改良法兔VX2骨肿瘤模型的病理学与影像学观察

目的通过改良的种植方法建立兔VX2骨肿瘤模型并进行影像学和病理学研究。方法将新鲜的活VX2肿瘤组织制成肿瘤细胞悬液，经胫骨近端关节面穿刺将肿瘤悬液注入32只新西兰大白兔右侧胫骨中上段骨髓腔内，建立兔VX2骨肿瘤模型。于肿瘤种植后每隔5天用X线平片及MRI对动物模型进行连续动态观察，并在影像检查后分批立即处死4只动物进行病理学检查，总观察期为40天。结果所有32只免试验侧胫骨肿瘤种植成功。在肿瘤种植后的前15天内，肿瘤破坏骨髓正常结构；从第20天起，肿瘤破坏骨皮质；第25天出现骨膜新生骨。第30～40天，骨膜新生骨及骨膜相继被肿瘤破坏。影像学所见与病理学所见相一致。结论经改良的种植方法建立了更接近人体骨肿瘤的兔VX2骨肿瘤模型，其影像学表现与病理学表现有较高的一致性，为骨肿瘤的研究提供了理想的动物模型。     

兔VX2肝移植瘤模型研究进展

肝癌是常见的恶性肿瘤之一,早期诊断率低、恶性程度高、病死率高.放化疗及手术治疗是其主要的常规三大治疗手段,但治疗效果差、容易复发及转移,具有诸多的局限性,从而影响临床疗效,因此肝癌治疗面临的难题颇多.     

VX2活细胞数与兔肝癌模型成功率及成瘤时间的关系

目的探讨接种不同数量的VX2瘤株活细胞的成瘤率、成瘤时间。方法制备VX2细胞匀浆,并计数活细胞浓度。将新西兰大兔分为三组(每组10只):A组(低细胞数组):活细胞数1×104;B组(中细胞数组):活细胞数为1×105;C组(多细胞数组):活细胞数1×106。分别于接种后5d、10d、14d、21d、28d做B超观察成瘤情况及瘤体的大小、形态、转移等情况。结果A组:于接种后5d、10d、14d、21d、28d分别作腹部B超未见肝内肿瘤生长(0/10);B组:于接种后第10d(1/10)和第14d(8/10),B超显示肝内接种部位可见体积(0.53±0.02)cm3低回声区,有声晕,血供丰富;1只于接种后5d、10d、14d、21d、28d分别作腹部B超未见肝内肿瘤生长(1/10)。平均成瘤时间为(13.5±0.18)天。成瘤率为90%。C组:于接种后第5d(1/10)、第10d(9/10),B超显示肝内接种部位可见体积为(0.67±0.03)cm3低回声区,血供丰富,成瘤率为100%,平均成瘤时间为(9.5±1.33)天。A与B组及A与C组的成瘤率在统计学上有显著差异(χ12=16.36,P1<0.05;χ22=20.0,P2<0.05),B与C组的成瘤率在统计学上无显著性差异(χ2=1.046,P>.0.05)。B组与C组成瘤后体积及肿瘤生长情况无显著差异。结论VX2细胞株是制作兔移植性肝癌模型较好的瘤株,创建模型的成功率及成瘤时间与接种的活细胞数有关,接种活细胞数>1×105则其成瘤率可达90%~100%。VX2活细胞多比活细胞少的成瘤时间早,一般成瘤时间在9天以上。     

兔VX2肿瘤的应用研究概况

兔VX2肿瘤是一种来源于Shope病毒致乳头瘤恶变形成的鳞状上皮细胞恶性肿瘤，属于鳞状细胞癌。1940年建株保存。经72次传代培养后建立起来的仍可在兔体内种植的肿瘤细胞株。国内文献对其来源描述不统一，它可接种在兔的肝脏、肾脏、肌肉、骨骼和颅脑等处。兔VX2肿瘤广泛用于各脏器肿瘤模型的建立，现就兔VX2肿瘤研究状况作一综述。     

兔鼻咽VX2移植癌模型的建立及其生长转移特性

目的:建立兔鼻咽VX2移植癌动物模型,观察肿瘤局部生长浸润、淋巴结和远处转移的特性及在18F-FDG PET-CT、MRI图像上的表现.方法:将VX2瘤细胞株荷瘤新西兰白兔麻醉后,解剖将肿瘤剥离,制成1×107～2x107/mL细胞悬液,注入免腹股沟,形成传代兔传代.在CT引导下,将瘤细胞悬液注入兔鼻咽部,建立兔鼻咽VX2移植癌动物模型后.观察兔症状及肿瘤生长、淋巴结和远处转移特征及影像学表现.结果:41只兔在鼻咽种植瘤细胞2～4周内.37只在鼻咽部形成实体瘤,成功率90.2%(37/41),7只意外死亡,30只进入研究.鼻咽部肿瘤成瘤后均增长迅速.向周围浸润性生长,常见的周围浸润部位有咽旁间隙、鼻腔、口咽、颅底、斜坡、颞下窝、海绵窦等.病理检查符合低分化鳞状细胞癌表现.颈部淋巴结转移率93.3%(28/30),双颈淋巴结转移率43.3%(13/30).2例出现肺多发转移6.7%(2/30).30只兔鼻咽结构、周围组织器官及鼻咽肿物、淋巴结转移灶、远处转移灶在18F-FDGPET-CT图像上均能清晰显示.结论:兔鼻咽VX2移植癌动物模型建立成功,且成功率高.鼻咽部肿瘤成瘤后迅速向周围浸润性生长,颈部淋巴结转移率高,在18F-FDGPET-CT、MRI图像上能清晰显示鼻咽腔内外结构以及与周围组织的关系,提供影像证据,是进行人类鼻咽癌实验研究的理想动物模型.     

兔VX2肝癌模型制作的三种方法及其超声评价

目的:比较三种建立兔VX2肝癌模型方法的效果差异,评价超声在监测兔VX2肝癌中的价值,探讨建立兔VX2肝癌模型的最佳方法.方法:18只新西兰大白兔,随机分为三组:A组超声引导注入肿瘤组织块悬液;B组超声引导经皮穿刺种植肿瘤组织块;C组开腹手术瘤块种植法.分别于接种后第7、14、21和28天采用超声观测三组兔肝脏成瘤情况并记录,处死动物后取病理标本进行对照,比较不同方式肿瘤的生长特点.结果:超声观测下兔VX2肝癌多呈低或等回声结节,边界较清楚,血供较丰富,部分可见声晕.当肿块直径＞ 1cm时,超声能准确地反映肿瘤生长情况,与病理检测结果一致.A组多为多结节散在分布,异位种植多;B组肿瘤多生长局限,多突出于肝表面被膜;C组肿瘤呈孤立结节,位于肝实质内.A、B、C三组接种成瘤率分别为:61.1％、44.4％、100％,差异有统计学意义(P＜0.05).单发率:11.1％、61.1％、88.9％.异位种植率:55.6％、38.9％、0％.平均存活时间:A组(38.2 ±4.5)d、B组(37.5±3.6)d、C组(41.2±3.5)d,差异无统计学意义(P＞0.05).结论:三种方法均能制成肝癌模型,开腹手术瘤块种植法成功率高、模型性质稳定,是可推荐的建立兔肝癌模型的方法,超声检查是一种监测肝癌模型的有效手段.     

兔肝VX2肝肿瘤模型的转移特性

兔VX2肝肿瘤模型为最大的肝移植性癌实验动物模型,广泛应用于肝癌局部治疗(射频消融、酒精注射等)研究。本研究探讨兔VX2肝癌的转移特性,为研究局部治疗对肝癌转移的影响打下基础。1材料与方法1．1实验动物新西兰兔(上海松江区松联实验动物场提供)10只,雌雄兼用,兔龄4～5个月,每只2．6～3 kg,饲养     

定位针穿细胞接种法建立兔脑VX2肿瘤模型

目的:探讨微创定位针穿刺细胞接种法建立兔脑VX2肿瘤模型的方法并观察肿瘤生长特性。方法:经测量计算确定冠状缝的位置及其与正中矢状线的交叉点和接种位点后,采用可调节钻孔深度的金属钻在头颅正中矢状线右侧5mm,冠状缝后5mm处接种位点钻一Φ1.2mm的穿刺孔,取VX2肿瘤细胞悬液0.1ml(1×107细胞/ml)注射接种入12只2.5kg～3kg的成年New Zealand大白兔的大脑皮质表面下2mm深度内。接种后第6天、10天和14天,冠状切面测定肿瘤体积和观察组织病理学改变,以及神经系统体征变化。结果:VX2肿瘤细胞接种入脑皮质后12只成瘤,成瘤率为100%;肿瘤体积与接种后的生长时间呈对数相关(r=0.91,P<0.01),其体积倍增时间为1.34天;接种10天后,脑皮质表面血管较丰富,肿瘤呈卵圆形实质性生长,与正常脑组织边界清楚,肿瘤中央明显坏死;肿瘤细胞明显浸润正常脑组织并形成瘤块,瘤周脑组织形成水肿带。结论:采用定位针穿细胞注射法颅内接种兔VX2肿瘤细胞能较好地模拟颅内肿瘤生长,其生长特性与原发性或转移性脑肿瘤相似,且可缩短等待时间,尤其适合脑肿瘤的影像学诊断、CT灌注参数及放疗靶区勾画的实验研究。     

组织块悬液注射法制作兔VX2乳腺癌模型

目的：建立稳定的兔VX2乳腺癌模型，选择最佳的模型制作方法。方法：30只兔随机分为3组，每组10只，分别采用乳腺内瘤细胞液注射法、组织块悬液注射法、组织块种植法制作兔VX2乳腺癌模型，比较各组的种植成活率、肿瘤生长率、荷瘤兔存活时间，并观察肿瘤的生物学形态。结果：组织块悬液注射法操作简便，成瘤率高，肿瘤增殖旺盛，生物学特征符合乳腺鳞状细胞癌。结论：成功建立了兔VX2乳腺癌模型，组织块悬液注射法是最佳模型制作方法。     

兔VX2肝移植瘤模型及其影像学表现

肝癌的动物模型是肝癌的主要实验研究材料。兔VX2肝移植瘤模型是建立在较大型动物体内的肝癌动物模型,其制作相对简便易行,价格较低廉,实验周期较短;以肝动脉供血为主,为巨块型实体瘤,浸润性生长,血供丰富,类似于人类巨块型肝癌,是较理想的用于肝癌实验研究的动物模型。     

阿霉素肝动脉热化疗治疗兔肝VX2移植癌

背景与目的:研究表明,加热可提高兔VX2细胞对阿霉素(adriamycin,ADM)的增敏作用,可促进ADM进入细胞内,从而提高ADM的抗癌作用。作者在兔VX2细胞行ADM热化疗研究和兔肝VX2细胞移植瘤模型建立基础上,进行ADM兔肝动脉热灌注,以评价介入性化疗与介入性热化疗对兔肝癌的抑瘤效果。方法:将VX2细胞接种于60只新西兰白兔肝右叶,建立兔肝VX2移植癌模型。随机分4组,每组15只。利用导管经肝动脉分别给各组37℃生理盐水(第1组)、37℃ADM溶液(第2组)、60℃生理盐水(第3组)、60℃ADM溶液(第4组),1周后观察各组肿瘤体积及血清AST水平,观察荷瘤兔的存活期。结果:第4组肿瘤生长率(0.53±0.21)%,与第1组(3.48±1.17)%相比有显著性差异(P<0.01),与第2组的(1.09±0.26)%、第3组的(3.32±1.28)%相比亦有显著性差异(P<0.05)。第4组存活期(87.0±2.0)天,与第1组(40.5±3.0)天相比差异有显著性(P<0.05)。第4组血清AST水平给药前后变化与其它各组相比无显著性差异(P>0.05),与对第1组相比有显著性差异(P<0.05)。结论:60℃ADM溶液热灌注可降低肿瘤生长率,延长存活期,而对肝功能的损害是可逆的。     

RFA治疗对VX2肝肿瘤兔免疫功能影响的实验研究

目的 :探讨RFA治疗对机体免疫功能的影响。方法 :采用开腹直视下行兔肝VX2 肿瘤RFA治疗 ,定期用MTT法检测兔外周血T淋巴细胞活性及分泌IL 2的能力和腹腔巨噬细胞的活性。结果 :RFA治疗组的荷瘤兔T淋巴细胞活性及分泌IL 2的能力和腹腔巨噬细胞的活性均较手术治疗组和自身治疗前有显著提高 (P <0 .0 5 )。结论 :RFA治疗可以提高机体的细胞免疫力 ,是一种有效的肿瘤治疗手段     

CT引导下经皮无水乙醇消融兔肾VX2肿瘤的实验研究

背景与目的:CT引导下经皮无水乙醇消融(pereutaneous ethanol ablation,PEA)在肝癌、肺癌及肾上腺无功能腺瘤等实体肿瘤的治疗中得到广泛应用,但目前有关经皮无水乙醇消融治疗肾脏实体肿瘤的实验及临床应用仍未见报道.本研究通过CT引导下经皮无水乙醇消融兔肾VX2肿瘤,探讨无水乙醇消融治疗肾脏肿瘤的有效性、安全性和可行性.方法:将25只已建立兔肾VX2肿瘤的新西兰大白兔随机分为治疗组15只和对照组10只.治疗组行CT引导下经皮无水乙醇消融并测量碘油沉积区致密影最大截面面积.对照组不接受治疗.1周后取出两组兔荷瘤肾脏,测量两组肿瘤大小及治疗组肿瘤凝固坏死区最大截面面积.对比观察实验兔治疗后伤口有无感染及生活习性的改变.结果:25只兔共形成25个肾脏肿瘤,最大截面积为1.38～2.25 cm2,平均(1.61～0.04)cm2,两组肿瘤大小差异无统计学意义(P>0.05).治疗组经皮无水乙醇消融后,碘油沉积面积大小1.31～1.85 cm2,平均(1.56±0.05)cm2;PEA治疗1周后,治疗组肿瘤大小1.35～1.85 cm2,平均(1.58±0.03)cm2,对照组肿瘤大小1.67～2.17 cm2,平均(1.94±0.03)cm2,两组对比差异有统计学意义(P<0.05).治疗组肿瘤凝固坏死区面积大小1.27～1.78 cm2,平均(1.54±0.04)cm2,与碘油沉积面积比较,差异无统计学意义(P>0.05).消融区肿瘤组织呈嗜酸性改变及不规则片状凝固性坏死.治疗组动物均未出现明显不良反应及并发症.结论:CT引导下经皮无水乙醇消融可有效灭活兔肾VX2肿瘤组织;CT引导下经皮无水乙醇消融兔肾VX2肿瘤无明显不良反应及并发症.安全可行.     

热盐水灌注对兔肝VX2肿瘤血管内皮细胞的影响

目的：研究将60℃生理盐水经肝动脉灌注兔肝VX2肿瘤对肿瘤血管内皮细胞及通透性的影响。方法：20只VX2肝荷瘤兔,随机分为2组,分别经兔肝动脉灌注37℃生理盐水60ml（对照组）、60℃生理盐水60ml（治疗组）。灌注后再经导管推注1% Evans Blue （EB）,2ml/kg。24小时后处死荷瘤兔,取小块瘤组织,称重后,放入1ml甲酰胺液中,置于50℃恒温水浴箱60h,提取液用722型光栅分光光度计测出620nm下的OD值,从标准曲线上测出相应的伊文思蓝含量,以反映该组织血管的通透性。切取肿瘤边缘血管组织包埋,行电镜检查观察肿瘤血管内皮细胞形态变化。结果：60℃生理盐水灌注组肿瘤组织EB含量［（10.71±0.84）μg/100mg］与37℃灌注组［（3.42±0.87）μg/100mg］相比有差异（P〈0.01）。电镜观察热灌注组肿瘤血管内皮细胞,细胞间隙增大。结论：60℃灌注可增大肿瘤内皮细胞间隙从而增加肝肿瘤组织的血管通透性。     

外照射与局部热疗对荷VX2瘤兔细胞因子的影响

 目的 观察外照射、热疗对荷VX2瘤兔的治疗作用及其细胞因子的改变情况。方法 将健康雄性3年的新西兰大白兔60只，分成3组，分别为外照射组（外放组）、体外高频热疗组（热疗组）和对照组，各20只。观察肿瘤消退情况、死亡比率，同时观察白细胞介素-2，6，8（IL-2，IL-6，IL-8）、肿瘤坏死因子（TNF）、胰岛素样生长因子（IGF）、血型类肿瘤抗原标志物CA-50在VX2瘤移植前后和治疗1，3，4周后的变化情况。结果 经治疗肿瘤直径从大到小、死亡比率从高到低依次为对照组、热疗组、外放组；肿瘤VX2瘤移植成功后细胞因子的变化为IL-2，IL-8降低，IL-6，TNF，IGF，CA-50增高，治疗1，3，4周后IL-2，IL-8逐渐降低，但其程度显著，差异有统计学意义（P＜0.01），IL-6，TNF，IGF，CA-50逐渐增高。结论 VX2种植成功后对宿主细胞免疫产生明显的抑制作用。外照射疗效明显好于热疗，且较明显地扭转其免疫过程。     

兔VX2腹膜转移癌模型的建立及转移特征研究

目的:建立大动物腹膜转移癌模型,鉴定其生物学行为.方法:36只新西兰大白兔分为开腹包埋、开腹穿刺及直接经皮穿刺种植三组(每组12只),每组又分为6只瘤块接种,6只悬液接种,接种VX2肿瘤.观察肿瘤生长状况,通过病理学和影像学检查分析局部区域及远处转移情况.结果:三种方法构建模型的成功率分别是100%(12/12)、91.7%(11/12)和58.3%(7/12),开腹法与经皮穿刺法相比有显著性差异(P＜0.05).接种2周后,形成典型溃疡型胃癌并腹膜转移癌表现,宿主衰竭,4周出现肺转移.病理学检查符合典型VX2组织学特点.结论:开腹包埋与开腹穿刺接种制作VX2兔腹膜转移癌模型简单,实验周期短,接种率高,其病理表现类似人类腹膜转移癌,为腹膜癌治疗的实验研究提供可靠的大型动物模型.     

兔转移性乳腺癌模型:肿瘤生长及转移

目的:建立移植性兔VX2乳腺癌模型,观察肿瘤生长及转移进程。方法:采用组织块悬液注射法制作兔VX2乳腺癌模型 28只,测量并记录瘤体大小变化,触诊检查有无腋窝淋巴结转移,影像学方法检查有无远处组织或器官转移,记录荷瘤生存时间,兔死亡后解剖并做病理检查。结果: 28只兔植瘤后 1周均在注射部位形成可触及的实体瘤。除去 5只中途意外死亡兔,共有 23只兔进入研究。全部模型肿瘤增长迅速,腋窝淋巴结转移发生率21 /23(91. 3% ),纵隔淋巴结转移发生率 5 /23(21. 7% ),腹腔淋巴结转移发生率 2 /23 (8. 7% ),肺转移发生率 6 /23(26. 1% ),肝转移发生率 3 /23(13. 0% ),骨转移发生率 1 /23(4. 3% )。肿瘤局部浸润侵犯胸膜腔 2 /23(8. 7% ),胃2 /23(8. 7% )。荷瘤兔平均生存时间(51. 2±8. 6)天,瘤灶病理切片检查符合乳腺鳞状细胞癌。结论:兔VX2乳腺癌模型的生物学行为和病程进展与人类转移性乳腺癌相似,是进行人类晚期乳腺癌实验研究的理想动物模型。     

兔VX2食管癌模型的建立及生物学特性观察

目的:建立兔VX2食管癌移植瘤模型,探讨其成瘤率、生长特性及转移情况,为进一步研究食管癌及寻找有效治疗方法提供平台.方法:将兔VX2肿瘤剪碎至1 mm3左右的组织块,通过外科手术将肿瘤块植入腹段食管黏膜下层,于接种后第1、2及3周分别行食管造影和CT扫描检查,观察肿瘤生长情况.3周后,处死兔子取标本行病理学检测.结果:12只兔子除2只死于手术并发症外(胃穿孔及误缝食管所致的梗阻),其余10只接种后1周,未见肿瘤生长;2周后食管造影显示食管下段充盈缺损.CT扫描示食管下段走行区局限性管壁增厚,有明显软组织肿块影,平均最大径为1.04 cm (0.7～1.5 cm);3周后兔子消瘦明显,食管造影示食管下段黏膜破坏,充盈缺损明显,4只兔子出现食管穿孔.CT扫描示食管下段软组织肿块影明显增大,平均最大径为2.28 cm (1.7～4.3 cm).瘤体及淋巴结病理检查证实,成瘤及淋巴结转移成功率为100%.结论:采用兔VX2瘤块移植法可成功建立食管癌移植模型,且具有周期短,成瘤率高,生长迅速等特点.     

三氧化二砷对兔肝VX2肿瘤抗血管生成的作用

目的 研究三氧化二砷(AS₂O₃)对兔肝VX2肿瘤血管生成的作用。方法 复制兔肝VX2肿瘤模型16只,随机分为对照组(生理盐水)及实验组(AS₂O₃)各8只,连续3天耳缘静脉注射用药,应用免疫组化检测瘤组织中的微血管密度(MVD)及血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果 实验组的MVD表达(P=0.021＜0.05)及VEGF表达(P=0.012＜0.05)均明显低于对照组,差异有显著性。实验组MVD及VEGF表达(P=0.007)和对照组MVD及VEGF表达(P=0.048)均呈线性正相关。结论 AS₂O₃对兔肝VX2肿瘤血管生成具有抑制作用。     

兔VX2肝癌介入治疗后早期发生凋亡的流式细胞术检测

目的研究经肝动脉插管灌注碘油抗癌药乳液化疗栓塞和单纯灌注化疗后的早期兔肝VX2肿瘤发生凋亡。方法27只新西兰大白兔瘤组织块种植肝VX2肿瘤,A组(n=9)经肝动脉灌注碘油抗癌药乳液,B组(n=9)肝动脉灌注化疗,C组(n=9)肝动脉灌注生理盐水,每组分别在处理后第24h、72h、120h处死实验兔各3只,采用FITC-AnnexinV/PI流式细胞术分析介入处理后早期的肿瘤细胞凋亡。结果肿瘤边缘部的凋亡早期细胞百分率(PapE)与凋亡晚期细胞百分率(PapL)及峰值时间点分别为:A组(9.48±4.58)%、(33.46±8.81)%、24h、72h,B组(4.46±1.47)%、(11.65±3.51)%、24h、24h,C组(2.50±1.39)%、(5.99±1.22)%。肿瘤中心部的PapE、PapL与峰值时间点分别为:A组(16.48±6.32)%、(43.56±18.51)%、24h、72h,B组(7.50±3.10)%、(18.53±14.04)%、24h、24h,C组(5.61±1.92)%、(14.63±12.23)%。结论Lp-THACE诱导肝癌肿瘤细胞早期大量凋亡是其有效的主要作用机制,...