协同刺激分子B7-H4在食管癌前病变组织中的表达及临床意义

目的：研究协同刺激分子B7同系物4（B7-H4）在人食管癌前病变组织中的表达变化,探讨其在食管鳞状细胞癌形成中的临床意义。方法：收集内镜切除的食管组织标本58例,其中正常组织16例,低级别上皮内瘤变（LGIN）23例,高级别上皮内瘤变（HGIN）19例。通过苏木素-伊红（HE）染色评价食管组织病理变化。分别采用实时荧光定量PCR（qPCR）检测B7-H4 mRNA在食管组织的表达;免疫组织化学和Western blot检测B7-H4蛋白在食管病变组织中的表达;酶联免疫吸附法（ELISA）检测食管组织细胞因子IL-6、IL-10和IFN-γ的表达,并分析各细胞因子与B7-H4蛋白表达的相关性。结果：免疫组化和HE染色结果提示,B7-H4表达与食管组织病理分级呈显著正相关（P < 0.01）。qPCR结果提示,与正常食管组织相比,食管癌前病变组织B7-H4 mRNA表达无显著改变（P > 0.05）。而Western blot实验结果显示,与正常食管组织相比,食管癌前病变组织B7-H4蛋白表达显著升高（P < 0.05）。Westernblot和ELISA实验结果显示B7-H4表达与IL-6表达呈正相关（P < 0.01）。结论：随着食管癌前病变病理分级的提高,B7-H4蛋白的表达逐渐上调,B7-H4可能与IL-6相互作用促进了食管鳞状细胞癌的发生发展。     

基于生物信息学数据库探讨FOXO3基因在膀胱癌中的表达及临床意义

目的：探讨叉头转录蛋白O亚族3（FOXO3）基因在膀胱癌中的表达及临床意义。方法：利用GEPIA数据库分析FOXO3基因在膀胱癌与其癌旁正常组织中的表达情况,及其与患者预后的关系,利用UALCAN数据库分析膀胱癌中FOXO3表达与淋巴结转移的关系;通过TIMER数据库分析FOXO3基因表达与膀胱癌免疫浸润水平的相关性;通过String数据库分析与FOXO3相互作用的蛋白。结果：GEPIA数据库分析结果显示,FOXO3基因在膀胱癌组织中的表达显著低于癌旁正常组织（P < 0.01）;低表达FOXO3基因的患者总生存率（OS）和无疾病生存率（DFS）均显著高于高表达者（P < 0.05）。UALCAN数据库分析结果显示膀胱癌中FOXO3的表达与淋巴结转移无明显相关。TIMER数据库分析显示FOXO3基因表达与B细胞（r=0.133,P < 0.05）、CD8⁺T细胞（r=0.262,P < 0.01）、CD4⁺T细胞（r=0.12,P < 0.05）、巨噬细胞（r=0.252,P < 0.01）、中性粒细胞（r=0.242,P < 0.01）和树突状细胞（r=0.162,P < 0.01）的免疫浸润水平呈正相关。蛋白相互作用网络分析发现,AKT1、SIRT1、EP300、BCL2L11、SOD2、SGK1、AKT2、CREBBP、CDKN1B、SMAD4等蛋白与FOXO3具有明显相互作用。结论：基于肿瘤基因数据库分析发现,FOXO3基因在膀胱癌组织中低表达,其高表达与患者预后不良相关;FOXO3表达与膀胱癌免疫细胞的浸润水平有关。     

基于生物信息学数据库探讨FOXO3基因在膀胱癌中的表达及临床意义

目的：探讨叉头转录蛋白O亚族3（FOXO3）基因在膀胱癌中的表达及临床意义。方法：利用GEPIA数据库分析FOXO3基因在膀胱癌与其癌旁正常组织中的表达情况，及其与患者预后的关系，利用UALCAN数据库分析膀胱癌中FOXO3表达与淋巴结转移的关系；通过TIMER数据库分析FOXO3基因表达与膀胱癌免疫浸润水平的相关性；通过String数据库分析与FOXO3相互作用的蛋白。结果：GEPIA数据库分析结果显示，FOXO3基因在膀胱癌组织中的表达显著低于癌旁正常组织（P < 0.01）；低表达FOXO3基因的患者总生存率（OS）和无疾病生存率（DFS）均显著高于高表达者（P < 0.05）。UALCAN数据库分析结果显示膀胱癌中FOXO3的表达与淋巴结转移无明显相关。TIMER数据库分析显示FOXO3基因表达与B细胞（r=0.133，P < 0.05）、CD8⁺T细胞（r=0.262，P < 0.01）、CD4⁺T细胞（r=0.12，P < 0.05）、巨噬细胞（r=0.252，P < 0.01）、中性粒细胞（r=0.242，P < 0.01）和树突状细胞（r=0.162，P < 0.01）的免疫浸润水平呈正相关。蛋白相互作用网络分析发现，AKT1、SIRT1、EP300、BCL2L11、SOD2、SGK1、AKT2、CREBBP、CDKN1B、SMAD4等蛋白与FOXO3具有明显相互作用。结论：基于肿瘤基因数据库分析发现，FOXO3基因在膀胱癌组织中低表达，其高表达与患者预后不良相关；FOXO3表达与膀胱癌免疫细胞的浸润水平有关。     

舌鳞状细胞癌组织中硫氧还蛋白和硫氧还蛋白还原酶-1的表达及其意义

目的：研究硫氧还蛋白（Trx）和硫氧还蛋白还原酶-1（TrxR1）在舌鳞癌组织中的表达及其临床意义。方法：收集28例舌鳞癌组织和10例癌旁上皮组织,采用免疫组织化学SP三步法检测Trx和TrxR1蛋白在两种组织中的表达水平,并分析其表达与临床病理特征的关系。结果：舌鳞状细胞癌组织中的Trx和TrxR1蛋白表达水平明显高于癌旁正常上皮组织,癌组织和癌旁正常组织的Trx IOD值分别为（2.84±0.34）×10⁸和（3.91±3.00）×10⁷（P < 0.01）,TrxR1 IOD分别为（1.88±0.29）×10⁸和（0.69±0.32）×10⁷（P < 0.05）;Trx和TrxR1蛋白表达水平在不同肿瘤大小、分化程度组间表达的差异均具有统计学意义（P均 < 0.05）;Trx和TrxR1表达水平之间呈正相关关系（r=0.504,P < 0.05）,且Trx和TrxR1高表达组与低表达组的生存率差异具有统计学意义（P < 0.05）。结论：硫氧还蛋白及其还原酶-1可能为舌鳞状细胞癌的药物治疗靶点和早期诊断、肿瘤筛查的重要临床指标。     

NEDD4在食管鳞癌中的表达及作用研究

目的：检测神经前体细胞表达发育下调蛋白4（neural precursor cell expressed developmentally down-regulated protein 4,NEDD4）在食管鳞癌组织中的表达及其临床意义,并探讨其过表达对食管鳞癌细胞恶性表型的影响。方法：应用组织芯片-免疫组织化学染色技术,检测131例食管鳞癌及配对癌旁正常食管上皮组织中NEDD4蛋白的表达情况,并分析其表达水平与临床病理指标的相关性;同时,使用TCGA和GTEx数据库中的mRNA表达数据,分析食管鳞癌组织中NEDD4 mRNA的表达变化。然后,在NEDD4表达水平较高的食管鳞癌细胞系中用特异性siRNA敲降NEDD4的表达,采用CCK8法检测细胞增殖活力的变化。结果：免疫组化染色结果显示,NEDD4在40%（53/131）的食管鳞癌组织中高水平表达,而在癌旁正常食管上皮组织中不表达或低水平表达。NEDD4蛋白的表达水平与食管鳞癌的浸润深度、病理学分期呈正相关（均为P < 0.05）。同时,TCGA及GTEx数据库分析结果显示,NEDD4 mRNA表达水平在食管鳞癌组织中明显升高（P < 0.01）。细胞增殖活力检测结果显示,在KYSE30和KYSE150细胞中,转染NEDD4 siRNA的实验组细胞的增殖活力均显著低于对照组细胞（均为P < 0.01）。结论：NEDD4在食管鳞癌组织中表达上调,其高表达可增强食管鳞癌细胞的增殖活力,提示NEDD4过表达可能在食管鳞癌的发生发展过程中发挥促癌作用。     

B7-H1基因rs4143815位点多态性与结直肠癌发病风险的关联研究

目的：B7-H1是肿瘤免疫治疗的一个靶点,位于其3'-非翻译区的rs4143815位点C/G多态性可影响其与miR-570的结合,进而影响B7-H1的表达。本研究旨在探讨B7-H1基因rs4143815位点多态性与结直肠癌发病风险的相关性。方法：采集215例结直肠癌患者和236例年龄性别匹配的健康对照人群外周静脉血,并收集手术切除结直肠癌和癌旁正常组织样本65例,直接测序法检测B7-H1基因rs4143815多态性,运用卡方检验分析B7-H1基因rs4143815多态性与结直肠癌发病风险的相关性;定量PCR检测B7-H1 mRNA表达。结果：结直肠癌和对照组中均检测到B7-H1基因rs4143815多态性的3种基因型,即CC、CG和GG基因型。结直肠癌和癌旁正常组织中均检测到B7-H1 mRNA的表达。与CC基因型相比,GG和CG/GG基因型显著增加了结直肠癌的发病风险[GG与CC相比：OR_调整=1.99,95% CI （1.19,3.34）,P=0.008;CG/GG与CC相比：OR_调整=1.58,95% CI （1.06,2.36） P=0.02]。与C等位基因相比,G等位基因显著增加了结直肠癌的发病风险[OR_调整=1.48,95% CI （1.14,1.93）,P=0.004]。B7-H1 mRNA在结直肠癌组织中的表达明显高于癌旁组织（P=0.02）,并且B7-H1基因rs4143815位点GG基因型携带者B7-H1 mRNA水平明显高于CC基因型携带者（P=0.03）。结论：B7-H1基因rs4143815位点GG基因型可能通过增加B7-H1 mRNA表达,进而增加了结直肠癌的发病风险。     

SALL4高表达在食管鳞癌临床病理及预后判定中的意义

目的 分析食管鳞癌(Esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)中SALL4的表达与临床病理及生存预后的关系,探讨SALL4在食管鳞癌诊断和治疗中的作用。方法 收集2010年7月—2011年11月哈尔滨医科大学附属肿瘤医院90例食管鳞癌患者的癌组织及相应的癌旁组织,采用免疫组织化学的方法检测SALL4的表达情况,比较癌组织与癌旁组织间SALL4的表达差异,并分析其与食管鳞癌患者临床特征、总生存(Overall survival,OS)及无进展生存(Progression free survival,PFS)的关系。结果 食管鳞癌组织中SALL4的表达水平明显高于癌旁组织(P＜0.05),SALL4高表达与术中肿瘤部位(P=0.038)、G分级(P=0.036)和AJCC分期(P=0.015)密切关联。生存分析及Cox风险回归分析表明,SALL4高表达组的食管鳞癌患者OS和PFS均低于SALL4低表达组(P＜0.05)。结论 SALL4高表达可以作为食管鳞癌一个独立的预后判定因子,在临床工作中,可以帮助判断食管鳞癌患者的生存预后。     

RNF2和PCNA在食管鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的：探讨多梳基因家族成员环指蛋白2（RNF2）和增殖细胞核抗原（PCNA）蛋白在食管癌组织中的表达及其临床意义。方法：应用免疫组化法检测64例食管癌患者癌组织、30例癌旁正常组织中RNF2和PCNA蛋白的表达情况,分析其与临床病理指标及预后的关系。随访并分析RNF2阳性表达与食管癌患者术后5年存活率的关系。结果：RNF2和PCNA蛋白在肿瘤组织中均高表达,RNF2在癌组织和癌旁组织中的阳性表达率分别为54.69%（35/64）和30.00%（9/30）,差异有统计学意义（χ²=5.000,P < 0.05）;PCNA在癌组织和癌旁组织中的阳性表达率分别为60.94%（39/64）和46.67%（14/30）,差异有统计学意义（χ²=6.237,P < 0.05）;2种蛋白的阳性表达均与食管癌的肿瘤大小、TNM分期和淋巴结转移有关（P < 0.05）,而与患者年龄、性别、分化程度无关（P > 0.05）;食管癌组织中PCNA蛋白表达与RNF2蛋白表达具有正相关关系（r=0.494,P < 0.01）。5年总生存期分析结果显示RNF2阳性表达者的生存时间更短（P < 0.01）。结论：RNF2和PCNA与食管癌的发生发展密切相关,且二者在食管癌发生发展中具有协同作用。     

CXCR-2在食管鳞癌组织中的表达及其与MMP-9、VEGF的相关性研究

目的：探讨CXC趋化因子受体2（CXCR-2）在食管鳞癌中的表达及其与基质金属蛋白酶9（MMP-9）、血管内皮生长因子（VEGF）表达的相关性。方法：收集河北北方学院附属第一医院胸外科2016年12月—2019年12月诊治的70例食管鳞癌患者食管癌组织及癌旁正常组织,分别采用实时荧光定量PCR法（qPCR）和免疫组化法检测CXCR-2、MMP-9、VEGF mRNA和蛋白在两组标本中的表达情况,采用Pearson相关分析法分析CXCR-2、MMP-9和VEGF表达的相关性,受试者操作特征（ROC）曲线分析CXCR-2的表达对食管鳞癌的诊断意义。结果：qPCR检测结果显示,癌组织中CXCR-2、MMP-9、VEGF mRNA的相对表达水平高于癌旁正常组织（均为P < 0.01）;免疫组化检测结果显示,癌组织中CXCR-2、MMP-9、VEGF蛋白的阳性表达率高于癌旁正常组织（均为P < 0.01）;且癌组织中CXCR-2的表达与MMP-9、VEGF的表达呈正相关（r分别为0.488和0.491,均为P < 0.01）;癌组织中CXCR-2表达的ROC曲线下面积为0.938[95% CI （0.908,0.972）,P < 0.05],最佳截断点为0.77。其诊断的灵敏度和特异度分别为91.2%和80.9%。结论：食管鳞癌组织中CXCR-2、MMP-9和VEGF呈高水平表达,且与TNM分期、淋巴结转移和远处转移关系密切,CXCR-2表达水平的检测对食管鳞癌诊断有重要价值。     

miR-143、MMP-2和TIMP-1在哈萨克族食管癌组织中的表达及其临床病理意义

目的: 探讨在新疆哈萨克族食管癌组织中miR-143、基质金属蛋白酶-2(MMP-2) 和基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)的表达及其临床意义。方法: 根据前期芯片检测结果,通过靶点预测软件PicTar TargetScan和miRanda预测miR-143可能与肿瘤相关的靶基因。并采用实时荧光定量PCR方法检测30例哈萨克族食管癌组织及相应癌旁组织中miR-143、MMP-2和TIMP-1的表达水平,分析其与临床病理特征的关系。结果: miR-143在哈萨克族食管癌组织中表达较远端癌旁组织中明显降低,差异有统计学意义(P=0.000);miR-143低表达与分化程度、淋巴结转移、临床分期相关(P依次为0.042、0.039、0.007);MMP-2、TIMP-1在哈萨克族食管癌组织中表达均较远端癌旁组织中增高,差异均有统计学意义(P=0.026和P=0.021);MMP-2高表达与淋巴结转移正相关(r=0.367 P=0.037);miR-143与MMP-2、TIMP-1的表达均呈负相关(r依次为-0.442、-0.410,P均<0.05),MMP-2与TIMP-1的表达呈正相关(r=0.794,P=0.000)。结论: miR-143与MMP-2、TIMP-1表达失调共同参与哈萨克族食管癌的发生发展过程,MMP-2和TIMP-1可能是miR-143的靶基因。     

哈萨克族食管癌组织中miR-143、miR-145和Survivin mRNA的表达及其临床病理意义

目的:检测新疆哈萨克族食管癌组织中miR-143、miR-145和Survivin mRNA的表达,探讨其在哈萨克族食管癌发生发展中的作用及临床意义。方法:采用实时荧光定量PCR方法检测47例哈萨克族食管癌及癌旁组织标本中miR-143、miR-145和Survivin mRNA的表达水平,分析它们与临床病理指标的关系。结果:miR-143、miR-145在哈萨克族食管癌组织中表达较癌旁组织降低(P均<0.01);Survivin mRNA在哈萨克族食管癌组织中表达较癌旁组织升高(P=0.000);miR-143的表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移、临床分期相关(P=0.018、0.004、0.022);miR-145的表达与分化程度、淋巴结转移相关(P=0.007、0.039);Survivin mRNA的表达与淋巴结转移及临床分期相关(P=0.042、0.034)。miR-143的表达与miR-145呈正相关(r=0.662,P=0.000),与Survivin mRNA呈负相关(r=-0.313,P=0.002);结论:在哈萨克族食管癌中miR-143、miR-145低表达、Survivin mRNA高表达,miR-143/145基因簇、Survivin mRNA可能共同参与哈萨克族食管癌发生发展过程。     

高迁移率族蛋白B1在小鼠肝再生中对细胞增殖的作用及机制

目的： 研究高迁移率族蛋白B1（HMGB1）在小鼠部分肝切除术（PH）后的再生过程中对细胞增殖的作用及机制。方法： 将21只雄性BALB/c小鼠，随机分为假手术组和6个PH组，每组3只。假手术组小鼠只打开腹腔暴露肝脏并不切除肝脏；PH组小鼠进行70%肝切除术，并分别于术后第6小时以及第1、2、3、5、7天处死。另外采用丙酮酸乙酯（EP）作为HMGB1的特异性抑制剂进行干预实验，9只雄性BALB/c小鼠，随机分为假手术组、PH组和EP干预组，每组3只，EP干预组小鼠在70%肝切除术后按40 mg/（kg·d）给予EP腹腔注射，术后第2天处死。取各组小鼠肝组织提取总蛋白及核浆蛋白，采用Western blot法分别检测提取的不同蛋白样品中HMGB1、TLR4、RAGE、NF-κB p65、Cyclin D1、PCNA的蛋白表达水平。结果： 小鼠于进行70% PH后的1周内，肝组织内胞核中HMGB1的蛋白表达水平，在术后第2天上升至顶峰（P < 0.05），之后逐渐回落，细胞质中该蛋白表达水平的变化与其一致。干预实验中，相比较假手术组，术后第2天PH组中TLR4、RAGE、NF-κB p65、Cyclin D1、PCNA的蛋白表达水平也明显提高（P < 0.05）。EP干预后，虽然肝组织内胞核蛋白中的HMGB1以及总蛋白中TLR4与RAGE的表达水平与PH组比较没有明显改变，但胞浆蛋白中的HMGB1和下游NF-κB p65、Cyclin D1、PCNA的蛋白表达水平出现了显著下降（P < 0.05）。结论： HMGB1在小鼠肝再生过程中对细胞的增殖发挥了调控作用，该蛋白可能作为调控肝再生的潜在干预靶点。     

FBXW10与Cyclin E在肾透明细胞癌中的表达及临床意义

目的 研究F框/WD-40域蛋白10(FBXW10)和细胞周期蛋白E(Cyclin E)在肾透明细胞癌组织中的表达及其临床意义。方法 应用免疫组化SP法检测60例肾透明细胞癌及其中行根治术的20例癌旁正常肾组织中FBXW10和Cyclin E蛋白的表达,分析两者之间的相关性及其与患者病理特征之间的关系。结果 FBXW10和Cyclin E蛋白在癌组织和癌旁正常组织表达率分别是40.0%、70.0%和55.0%、25.0%(P＜0.05)。FBXW10蛋白的表达与肾透明细胞癌的组织学分级(P=0.041)、远处转移(P=0.030)有关;Cyclin E蛋白的表达与透明细胞肾癌的病理分期(P=0.005)、组织学分级(P=0.035)、远处转移(P=0.011)有关。肾癌组织中FBXW10与Cyclin E蛋白的表达有相关性(r=0.533,P＜0.001)。结论 FBXW10和Cyclin E可能在肾透明细胞癌的发生发展中起重要作用。     

Aurora-A在宫颈癌及癌前病变中的表达以及与HPV感染的相关性研究

目的 分析正常宫颈、不同级别宫颈上皮内瘤变(Cervical intraepithelial neoplasia,CIN)和宫颈鳞状细胞癌(Cervical squamous cell carcinoma,SCC)组织中Aurora-A的表达差异,观察其异常表达对宫颈癌变过程的影响及与人乳头瘤病毒(Human papilloma virus,HPV)感染的相关性,了解Aroura-A在CIN与宫颈癌发病机制中的作用。方法 选取已进行宫颈管分泌物高危型HPV检测的宫颈活检或手术标本存档蜡块100例,其中正常宫颈组织20例,CIN1级组织20例、CIN 2级组织20例、CIN 3级组织20例,宫颈癌全部选取的是宫颈鳞状细胞癌组织20例。采用免疫组化方法检测Aurora-A蛋白的表达水平,并分析Aurora-A表达与HR-HPV感染的相关性。结果 Aurora-A在CIN以及宫颈癌中存在高表达(P＜0.05),且其阳性表达率随着宫颈病变程度的加深而增强,两者呈正相关性(r=0.475,P＜0.001);在高级别宫颈上皮内瘤变(CIN2、3)组织中,Aurora-A表达与HPV感染间存在正相关(V=0.591,P＜0.05)。结论 Aurora-A的异常表达可能与宫颈癌的发生发展密切有关,Aurora-A可能作为早期诊断CIN或宫颈癌的重要分子生物学指标,同时也可能是宫颈癌的潜在治疗靶点。