柯萨奇病毒B3诱导大鼠心肌成纤维细胞骨桥蛋白及I型胶原的表达情况

目的检测柯萨奇病毒B3（CVB3）对大鼠心肌成纤维细胞骨桥蛋白（OPN）及I型胶原表达的影响,探讨OPN在病毒性心肌炎的可能发病机制。方法用重复感染率（MOI）为0．5PFU／cell的CVB3感染体外培养的大鼠心肌成纤维细胞,细胞分对照组（12h）、病毒组（感染后12h、1d,2d及3d）。用RT·PCR及WesternBlot、免疫组化检测OPN及I型胶原表达,并将OPN表达与I型胶原表达进行直线相关分析。结果（1）RT-PCR测得对照组12h、病毒组12h、1d、2d及3d5组OPN／13-actin吸光度比值分别为：0．38±0．06、0．56±0．06、0．72±0．05、0．98±0．06、0．86±0．02;WesternBlot测得上述5组的OPN／13-actin灰度值分别为：0．26±0．03、0．36±0．03、0．52±0．04、0．76±0．05、0．62±0．02;感染后12h,OPN表达即增高,于2d达到高峰,3d呈下降趋势,OPN／13-actin吸光度比值、灰度值比较差异均有统计学意义（F值分别为74．965、53．004,P均〈0．05）;（2）RT-PCR测得心肌成纤维细胞对照组12h、病毒组12h、1d、2d、3dI型胶原／13-actin吸光度比值分别为：1．12±0．03、1．184-0．01、r．22±0．02、1．33±0．02、1．28±0．03,感染后12hI型胶原表达即增高,于2d达到高峰,3d呈下降趋势,差异有统计学意义（F=38．241,P〈0．05）;（3）OPN表达与I型胶原有正相关关系（r=0．948,P〈0．001）。结论CVB3可诱导心肌成纤维细胞I型胶原及OPN表达,OPN表达与I型胶原表达呈正相关,提示OPN可能促进心肌成纤维细胞I型胶原表达,参与病毒性心肌炎心肌纤维化的发病机制。     

流式细胞术分析急性脑缺血患者血小板膜糖蛋白改变

应用流式细胞术（FCM）检测急性脑缺血患者血小板膜糖蛋白Ⅱb／Ⅲa复合物（GPⅡb／Ⅲa）、GPⅠb、α-颗粒膜蛋白（GMP－140）、假血管性血友病因子（vWF）等的改变，结果显示病例组GP阳性细胞百分率及平均荧光强度均较对照组明显升高（P＜0．001～0．05），表明急性脑缺血患者血小板处于激活状态，并探讨了GP在脑缺血发病中的作用，FCM为研究脑缺血患者血小板活化程度和抗血小板药物疗效提供了一种新方法。     

大鼠卵巢经诊断超声照射后c-fos表达的研究

目的：探讨大鼠卵巢经超声照射不同次数，时间对c-fos表达的影响。方法：将30只雌性大鼠随机分为等同数6组：正常对照组，5min,10min,20min,30min和60min组，应用EUB－26黑白超声诊断仪，对大鼠卵巢相应部位予以不同时间持续照射，7天后断头处死当即取材，用免疫组织化学ABC法检测c-fos，用原位杂交方法检测c-fosmRNA表达情况。结果：诊断超声持续照射大鼠卵巢组织10min后与对照组无差异（P＞0．05），照射20min后大鼠卵巢组织c-fos表达增加并随照射时间的延长表达明显增加，与对照组差异显著（P＜0．05），而持续照射大鼠卵巢20min时c-fosmRNA与对照组无明显差异呈弱表达（P＞0．05），而持续照射30min时表达增加（P＜0．05），60min后表达明显增加（P＜0．01）。结论：诊断超声持续照射大鼠卵巢20min后使c-fos表达增加，持续照射30min后使c-fosmRNA表达增加，从而诱导大鼠卵巢细胞凋亡。     

冠心病与风心病患者中心血与外周血血小板活性变化的临床意义

采用单克隆抗体和流式细胞仪分析技术，研究冠心病和风心病患者中心血与外用静脉血血小板表面GPⅡb／Ⅲa、vWF、GMP－140平均荧光强度和阳性细胞百分率的变化。结果．冠心病组中心血血小板GPⅡb／Ⅲa、GMP－140平均荧光强度较风心病之明显增高（P＜0．01），冠心病组中心血、外周静脉血血小板膜vWF平均荧光强度较风心病组明显增高（P＜0.01）。提示，冠心病血小桥活化程度较高。另外，冠心病组中心血血小板膜GPⅡb／Ⅲa、GMP－140平均荧光强度较自身外周静脉血高（P＜0．05）。表明冠心病人中心血血小板活化状态高于外周静脉血，而风心病患者无明显血小板活化现象。     

二烯丙基三硫对脂多糖诱导小鼠肺泡巨噬细胞株MH-S细胞因子生成的影响

目的 探讨二烯丙基三硫（DATS）对脂多糖（LPS）诱导小鼠肺泡巨噬细胞株MH-S细胞因子生成的影响。方法 体外培养MH-S细胞，用DATS和（或）LPS进行干预。酶联免疫吸附法测定细胞上清液中肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）浓度。反转录PCR检测细胞中TNF-α、IL-1β mRNA表迭。结果 LPS（1mg／L）孵育细胞1、2、3、6h，TNF-α、IL-1β的蛋白生成及其mRNA表达均较对照组明显增加（P〈0．01），呈时间依赖性。用DATS（0．1、0．5、2．5、5．0ms／L）预处理细胞30min后再给予LPS刺激3h，可使TNF-α、IL-1β含量及其mRNA表达明显降低，并呈剂量依赖性，其中TNF-α含量仍高于对照组（P〈0．05），但IL-1β含量在2．5、5mg／LDATS作用下可降至对照组水平。单独DATS对TNF-α及IL-1β的生成及其mRNA表达无明显影响（P〉0．05）。结论 DATS通过抑制LPS诱导的小鼠MH-S细胞TNF-α、IL-1β mR-NA表达而减少其蛋白生成，具有直接的抗炎效应，这是DATS预防ALI发生、减轻肺组织损伤的重要机制。     

雷公藤对豚鼠表皮c-fos基因表达及表皮再生能力的调节

目的：观察雷公藤甲素对豚鼠皮肤原癌基因c-fos表达的影响，探讨雷公藤甲素的有效作用浓度。方法：实验于2004—01／08在泸州医学院组织学与胚胎学实验空进行。将20只雄性豚鼠随机分成为4个实验组，分别为对照组、雷公藤甲素5mg／L组、雷公藤甲素10mg／L组和雷公藤甲索20mg／L组，每组5只。使用雷公藤甲素5，10，20mg／L3种浓度对局部皮肤真皮注射处理，免疫组织化学方法显示c-fos阳性细胞，用光学显微镜和图像分析仪对结果进行观察和分析。结果：20只豚鼠均进入结果分析。与对照组比较，雷公藤甲素5，10，20mg／L组豚鼠表皮角质细胞c-fos表达明显增强（149，162，144，87个／视野，P〈0．05），吸光度明显增高（0．142&;#177;0．025，0．157&;#177;0．066，0．159&;#177;0．079，0．107&;#177;0．076，P〈0．05）。不同浓度药物之间作用差异元显著性意义（P〉0．05）。结论：雷公藤甲素对豚鼠皮肤原癌基因c-fos表达具有调节作用，其有效作用浓度范围较实验采用的5-20mg／L大。     

急性冠脉综合征患者外周血白介素-18蛋白和基因表达的变化

目的探讨白介素-18（IL-18）在急性心肌梗死发生、发展中的作用。方法采用RT—PCR和ELISA方法分别测定了急性心肌梗死组（AMI）、不稳定性心绞痛组（UAP）、稳定性心绞痛组（SAP）和健康对照组的IL-18血浆水平和外周血单个核细胞IL-18mRNA的表达量。结果急性心肌梗死组IL-18血浆水平和外周血单个核细胞IL-18mRNA表达量显著高于不稳定性心绞痛组（P〈0．01，P〈0．05）、稳定性心绞痛组（P〈0．01，P〈0．01）和健康对照组（P〈0．01，P〈0．01）。结论外周血IL-18蛋白水平、IL-18mRNA表达量与急性冠脉综合征（ACS）的发展及严重程度密切相关。     

白细胞介素-6在2型糖尿病患者腹部皮下和网膜脂肪组织中的表达及其与胰岛素抵抗的关系

目的探讨白细胞介素石（IL-6）基因在2型糖尿病（T2DM）患者腹部皮下和网膜脂肪组织中的表达情况，及其与胰岛素抵抗的关系。方法用半定量RT-PCR方法检测22例正常人（对照组）和20例T2DM（糖尿病组）患者的大网膜与皮下脂肪组织IL-6mRNA的表达水平，并测量体重、血压、腰围、臀围、血糖、空腹胰岛素、血脂和胰岛素敏感指数（IAI）。结果①糖尿病组网膜和皮下脂肪的IL-6mRNA表达量均高于对照组（P〈0．05）；对照组网膜组织的IL-6mRNA表达量高于皮下脂肪组织（P〈0．05）．而糖尿病组网膜和皮下脂肪组织差异无显著性（P〉0．05）。②将两组数据合并，网膜和皮下脂肪的IL-6mRNA表达量与腰臀比、胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）呈正相关（P〈0．05），与血浆IAI呈负相关（P〈0．05），与其他因素均无相关性（均P〉0．05）。③多元逐步回归分析发现，皮下脂肪IL-6mRNA表达量与HOMA—IR、腰臀比相关（P〈0．05），网膜IL-6mRNA表达量与HOMA—IR相关（P〈0．05）。结论，12DM患者网膜和皮下脂肪组织IL-6mRNA表达水平升高，可以作为胰岛素抵抗的一个重要参数。     

流式细胞术在血小板膜糖蛋白Ⅱb/IIIa位点定量检测中的应用及临床意义

目的评价流式细胞术（FCM）定量检测血小板膜糖蛋白（GP）Ⅱb／Ⅲa位点的性能，探讨正常人与白血病患者GPⅡb／Ⅲa位点数及CD41／CD61阳性表达率的关系。方法用FCM检测GPⅡh／Ⅲa位点，以国际标准评价其检测性能；并检测13例正常人和16例急性白血病患者血小板GPⅡb／Ⅲa的位点数及CD41／CD61表达率。结果FCM检测GPⅡb／Ⅲa位点的批内CV〈1％、批间CV〈3％及总重复性的CV〈2％；检测线性良好，标本量（血小板数1000～7000）对GPⅡh／Ⅲa位点检测无影响，CV〈2％；GPⅡb／Ⅲa位点检测标准曲线的平均荧光强度（MFI）与位点数间相关性很好（r=0．9998）。同时，正常人GPⅡb／Ⅲa的游离位点数平均为76944，总位点数平均为74432，CD41／CD61平均表达率为98．0％，急性淋巴细胞白血病患者GPⅡb／Ⅲa游离位点数平均为64180，总位点数平均为61079，CD41／CD61平均表达率为68．5％，急性非淋巴细胞白血病患者GPⅡb／Ⅲa游离位点数平均为63634，总位点数平均为58667，CD41／CD61平均表达率为61．6％。经t检验，急性白血病患者的GPⅡb／Ⅲa位点数及CD41／CD61表达率明显低于正常者（P均〈0．02）。结论流式细胞术可直接、快速、特异地检测血小板GPⅡb／Ⅲa位点数，可为急性白血病患者的出血机制研究及治疗提供依据。     

失血性休克大鼠器官组织中促炎细胞因子表达及释放的时相性研究

目的探讨休克后促炎细胞因子表达释放的时相性变化。方法80只SD大鼠被随机分为失血性休克组（40只）和对照组（40只）。于休克后30、60和90min及复苏后30min和90min各处死8只大鼠，采用逆转录-聚合酶链反应（RT～PCR）检测失血性休克后各时间点肠、肝、肺组织内肿瘤坏死因子-α（TNF—α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、IL-6的mRNA表达，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）双抗体夹心法测定血清中TNF—α、IL-6的含量。结果①休克30min时，肠、肝、肺组织中促炎细胞因子的mRNA表达均未见升高；休克60min肠道首先出现TNF—α mRNA表达升高（P〈0．05），而肝脏在休克90min时表达开始升高（P〈0．01），肺脏则在复苏后30min表达开始升高（P〈0．05）。复苏后90min肠、肝、肺组织中TNF—α mRNA表达仍高于对照组（P均〈0．01）。TNF—α mRNA在肠、肝、肺内的表达升高最早，其后才是IL-1β mRNA和IL-6 mRNA。②休克30min门静脉血和下腔静脉血中TNF—α、IL-6的含量与对照组比较差异均无显著性，而休克60min时门静脉血中TNF—α含量显著升高（P〈0．05）；休克90min、复苏后30min和90min门静脉血和下腔静脉血中TNF—α、IL-6含量均较对照组显著升高（P均〈0．01）。结论失血性休克时细胞因子的释放顺序县肠道、肝脏和肺脏。椎测存在“肠→肝→肺”细胞因子释放轴。     

KLF4反义基因对内皮细胞血管性血友病因子、纤溶酶原抑制物-1表达的影响

目的 探讨类果蝇分节因子4(Kroppel-like factor4,KLF4)反义基因对原代人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中血管性血友病因子(vWF)、纤溶酶原抑制物-1(PAI-1)表达的影响,明确KLF4在内皮细胞调节血栓形成中的作用.方法 胰蛋白酶消化法分离和培养原代HUVEC,采用同源重组方法 构建携带反义KLF4基因腺病毒,实时定量(Real-time)PCR、Western blot、激光共聚焦显微镜法检测转染KLF4反义基因后内皮细胞KLF4、PAI-1、vWF mRNA和蛋白的表达.结果 成功构建出携带反义KLF4基因片段的重组腺病毒(Ad-反义KLF4),以感染复数值200的重组腺病毒感染HUVEC,KLF4 mRNA相对表达水平由0.59±0.01下降至0.44±0.06,同时HUVEC中vWF mRNA相对表达水平升至1.17±0.05,与感染携带绿色荧光蛋白的腺病毒(Ad-GFP)组(1.04±0.03)相比,差异均具有统计学意义(P<0.05).而HUVEC中PAI-1 mRNA相对表达水平增加至0.73±0.01,与感染Ad-GFP组(0.67±0.04)相比,差异无统计学意义(P>0.05).与感染Ad-GFP组相比,感染Ad-反义KLF4的HUVEC中vWF、PAI-1蛋白表达水平明显增加.结论 KLF4反义基因可下调KLF4表达,促进内皮细胞中vWF、PAI-1的表达.KLF4可能参与内皮细胞抗栓作用的转录调节.     

CXCL12/CXCR4轴通过诱导miR-125b促进肝癌细胞肿瘤干性和5-氟尿嘧啶抵抗的机制

目的探究趋化因子CXCL12/趋化因子受体CXCR4轴通过诱导miR-125b促进肝癌细胞肿瘤干性和5-氟尿嘧啶(5-FU)抵抗的机制。方法选择人肝细胞癌细胞系Huh7,分为7组:对照组(正常培养的肝细胞癌系),CXCR4转染组(CXCR4模拟转染超表达),CXCR4沉默组(CXCR4低表达或者不表达),miR-125b转染组(miR-125b超表达),CXCL12+125b抑制剂组(CXCL12超表达的+抑制miR-125b的表达),5-FU处理组(10μg/L的5-FU处理细胞),5-FU+miR-125b转染组(10μg/L的5-FU处理+miR-125b超表达的细胞)。聚合酶链式反应分析miR-125b mRNA表达;蛋白质印迹法检测E-钙粘蛋白、波形蛋白、CXCR4蛋白、Caspase-3、Bcl-2和Bax的蛋白表达;Transwell分析各组细胞中的细胞迁移、侵袭测定;MTT检测细胞存活力;细胞计数试剂盒8(CCK-8)评估细胞增殖。结果与对照组相比,CXCR4转染组miR-125b mRNA、波形蛋白、CXCR4的蛋白表达显著升高,E黏着蛋白表达显著降低(P<0.05);与CXCR4转染组相比,CXCR4沉默组miR-125b mRNA、波形蛋白、CXCR4的蛋白表达显著降低,E黏着蛋白表达显著升高(P<0.05)。与对照组相比,miR-125b转染组细胞迁移、侵袭数量、细胞活力均显著增加,细胞凋亡率显著降低(P<0.05);与miR-125b转染组相比,CXCL12+125b抑制剂组,细胞迁移、侵袭数量、细胞活均显著减少,细胞凋亡率显著升高(P<0.05)。与对照组相比,5-FU处理组细胞增殖率、Bcl-2表达显著降低,caspase-3、Bax的蛋白表达显著升高(P<0.05),与5-FU处理组相比,5-FU+miR-125b转染组细胞增殖率、Bcl-2表达显著升高,caspase-3、Bax的蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论MiR-125b通过激活CXCL12/CXCR4轴而被上调,miR-125b增强CXCR4的表达,这在触发肿瘤侵袭和进展中形成了正反馈回路。这些结果为miR-125b在肝癌进程和化学抗性的发展中的作用提供了新的线索,为肝癌的治疗提供了潜在的治疗靶点。     

神经毡蛋白-1在急性髓系白血病细胞中的表达和作用

本研究旨在探索神经毡蛋白(neuropilin-1,NRP-1)和NRP-2在髓系白血病细胞中的表达及抑制NRP-1基因表达后对白血病细胞生长和迁移的影响.采用RT-PCR观察NRP-1和NRP-2 mRNA在24例急性髓系白血病(AML)患者骨髓单个核细胞(MNC)及7种髓系白血病细胞系中的表达;以小干扰RNA(siRNA)干扰NRP-1基因在HEL细胞的表达,用MTT和细胞迁移试验观察细胞增殖、迁移的变化.结果显示NRP-1在24例AML患者骨髓MNC中表达,其阳性率为100%,显著高于正常对照组67%(p=0.03).79%AML患者表达NRP-2,67%正常人表达NRP-2,两者无明显差异(p=0.6).NRP-1的表达与AML患者骨髓、外周血原始细胞比例呈正相关(r=0.5,r=0.4,p＜0.05).NRP-1和NRP-2 mRNA分别在6/7和3/7种髓系白血病细胞系表达.用siRNA转染HEL细胞24小时后NRP-1 mRNA和蛋白表达水平明显降低,当有VEGF165作用时,对照组细胞增殖明显增加,而干扰组无变化(MTT值对照组vs干扰组0.6±0.01 vs 0.49±0.02,p＜0.001).转染24小时后干扰组细胞迁移显著降低,其迁移细胞数干扰组vs对照组为500±17 vs 123±7(p＜0.001).结论NRP-1在AML患者骨髓MNC中表达增高,并在髓系白血病细胞的增殖和迁移中起重要作用.     

Magnesium sulphate attenuates tourniquet-induced hypertension and spinal c-fos mRNA expression: a comparison with ketamine

Magnesium and ketamine are well-known N-methyl-D-aspartic acid receptor antagonists. The aim of this study was to determine whether magnesium, in comparison with ketamine, attenuates tourniquet-induced hypertension and spinal c-fos mRNA expression. Rats were divided into four treatment groups: normal (baseline for c-fos mRNA expression); control (saline injection); magnesium injection; and ketamine injection. Arterial blood pressure and c-fos mRNA expression at 60 min were higher in the control than in the magnesium and ketamine groups. Human patients under sevoflurane-oxygen/nitrous oxide anaesthesia were also assigned to receive similar treatments. In humans, arterial blood pressure was increased in the control group at 50 min and thereafter compared with the magnesium and ketamine groups; the magnesium and ketamine groups did not differ. Magnesium and ketamine are equally effective in attenuating tourniquet-induced hypertension and spinal c-fos mRNA expression, suggesting that this effect may be due to reduced pain transmission.     

微小核糖核酸155对不稳定性心绞痛患者CD4+T淋巴细胞的调控作用

目的 探讨微小核糖核酸-155 (miRNA-155)对不稳定性心绞痛(UAP)患者外周血CD4 +T淋巴细胞的调控作用,从而阐明miRNA-155在UAP发病中的作用机制。方法 选取住院的UAP患者21例,同时以疑似不典型冠心病症状而冠脉造影正常的住院患者18例作为对照组。采用实时定量PCR检测外周血CD4+T淋巴细胞miRNA-155表达水平,酶联免疫法检测血清干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)、白细胞介素4(interleukin-4,IL-4)表达水平。免疫磁珠法分选10例UAP患者外周血CD4 +T淋巴细胞,将分离的细胞分为对照组、miRNA-155组和miRNA-155抑制物组。对培养的细胞进行干预后,流式细胞术检测辅助性T细胞Th1和Th2数量,实时定量PCR及蛋白免疫印迹法检测IFN-γ受体α(interferon gamma receptor alpha,IFN-γRα)、T细胞表达T盒(T-box expressed in T cells,T-bet)、GATA结合蛋白3(GATA-binding protein 3,GATA-3)的mRNA及蛋白表达,酶联免疫法检测细胞培养液上清IFN-γ、IL-4的表达。结果 UAP患者外周血CD4+T淋巴细胞miRNA-155与血清IFN-γ表达较对照组差异具有统计学意义(P＜0.01),且miRNA-155的表达与血清IFN-γ呈显著正相关(r=0.842,P＜0.01)。与对照组比较,体外培养CD4 +T淋巴细胞miRNA-155组Th1数量、T-bet mRNA及蛋白、培养液上清IFN-γ表达显著增加,IFN-γRα蛋白表达降低,差异具有统计学意义(均P ＜0.01);Th2数量、GATA-3、IFN-γRα的mRNA、GATA-3蛋白表达及培养液上清IL-4无明显改变(均P＞0.05);miRNA-155抑制物可有效地阻断miRNA-155的上述作用。结论 miRNA-155主要通过影响Th1细胞的分化和功能,参与对CD4 +T淋巴细胞的调控,在UAP发病机制中具有重要的作用。     

低分子肝素钙减轻不稳定性心绞痛患者血管内皮细胞的损伤

目的　探讨低分子肝素钙(商品名速避凝)对不稳定性心绞痛患者血管内皮细胞的影响。方法　30例不稳定性心绞痛患者随机分为速避凝治疗组和常规治疗组,每组各15例,观察治疗前后血浆vonWillebrand因子(vWF)、内皮素(ET)的变化。结果　速避凝组和常规治疗组治疗前血浆vWF、ET均明显高于正常对照组(P<0001),前二组vWF、ET比较无明显差异(P>005);速避凝组和常规治疗组vWF、ET在治疗后比治疗前明显下降(P<001,P<005),治疗后速避凝组较常规治疗组vWF、ET下降明显(P<005)。结论　速避凝能够减轻不稳定性心绞痛患者血管内皮细胞的损伤。     

MiR-467b调控JAK/STAT信号通路在脂多糖诱导ATDC5细胞增殖及炎症反应中的作用

目的:探讨miR-467b调控JAK/STAT信号通路在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导ATDC5细胞增殖及炎症反应中的作用。方法:将ATDC5细胞分为4组:对照组、LPS组、NC mimics组、miR-467b mimics组。于转染培养48 h后收集细胞并进行后续实验:采用ELISA检测各组细胞TNF-α、IL-1β水平;采用qRT-PCR法检测各组细胞miR-467b的表达水平;采用MTT法检测各组细胞的增殖能力;采用蛋白质印迹和qRT-PCR法检测各组细胞JAK/STAT信号通路相关基因的蛋白质及mRNA表达水平。结果:与对照组相比,LPS组和NC mimics组ATDC5细胞TNF-α、IL-1β的表达水平均显著升高、miR-467b的表达水平显著降低(P<0.05);MTT实验结果表明:LPS组在24、48、72 h的吸光度值显著降低(P<0.05)。蛋白质印迹结果发现:与对照组相比,LPS组和NC mimics组ATDC5细胞STAT1、STAT3、JAK2、p-STAT1、p-STAT3、p-JAK2蛋白表达水平及STAT1、STAT3、JAK2 mRNA表达水平均显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。与NC mimics组相比,miR-467b mimics组TNF-α、IL-1β的表达水平均显著降低而miR-467b的表达水平显著升高(P<0.05);过表达miR-467b后,细胞在24、48、72 h的吸光度值显著升高(P<0.05),而STAT1、STAT3、JAK2、p-STAT1、p-STAT3、p-JAK2蛋白表达水平及STAT1、STAT3、JAK2 mRNA表达水平均显著降低(P<0.05)。结论:LPS刺激ATDC5细胞后可通过激活JAK/STAT3信号通路引起细胞炎性损伤,过表达miR-467b后可抑制JAK/STAT3信号通路的活化,降低ATDC5细胞的炎症水平。     

视黄酸诱导小鼠骨髓基质细胞c-fos，c-jun和GM-CSFmRNA表达

为了探讨维生素A(VA)对造血微环境调节的机理,采用体外培养和原位杂交技术动态检测全反式视黄酸(ATRA)诱导小鼠骨髓基质细胞(BMSC)30,60和120分钟后c-fos,c-jun及GM-CSF mRNA的表达。结果表明:①ATRA处理30分钟后c-fos和c-jun的表达即有增强,与对照组相比有显著差异(P<0.01),并持续表达至60分钟和120分钟时降至对照组水平;②GM-CSFmRNA的表达在30分钟和60分钟时与对照组水平相比无显著性差别,直至120分钟才表现出显著性差异(P<0.01)。实验结果提示:VA对造血微环境调节的机理可能是通过诱导BMSC中c-fos和c-jun mRNA的表达进而调控造血生长因子GM-CSF的分泌。     

Expression patterns of plasma von Willebrand factor and serum interleukin-8 in patients with early-stage severe pulmonary contusion

BACKGROUND: von Willebrand factor (vWF) is only released from endothelial cells and platelets and is an in vivo and in vitro marker of endothelial injury in septic patients with acute lung injury (ALI). Interleukin-8 (IL-8), as a proinflammatory mediator causing recruitment of inflammatory cells, induces an increase in oxidant stress mediators and makes it as a key parameter for localized inflammation. However, it has not been well established whether the level of serum IL-8 is associated with the severity of lung injury and whether it is a prognosis marker for severe lung contusion. This study was to investigate the expression of plasma vWF and IL-8 and their association with the severity and outcomes of severe pulmonary contusion.METHODS: A total of 63 patients were divided into a severe pulmonary contusion with acute respiratory distress syndrome (ARDS) group and a non-ARDS group, or a survivor group and a non-survivor group, or an injury severity score (ISS) <20 group and an ISS ≥20 group. Another 20 healthy volunteers served as controls. The levels of plasma vWF and serum IL-8 were measured by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) at 1, 3, 5 and 7 days after injury. The expression patterns of the plasma vWF and serum IL-8 were compared between different groups.RESULTS: The concentrations of plasma vWF and serum IL-8 were significantly increased in all severe pulmonary contusion patients at all time points in comparison with the control group. The concentrations of plasma vWF in patients with ARDS increased during the whole study period, but vWF in patients with non-ARDS increased gradually until day 5 and then decreased at day 7. The concentration of serum IL-8 showed a similar expression pattern in both groups, but the expression increased more significantly in the ARDS group than in the non-ARDS group. Interestingly, both plasma vWF and serum IL-8 levels steadily increased in the non-survivor group. Furthermore, the level of plasma vWF was higher in the ISS≥20 group than in the ISS<20 group. The level of serum IL-8 in the ISS≥20 group was consistently high, while that in the ISS<20 group peaked at day 3 and decreased at day 5. In addition, the level of plasma vWF was positively correlated with platelet count, but negatively correlated with oxygen index. The level of serum IL-8 was positively correlated with white blood cell count and ISS score, and inversely correlated with oxygen index.CONCLUSION: The elevated levels of plasma vWF and serum IL-8 in severe pulmonary contusion patients reflect the severity of pulmonary injury and patients outcomes, suggesting that the plasma vWF and serum IL-8 are sensitive markers for clinical evaluation of the severity of pulmonary injury and predication of patient prognosis.     

吸入一氧化氮对急性大面积肺血栓栓塞家兔血浆vWF、GPⅡb/Ⅲa和CTnI的影响

目的通过研究大面积肺血栓栓塞症家兔心肌受损模型的心肌肌钙蛋白（CTnI）浓,血浆血管性假血友病因子（vWF）和血小板膜表面糖蛋白（GPⅡb/Ⅲa）的改变及吸入一氧化氮对其影响,来探讨吸入一氧化氮对大面积肺血栓栓塞症家兔受损心肌保护作用的机理。方法日本大白兔30只,分为试验组10只,只对家兔进行大面积肺血栓栓塞症心肌受损模型实验;对照组10只：在实验组静脉注射血栓栓子时,本组动物模型制作只静脉注射生理盐水,不注射血栓栓子;治疗组10只：大面积肺血栓栓塞症动物模型成功后吸入一氧化氮治疗24小时,一氧化氮吸入浓度为40×10-6g/l。试验组、对照组、治疗组于试验组模型制备成功后每2 h,吸入一氧化氮治疗24 h同步抽血各一次,血浆心肌肌钙蛋白、血浆血管性假血友病因子、血小板膜表面糖蛋白被测定分别微粒子化学发光法流式细胞仪检测酶联免疫法。治疗组吸入一氧化氮治疗同时,试验组、对照组同步吸入50%氧气,多道生理参数分析记录仪,同步检测动脉平均压和肺动脉压。结果家兔大面积肺血栓栓塞症心肌受损动物模型制备成功后24小时后心肌肌钙蛋白浓度明显高于对照组（0.41±0.07,0.08±0.009,P〈0.05）,吸入一氧化氮24小时后治疗组明显低于实验组（0.31±0.07,0.41±0.07,P〈0.05）;急性大面积肺血栓栓塞症家兔栓塞后2小时和24小时其血浆vWF水平明显高于对照组（153.8±26.2,212.7±28.4P〈0.05;111.2±24.6,113.1±25.1,P〈0.05）,吸入一氧化氮24小时后其浓度水平明显下降与实验组比较（131.8±25.4,212.7±28.4,P〈0.05）;家兔大面积肺血栓栓塞症栓塞后2小时和24小时其血浆GPⅡb/Ⅲa水平明显高于对照组（14.04±6.01,23.03±6.70,P〈0.05;2.14±0.82,2.13±0.79,P〈0.05）,吸入一氧化氮24小时后其浓度水平明显下降与实验组比较（10.4±7.1,23.03±6.70,P〈0.05）;实验组模型制备成功后24小时血浆心肌肌钙蛋白与血浆vWF、GPⅡb/Ⅲa呈明显正相关性（r,0.99,P〈0.01;r,0.99,P〈0.01）;吸入一氧化氮治疗24小时后血浆心肌肌钙蛋白与血浆vWF、GPⅡb/Ⅲa呈明显正相关性（r,0.98,P〈0.01;r,0.98,P〈0.01）。结论大面积肺血栓栓塞症家兔血浆vWF、GPⅡb/Ⅲa增高是造成心肌受损的主要体液因子,吸入一氧化氮降低其浓度是保护心肌受损的主要机理。