肾动脉移植骨髓间充质干细胞对阿霉素肾病大鼠肾纤维化的影响

【摘要】 目的 分析经肾动脉移植骨髓间充质干细胞（BMSC）对阿霉素慢性肾脏病（CKD）大鼠的治疗作用,评估不同移植方式对肾脏纤维化的影响。方法 实验动物为50只雄性Sprague-Dawley大鼠,其中2只4周龄大鼠用于体外分离培养BMSC;36只16周龄大鼠经尾静脉注射阿霉素构建CKD动物模型,造模成功后随机分为模型组（CKD组）、经尾静脉移植BMSC组（V-M组）和经肾动脉移植BMSC组（A-M组）,每组各12只;12只健康大鼠作为正常对照组（N组）,经尾静脉输注等量0.9%氯化钠溶液。移植BMSC后第7、14天检测各组大鼠血肌酐、血尿素氮、24 h尿蛋白水平;制作肾脏病理切片行HE染色观察肾脏结构病理改变,Masson三色染色评估肾脏纤维化程度。结果 CKD组、V-M组、A-M组在各观察点血肌酐、血尿素氮、24 h尿蛋白水平均显著高于N组（P＜0.01）。移植后第7天,V-M组、A-M组24 h尿蛋白水平均低于CKD组（P＜0.05）,且A-M组低于V-M组（P＜0.05）;A-M组血肌酐、血尿素氮显著低于CKD组（P＜0.01）。移植后第14天,V-M组、A-M组24 h尿蛋白水平均低于CKD组,但差异无统计学意义（P＞0.05）;A-M组血肌酐、血尿素氮均低于V-M组、CKD组（P＜0.05）。CKD组、V-M组、A-M组肾组织HE染色呈慢性肾病改变,Masson三色染色示肾间质及肾小囊周围不同程度纤维化,但A-M组纤维化程度较V-M组、CKD组有所改善。结论 经肾动脉移植BMSC可抑制或延缓CKD大鼠肾脏纤维化,并发挥积极的治疗作用。     

肾动脉移植骨髓间充质干细胞治疗大鼠慢性肾病结果分析

目的 分析和评价经肾动脉途径移植骨髓间充质干细胞(BMSC)对慢性阿霉素肾病模型大鼠的治疗结果.方法 采用50只雄性Sprague-Dawley大鼠作为实验动物.其中2只12周龄大鼠用于BMSC分离培养;12只作为空白对照组(N组),36只经尾静脉注入阿霉素制作慢性肾病大鼠模型,并随机分为慢性肾病对照组(C组)、经肾动脉移植BMSC组(A组)和经尾静脉移植BMSC组(V组),每组12只.N组经尾静脉注入等量0.9％氯化钠溶液.结果 A组、V组、C组在各观察时点血尿素氮、血肌酐、24 h尿蛋白、24 h尿微量蛋白水平均明显高于N组(P＜0.01).移植后1、2周A组24 h尿微量蛋白均低于C组(P＜0.01),且血肌酐均较C组和V组低(P＜0.01);移植后1周A组24 h尿蛋白、24 h尿微量蛋白均明显低于V组(P＜0.01),但2周时与V组差异无统计学意义.结论 经肾动脉途径移植BMSC可提高细胞归巢效率,并提高对损伤组织的修复作用.     

骨髓间充质干细胞经肾动脉途径不同移植次数对大鼠阿霉素肾病的修复作用比较

目的 比较分析骨髓间充质干细胞(BMSC)经肾动脉途径单次或多次移植于阿霉素肾病大鼠后对其肾功能的改善作用.方法 以阿霉素经尾静脉输入构建大鼠慢性肾病模型32只,随机分为M0、M1、M2、M3组(4×n,n=8),另选8只为正常对照组(N组).以2×106个/ml、单次0.5 ml分别移植BMSC细胞0次(M0组)、1次(Ml组)、2次(M2组)、3次(M3组),不进行BMSC移植组别每次操作以L-DMEM培养基0.5 ml作为安慰剂对照,移植间隔为1周.移植前及末次移植后1、2周末检测大鼠血尿素氮、血肌酐、24 h尿蛋白、24 h尿微量蛋白,末次移植l周末制作病理片并于激光聚焦显微镜下观察大鼠肾脏病理和BMSC细胞在肾脏内分布情况.结果 M0、M1、M2、M3组在各观察点血尿素氮、血肌酐、24 h尿蛋白总量、24 h尿微量蛋白均明显高于N组(P＜0.001),末次移植第1周末M2、M3组24 h尿蛋白总量、24 h尿微量蛋白明显低于M1组(P＜0.05),M2、M3组间差异无统计学意义(P=0.063).结论 BMSC经肾动脉途径移植2次治疗大鼠阿霉素肾病效果最宜.     

不同剂量骨髓间充质干细胞对阿霉素肾病大鼠肾纤维化形成的影响

【摘要】 目的 探讨不同剂量骨髓间充质干细胞（BMSC）对阿霉素慢性肾病大鼠肾纤维化形成的影响及其作用机制。方法 SD大鼠尾静脉注射阿霉素造模,首次剂量3 mg/kg,2周后相同剂量再次注射。造模成功后将大鼠随机分为M组（模型组,肾动脉注射磷酸缓冲液）,A组、B组、C组（肾动脉分别移植1×106个/mL、2×106个/mL、3×106个/mL BMSC,细胞悬液均为0.5 mL）,每组各9只。另取9只正常大鼠作为对照组（N组,尾静脉输注等量0.9%氯化钠溶液）。术后第4周测定各组大鼠体重,Masson染色评估肾纤维化程度,过碘酸六胺银（PASM）染色观察肾小球和肾小管基膜改变,免疫组化染色分析转化生长因子（TGF）-β1、纤维连接蛋白（FN）表达。结果 BMSC移植4周后,A、B、C组大鼠一般情况均较M组改善,体重改变最明显,体重增长变化为C组＞B组＞A组,但C组与B组差异无统计学意义（P＞0.05）。Masson染色显示M组表现为典型的肾小球和肾小管纤维化改变,肾组织大面积蓝染,A、B、C组虽也有不同程度肾纤维化改变,但程度和范围均较M组减少（P＜0.05）。PASM染色显示M组肾小球和肾小管基膜明显增厚,A、B、C组肾小球和肾小管基膜增厚程度下降（P＜0.05）。免疫组化染色显示A、B、C组肾组织不同部位TGF-β1、FN表达与M组比较均下降,尤其是C组下降最明显,仅在部分肾小球和肾小管上皮细胞见少量弱阳性表达。结论 BMSC移植治疗可延缓阿霉素慢性肾病大鼠早期肾纤维化形成,且该作用随细胞移植数量增加而增强。其机制可能是通过下调TGF-β1表达抑制细胞外基质过度沉积实现的。     

静脉注射丙种球蛋白对重症肺炎患儿免疫功能的影响

目的：观察静脉注射丙种球蛋白（ IVIG）对重症肺炎患儿体液免疫及细胞免疫的影响。方法重症肺炎患儿68例作为观察对象,按照治疗方法分为IVIG组（n＝38）和对照组（n＝30）。其中IVIG组在常规综合治疗的基础上静脉滴注丙种球蛋白400 mg/（ kg·d）,连续应用3 d。分别于治疗前、治疗后3、7、14 d检测患儿IgM、IgG、IgA水平,血清IL-6、TNF-α水平,CD3、CD4、CD8阳性细胞百分率及CD4/CD8比值。结果 IVIG组在治疗后3 d,IgM、IgG、IgA即较治疗前显著升高,尤其是IgG升高更为显著（P﹤0.01）,而对照组较治疗前无显著变化（P﹥0.05）,两组相比,IVIG组IgG、IgA显著高于对照组（ P﹤0.01）。IVIG组IL-6及TNF-α在治疗后3 d即较治疗前显著降低（ P﹤0.01）,并且显著低于对照组（ P﹤0.01）;在治疗后7 d及14 d时仍较治疗前显著降低（ P﹤0.01）。CD3、CD4、CD8、CD4/CD8在IVIG组治疗后3 d起较治疗前即显著升高（ P﹤0.01）,在治疗后7 d及14 d仍显著高于治疗前（P﹤0.01）;两组相比,在治疗后3 d,IVIG组均显著高于对照组（P﹤0.01）。结论 IVIG可促进重症肺炎患儿体液免疫和细胞免疫功能,有助于患儿度过重症肺炎危险期。     

高湿环境致大鼠肾功能损害与水通道蛋白-2的表达

目的 观察高湿环境对SD大鼠肾功能的影响,探讨水通道蛋白-2（AQP2）和加压素受体-2（V2R）在高湿环境大鼠肾脏中的表达及其意义.方法 20只SD大鼠随机分为对照组和高湿组,每组10只.高湿组大鼠每日放入人工气候箱10 h[温度25 ℃,相对湿度（RH）为（90±2）%],对照组置常温常湿环境[温度（25±2）℃,RH（55±5）%].处理20 d后,荧光定量PCR检测肾髓质AQP2和V2R mRNA表达水平,Western blot法检测肾髓质AQP2、磷酸化AQP2（p-AQP2）以及V2R的蛋白表达水平.结果 与对照组相比,高湿组大鼠血尿素氮（BUN）、血肌酐（SCr）显著升高（P＜0.05）;肾髓质AQP2和V2R mRNA表达较对照组显著降低（P＜0.01）,AQP2、V2R的蛋白表达水平和AQP2的磷酸化水平较对照组显著降低（P＜0.05）.结论 高湿环境可对大鼠肾功能造成一定损害,且使V2R和AQP2的表达水平降低,AQP2磷酸化水平也降低,提示V2R和AQP2可能参与了高湿环境引起的肾功能损害的发生发展.     

急性一氧化碳中毒对大鼠大脑少突胶质细胞前体细胞分化功能的影响CSCD

目的 探讨急性一氧化碳中毒（acute carbon monoxide poisoning,ACOP）对大鼠大脑少突胶质前体细胞（oligodendrocyte precursor cells,OPCs）分化功能的影响.方法 利用分次腹腔注射制作ACOP大鼠模型,60只SD大鼠按随机数字表法选取45只进行染毒,造模结束后从存活大鼠中随机选取15只作为ACOP组,对照组15只大鼠按同样方案注射空气.分别在造模成功后1、3、7、14 d和30 d时取大鼠脑组织,采用免疫荧光组织化学法分别检测大脑皮质和海马NG2和CC1阳性细胞数目.结果 （1）与对照组相比,ACOP组大鼠脑内NG2阳性细胞胞体形态不规则、皱缩,且突起数量明显减少;（2）与对照组相比,处理后1d和3d时ACOP组大鼠大脑皮层内NG2阳性细胞数目明显较多（P＜0.05）;7d时ACOP组NG2阳性细胞数目开始减少（P＜0.05）,14 d和30 d时减少更加明显（P＜0.01）.CC1阳性细胞数目处理后第3天开始减少（P＜0.05）,7d时最明显（P＜0.01）,14 d和30 d时CC1阳性细胞数目亦较对照组少（P＜0.05）.但与14 d相比,30 d时ACOP组大鼠脑内皮层CC1阳性细胞数目增加约50％.（3）与对照组相比,处理后1d时ACOP组大鼠大脑海马内NG2阳性细胞数目明显较多（P＜0.01）;3d时NG2阳性细胞数目稍减少（P＞0.05）,7、14 d和30 d时明显减少（P＜0.01）.ACOP组大鼠大脑海马内CC1阳性细胞数目处理后1、3、7、14 d和30 d时均较对照组减少（P＜0.05）.结论 大鼠ACOP后OPCs和少突胶质细胞（oligodendrocytes,OLs）均会受到不同程度的损伤,同时可能会调动机体自我修复能力,诱导OPCs增殖、分化成为成熟的OLs,从而实现髓鞘损伤修复.     

苯对模拟失重大鼠细胞免疫及微核形成的影响

目的:探讨苯吸入染毒对尾吊模拟失重大鼠免疫系统及其遗传毒性的影响.方法:将20只雄性SD大鼠随机分为2组:对照组和染毒组.对照组吸入新鲜空气,染毒组吸入10 mg/m3的苯气体,每天24 h,连续7 d.结果:与对照组相比,染毒组中白细胞(WBC)显著低于对照组(P＜0.05);淋巴细胞(LYM)极显著低于对照组(P＜0.01); T淋巴细胞亚群分类:CD4极显著降低(P＜0.01)、CD8极显著升高(P＜0.01).染毒组中外周血淋巴细胞和骨髓细胞微核率极显著升高.结论:苯吸入染毒7 d可导致尾吊SD大鼠机体细胞免疫紊乱并可产生遗传毒性作用.     

骨髓间充质干细胞治疗新生重度缺氧缺血性脑损伤大鼠神经营养因子的表达

目的：初步探讨骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells ,BM-MSCs）治疗新生重度缺氧缺血性脑损伤大鼠神经营养因子的表达及其与疗效的关系。方法60只6日龄SD大鼠被随机分为手术对照组（ NS组）、空白对照组（ BC组）和干细胞移植组（ MSC组）,每组20只,制备重度缺氧缺血性脑损伤大鼠模型。将BM-MSCs经体外培养、扩增后,经枕大池移植到MSC组模型大鼠的蛛网膜下腔中,NS组用相同体积的生理盐水代替BM-MSCs,BC组于模型建立后不进行任何移植。经上述处理后3、7、14、21 d对大鼠进行改良神经功能缺损评分（ modified neurological severity scores ,mNSS）,同时收集大鼠脑脊液检测神经生长因子（ nerve growth factor ,NGF）、脑源性神经营养因子（ brain-derived neurotrophic factor , BDNF）、神经营养素-3（ neurotrophin-3,NT-3）、胶质细胞源性神营养因子（ glia cell line-derived neurotrophic factor ,GDNF）等神经营养因子的表达。结果 MSC组及NS组大鼠在移植后第7、14和21天,其mNSS评分与移植前和移植后第3天相比较差异均有统计学意义（P＜0．05）。 MSC组、NS组及BC组移植后21 d mNSS评分分别为7．0±2．8、10．0±3．7和11．0±1．6。与第3天比较, BC组仅在移植后21 d出现差异并具有统计学意义（P＜0．05）,移植后7 d和14 d差异无统计学意义。脑脊液检测发现MSC组神经营养因子NGF、NT-3、BDNF及GDNF的表达较移植前有显著增加（P＜0．05）,而NS组和BC组表达反而减少（P＜0．05）。结论经枕大池移植BM-MSCs对脑损伤大鼠神经功能恢复具有促进作用,推断NGF、NT-3、BDNF、GDNF等神经营养因子在其中起重要作用,其具体作用机制有待进一步研究。     

受者同系骨髓间充质干细胞对心脏移植大鼠的免疫调节作用

目的 观察静脉注射受者同系骨髓间充质干细胞(MSC)对大鼠心脏移植免疫反应的影响.方法 以20只成年雄性Lewis大鼠作为心脏供体,20只成年雄性Wistar大鼠作为受体,将其随机分为2组,每组10只,行颈部心脏移植:对照组(A组)手术后24h,经尾静脉注射3ml 0.9％氯化钠注射液;MSC处理组(B组)手术后24h,经尾静脉注射2×106个MSC(悬浮于3ml 0.9％氯化钠注射液中).术后1周,每组随机取受体大鼠4只,检测静脉血及移植物CD4+、CD8+、CD4+CD25high、CD4+CD25highfoxp3+T细胞占总淋巴细胞的比例,计算CD4+/CD8+比值.其余6只大鼠用于继续观察移植物存活时间.结果 A组大鼠移植心脏存活7.2±1.3d,B组大鼠移植心脏存活14.8±2.9d,两组间差异有统计学意义(P＜0.01).B组静脉血中CD4+/CD8+值、CD4+CD25highT细胞占总淋巴细胞的比例、CD4+CD25highFoxp3+T细胞占总淋巴细胞的比例(分别为1.18±0.07、2.51％±0.56％、2.05％±0.62％)均明显高于A组(分别为0.49±0.05、0.96％±0.19％、0.82％±0.09％),差异有统计学意义(P＜0.01).移植心脏中CD4+/CD8+值在两组间无统计学差异(P＞0.05);B组移植心脏中CD4+CD25highT细胞及CD4+CD25highFoxp3+T细胞占总淋巴细胞的比例(分别为2.74％±0.28％、2.54％±0.31％)均明显高于A组(分别为0.61％±0.06％、0.53％±0.06％),差异有统计学意义(P＜0.01).结论 静脉注射受者同系骨髓MSC可诱导大鼠心脏移植免疫耐受,延长移植心脏的存活时间.     

Co-existent renal eosinophilic granuloma and renal adenocarcinoma

Localized renal eosinophilic granuloma has not been previously reported. In this patient there was osseous eosinophilic granuloma and a 1 cm hypervascular renal lesion which pathologically proved to be coexistent renal adenocarcinoma and eosinophilic granuloma.     

Percutaneous transluminal renal angioplasty and renal function

Renal function was studied before and after percutaneous transluminal renal angioplasty (PTRA) in 79 patients. In a prospective study of 28 patients with unilateral renal artery stenosis, renal function was similar during angiotensin-converting enzyme (ACE) inhibition and after PTRA. In 37 patients with bilateral renal artery stenoses, 9 patients with solitary kidneys and renal artery stenoses and 5 patients with transplant renal artery stenoses, there was no statistical difference in the renal function before and after PTRA. Of the 79 patients studied, 50 had normal renal function before PTRA. In 5 of these renal function decreased, requiring temporary hemodialysis in 1. Of 29 patients with impairment of renal function due to renal artery stenosis, improvement was noted in 14, stabilization of renal function in 11, and decrease of renal function in 4. It is concluded that PTRA is a safe technique that can make life-long drug treatment unnecessary in antihypertensive patients. It can restore or stabilize renal function in renal insufficiency caused by renal artery stenosis. It has to be kept in mind that contrast medium toxicity and cholesterol embolization can induce severe renal insufficiency after PTRA.     

Hemorrhagic renal angiomyolipoma: Superselective renal arterial embolization for preservation of renal function

A 35-year-old woman with tuberous sclerosis and known bilateral renal angiomyolipomas presented with shock due to massive hematuria arising from the left kidney. The cause of bleeding was diagnosed angiographically as arising from a left upper pole renal artery aneurysm within the tumor. Cessation of bleeding and clinical stabilization occurred without deterioration of renal function after superselective embolization of the dorsal segmental renal artery with a single 5-mm Gianturco coil.     

Primary renal angiosarcoma mimicking a renal cell carcinoma

Primary renal angiosarcoma is a very rare malignant tumor that closely mimics the more common renal cell adenocarcinoma (hypernephroma) in radiologic appearance. Both tumors are hypervascular masses and the diagnosis must be confirmed histologically. However, in the presence of a tumor with a capsular blood supply, and in the absence of venous invasion, the diagnosis of renal angiosarcoma may be suggested, especially in a patient with a new onset of consumption coagulopathy.