IL-33在脑缺血再灌注小鼠脑内的表达和细胞定位

目的:通过建立脑缺血再灌注小鼠模型,观察白细胞介素-33(IL-33)阳性细胞在脑缺血再灌注小鼠大脑中的表达和定位情况,初步探讨IL-33在缺血性脑卒中中的作用。方法:采用线栓法制作右侧大脑中动脉阻塞(MCAO)建立脑缺血再灌注小鼠模型,利用TTC染色检测MCAO后脑梗死形成情况,采用免疫荧光组织化学染色法检测IL-33在脑缺血再灌注小鼠大脑中的表达。结果:成功建立脑缺血再灌注小鼠模型,脑缺血再灌注可引起小鼠大脑内IL-33表达升高;脑缺血再灌注小鼠模型脑内广泛表达IL-33。IL-33在神经元、星形胶质细胞、小胶质细胞内均有表达。结论:脑缺血再灌注小鼠脑内IL-33表达增加,IL-33可能参与小鼠缺氧缺血性脑损伤过程。     

肢体缺血后适应对小鼠脑缺血再灌注损伤的影响及机制

目的:建立小鼠脑缺血后进行短暂肢体缺血提高脑缺血耐受模型,确定肢体缺血后适应对脑缺血时程的影响及热休克蛋白70(HSP70)的作用,探讨肢体缺血后适应(LIPostC)对脑缺血/再灌注损伤抑制作用和机制。方法:复制小鼠大脑中动脉闭塞模型(MCAO),第1批实验将小鼠分为9组:假手术组、脑缺血/再灌注组(缺血时间分别0.5 h、1 h、1.5 h、2 h组),脑缺血/再灌注+短暂肢体缺血(LIPostC)组(0.5 h+LIPostC、1 h+LIPostC、1.5 h+LIPostC、2 h+LIPostC组)。分别观察小鼠运动行为变化;TTC染色测量脑梗死体积;HE染色观察脑组织损伤程度;TUNEL法检测神经元凋亡程度。第2批实验将小鼠随机分为4组:假手术组、脑缺血/再灌注组、MCAO+LIPostC组和MCAO+LIPostC+quercetin组(缺血时间为2 h)。术后24 h用Western blotting法检测脑皮质中HSP70蛋白表达和神经功能评分。结果:脑缺血时程影响小鼠运动行为和脑损伤程度,随脑缺血时间延长,小鼠的脑再灌注损伤程度加重,其行为缺陷和脑病理变化明显;缺血2 h组脑损伤程度比缺血1.5 h组和缺血1 h组严重(P0.05)。脑缺血后不同时间施加LIPostC显示不同程度的神经保护作用。LIPostC各组与相对应的I/R组比较,其脑再灌注损伤程度呈现不同程度减轻,行为学评分降低、脑梗死体积减小,脑皮质损伤减轻,TUNEL阳性凋亡细胞数目减少。脑缺血2 h再灌注损伤较重,但LIPostC仍具有明显的脑保护作用。以2 h脑缺血小鼠为模型进行机制研究,结果表明,LIPostC可提高缺血脑组织HSP70蛋白表达,改善神经功能,HSP70抑制剂quercetin可削弱LIPostC的这种脑保护作用。结论:LIPostC可抑制MCAO小鼠的脑缺血再灌注损伤,促进缺血脑区HSP70表达和改善神经功能。HSP70在LIPostC提高MCAO小鼠的脑缺血耐受机制中发挥重要作用。     

大鼠脑缺血-再灌注的C3、C4和NO变化及复方水蛭合剂对其影响

本文探讨大鼠脑缺血 再灌注的免疫损伤及复方水蛭合剂对其影响。检测Wistar大鼠脑缺血 再灌注模型的脑匀浆、血清补体C3、C4和NO含量及其病理改变。结果显示模型组脑匀浆、血清补体C3、C4和NO含量较正常组高 (P <0 0 1,0 0 0 1) ,出现明显病理改变 ;药物组脑匀浆、血清补体C3、C4和NO含量明显低于模型组 (P <0 0 1,0 0 5 ) ,病理损伤比模型组轻。认为复方水蛭合剂可降低脑缺血 再灌注大鼠补体C3、C4和NO含量 ,有抗脑缺血 再灌注免疫损伤作用。     

高压氧对脑缺血再灌注小鼠明胶酶、一氧化氮合酶及血脑屏障的影响

目的:通过检测脑缺血再灌注小鼠明胶酶A(MMP－2)、明胶酶B(MMP－9)及一氧化氮合酶(NOS)活性,探讨高压氧(HBO)对脑缺血再灌注小鼠明胶酶、NOS及血脑屏障(BBB)通透性的影响。方法:复制脑缺血再灌注模型,并于再灌注期间经0.25MPaHBO治疗5次,采用明胶酶谱分析法及比色法,检测脑组织海马区明胶酶及NOS的活性,同时经尾静脉注射2%伊文思兰(EB),检测脑组织EB含量。结果:脑缺血再灌注后明胶酶(A、B)活性增加,HBO+脑缺血再灌注组明胶酶B(MMP－9)活性明显低于脑缺血再灌注组;而HBO对明胶酶A(MMP－2)作用不显著。脑缺血再灌注后NOS活性增加,HBO+脑缺血再灌注组NOS含量显著低于脑缺血再灌注组(P＜0.01)。脑组织EB含量以再灌注4h最高,11h、23h、48h、72h脑组织EB含量逐渐减少。高压氧+脑缺血再灌注组脑组织EB含量明显低于脑缺血再灌注组(P＜0.05,P＜0.01)。结论:高压氧具有降低脑缺血再灌注小鼠明胶酶B及NOS活性,降低血脑屏障的通透性的作用。     

一氧化氮和Ca~(2+)含量对缺血再灌注大鼠脑细胞凋亡的影响

目的:通过观察脑缺血再灌注时脑组织一氧化氮(NO)和Ca2+含量及脑细胞凋亡的变化,探讨NO、钙对脑细胞凋亡的作用。方法:本实验在建立大鼠急性全脑缺血再灌注损伤模型的基础上,用Green法测定脑组织NO的含量,用原子分光光度仪测定脑组织Ca2+含量,用流式细胞仪检测脑凋亡细胞。结果:脑缺血再灌注12h、24h,NO含量及Ca2+含量均较假手术组增加(P<0.05,P<0.01),脑细胞凋亡数亦增加(P<0.01),且随时间延长进一步增加(P<0.05)。脑缺血再灌注12h、24h时,脑组织Ca2+含量与脑细胞凋亡数呈正相关(P<0.05)。结论:全脑缺血再灌注损伤时发生脑细胞凋亡与脑组织NO、Ca2+含量增高有关。     

脑伤乐生颗粒剂对脑缺血模型鼠的保护作用

目的观察脑伤乐生颗粒剂(NSIS)对脑缺血模型鼠的保护作用。方法取SD大鼠和昆明种小鼠各60只,随机分成6组。用线栓法制作SD大鼠大脑中动脉阻塞的脑缺血动物模型(MCAO)和昆明种小鼠颈总动脉结扎模型。取脑组织,分别测定脑含水量、脑指数;制备脑匀浆测定丙二醛(MDA)含量,以及脑缺血小鼠脑血管通透性。结果脑伤乐生颗粒剂(NSIS)能够显著地降低脑缺血大鼠脑含水量、脑指数、脑组织中丙二醛含量;减少小鼠脑血管对伊文氏兰的通透性。上述各药理效应均呈剂量依从。结论NSIS对于脑缺血后引起的脑损伤具有一定的保护作用。     

CART肽抑制缺血再灌注小鼠脑组织水通道蛋白4表达并减轻脑水肿

目的:研究可卡因及苯丙胺调节转录物(CART)肽对小鼠脑缺血再灌注急性期脑水肿的作用,并探讨其作用机制。方法:清洁级雄性ICR小鼠随机分为假手术(sham)组、大脑中动脉栓塞(MCAO)组和CART组,复制小鼠MCAO模型以模拟局灶性脑缺血再灌注损伤病理过程,TTC染色法计算脑梗死体积及脑水肿体积,干湿重法测定脑组织中水含量,通过检测伊文思蓝含量判断血脑屏障(BBB)的完整程度,免疫荧光和Western blot观察脑组织水通道蛋白4(AQP-4)的表达变化。结果:小鼠MCAO后24 h,CART肽处理组小鼠脑梗死体积和脑水肿体积均明显小于MCAO组(P0.01),脑组织水含量亦明显低于MCAO组(P0.01)。伊文思蓝测定表明,CART肽能够有效维持血脑屏障的完整性。免疫荧光和Western blot结果显示,MCAO小鼠脑组织中AQP-4表达明显升高,而CART处理明显抑制脑缺血再灌注诱导的AQP-4表达(P0.05)。结论:CART肽可减轻脑缺血再灌注损伤小鼠急性期脑水肿,维持血脑屏障完整性,其作用机制可能与抑制脑组织AQP-4表达水平密切相关。     

血红素加氧酶-1对脑缺血再灌注损伤的保护作用研究

HO催化血红素产生的代谢产物胆红素和胆绿素是脑内重要的抗氧化物质。我们以自己创建的小鼠不完全性前脑缺血模型,研究了HO-1活性改变对脑缺血再灌注损伤的保护作用,结果显示:1 NIH小鼠经颈动脉抽出40％血液。再夹闭双侧颈总动脉20min,再回输血液,造成小鼠前脑缺血再灌注脑损伤模型,表现为模型鼠学习记忆能力明显下降,     

精制清开灵干预MCAO再灌注损伤的药效及机制研究

目的:观察工艺改进后的精制清开灵对大鼠局灶脑缺血再灌注损伤的拮抗作用。 方法:选取成年雄性大鼠120只，采用线栓法建立大鼠脑缺血再灌注模型，应用核磁共振弥散加权成像技术、病理学指标判断不同治疗组对大鼠脑缺血再灌注的拮抗作用，原位杂交技术检测脑组织海马脑源性生长因子（BDNF）含量的变化。 结果:精制清开灵减轻脑缺血大鼠再灌注损伤，核磁共振表现为病灶周边区RA值，FA值明显高于模型组，脑源性生长因子BDNF表达多于模型组。 结论:精制清开灵具有脑神经保护作用，在有效时间窗内给予该药物的干预可能是减少脑缺血再灌注损伤的重要措施，其作用与BDNF有关。     

L-精氨酸、氨基胍和胍丁胺在大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤中的作用

目的: 观察L-精氨酸 (L-Arg)、氨基胍 (AG) 和胍丁胺 (AGM) 对大鼠局灶性脑缺血组织中一氧化氮 (NO) 含量的影响,探讨3种药对脑缺血再灌注损伤大鼠是否具有保护作用和NO在脑缺血再灌注损伤的作用及机制。方法: 线栓法建立大鼠局灶性脑缺血 (MCAO) 模型,大鼠行为学改变用Longa评分标准来评价,血清NO浓度用酶标仪检测,脑内诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)用免疫组织化学方法测定。结果: 与假手术组相比,模型组、L-Arg组、AG组和AGM组在缺血再灌注12、24、72 h的NO含量均显著增加(P<0.05);与模型组相比,在缺血再灌注12 h,L-Arg组行为学评分显著降低(P<0.05),NO含量显著升高(P<0.05);在缺血再灌注24 h,AG组和AGM组行为学评分显著降低(P<0.05),NO含量也显著降低(P<0.05)。在缺血再灌注12、24、72 h,L-Arg组的iNOS阳性细胞数与模型组相比无显著差异(P>0.05);而AG组和AGM组则均显著低于模型组(P<0.05)和L-Arg组(P<0.05)。结论: 脑缺血再灌注损伤后血清NO和海马内iNOS的表达随时间有动态变化。L-Arg在术后12 h、AG和AGM在术后24h对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠有保护作用。