对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).(6 μmol/:硒+MMC)组的DNA损伤程度低于(1 μmol/L硒+MMC)组和(10 μmol/L硒+MMC)组.结论:硒对MMC造成的人外周血淋巴细胞遗传损伤具有一定的保护作用,在本实验条件下,以6 μmol/L硒组的保护作用最强.     

Protective effect of bioantioxidants on argemone oil/sanguinarine alkaloid induced genotoxicity in mice

Our prior studies have shown that argemone oil (AO) and its alkaloid sanguinarine causes DNA damage in mice and Epidemic Dropsy patients. Since some of the bioantioxidants including riboflavin and alpha-tocopherol offered protection to Epidemic Dropsy patients, a combination of riboflavin and alpha-tocopherol was evaluated on AO and sanguinarine induced genotoxicity using alkaline comet assay. Single administration of combination of riboflavin (50mg/kg) and alpha-tocopherol (150mg/kg) to mice, 24h prior to or immediately after AO (2.0ml/kg) exposure showed significant decrease in tail moment (70-72%), tail length (37-44%), and tail DNA (49-53%) in bone marrow cells. Single or multiple doses of antioxidants given after 24h of AO exposure resulted in substantial (P<0.05) decrease in all the parameters of comet assay in bone marrow cells. Single dose of antioxidants given either 24h prior to or immediately after sanguinarine (21.6mg/kg) exposure caused significant decrease in tail moment (56-62%), tail length (69%) and tail DNA (34-42%) in bone marrow cells of mice. Single or multiple doses of antioxidants given after 24h of sanguinarine treated resulted in decrease in tail moment (50-71%), tail length (54-63%) and tail DNA (29-43%) in bone marrow cells. Similar protective response of combination of antioxidants was observed in blood cells of mice treated either with AO or sanguinarine alkaloid. Further, the frequency of bone marrow and blood cells in Olive tail moment category of 8 and onwards were found to be substantially reduced in antioxidants treated animals as compared to respective AO or sanguinarine exposed mice. Based on these results, it can be suggested that a combination of riboflavin and alpha-tocopherol provides protection against AO and sanguinarine induced genotoxicity.     

β_胡萝卜素对丝裂霉素C致小鼠骨髓细胞遗传损伤的保护作用

背景与目的： 探讨β_胡萝卜素(β_carotene,βC)对丝裂霉素C(mitomycin_C,MMC)诱导的小鼠骨髓细胞遗传损伤的保护作用。 材料与方法： 分别用3 mg/kg和30 mg/kg的βC连续饲喂小鼠8 d后,以2 mg/kg MMC进行腹腔注射染毒,另设阳性对照组(用生理盐水)和阳性对照组(一次性腹腔注射MMC 2 mg/kg)。各组于末次给药后12、24 h处死小鼠,分别采用单细胞凝胶电泳技术和染色体畸变分析检测骨髓细胞DNA损伤及染色体畸变情况。 结果： 两个不同剂量的βC与MMC联合作用组小鼠骨髓细胞拖尾率、平均尾长及染色体畸变率均低于阳性对照组(单独MMC),但均高于阴性对照组,差异均有统计学意义(P<0.01)。 结论： βC对MMC诱导的小鼠骨髓细胞遗传损伤有明显的保护作用,但在实验所给剂量范围内(3～30 mg/kg)并不能完全抑制MMC所造成的遗传损伤。     

彗星实验检测紫外线诱导的K562细胞DNA损伤

背景与目的研究紫外线(Ultraviolet,UV)诱导K562细胞DNA损伤情况,评价彗星实验改良方法及分析参数的可靠性。材料与方法采用0.3mW/cm2UV以用不同时间(3、5、10、40、60、120、180、240s)照射K562细胞,诱导细胞DNA损伤,用彗星实验检测,CASP软件分析。结果尾长、彗星长、尾矩、Olive尾矩4个参数与紫外线照射时间有良好的时间依赖关系。结论0.3mW/cm2的紫外线照射K562细胞3s即可造成细胞DNA损伤,CASP分析软件可以用于彗星检测分析,其中尾长、彗星长、尾矩、Olive尾矩可作为彗星实验的分析指标,所改良的彗星实验系统可靠性较强,且基本上解决了实验中常见的脱胶现象,采图更方便。     

3-氯-4-二氯甲基-5-羟基-2(5氢)-呋喃酮对小鼠的遗传毒性与氧化损伤的关系

背景与目的：研究饮水氯化消毒副产物3-氯-4-二氯甲基-5-羟基-2(5氢)-呋喃酮(3-chloro-4-(dichlommethyl)-5-hydroxy-2[5H]-furanone,MX)对小鼠的遗传毒性与氧化损伤的诱导。材料与方法：昆明种小鼠随机分为4组,即溶剂对照组与低、中、高3个MX剂量组(11、33、100mg／kg),受试小鼠经腹腔注射染毒3h后处死。应用单细胞凝胶电泳技术(SCGE,彗星分析)检测小鼠肝、肾、小肠的DNA损伤,并测定小鼠肝、肾和小肠中脂质过氧化主要终产物丙二醛(Malondialdehyde,MDA)的含量。结果：随着MX浓度的增加,小鼠肝、肾、小肠中MDA含量与其细胞的Olive尾矩明显升高,且呈现较好的剂量依赖性。与溶剂对照组比较：①MX各剂量组小肠细胞Olive尾距均显著性增加,肝、肾细胞的Olive尾距在MX较高剂量时有显著性增加;②中、高剂量组小鼠肝组织中MDA含量显著性升高,高剂量组小鼠肾和小肠组织中MDA含量明显升高,差异有显著性意义。肝、肾、小肠MDA含量与Olive尾矩均呈明显正相关。结论：MX可引发哺乳动物多种脏器的脂质过氧化反应增强;并能引起细胞DNA损伤。MX导致机体组织的氧化损伤可能在细胞遗传毒性作用中起重要作用。     

扶正解毒颗粒对染镍大鼠肾细胞DNA单链断裂的影响

目的研究扶正解毒颗粒（FJG）对镍（NiSO4）诱发大鼠肾细胞DNA损伤的拮抗作用。方法以Wistar大鼠NiSO4 ［2.5 mg/(kg·d)］染毒造模,FJG灌胃处理,分别以单细胞凝胶电泳（SCGE）技术及比色法检测肾组织细胞DNA单链断裂及总抗氧化力（TAC）。结果与NiSO4组相比,FJG各组“彗星”样细胞出现率（计数一定量细胞中彗星样细胞所占的比例）、尾长、Olive尾矩、尾DNA%、尾长/头长比均明显降低（P<0.05和P<0.01）,TAC则显著升高（P<0.05和P<0.01）。结论FJG对镍致细胞DNA损伤有一定的拮抗作用,其机制与抑制镍诱导氧化损伤有关。     

维生素A缺乏对小鼠胚胎Hox-3.5 mRNA表达与胚胎发育关系的研究

目的 :探讨Vit.A缺乏对胚胎Hox-3.5mRNA表达的影响及其与胚胎发育的关系。 方法 :初断乳的昆明种雌鼠 ,随机分为正常对照组(N)、Vit.A缺乏组(A)、妊娠第0d补充Vit.A组(B)和妊娠第7d补充Vit.A组(C)。按AOAC方法建立孕鼠Vit.A缺乏模型。在妊娠第12d ,一半孕鼠剖腹取出胎鼠 ,采用原位杂交方法检测小鼠胚胎Hox-3.5mRNA的表达 ,同时检测孕鼠血清Vit.A水平。另一半孕鼠在妊娠第19d剖腹取胎 ,用于检查胚胎发育。 结果:孕鼠血清Vit.A缺乏时 ,孕12d胚胎组织Hox-3.5mRNA的含量明显减少 ;妊娠第0d补充Vit.A ,Hox-3.5mRNA的含量与N组无显著性差异 ;妊娠第7d补充 ,Hox -3.5mRNA的含量虽比A组增加 ,但仍明显低于N组。此外 ,Vit.A缺乏使胎鼠的体重、身长、尾长明显小于正常对照组(P<0.05) ,且出现脑膨出及细小肾等畸形。GD7补充Vit.A组明显好于Vit.A缺乏组 ,但与正常对照组相比仍有差异。交配后0d补充Vit.A组与正常对照组无差异。 结论 :Vit.A缺乏对胚胎发育的影响可能与Vit.A在转录水平调控Hox-3.5mRNA的表达有关。     

外周血有核细胞DNA损伤检测在肺多原发癌患者诊断中的临床价值

目的 本研究旨在探讨外周血单个有核细胞DNA损伤在肺多原发癌和转移癌鉴别诊断中的临床应用价值。方法 应用微量全血单细胞凝胶电泳技术（彗星实验）分别检测28例转移癌、30例肺多原发癌和29例原发肺癌患者外周血单个有核细胞DNA损伤率及损伤程度。结果 转移癌组外周血单个有核细胞损伤阳性率为6.29%（176/2800）,显著高于肺多原发癌组3.77%（113/3000）,（χ²=18.883,P=0.000）;肺多原发癌组显著高于原发肺癌组2.66%（77/2900）,（χ²=5.494, P=0.019）。转移癌组外周血单个有核细胞DNA损伤的尾长、尾矩和椭圆矩分别为（44.19±13.48）μm、（4.53±1.66）和（4.64±1.50） ,显著高于肺多原发癌组[（34.85±8.40）μm、（3.30±1.04）和（3.54±1.03） ],（P=0.000）;肺多原发癌组显著高于原发肺癌组[（26.25±7.64）μm 、（2.20±0.98） 和（2.37±0.78）],（P=0.000）。结论 检测外周血单个有核细胞DNA损伤有助于肺多原发癌与转移癌的鉴别诊断。     

维生素E对色拉油烟冷凝物致小鼠毒性作用的影响

本文采用微核试验和精子畸形分析方法，观察维生素Ｅ对色拉油烟冷凝物致小鼠微核率和精子畸形率作用的影响，并作Ｐｏｉｓｓｏｎ 分布资料的Ｕ 检验。结果显示色拉油烟冷凝物５ｍｌ／ｋｇ 和１０ｍｌ／ｋｇ 体重给小鼠灌胃染毒后，其微核率和精子畸形率均明显地高于２－５ｍｌ／ｋｇ 组和单纯色拉油对照组（Ｐ＜ ０．０１） ，而２ ．５ｍｌ／ｋｇ 组未显示致小鼠微核率和精子畸形率升高作用（Ｐ＞ ０．０５） ；给小鼠补充维生素Ｅ２０ｍｇ／ｋｇ 体重后，可显著地降低色拉油烟冷凝物致微核率和精子畸形率升高的作用（Ｐ＜ ０．０１）。故认为色拉油烟冷凝物对小鼠具有明显地毒性作用，而补充维生素Ｅ则可降低其作用。