TGF-β1介导的RhoA/ROCK通路在大鼠肺肌成纤维细胞分化中的调节作用

 目的：探讨转化生长因子β1 (TGF-β1)介导的RhoA/Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶(ROCK)通路在调控肺成纤维细胞向肌成纤维细胞分化过程中的作用。方法：胰酶消化法获得原代培养的肺成纤维细胞,进行以下实验：(1) 观察TGF-β1诱导肺成纤维细胞不同时间后p-RhoA、ROCK、磷酸化肌球蛋白磷酸酶靶亚基(p-MBS)、血清应答因子(SRF)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、I型和III型胶原蛋白表达变化;(2) 将细胞分为对照组、TGF-β1诱导分化组和Y-27632（ROCK通路阻滞剂）干预组,免疫细胞化学染色与Western blotting法分别观察与检测ROCK、p-MBS、SRF、α-SMA、I型和III型胶原蛋白在细胞内的定位分布与表达。结果：（1）经TGF-β1诱导24 h后,大鼠肺成纤维细胞胞体内出现大量平行或交叉排列的α-SMA抗体标记的肌丝。随着TGF-β1诱导刺激时间的延长,p-RhoA、ROCK、p-MBS、SRF、α-SMA、I型和III型胶原蛋白表达逐渐增高,其中RhoA/ROCK信号（p-RhoA、ROCK、p-MBS）、SRF和α-SMA蛋白分别在诱导后6 h、12 h和24 h达到高峰。I型胶原和III型胶原蛋白表达均在24 h达高峰,分别为诱导前的2.19和3.04倍（P<0.05）。 (2)与TGF-β1诱导分化组比较,当给予Y-27632干预后,在相应时点ROCK、p-MBS、SRF、α-SMA、I型和III型胶原蛋白表达均明显降低,差异有统计学意义（P<0.05）。结论：TGF-β1通过ROCK信号转导通路的活化,刺激了大鼠肺成纤维细胞向肌成纤维细胞分化,进而促进了胶原蛋白的合成,可能在（矽）肺纤维化形成过程中发挥着重要作用。     

miR-340和ROCK1的表达对宫颈癌细胞增殖和迁移能力的影响

目的 探讨微小RNA-340-5p(miR-340-5p)通过靶向Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶1(Rho associated coiled-coil forming protein kinase 1,ROCK1)对宫颈癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法 从基因表达综合数据库（GEO）中提取宫颈癌数据集GSE44001（包括300例宫颈癌组织和300例正常组织）中miRNA芯片以及转录组mRNA芯片数据,R软件进行分析miR-340-5p和ROCK1的mRNA的表达情况。qRT-PCR检测宫颈癌组织标本和各细胞系中miR-340-5p和ROCK1的mRNA的表达。双荧光素酶实验证明miR-340-5p和ROCK1的关系。细胞实验分为Normal组（不进行任何干预）,miR-340-5p-mimic-NC组（细胞转染miR-340-5p-mimic-NC）,miR-340-5p-mimic组（细胞转染miR-340-5p-mimic）,miR-340-5p-mimic+pc组（细胞转染miR-340-5p-mimic+pcDNA3.1-ROCK1）;EDU试剂盒、Transwell小室实...     

鹿茸多肽对APP/PS1双转基因小鼠Rho/ROCK通路的影响

目的 探讨鹿茸多肽(VAP)对APP/PS1双转基因小鼠Rho/ROCK通路的影响.方法 APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组和鹿茸多肽组,每组20只,另以同窝同性别阴性小鼠20只设立为对照组.鹿茸多肽组小鼠鹿茸多肽100 mg/kg灌胃给药,每天1次,连续28 d.治疗后水迷宫实验检测并记录小鼠逃避潜伏期和穿越平...     

shRNA沉默 ROCK1和ROCK2 表达对缺氧诱导的大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的: 探讨Rho相关的卷曲蛋白激酶(ROCK1)和ROCK2在缺氧诱导的大鼠心肌细胞凋亡中的作用。方法: 原代培养大鼠心肌细胞,并用抗α-横纹肌肌动蛋白免疫组化法进行鉴定。将ROCK1-shRNA和ROCK2-shRNA瞬时转染细胞,48 h后给予缺氧6 h处理。实验分为5组:(1)空白对照组;(2)缺氧组;(3)缺氧+阴性对照shRNA组;(4)缺氧+ROCK1-shRNA组;(5)缺氧+ROCK2-shRNA组。用倒置显微镜观察心肌细胞搏动频率与节律;用全自动生化分析仪测定细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)含量;用MTT检测细胞存活率;用流式细胞仪检测细胞凋亡率;用Western blotting检测ROCK1和ROCK2的表达,并检测caspase-3和p-PI3K的表达情况。结果: 鉴定证实大鼠心肌细胞原代培养成功。缺氧损伤后心肌细胞搏动频率较对照组明显减慢,搏动幅度减弱,节律不规整(P<0.01),而ROCK1-shRNA和ROCK2-shRNA的转染能抑制缺氧导致的这一作用(P<0.05或P<0.01)。全自动生化分析仪检测发现,缺氧能导致细胞培养液LDH含量升高(P<0.01),而ROCK1-shRNA和ROCK2-shRNA的转染能抑制缺氧导致的这一作用(P<0.01)。MTT检测发现,缺氧能导致心肌细胞存活率降低(P<0.05),而ROCK1-shRNA和ROCK2-shRNA的转染能抑制缺氧导致的这一作用(P<0.05)。流式细胞仪检测发现,缺氧能导致心肌细胞凋亡率升高(P<0.01),而ROCK1-shRNA和ROCK2-shRNA的转染能抑制缺氧导致的这一作用(P<0.05或P<0.01)。Western blotting检测发现,ROCK1-shRNA的转染能降低ROCK1的表达(P<0.05), ROCK2-shRNA的转染能降低ROCK2的表达(P<0.01);缺氧能导致caspase-3表达升高(P<0.05)、p-PI3K表达降低(P<0.01),ROCK1-shRNA和ROCK2-shRNA的转染能抑制缺氧导致的这一作用(P<0.05或P<0.01)。结论: ROCK1和ROCK2表达下调能抑制缺氧损伤导致的大鼠心肌细胞凋亡,其机制与抑制caspase-3活化和增强p-PI3K的表达有关。     

法舒地尔对大鼠动脉粥样硬化斑块中单核细胞趋化蛋白-1表达的抑制作用

目的探讨Rho/Rho激酶途径在大鼠动脉粥样硬化形成过程中的作用及机制。方法将30只健康雄性Wistar大鼠（体质量220～250g）,随机分为正常对照组、动脉硬化组和法舒地尔组,每组10只。正常对照组行假球囊损伤手术给予正常饮食,余两组每只大鼠给予30万U/kg维生素D3右下肢肌肉注射后用球囊行动脉拉伤,在基础饲料中加入2%胆固醇、0.5%胆酸钠、0.2%丙基硫氧嘧啶、维生素D3粉剂（1.25×10^6U/kg饲料）、3%猪油等饲养。法舒地尔组同时给予法舒地尔5mg/kg体质量,每日2次腹腔注射。喂养9周后空腹24h抽血并处死,检测血脂水平,自主动脉弓下约1cm处留取动脉组织1cm用4%甲醛溶液固定,行HE染色,用免疫组织化学法检测斑块中血管紧张素Ⅱ-1型受体（AT1R）和单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）蛋白的表达。结果动脉硬化组均形成了典型的粥样斑块;免疫组化半定量分析表明：动脉硬化组与正常对照组和法舒地尔组比较,AT1R和MCP-1蛋白均明显升高（P〈0.001）,法舒地尔组与正常对照组比较,AT1R和MCP-1蛋白的表达也明显升高,有明显差异（P〈0.05）。结论Rho/Rho激酶途径在大鼠动脉粥样硬化的形成过程中参与了重要的作用,该途径的激活与RAS系统的激活有密切关系,Rho激酶抑制剂的抗动脉粥样硬化作用可能是通过抑制了MCP-1的表达而起作用。     

不同生长期小鼠胸腺T细胞不同亚群的变化及ROCK抑制剂对衰老小鼠胸腺再生的促进作用

目的研究各发育阶段小鼠胸腺细胞、胸腺上皮细胞(TEC)和脾脏中T细胞的变化,探索Rho相关卷曲蛋白激酶(ROCK)抑制剂对衰老小鼠胸腺再生的作用。方法取幼年、青年、中年及老年期C57BL/6雌鼠的胸腺和脾脏,流式细胞术分析小鼠胸腺细胞、TEC及脾脏中T细胞亚群;ROCK抑制剂体外处理衰老进程中小鼠TEC,荧光酶联斑点分析仪观察细胞增殖情况;ROCK抑制剂处理20月龄衰老小鼠,流式细胞术检测小鼠胸腺细胞、TEC及脾脏中T细胞亚群的变化。结果随月龄增加,胸腺细胞、TEC总数及各细胞亚群数量均显著降低;脾脏中总CD4⁺T细胞及CD8⁺T细胞比例无显著性改变,但CD4+初始T细胞、CD8+初始T细胞和CD4+近期胸腺迁出细胞(RTE)在脾脏中所占比例呈下降趋势;ROCK抑制剂在体外促进衰老进程中小鼠TEC增殖,ROCK抑制剂在体内使衰老小鼠胸腺细胞、TEC以及外周脾脏中T淋巴细胞各亚群数量明显增加。结论随着小鼠月龄增加,胸腺呈进行性退化。ROCK抑制剂可以显著缓解衰老小鼠胸腺的萎缩,促进衰老小鼠胸腺再生。     

解除狭窄联合Rho激酶抑制剂对颈动脉狭窄大鼠认知功能的影响

目的 观察解除狭窄联合Rho激酶抑制剂对重度颈动脉狭窄大鼠认知功能(VCI)、海马区细胞凋亡及相关基因表达.方法 用48只SD大鼠,复制重度颈动脉狭窄模型,分成假手术组、狭窄解除组、药物组和联合组,另12只为对照组.联合组给予狭窄解除和法舒地尔(8.35 mg/kg),药物组注射等量的法舒地尔,狭窄解除组给予解除狭窄,对照组注射等容积的0.9％氯化钠注射液.分别在干预2和4周后,Morris水迷宫实验检测大鼠的空间学习记忆能力;免疫组化方法检测海马区凋亡相关蛋白BCL-2及BAX免疫阳性细胞数;TUNEL染色法检测海马区凋亡神经细胞.结果 与单纯药物组和狭窄解除组比较,联合治疗组大鼠的逃避潜伏期和游泳距离百分比均有显著改善(P＜0.05),海马区凋亡相关蛋白BCL-2免疫阳性细胞数显著增加(P＜0.05),而BAX的免疫阳性细胞数显著降低(P＜0.05),且治疗4周比2周更明显(P＜0.05);联合治疗组大鼠海马区的神经细胞凋亡率为56.24％±2.25％,明显低于药物治疗组和狭窄解除组的63.86％ ±2.23％和61.89％±2.67％(P ＜0.05),且随着治疗时间延长,细胞凋亡率呈下降趋势.结论 解除颈动脉狭窄联合Rho激酶抑制剂可通过调节凋亡相关蛋白的表达而明显改善颈动脉狭窄引起的认知功能障碍.     

PKC和ROCK对硝苯地平舒张血管作用的影响

目的:探讨蛋白激酶C(PKC)及Rho相关激酶(ROCK)对硝苯地平舒张大鼠离体胸主动脉血管环作用的影响。方法:采用离体血管环灌流装置观察硝苯地平对基础状态血管环及去甲肾上腺素(NE,10~(-6)mol/L)或KCl(60mmol/L)预收缩血管环的张力变化,并利用PKC抑制剂和ROCK抑制剂等工具药观察对硝苯地平舒血管作用的影响并探讨可能机制。结果:系列浓度硝苯地平对基础状态血管环张力无明显影响,对NE和KCl预收缩的血管环具有浓度依赖性舒张作用(P 0. 05),去内皮组舒张作用与内皮完整组比较无明显差异。预孵PKC抑制剂星孢菌素(STA,10~(-8)mol/L)及激动剂佛波酯(PMA,10~(-7)mol/L)后,STA能增强硝苯地平对血管的舒张作用,而PMA能减弱硝苯地平对血管的舒张作用(P 0. 05);预孵ROCK抑制剂法舒地尔(fasudil,10~(-6)mol/L)及激动剂血管紧张素Ⅱ(Ang-Ⅱ,10-9mol/L)后,fasudil能增强硝苯地平对血管的舒张作用,而Ang-Ⅱ能减弱硝苯地平对血管的舒张作用(P 0. 05);钾通道阻滞剂BaCl_2(10~(-4)mol/L)、四乙胺(10~(-3)mol/L)、格列本脲(10~(-5)mol/L)和4-氨基吡啶(10~(-3)mol/L)对硝苯地平的舒张血管作用无明显影响。在无钙且含高浓度KCl的溶液中,硝苯地平可浓度依赖性地抑制累积浓度的CaCl_2对大鼠离体主动脉环的收缩作用(P 0. 05)。在无钙液中,硝苯地平对NE所引起的收缩无明显影响。结论:硝苯地平能够呈浓度依赖性地舒张大鼠主动脉,其舒张血管作用为非内皮依赖性,且与抑制细胞外钙内流密切相关,其舒张血管作用部分与抑制PKC和ROCK作用相关。     

植入PHPMA水凝胶对脑损伤后胶质瘢痕形成的抑制性影响

人工合成 PHPMA水凝胶材料。利用此材料修补急性损伤的大鼠脑皮质缺损区 ,评价其对创伤后胶质瘢痕形成的影响以及在神经组织再生中的作用。合成的水凝胶材料经检测分析性状后植入预先造成的大脑皮质空腔内 ,4周以后灌注取脑 ,观察植入材料和周围组织整合结果以及星形胶质细胞在材料周围和内部的浸润状况 ,确定有无胶质瘢痕的形成 ,并进行超微结构分析。结果表明 ,植入材料可和周围组织良好整合 ,二者交界处细胞分布弥散 ,星形胶质细胞无过度聚集现象 ;植入材料内部有轴突样结构生长和血管发生。本研究结果提示 ,利用 PHPMA水凝胶填补脑损伤后的空洞可抑制胶质瘢痕的形成 ,有利于损伤部位神经组织的再生。     

椎管术后硬脊膜外瘢痕粘连形成的原因及治疗进展

硬脊膜外瘢痕粘连是椎管术后常见的并发症 ,为了寻求避免瘢痕粘连的方法 ,不少学者做了大量的研究 ,特别是近几年来 ,随着高分子聚合物材料的迅猛发展 ,给椎管手术的患者带来了福音。本文就近几年来关于防止椎管术后瘢痕粘连的原因及治疗进展作一综述。1　椎管术后瘢痕粘连形成的原因1948年 Key与 Ford〔1〕首先对椎板切除 ,椎间盘摘除术后硬膜周围纤维化的形成进行了研究 ,提出了纤维化形成的前源学说 ,认为术中损伤纤维环是造成这一并发症的主要原因。 1974年 L arocca等 〔2〕则通过动物实验证明硬膜纤维瘢痕粘连是来自椎板外损伤肌肉…     

吡非尼酮对大鼠坐骨神经损伤后瘢痕形成及功能恢复的实验研究

目的探讨大鼠坐骨神经损伤后细胞因子抑制剂吡非尼酮对神经吻合口处瘢痕形成及神经功能恢复的影响。方法选用健康雄性SD大鼠60只,制作右侧坐骨神经损伤模型,术后随机分为3组,分别为对照组、低剂量组和高剂量组,每组20只,分别给予0 mg/kg、25 mg/kg、100 mg/kg吡非尼酮混悬液灌胃。术后于第4、12周分别行坐骨神经功能指数、神经电生理测定,然后取材进行Ⅰ型胶原蛋白免疫组织化学染色,最终对实验结果进行图像分析和统计学处理。结果坐骨神经功能指数:术后第4周,三组之间两两比较,差异无统计学意义(P0.05);术后第12周,低剂量组优于对照组(P0.01),高剂量组优于低剂量组(P0.01);神经电生理:术后第4周,三组之间神经传导速度、潜伏期、波幅两两比较,差异无统计学意义(P0.05);术后第12周,与对照组相比,低剂量组和高剂量组神经传导速度显著增快(P0.05),潜伏期缩短(P0.05),波幅升高(P0.05),且高剂量组优于低剂量组(P0.05);Ⅰ型胶原蛋白沉积量:术后第4周,与对照组相比,低剂量组和高剂量组神经吻合口处Ⅰ型胶原蛋白沉积量明显减少(P0.01),低剂量组与高剂量组相比,差异无统计学意义(P0.05);术后第12周,与对照组相比,低剂量组和高剂量组神经吻合口处Ⅰ型胶原蛋白沉积量明显减少(P0.01),且高剂量组比低剂量组减少更明显(P0.05)。结论吡非尼酮能明显减少神经吻合口处Ⅰ型胶原蛋白沉积,有效抑制瘢痕形成,促进神经功能恢复。     

Raf激酶抑制蛋白和p-ERK在糖尿病肾病大鼠肾组织中的表达及意义

 目的:探讨Raf激酶抑制蛋白(Raf kinase inhibitor protein,RKIP)和磷酸化细胞外信号调节激酶(phosphorylated extracellular signal-regulated kinase, p-ERK)在糖尿病肾病大鼠肾组织中的表达及意义。方法:40只Sprague-Dawley （SD）大鼠随机分为2组:正常对照组（N组）和糖尿病肾病组（M组）。苏木精-伊红（hematoxylin-eosin, HE）和过碘酸-雪夫（periodic acid-Schiff,PAS）染色观察肾组织病理改变,免疫组化方法检测各组肾组织RKIP和p-ERK1/2表达,Western blotting 检测各组RKIP和p-ERK1/2的表达。结果:M组大鼠随着病程的延长,血糖升高,出现蛋白尿,肾重增加,肾组织内p-ERK1/2明显增高,RKIP降低,与N组相比有显著差异(P<0.05)。结论: RKIP表达的减少及p-ERK的表达增加可能促进糖尿病肾病的进展。     

Recombinant human endostatin reduces hypertrophic scar formation in rabbit ear model through down-regulation of VEGF and TIMP-1

BackgroundRecombinant human endostatin (Endostar) has been widely used to suppress angiogenesis in carcinoma patients. Hypertrophic scar (HS) tissue, much like a carcinoma, is often associated with angiogenesis. However, there have been few studies conducted on the effects of Endostar on HS or its mechanism.ObjectiveThis paper investigated the effects Endostar on the HS of rabbit ears and studied the effects of Endostar on VEGF and TIMP-1 expression.MethodsSixteen New Zealand white rabbits were used to establish HS models. Then, rabbit ears containing HS were randomly assigned to either the Endostar group or the control group. The changes of appearance and histology were evaluated using the naked eye, hematoxylin eosin staining, and a scar elevation index. The VEGF and TIMP-1 expressions were detected by immunohistochemical staining, RT-PCR, and western blot.ResultsThe thickness of the connective tissue in the Endostar group were thinner, the numbers of micro vessels and fibroblasts were fewer, and the collagen fibers were smoother. Moreover, the mRNA and protein expressions of VEGF and TIMP-1 in the Endostar group were significantly lower than those in the control group.ConclusionThe results suggested that Endostar reduced the formation of HS by down-regulation of VEGF and TIMP-1 expressions.     

P38 MAPK在大鼠脊髓损伤后胶质瘢痕形成早期对GFAP、vimentin表达的调控作用

目的探讨在大鼠脊髓损伤(SCI)后胶质瘢痕形成早期,p38丝裂原活化蛋白激酶(P38 MAPK)对神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及波形蛋白(vimentin)表达的影响。方法将大鼠随机分为假手术组(sham group)、模型组(model group)、P38 MAPK特异性激动剂anisomycin组(anisomycin group)和P38 MAPK特异性抑制剂SB203580组(SB203580group)。脊髓夹伤模型制作成功后即分别在损伤区硬脊膜下注射0.9%氯化钠溶液、anisomycin和SB203580各10μL,假手术组只打开椎板暴露脊髓,不做其他处理。于术后第1、3、7及14天利用BBB评分评定大鼠后肢运动功能,用Western blot和免疫荧光标记技术检测GFAP和vimentin表达。结果术后第14天,模型组BBB评分显著低于假手术组(P0.01);SB203580组大鼠BBB评分显著高于模型组(P0.05)但仍低于假手术组(P0.01),而anisomycin组则显著低于模型组(P0.05)。术后第7和14天,模型组GFAP、vimentin的表达显著高于假手术组(P0.01);SB203580组GFAP、vimentin的表达均显著低于模型组(P0.05)但仍高于假手术组(P0.05),而anisomycin组GFAP、vimentin的表达均显著高于模型组(P0.05)。结论 SCI后胶质瘢痕形成早期P38 MAPK可调控GFAP、vimentin的表达,抑制P38 MAPK可降低GFAP、vimentin的表达,减轻大鼠SCI后胶质瘢痕形成,促进神经功能的恢复。     

术前碳水化合物对瘢痕切除术后胰岛素抵抗的影响

目的观察术前口服碳水化合物及静脉输注葡萄糖对术后胰岛素抵抗程度的影响.方法择期瘢痕切除术病人60例,随机分为对照组、口服组和静注组,每组20例.术前对照组常规禁食禁饮;口服组口服12.5%碳水化合物的饮料（CHO）;静注组持续静脉输注10%葡萄糖液.分别于口服或静注前、术后6 h采血,测定血糖、血清胰岛素以及红细胞胰岛素受体.结果处理前各组血糖、血清胰岛素、胰岛素敏感指数及红细胞胰岛素高亲和力受体、低亲和力受体无明显差异;术后6 h口服组、静注组的血糖明显低于对照组,与处理前无显著差别;术后6 h各组血清胰岛素无显著差别,均显著高于处理前;胰岛素敏感指数、红细胞低亲和力受体三组均较处理前显著降低,但口服组、静注组明显高于对照组;术后6 h口服组、静注组红细胞高亲和力受体无明显降低;口服组与静注组间的血糖、胰岛素、胰岛素敏感指数及红细胞胰岛素受体无明显差别.结论术前静脉输注葡萄糖可缓解术后胰岛素抵抗的程度,术前饮用碳水化合物具有同样的效果,是一种简单有效的治疗方法.     

The inhibitor effect of RKIP on inflammasome activation and inflammasome-dependent diseases

Aberrant inflammasome activation contributes to the pathogenesis of various human diseases, including atherosclerosis, gout, and metabolic disorders. Elucidation of the underlying mechanism involved in the negative regulation of the inflammasome is important for developing new therapeutic targets for these diseases. Here, we showed that Raf kinase inhibitor protein (RKIP) negatively regulates the activation of the NLRP1, NLRP3, and NLRC4 inflammasomes. RKIP deficiency enhanced caspase-1 activation and IL-1β secretion via NLRP1, NLRP3, and NLRC4 inflammasome activation in primary macrophages. The overexpression of RKIP in THP-1 cells inhibited NLRP1, NLRP3, and NLRC4 inflammasome activation. RKIP-deficient mice showed increased sensitivity to Alum-induced peritonitis and Salmonella typhimurium-induced inflammation, indicating that RKIP inhibits NLRP3 and NLRC4 inflammasome activation in vivo. Mechanistically, RKIP directly binds to apoptosis-associated speck-like protein containing a caspase-recruitment domain (ASC) and competes with NLRP1, NLRP3, or NLRC4 to interact with ASC, thus interrupting inflammasome assembly and activation. The depletion of RKIP aggravated inflammasome-related diseases such as monosodium urate (MSU)-induced gouty arthritis and high-fat diet (HFD)-induced metabolic disorders. Furthermore, the expression of RKIP was substantially downregulated in patients with gouty arthritis or type 2 diabetes (T2D) compared to healthy controls. Collectively, our findings suggest that RKIP negatively regulates NLRP1, NLRP3, and NLRC4 inflammasome activation and is a potential therapeutic target for the treatment of inflammasome-related diseases.     

慢性粒细胞白血病对BCR-ABL酪氨酸激酶 靶向抑制剂的耐药机制

BCR-ABL酪氨酸激酶抑制剂靶向治疗慢性粒细胞白血病（chronic myeloid leukemia, CML)能够达到良好的临床效应,然而随着其临床广泛应用,对其产生耐药逐渐增多。CML细胞多药耐药是目前导致化疗失败,缓解率降低,疾病复发的主要原因。本文就CML对BCR-ABL酪氨酸激酶靶向抑制剂耐药的主要机制进行了阐述。     

重组水蛭素对大鼠坐骨神经损伤后神经功能的影响及可能机制

目的探讨重组水蛭素对大鼠坐骨神经损伤后神经功能的影响及对坐骨神经微管相关蛋白-2(MAP-2)、神经丝蛋白(NF-M)与生长相关蛋白43(GAP-43)蛋白表达的影响。方法 60只SD大鼠,雌雄不限,随机分为随机分为假手术组、实验组与重组水蛭素处理组。通过钳夹大鼠坐骨神经制备周围神经损伤大鼠模型,对各组大鼠进行坐骨神经指数与小腿三头肌湿重比测定,western blot方法检测坐骨神经MAP-2、NF-M与GAP-43的表达,Real time-PCR方法检测坐骨神经MAP-2 mRNA、NF-M mRNA与GAP-43 mRNA的表达水平。结果给予重组水蛭素处理后,坐骨神经损伤大鼠的坐骨神经指数明显升高,小腿三头肌湿重比减小(P<0.05);坐骨神经MAP-2、NF-M与GAP-43蛋白与mRNA的表达升高(P<0.05)。结论重组水蛭素能促进周围神经损伤后再生和功能恢复,其机制可能与上调MAP-2、NF-M与GAP-43表达相关。     

Aurora蛋白激酶抑制剂VX-680对人肝癌细胞HepG2细胞间同质黏附力和迁移能力的影响

目的:研究Aurora蛋白激酶抑制剂VX-680对人肝癌细胞HepG2细胞间同质黏附力和迁移能力的影响。方法:分别设立实验组和对照组:实验组加VX-680,总共设置3个浓度组(3.125μmol/L组、6.25μmol/L组和12.5μmol/L组);对照组加DMSO。采用细胞缓慢聚集实验和分离实验观察不同浓度VX-680对HepG2细胞间黏附能力的影响。通过划痕愈合实验检测不同浓度VX-680对Hep G2细胞迁移能力的影响。Western blot检测HepG2细胞E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达。结果 :细胞缓慢聚集实验结果显示,相比对照组,各实验组细胞所形成的细胞团块数均明显减少(P0.01)。细胞分离实验结果显示,随着VX-680浓度的升高,N_(TC)/N_(TE)的比值逐渐降低,即细胞间黏附能力逐渐增强。划痕愈合实验结果显示,相比对照组,随着VX-680浓度的升高,细胞划痕愈合能力逐渐减弱。Western blot实验结果显示HepG2细胞中E-cadherin的表达随着VX-680浓度的升高而增加(P0.05)。结论 :VX-680可以增加人肝癌细胞HepG2细胞间的同质黏附力,同时抑制其迁移。