高温及低温时大气PM_(2.5)对大鼠肺泡巨噬细胞的毒性作用

目的探讨高低温下大气PM_(2.5)对肺泡巨噬细胞(alveolar macrophages,AMs)的毒性作用及机制。方法取大鼠AMs进行原代培养,并在高温(43℃)、低温(31℃)及正常温度(37℃)下分别给予0、25、50、100μg/ml PM_(2.5)染毒,倒置显微镜下观察AMs的形态和数量变化,测定AMs的相对细胞存活率、吞噬功能及培养液中炎症因子等指标。结果低温、常温和高温时PM_(2.5)高剂量组的大鼠AMs细胞存活率分别为47.9%,62.2%和32.3%,AMs的细胞活性和吞噬功能均随着PM_(2.5)剂量的升高而降低,且在低温或高温时明显低于正常温度组,差异有统计学意义(P0.05)。低温或高温与PM_(2.5)对AMs炎症因子生成的影响无交互作用,但均可增加PM_(2.5)对AMs中SOD活力的抑制作用,差异有统计学意义(P0.05),且高温的抑制作用更强,高、低温时高剂量组大鼠的细胞SOD活力分别为44.54、51.31 U/ml。结论高低温下,大气PM_(2.5)对AMs的毒性作用增强,可能通过降低SOD活力而降低其细胞活性和吞噬功能,且高温的影响强于低温。     

上海市吴淞地区大气PM2.5两种提取成分的细胞毒性研究

[目的]研究上海市吴淞地区大气细颗粒物（PM2.5）两种提取成分（有机和无机提取成分）的细胞毒性。[方法]采用滤膜法采集上海市吴淞地区大气中PM2.5，以中国仓鼠肺成纤维细胞（chinese hamsterfibroblast cell line，CHL）为靶细胞研究PM2.5，有机及无机提取成分对细胞活力、代谢的影响及氧化损伤毒性，具体包括细胞形态、活力和细胞培养液中乳酸脱氢酶（LDH）、乳酸（LD）、丙二醛（MDA）及超氧化物歧化酶（SOD）水平的测定。[结果]上海市吴淞地区大气PM2.5的有机和无机两种提取成分分别以10、50、100、200μg/ml浓度染毒CHL细胞10h，结果显示随着染毒剂量的增加细胞形态损伤加剧，细胞存活率、SOD含量呈下降趋势，LD和MDA则呈上升趋势，LDH则呈现先升后降趋势。与阴性对照组相比，200μg／ml染毒组的LD含量的升高同100、200μg/ml组的LDH和MDA含量的升高及SOD水平的下降均具有统计学显著性（P〈0．05）～除200μg/ml染毒组，有机提取成分要高于无机提取成分所染毒细胞的生长抑制率外，其他各染毒浓度组的氧化损伤及代谢指标水平在两种染毒成分之间尚不能认为有差别。[结论]上海市吴淞地区PM2.5，的有机及无机提取成分均具有一定的细胞毒性。     

不同地区大气PM2.5对人血管内皮细胞毒性作用的实验研究

目的比较不同地区大气PM2.5对血管内皮细胞的毒性,并探讨其作用机制。方法采集广州、东莞、深圳和肇庆4个城市的PM2.5。试验细胞为人脐静脉内皮细胞。将PM2.5分别以10、50、100、200、300μg/ml剂量染毒,作用于细胞24 h,测定细胞NO释放量、SOD活力、LDH漏出量及细胞存活率(MTT试验)。以肇庆作为对照,观察PM2.5对各指标的影响。经剂量与指标回归分析,以斜率评价不同城市PM2.5的效应大小。结果各城市PM2.5致细胞NO释放量和LDH漏出量随剂量增加而升高,SOD活力和细胞存活率随剂量升高而降低(P<0.05)。广州和深圳PM2.5在高剂量时致NO释放量明显高于肇庆(P<0.05)。广州、东莞和深圳PM2.5致SOD活力降低的程度在各剂量组均强于肇庆(P<0.05)。深圳PM2.5致LDH释放量明显高于肇庆,广州、东莞在高剂量时高于肇庆(P<0.05)。广州、深圳PM2.5致细胞死亡率高于肇庆(P<0.05)。回归分析表明,广州PM2.5致LDH漏出和细胞死亡的毒性效应最高,深圳PM2.5对NO释放和SOD活力降低的毒性效应最高,肇庆PM2.5对NO、SOD、LDH的细胞毒性均处于最低水平。NO释放量、LDH漏出量与细胞存活率呈负相关,SOD活力与细胞存活率呈正相关(P<0.01)。结论不同城市PM2.5对血管内皮细胞的毒性表现不同。NO、SOD、LDH与细胞存活率有关联,氧化应激损伤可能是其作用机制之一。     

木尘对肺泡巨噬细胞的毒性作用

目的 :探讨木尘对肺泡巨噬细胞 (AM)的毒性作用。方法 :采用某木综厂胶合板车间除尘室的尘木进行家兔 AM的毒性实验。结果 :显示该木尘使 AM存活率降低 ,有明显的剂量反应关系。结论 :该木尘对 AM有明显毒性。     

不同地区大气PM2.5致大鼠肺损伤的比较实验研究

目的利用动物实验比较不同地区大气PM2.5对呼吸系统的毒性作用。方法采集广州、东莞、深圳和肇庆4个城市的大气PM2.5。将雄性SD大鼠分为3个染毒组(10、3和1 mg/kg)和1个对照组,每组7只。4个城市的PM2.5均按此分组并染毒。气管滴注PM2.5,对照组滴注等量生理盐水。分别于48 h和28 d后处死动物,收集左侧肺和一定量的肺泡灌洗液(BALF),观察肺部病理变化和测定灌洗液中总蛋白(TP)、超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)、白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子(TNF-α)的变化。结果肇庆地区大鼠体重增长率较高,东莞地区最低。PM2.5主要导致间质炎性细胞浸润、支气管炎症等。与对照组比较,PM2.5导致肺泡灌洗液中TP、LDH、IL-6和TNF-α水平增高,SOD活力降低,差异有统计学意义(P<0.05)。广州PM2.5组LDH的漏出量最高,深圳PM2.5组肺泡灌洗液中SOD活力最低,东莞PM2.5组肺泡灌洗液中IL-6释放量最高,肇庆PM2.5染毒48 h组SOD活力均高,LDH、TNF-α、IL-6均较低。结论本次采集的四城市大气PM2.5可致大鼠肺组织发生氧化应激损伤和炎性反应。广州、东莞、深圳PM2.5对上述效应指标的影响强于肇庆。     

飘尘对肺泡巨噬细胞的毒性作用

在研究飘尘的细胞毒性中,肺泡巨噬细胞被认为是最主要的研究细胞,各种尘均会被吞噬细胞吞噬,使肺泡巨噬细胞溶酶体膜受损,并使之崩解,细胞内容物全部释放出来。不同的尘引起的结果不同。对细胞内酶系统的影响亦不同,酶的释放直接表明对细胞的损害程度。沈阳是我国重工业基地之一,被WHO列为重点监测城市,流行病学调查表明铁西区(32业区)居民肺癌发病率较高,小儿易患感冒等。     

槲皮素对PM2.5发育毒性的拮抗作用

目的研究槲皮素对PM2.5发育毒性的拮抗作用。方法收集2014年11月—2015年3月采暖期北京市某地区大气颗粒物样品于石英滤膜上,通过水浴超声和冷冻干燥操作收集石英滤膜上的PM2.5颗粒,以无菌PBS配制成不同浓度的PM2.5溶液。将健康ICR孕鼠随机分为空白对照组、PM2.5模型对照组、维生素C(VC)干预组和3个槲皮素干预组。除空白对照组的各组孕鼠于孕3、6、9、12、15天分别进行气管滴注PM2.5溶液(15 mg/kg),空白对照组给予相应剂量的干净滤膜洗脱液。各组孕鼠于孕0~17 d每天灌胃,空白对照组和PM2.5模型对照组给予0.15%羧甲基纤维素钠灌胃,VC干预组给予100 mg/kg的VC,槲皮素三个干预组分别予以50mg/kg、100 mg/kg、200 mg/kg的槲皮素羧甲基纤维素钠混悬液灌胃。各组孕鼠于孕18天处死,收集母鼠血液,检测血清中的过氧化氢酶(CAT)活力和谷胱甘肽(GSH)含量;称量活胎重量、胎盘重量、胎鼠身长和尾长,记录活胎数、死胎数和吸收胎数,并进行活胎骨骼和内脏畸形检查。结果与空白对照组相比,PM2.5模型对照组的胎鼠出生体重下降、胎鼠身长变短、14肋骨畸形发生率增加和枕骨骨化不全程度加重,同时母鼠血清CAT活力下降,差异均有统计学意义。与PM2.5模型对照组相比,槲皮素中剂量组的胎鼠体重和胎鼠身长改善效果最明显,表现为胎鼠体重增加和胎鼠身长增长;槲皮素低剂量组和中剂量组母鼠血清CAT活力显著升高;槲皮素干预组的枕骨骨化不全的情况得到明显改善。与PM2.5模型对照组相比,VC干预组的胚胎毒性加重及14肋骨畸形的发生率升高。结论孕期补充槲皮素对PM2.5引发的发育毒性具有一定的拮抗作用,且保护作用有适宜的剂量范围。     

铁矿尘对肺泡巨噬细胞影响的实验研究

采用大鼠肺泡巨噬细胞（ＡＭ）体外培养的方法,对铁矿积尘进行毒性研究。染尘浓度为０、０．２、０．６和１．２ｍｇ／ｍｌ,染尘１、５、２０小时后,通过对大鼠ＡＭ功能、形态、细胞膜通透性变化以及脂质过氧化、抗氧化等的观察,初步探讨了铁矿尘对ＡＭ的毒作用及其机理。结果表明,染尘后ＡＭ吞噬酵母菌能力降低;随铁矿尘浓度增高和染尘时间延长,细胞培养液中ＬＤＨ活性升高,细胞内ＡＣＰ活性降低,Ｋ＾＋水平降低,说明铁矿     

不同含铁粉尘的细胞毒性作用研究 Ⅱ．含铁粉尘对肺泡巨噬细胞的毒性实验

本文观察了三种含铁粉尘（纯氧化铁尘，电焊烟尘和铁锈尘）对体外加尘培养的肺泡巨噬细胞（AM）的毒性作用，以AM存活率及其光镜和扫描电镜的形态学变化作为观察指标，结果表明，三种含铁粉尘均能引起不同程度的AM毒性作用，其中铁锈尘和电焊烟尘引起AM存活率下降及形态改变较纯氧化铁尘明显，高浓度的纯氧化铁尘亦可引起轻度的AM损伤。     

镍污染地区大气细颗粒物对大鼠肺泡巨噬细胞吞噬功能的影响

目的探讨镍污染地区大气细颗粒物（PM2.5）对大鼠肺泡巨噬细胞吞噬功能的影响。方法选择某镍污染地区及非污染地区,监测环境空气质量、采集颗粒物并进行镍浓度分析。将42只成年雄性SPF级Wistar大鼠随机分为生理盐水对照组、镍污染区组和非污染区组,镍污染区组和非污染区组又分为颗粒物低（1．6mg／kg）、中（8．0mg／kg）、高（40．0mg／kg）剂量组,每个剂量组6只。一次性气管滴注染毒颗粒物,24h后处死大鼠,观察大鼠肺泡灌洗液中肺泡巨噬细胞吞噬率、吞噬指数的变化。结果镍污染地区与非污染地区环境空气质量水平相似,镍污染地区大气颗粒物中镍浓度是非污染地区的48．75倍。毒理实验结果显示,与生理盐水对照组比较,镍污染区组巨噬细胞吞噬率在低剂量即显著降低（P〈0.05）,而非污染区组则在中剂量显著性降低（P〈0.05）;相同剂量下镍污染区组吞噬率均比非污染区组低,在高剂量（40．0mg／kg）时差异有统计学意义（P〈0.05）。吞噬指数变化趋势相似。结论镍污染地区大气PM2．5对大鼠肺泡巨噬细胞的毒性效应大于非污染区,其中镍可能起到了关键性作用：     

亚硫酸盐对大鼠肺泡巨噬细胞培养上清液中IL—1含量的影响

本文采用二氧化硫的衍生物亚硫酸盐作用于肺泡巨噬细胞,用胸腺细胞增殖法检测肺泡巨噬细胞培养上清液中IL-1含量的变化。结果表明,亚硫酸盐使肺泡巨噬细胞培养上清液中IL-1含量下降,并和亚硫酸盐浓度有依赖关系。     

石棉对大鼠肺泡巨噬细胞毒作用的体外研究

本文研究了新康温石棉,加拿大(UICC)温石棉和石英粉尘,经5,10,15小时体外染尘对大鼠肺泡巨噬细胞的毒作用,结果表明各组细胞的存活率均随培养时间而下降,以石英组下降最快,加拿大组次之,各染尘组与对照组间有明显差异,染尘细胞的形态与功能有明显改变经光镜和电镜检查可见细胞迅速增大,内含多量不同大小的空泡,两石棉组不少细胞成锥形或梭形,肾形核双核和三核细胞明显增加,并有两巨噬细胞共吞长石棉纤维,三种粉尘均无例外地被吞噬,毒性有所差异以石英最大,认为此种差异由粉尘性质和形状不同所致.     

可吸入颗粒物对大鼠心脏交感神经分布的影响

目的研究可吸入颗粒物对大鼠心脏交感神经分布的影响，明确可吸入颗粒物对心脏自主神经系统是否具有解剖结构的影响。方法24只sD大鼠，均为雄性，随机分为2组（实验组、对照组），每组12只。实验组大鼠按25mg（1ml）／kg体重经气管内缓慢注入颗粒物生理盐水悬液染毒，每周染毒2次，连续染毒4周；对照组以生理盐水代替颗粒物悬液；两组大鼠于末次染毒后次日处死，开胸剪取心脏，留取双侧心耳、双心室侧壁及室间隔中部，通过免疫组化方法检测酪氨酸羟化酶（tyrosine hydroxylase，TH）染色阳性的交感神经纤维，其密度等于选区面积的神经纤维数目除以总的测试面积。结果两组大鼠心耳和右室侧壁部位的交感神经分布无明显差异；实验组室间隔和左室侧壁神经分布密度明显高于对照组。结论可吸入颗粒物具有影响大鼠心脏交感神经分布的作用，主要表现为室间隔和左室侧壁神经分布的增多。     

过氯酸铵对大鼠肺泡巨噬细胞和肺成纤维细胞影响的研究

目的通过探讨过氯酸铵(AP)对大鼠肺泡巨噬细胞(AM)损伤及对肺成纤维细胞(FB)增殖的影响,研究AP的致肺纤维化作用。方法用AP浓度分别为0.5,1.0,2.0 mg/ml和SiO2浓度为0.1 mg/ml 的培养液培养AM,对照组采用RPMI1640培养液培养,24 h 后收集培养上清液,分别检测AM内MDA含量、GSH-Px活力以及上清液中LDH活力。并用AM上清液培养FB,检测FB增殖活力和FB内羟脯氨酸含量.结果 1.0,2.0 mg/ml AP组及SiO2组MDA含量(2.21,2.58,2.32 nmol/ml)均比对照组(1.97 nmol/ml)增加,差异有显著性或非常显著性(P＜0.05或P＜0.01); 2.0 mg/ml AP组及SiO2组GSH-Px活力(29.47,30.79 U/106 AM)比对照组(26.70 U/106 AM)明显增强,差异有显著或非常显著性(P＜0.05或P＜0.01); 0.5,1.0,2.0 mg/ml AP组和SiO2组LDH活力(151.03,252.31,446.50,583.88U/106 AM)均明显高于对照组(77.06U/106 AM,P＜0.05或P＜0.01), 且随AP染毒剂量的增加而升高。SiO2组AM上清液使FB羟脯氨酸含量(0.900 μg/ml)及增殖活力(0.165)明显高于对照组(0.379 μg/ml,0.138,P＜0.05或P＜0.01)。结论 AP对肺泡巨噬细胞具有一定的细胞毒作用,而AP染毒的AM上清液未发现有促进FB的增殖和胶原合成的作用。     

尼龙六六盐粉尘对大鼠肺致纤维化实验研究

目的 研究尼龙六六盐粉尘对大鼠肺的致纤维化作用。方法 采用大鼠被动式粉尘吸入法染尘。以肺组织形态学改变为观察指标。并参考支气管肺泡灌洗（BAL）的实验结果。结果 实验组大鼠肺病理切片上可见轻度的网织纤维增生和少量胶原纤维，石英粉尘对照组可见明显的纤维化，两者差异有显著性，BAL实验组的各项指标实验组均高于正常对照组。低于石英粉尘组。结论 尼龙六六盐粉尘对大鼠肺有轻度的致纤维化作用。     

厨房空气污染对肺巨噬细胞细胞毒效应的影响

本文研究了小鼠暴露于厨房空气污染物后肺巨噬细胞体内、外细胞毒效应的变化。结果表明,小鼠吸入煤气烟气后未出现细胞毒效应的变化,吸入燃煤饼烟气及燃煤与油烟混合烟气2、3月,体外细胞毒效应受抑制,吸入上述污染烟气3个月,体内肺巨噬细胞抗肿瘤细胞毒效应出现抑制。     

西北地区沙漠尘对大鼠肺巨噬细胞毒性的实验研究

目的探讨和田沙漠尘和民勤沙漠尘对大鼠肺巨噬细胞的毒性作用。方法用50、100、200、400、800、1600μg/ml的和田沙漠尘、民勤沙漠尘和SiO_2的混悬液培养肺巨噬细胞,用DMEM培养液培养肺巨噬细胞作为对照组,24 h后用MTT法测定肺巨噬细胞的存活率,并收集细胞及上清液,检测肺巨噬细胞内丙二醛(MDA)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力,上清液中LDH活力和转化生长因子(TGF-β_1)含量。结果与对照组比较,和田沙漠尘400μg/ml以上组、民勤沙漠尘100μg/ml以上组和SiO_2组的大鼠肺巨噬细胞存活率降低(P<0.05,P<0.01);随染毒剂量增加,大鼠肺巨噬细胞内MDA含量、GSH-Px活力,上清液中LDH活力、TGF-β_1含量均有增高趋势,和田沙漠尘和民勤沙漠尘浓度200μg/ml以上组MDA含量和GSH-Px活力高于对照组(P<0.05,P<0.01),和田和民勤沙漠尘浓度100μg/ml以上组和SiO_2组LDH活力高于对照组(P<0.01),两地沙漠尘浓度200μg/ml以上组和SiO_2组TGF-β_1含量高于对照组(P<0.01)。结论民勤沙漠尘和和田沙漠尘对肺巨噬细胞有一定的损伤作用,使肺巨噬细胞脂质过氧化作用增强,并能引起纤维化因子FGF-β_1的释放。