腺病毒介导的肝癌自杀基因疗法的实验研究

本文观察了胞嘧啶脱氨酶(CD)基因/5-氟胞嘧啶(5FC)自杀基因疗法对肝癌模型的治疗作用。以CMV启动子调控CD基因的重组腺病毒载体AdexCMV.CD在体外能有效转染人肝癌细胞株SMMC-7721和HepG2,转染后的细胞体外生长能力无明显变化,对5FC的敏感性明显增高。当以AFP上游调控序列驱动CD基因的重组腺病毒载体AdexAFP.CD分别转染SMMC-7721和HepG2时,CD基因能在HepG2中表达,使HepG2对5FC的敏感性增高,但不能使SMMC-7721的生长受到5FC的抑制。[~3H]TdR掺入法观察体外旁观者效应时发现,当细胞总数中转染细胞数超过20％时,其生长明显被5FC抑制。将AdexCMV.CD直接注射入裸鼠接种SMMC-7721细胞形成的皮下肿瘤中,并全身应用5FC后,与对照组相比,肿瘤大小在开始治疗后第8天约缩小3倍,第18天约缩小4倍,以上结果表明,腺病毒介导的CD/5FC自杀基因系统能在体内、外有效地抑制肝癌的生长。以AFP上游调控序列驱动CD基因的腺病毒载体介导的基因转染能在AFP阳性的肝癌细胞中特异表达。     

肝癌细胞系BEL-7402中siRNA表达载体介导靶向c-myc基因的RNA干涉实验研究

Objective： To explore the inhibition of the expression of c-Myc in human hepatocellular carcinoma via vector-based RNA interference （RNAi）. Methods： Two RNA interference DNA templates targeting c-Myc oncogene were designed via online software and synthesized. By ligation, the fragments were inserted into pSilencer 1.0-U6 to construct the recombinant siRNA expressing plasmids. The identified recombinants were introduced into BEL-7402 cells with Lipofactamine. The inhibition of c-Myc expression, together with the expression of CDK4, hTERT and Gadd45β in c-Myc down-regulated BEL-7402 cells, were analyzed by semi-quantitative RT-PCR. Results： Two recombinant plasmids pSic-myc-1 and pSic-myc-2, which direct the yields of siRNAs targeting c-Myc in cells, were constructed. Among which, pSic-myc-2 was shown to trigger a RNAi-mediated inhibition of expression of c-Myc in BEL-7402 by up to 90%. In c-Myc knockdown BEL-7402 cells, the expression of CDK4 and hTERT were down-regulated with a ratio of 85% and 57%, respectively, while the expression of Gadd45β was up-regulated by up to 110%. Conclusion： The expression of c-Myc in BEL-7402 could be suppressed by vector-based RNA interference successfully. The knockdown of c-Myc in turn resulted in the changes of expression of genes related to cell proliferation and apoptosis. Thus, our study provided a preliminary data in searching of a c-Myc-targeted RNAi therapy of human hepatocellular carcinoma.     

IL-2和IL-12基因联合治疗小鼠头颈鳞癌的实验研究

目的观察白细胞介素-2(IL-2)基因与白细胞介素-12(IL-12)基因联合治疗小鼠头颈鳞癌的疗效. 方法建立小鼠头颈鳞癌动物模型,在荷瘤部位将脂质体包裹的IL-2基因和IL-12基因直接注入肿瘤中,观察肿瘤大小变化,并检测此两种基因在肿瘤细胞中的蛋白表达情况、小鼠脾脏自然杀伤细胞(NK)和细胞毒T淋巴细胞(CTL)活性. 结果 IL-2基因和IL-12基因联合治疗组,肿瘤生长明显受抑制,疗效显著优于单独治疗组和对照组(P<0.01).在注射有IL-2、IL-12基因的肿瘤组织中,其相对应的IL-2、IL- 12蛋白水平明显升高,小鼠脾细胞NK活性和CTL杀伤活性增强. 结论 IL-2、IL-12基因治疗可抑制小鼠头颈鳞癌生长,提高机体的抗肿瘤免疫应答.二者联合应用,可产生协同效应并加强其抗肿瘤效果.     

联合B7-1分子、IL-2及LAK细胞治疗肝癌的实验研究

目的：研究共刺激信号在肿瘤免疫中的作用。方法：构建含人B7-1基因的真核表达载体PRCCMV-B7-1，脂质体介导DNA转移法将人B7-1基因转入人肝癌细胞株SMMC7721，建立新的细胞株SMMC-B7-1，PCR及逆转录PCR（RT-PCR），流式细胞仪检测，四唑卤（MTT）比色试验体外检测白细胞介素-2（IL-2）激活的LAK细胞（LAK-C），对两种肝癌细胞的杀伤活性，结果：PCR，RT-PCR法证实SMMC-B7-1细胞稳定表达B7基因，LAK细胞对SMMC-B7-1细胞的杀伤活性明显高于SMMC7721，结果有统计学意义。结论：B7基因可以体外转染人肝癌细胞，并表达有活性的B7分子，明显增强IL-2激活的LAK细胞的肿瘤杀伤作用。为进一步开展临床应用奠定基础。     

IL-12基因联合吡柔比星治疗裸鼠膀胱癌移植瘤的实验

目的 探讨联合应用白细胞介素12(IL-12)质粒和吡柔比星（THP）对人膀胱癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用。方法 将人EJ膀胱癌细胞株裸鼠腋下接种,成瘤后设4组（每组6只）：联合组于骨骼肌注射IL-12真核表达质粒pcAGGS-mIL-12和腹腔注射THP;IL-12组骨骼肌注射pcAGGS-mIL-12;THP组腹腔注射THP;对照组肌肉及腹腔注射0.9%氯化钠溶液,以上注射每周2次,共4次。观察各组裸鼠肿瘤大小变化。4周后处死荷瘤鼠。免疫组织化学法检测肿瘤内VEGF 表达。ELISA法测定血液及肿瘤组织中IL-12和γ-干扰素(IFN-γ)的表达。结果 联合组肿瘤生长明显抑制,瘤重及体积明显小于其他组。ELISA法表明IL-12组和联合组 IL-12和IFN-γ都高表达。免疫组织化学法表明联合组VEGF基因表达量明显低于其他组（P<0.05）。结论 联合应用IL-12真核表达质粒pCAGGS-mIL-12和THP,对人膀胱癌裸鼠移植瘤的抑制作用明显强于单独应用IL-12和THP。     

慢病毒载体介导端粒酶逆转录酶小干扰RNA治疗肝癌的实验研究

目的 探讨慢病毒介导的端粒酶逆转录酶(hTERT)小干扰RNA(siRNA)对肝癌细胞生长的影响.方法 构建携带hTERT siRNA的慢病毒表达载体,在体外转染人肝癌HepG2细胞系,以MTT法测定细胞生长变化,半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测hTERT mRNA的表达.将转染hTERT siRNA的HepG2细胞,接种于裸鼠腋窝皮下,观察移植瘤生长情况.取移植瘤组织,常规HE染色,行组织学观察,应用原位末端标记(TUNEL)技术检测细胞凋亡情况.结果 hTERT siRNA转染HepG2细胞后,随着时间的延长,对细胞增殖的抑制作用逐渐增强,到第8天,干扰组细胞抑制率为57.5%,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01).RT-PCR产物凝胶电泳图显示,hTERT siRNA转染后,肿瘤细胞的端粒酶活性明显下降.转染后72 h,干扰组hTERT mRNA的表达水平为0.035±0.007,明显低于空载体对照组(0.151±0.016)和空白对照组(0.155±0.014,均P<0.01).转染细胞皮下接种后,干扰组的肿瘤生长速度明显慢于两个对照组,随着时间的延长,差异越来越明显.移植瘤组织常规HE染色显示,组织坏死增多,周围炎性细胞浸润.TUNEL检测结果显示,细胞凋亡增多,增殖减慢.结论 慢病毒介导的hTERT siRNA转染能明显抑制肝癌细胞的生长.     

脂质体介导mIL-12基因与MHCⅠ基因联合对小鼠实验性肝癌的治疗作用

背景与目的：白细胞介素-12及MHCⅠ基因均已单独用于肿瘤基因治疗,为探索两者的抗肿瘤协同效应,本研究探讨小鼠白细胞介素-12（mIL-12)基因与同种异型的MHCⅠ（小鼠为H-2K）基因联合治疗Balb/C小鼠实验性肝癌。方法：分别应用含mIL-12基因,C57BL/6小鼠H-2K^bcDNA及绿色荧光蛋白（GFP）报告基因的真核表达质粒载体pcDNA3。体外经新型脂质体LipofectAMINE2000(LF2000)介导转染小鼠肝癌细胞株MM45T.Li,检测转染细胞外源基因的表达,将经LF2000介导pcDNA3/mIL-12与pcDNA3/H-2K^b转染的MM45T.Li细胞,注射于小鼠皮下,观察致瘤性的变化,在荷瘤Balb/C小鼠瘤内注射上述脂质体-DNA复合物,观察瘤体生长情况及小鼠生存期的改变。结果：LF2000介导pcDNA3/GFP转染MM45T.Li细胞的最佳条件为脂质体与DNA为3：1（μg：μg）,转染效率达30%,经LF2000介导pcDNA3/mIL-12与pcDNA3/H-2K^b转染的MM45T.Li细胞,RT-PCR检测有mIL-12和H-2K^bcDNA的特异扩增片段,WesternBlot检测显著有57kDaH-2K^b蛋白表达,ELISA检测mIL-12分泌量达48ng/ml/10^6细胞,经LF2000介导pcDNA3/mIL-12与pcDNA3/H-2K^b转染的MM45T.Li细胞,其致瘤性下降;荷瘤Balb/C小鼠瘤内注射该脂质体-DNA复合物,FACS检测显示小鼠脾脏淋巴细胞中CD3^ ,CD4^ 和CD8^ 的数量治疗组较对照组高,肿瘤生长相对缓慢,且pcDNA3/mILp-12与pcDNA3/H-2K^b联合治疗具有一定的正协同效应。结论：mIL-12基因与MHCⅠ基因联合治疗小鼠肝癌具有正协同效应,增强了抗肿瘤效果。     

脂质体介导的基因转染效率与肺癌细胞的增殖特性的关系

目的：简化粘附性LAK（A－LAK）细胞的制备方法并观察其与苯乙酸（PA）的协同抗瘤作用。方法：采用苯丙氨酸甲酯（PME）处理肝癌患者外周血单个核细胞（PBMC）而制备A－LAK细胞;观察人肝癌SMMC7721细胞株经PA处理后增殖能力的变化;并用经PA预处理的SMMC7721培养上清液作用于A－LAK细胞,观察A－LAK增殖能力与杀伤活性的变化。结果：采用PME制备的A－LAK细胞,其增殖能力显著高于非粘附性LAK细胞（NA－LAK）和常规LAK细胞;肿瘤细胞经PA作用后,生长明显受 到抑制;肿瘤细胞的培养上清液可明显抑制A－LAK的增殖与杀伤活性,而经苯乙酸预处理的上清液则抑制作用减弱。结论：采用PME可 简便快速地制备A－LAK,而苯乙酸可与A－LAK协同发挥抗瘤作用。     

HSV-TK/CD基因联合IL-12基因体内治疗肝癌

目的观察HSV-TK/CD基因联合IL-12基因体内治疗肝癌的疗效.方法SCID小鼠双侧腋部皮下植入5×105(0.2ml)HepG2细胞,同时腹腔注射PBL 2×107(0.5 ml).荷瘤小鼠分为4组,左侧腋部瘤内分别注射5×105(0.1 ml)丝裂霉素处理过的HepG2-IL-12细胞、5×105(0.1 ml)HepG2-pALBeAFP-CD/TK细胞或两者(各0.05 ml),次日起腹腔注射PBS或GCV 100 mg/kg 5-FC 500 mg/kg,连续10天.Ⅰ组:HepG2-IL-12 GCV,5-FC;Ⅱ组:HepG2-pALBeAFP-CD/TK PBS;Ⅲ组:HepG2-pALBeAFP-CD/TK GCV,5-FC;Ⅳ组:HepG2-pALBeAFP-CD/TK HepG2-IL-12 GCV,5-FC.治疗结束5天后作常规肿瘤组织病理学检查.结果与Ⅱ组比较,Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ组治疗侧均有明显的生长抑制,第30天较Ⅱ组分别减小20.5%、54.9%和87.6%,且Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ组之间差异明显.Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ组右侧肿瘤较Ⅱ组同侧显著缩小,分别达23.2%、24.9%和45.0%.结论pALBeAFP-CD/TK双自杀基因体内治疗肝癌有效.在免疫活性鼠,局部转染IL-12基因可增强双自杀基因的疗效和远处旁观者效应.     

肝癌细胞系BEL-7402中siRNA表达载体介导靶向c-myc基因的RNA干涉实验研究

目的:探索经载体介导的RNA干涉对肝癌细胞cmyc基因表达抑制的可行性。方法:设计并合成2条靶向癌基因cmyc的RNA干涉模板片段,分别将其连接至pSilencer1.0U6载体上构建siRNA真核表达载体;脂质体转染法将上述重组质粒转入BEL7402肝癌细胞株。半定量RTPCR分析cmyc基因的表达抑制效率,以及cmyc基因表达下调细胞中CDK4、hTERT和Gadd45β基因表达的改变。结果:获得2个能在细胞内有效转录生成靶向cmyc基因siRNA的重组载体pSicmyc1和pSicmyc2;其中pSicmyc2可有效介导肝癌细胞BEL7402cmyc基因的表达抑制,抑制率高达90%以上;在cmyc基因经RNAi抑制的细胞中,CDK4和hTERT基因的表达分别下调至85%和57%;而Gadd45β的表达上调约110%。结论:肝癌细胞BEL7402中cmyc基因的表达可被载体介导诱发的RNA干涉有效抑制,进而导致细胞中与增殖和凋亡相关基因的表达改变。     

内皮抑素治疗人骨肉瘤裸鼠模型的实验研究

目的:观察内皮抑素(ES)对裸鼠骨肉瘤皮下移植模型血管生成和肿瘤生长的抑制作用及其机制。方法:Transwell双室模型观察ES对骨肉瘤细胞9901诱导内皮细胞迁徙的影响;随机将30只骨肉瘤荷瘤裸鼠分为对照组、ES低剂量组[0.75mg(kg·d)-1]和高剂量组[1.5mg(kg·d)-1],瘤体及瘤体周围注射ES,1次/d,连续给药14d,观察肿瘤生长情况,计算抑瘤率。肿瘤组织进行病理学观察及免疫组化染色,计数坏死组织百分比,微血管密度以及细胞增殖和凋亡指数;动物处死前3个小时尾静脉注射EF5,激光共聚焦显微镜观察组织缺氧及血管标记。结果:ES低剂量组(350ng·ml-1)和高剂量组(700ng·ml-1)对内皮细胞迁徙有明显抑制作用,且高剂量组明显高于低剂量组(P<0.01);高剂量组和低剂量组平均瘤重明显小于对照组,抑瘤率分别为35.83%和22.92%(P<0.01);正常对照组、低剂量组、高剂量组的坏死百分比分别为2.40%、4.68%和9.52%(P<0.01),细胞增殖指数(PI)分别为66.44%、46.11%和25.11%(P<0.01),细胞凋亡指数(AI)分别为2.69%、7.58%和11.53%(P<0.01)。激光共聚焦观察ES治疗组绿色荧光量减少,血管稀疏;肿瘤细胞缺氧增加,呈弥漫的强红色。结论:ES可显著地抑制骨肉瘤细胞诱导的内皮细胞迁徙,以及人骨肉瘤的生长和发展,且呈剂量依赖效应,其可能机制为抑制血管生成,增加肿瘤细胞缺氧和凋亡。     

肝癌患者红细胞CD55、CD59及血浆中IL-8、IL-12的实验研究

[目的]采用自然与分离实验研究方法研究原发性肝癌患者红细胞CD55、CD59分子表达与IL-8、IL-12含量的相关性。[方法]全血细胞自然试验管由0.2ml全血细胞悬液、0.3ml血浆和0.2ml生理盐水组成,白细胞分离试验管由0.2ml白细胞悬液、0.3ml血浆和0.2ml生理盐水组成。两管均37℃温育1h,用免疫酶联法测定IL-8和IL-12含量,用流式细胞仪测定红细胞CD55和CD59表达量。[结果]原发性肝癌患者中,自然组和分离组IL-8含量分别是(353.64±271.92)pg/ml和(424.97±278.93)pg/ml,而健康人中分别是(4.98±4.15)pg/ml和(20.72±14.20)pg/ml。在原发性肝癌患者中,自然组与分离组IL-12含量分别是(9.95±3.49)pg/ml和(13.02±3.74)pg/ml,而在健康人中分别是(9.84±2.23)pg/ml和(13.59±3.69)pg/ml。在健康人中红细胞CD59分子与IL-8含量之间正相关(r=0.669,P<0.05)。原发性肝癌患者中,红细胞CD55和IL-8之间是负相关(r=-0.727,P<0.01)。[结论]红细胞在系统血液免疫功能中能调控IL-8和IL-12变化,而原发性肝癌患者红细胞调控IL-8和IL-12能力低于健康人,红细胞CD55、CD59与血浆中IL-8含量之间处于失平衡状态。     

增殖缺陷型腺病毒介导人内皮抑素基因抗乳腺癌的实验

 目的通过建立裸鼠乳腺癌肿瘤模型,在体内实验中进一步证实携带人内皮抑素基因的增殖缺陷型腺病毒Ad-hE的抗肿瘤作用。方法在BALB/c裸鼠皮下种植人乳腺癌细胞MCF-7,建立移植瘤模型。在瘤体内注射Ad-hE治疗,观察肿瘤生长,免疫组化检测肿瘤细胞内皮抑素的表达和计数肿瘤间质中微血管的数量。结果Ad-hE具有明显抑制肿瘤细胞生长的作用,瘤体内注射重组腺病毒后4周,Ad-hE治疗组肿瘤体积为(225.3±90.2)mm3,明显小于Ad-LacZ病毒对照组(794.9±189.8)mm3和空白对照组(890.7±102.5)mm3。免疫组化显示,乳腺癌细胞在感染腺病毒后能够有效表达内皮抑素,阳性细胞比率超过60%以上。Ad-hE治疗组瘤组织中血管数量(16.3±7.3)明显少于空白对照组(54.6±17.6)和Ad-LacZ病毒对照组(49.8±21.2)。结论增殖缺陷型腺病毒介导人内皮抑素的表达,具有明显抑制肿瘤细胞生长的作用。     

Interleukin-12 and Interleukin-6 Gene Polymorphisms and Risk of Bladder Cancer in the Iranian Population

Interleukin-12 (IL-12) as an antitumor and interleukin-6 (IL-6) as an inflammatory cytokine, areimmunomodulatory products that play important roles in responses in cancers and inflammation. We testedthe association between two polymorphisms of IL-12(1188A>C; rs3212227) and IL-6 (-174 C>G) and the riskof bladder cancer in 261 patients and 251 healthy individuals. We also investigated the possible association ofthese SNPs in patients with high-risk jobs and smoking habits with the incidence of bladder cancer. The genotypedistributions of IL-6 (-174 C/G) genotype were similar between the cases and the control groups; however, amongpatients with smoking habits, the association between IL-6 gene polymorphism and incidence of bladder cancerwas significant. After a control adjustment for age and sex, the following results were recorded: CC genotype(OR= 2.11, 95%CI=1.56-2.87, p=0.007), GC genotype (OR=2.18, 95%CI=1.16-4.12, p=0.014) and GC+ CC(OR=2.6, 95%CI=1.43-4.47, p=0.011). A significant risk of bladder cancer was observed for the heterozygousgenotype (AC) of IL-12 (OR=1.47, 95%CI=1.01-2.14, p=0.045) in all cases, and among smokers (AC) (OR=3.13,95%CI=1.82-5.37, p=0.00014), combined AC+CC (OR=3.05, 95%CI=1.8-5.18, p=0.000015). Moreover amonghigh risk job patients, there was more than a 3-fold increased risk of cancer in the carriers of IL-12 betaheterozygous (OR=3.7, 95%CI=2.04-6.57, p=0.000056) and combined AC+CC(OR=3.29, 95%CI=1.58-5.86,p=0.00002) genotypes as compared with the AA genotype with low-risk jobs. As a conclusion, this study suggeststhat IL-12(3’UTR A>C) and IL-6 (-174 C>G) genotypes are significantly associated with an increased risk ofbladder cancer in the Iranian population with smoking habits and/or performing high-risk jobs.     

内抑素(endostatin)对移植大肠癌新生血管密度影响的动物实验研究

目的：探讨内皮细胞生长抑素（内抑素endostatin）对裸鼠大肠血管生成的影响及其作用机理，为endostatin的临床应用提供理论依据。方法：采用免疫组化方法检测肿瘤新生血管密度，对用药过程中瘤 体积进行测量，对endostatin抑制肿瘤的效果进行分析。结果：endostatin能够抑制裸鼠大肠癌肿瘤血管生成，减轻肿瘤的血管密度。结论：endostatin通过抑制血管形成抑制肿瘤的生长。     

上皮性卵巢癌中内皮抑素与血管内皮生长因子的表达及意义

目的:探讨内皮抑素(Endostatin)及血管内皮生长因子(VEGF)在上皮性卵巢组织中的表达及意义。方法:采用免疫组化SP法检测48例上皮性卵巢癌组织、18例良性上皮性卵巢肿瘤及18例正常卵巢组织中Endostatin及VEGF的表达。结果:1)卵巢癌组织Endostatin和VEGF表达明显高于良性卵巢瘤和正常卵巢组织(P<0.05)。2)48例上皮性卵巢癌组织中Endostatin及VEGF的阳性表达率分别为62.5%(30/48)和66.67%(36/48),Endostatin与VEGF的表达呈正相关。3)在晚期卵巢癌组织中Endostatin的高表达率及VEGF阳性率明显高于早期卵巢癌组织,差异具有显著性(P<0.05)。4)卵巢癌组织中Endostatin高表达和VEGF阳性患者的平均总生存期短于Endostatin低表达和VEGF阴性患者,但二者累计生存率均无显著性差异(P>0.05)。结论:Endostatin与VEGF的表达水平随着卵巢癌临床分期的进展而升高,反映了卵巢癌疾病发展过程中血管生成抑制因子和促进因子之间的平衡调节。     

贲门腺癌中内皮抑素表达的临床病理学意义

目的:检测贲门腺癌组织中内皮抑素表达水平与贲门腺癌临床病理特征的关系。方法:应用免疫组化染色SP法分析62例贲门腺癌患者肿瘤组织中内皮抑素的阳性表达水平。结果:内皮抑素表达水平与贲门腺癌原发肿瘤的浸润深度、细胞分化程度、临床TNM分期均有密切关系(P均<0.05),而与区域淋巴结转移状态无明显关系(P>0.05);多因素相关分析发现内皮抑素阳性表达水平与原发肿瘤侵润深度、临床TNM分期均呈负相关(P均<0.05),与细胞分化程度呈正相关(P<0.05)。结论:内皮抑素的表达水平与贲门腺癌临床病理分期、浸润深度及细胞分化程度有相关性,而与区域淋巴结转移状态无明显关系。     

阳离子脂质体介导的小鼠白细胞介素2基因修饰肝癌细胞瘤苗

目的 研究阳离了脂质体介导的小鼠白细胞介素2基因修饰肝癌细胞瘤苗的抗肿瘤作用。方法 利用阳离子脂质体Transfectam,将携带小鼠白细胞介素2（IL－2）基因的真核表达南粒VR1110,导入小鼠肝癌细胞H22;采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测转染后经放射线照射、末经放射线照射和冻融后的细胞培养上清液中白细胞介素2的浓度;并研究转染后经放射线照射而制成的瘤苗的抗肿瘤效应。结果 转染后经放射线照射和末经放射线照射的H22细胞均持续分泌IL－2达30天以上;转染细胞在冻融后也能分泌IL－2;制备的瘤苗对小鼠肝癌模型肿瘤的生长有明显的抑制作用,并能明显提高荷瘤小鼠的生存率。结论 阳离了脂质体介导的小鼠细胞介素2基因转染后,能在肝癌细胞中有效表达,所制备的瘤苗可诱导有效的抗肿瘤效应。     

IL-15联合CIK细胞治疗裸鼠肾癌移植瘤的实验研究

[目的]探讨白细胞介素-15(IL-15)联合CIK细胞治疗裸鼠肾癌移植瘤的效果及其作用机制。[方法]建立裸鼠肾癌皮下移植瘤模型,采用析因设计方法,随机分4组,Ⅰ组对照组(n=8),瘤旁注射生理盐水0.2ml/只;Ⅱ组(n=8),瘤旁注射CIK细胞0.2ml/只(约3×107个CIK细胞);Ⅲ组(n=8),瘤旁注射IL-15 0.2ml/只(约100μg/kg);Ⅳ组(n=8),瘤旁注射IL-15 0.2ml/只(约100μg/kg)和CIK细胞0.2ml/只(含约3×107个CIK细胞),注射方案:1次/周,连续3周。观察裸鼠生存期、生存延长率及肿瘤生长曲线。待裸鼠死亡后,观察移植瘤细胞凋亡率,NK细胞群计数;测定裸鼠脾脏重量;对裸鼠移植瘤常规病理学检查。[结果]实验组与对照组相比荷瘤裸鼠生存延长率,脾脏重量,移植瘤细胞凋亡率,NK细胞群计数均有明显差异。病理学检查示CIK组、IL-15组与对照组肿瘤细胞形态上无明显差别,可见少量肿瘤坏死,但联合治疗组可见较多肿瘤坏死,肿瘤细胞周围及肿瘤内有大量淋巴细胞浸润。[结论]IL-15联合CIK细胞对裸鼠肾癌移植瘤生长有明显的抑制作用,且较IL-15或者CIK细胞单一治疗效果更好。其机制可能与IL-15诱导CIK细胞(含NK细胞、NK-T细胞及CD8+记忆T细胞)的发育、增殖及活化,进一步促进机体免疫细胞活性及细胞因子反应,免疫性增强有关。