产KPC酶肺炎克雷伯菌耐碳青霉烯类药物的分子机制研究

摘要：目的 研究临床分离肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类药物的分子耐药机制,为临床合理用药提供理论及实验依据。方 法 收集2020年1月-2020年12月皖南医学院弋矶山医院临床分离非重复肺炎克雷伯菌株923株,利用全自动微生物分析系统进 行菌种鉴定及药敏分析,并用16S rRNA PCR扩增产物测序验证菌种,K-B法复核碳青霉烯类药物耐药情况;胶体金法对耐碳青 霉烯类肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiella pneumonia, CRKP)菌株进行碳青霉烯酶的表型检测,并用碳青霉烯酶PCR扩 增结果进行验证;同时利用全自动微生物分析系统对产KPC酶CRKP产超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum β-lactamases, ESBLs) 进行检测,并用ESBLs耐药相关基因PCR扩增结果进行验证;多位点序列分型技术(MLST)对产KPC酶CRKP进行序列分型 (ST)。 结果 923株肺炎克雷伯菌中256株(27.74%)为CRKP,其中183株携带blaKPC,ST分型为ST11型和ST12型,产KPC酶CRKP 携带3种ESBLs基因blaTEM-1、blaSHV-11和blaCTX-M-1。结论 CRKP产碳青霉烯酶以KPC酶型为主,blaKPC可合并3种ESBLs的产生。     

1例泛耐药肺炎克雷伯菌尿源性脓毒症伴血小板减少的给药策略分析

临床药师对1例泛耐药肺炎克雷伯菌尿源性脓毒症伴血小板减少患者进行用药干预,分析替加环素联合黏菌素治疗效果不佳及血小板减少的原因,推荐头孢他啶阿维巴坦单药治疗产肺炎克雷伯菌（KPC）碳青霉烯酶类耐药肺炎克雷伯菌（CRKP）的重症感染,基于患者感染部位、病原菌酶型等,制定抗感染治疗方案后,患者感染指标和血小板逐渐恢复至正常范围,病情好转。     

质粒介导的KPC-2型碳青霉烯酶水平传播机制的探讨

目的了解河南省人民医院耐美罗培南肺炎克雷伯菌和日勾维肠杆菌是否携带KPC型碳青霉烯酶基因,探讨blaKPC基因的水平传播机制。方法采用琼脂稀释法进行药物敏感性试验,PCR检测KPC编码基因,质粒电转化试验分析blaKPC基因能否水平传播,质粒酶切电泳图谱判断质粒的相似性。结果两株耐美罗培南肺炎克雷伯菌和日勾维肠杆菌均检测出KPC型碳青霉烯酶基因,测序比对结果显示为KPC-2型碳青霉烯酶,其编码基因blaKPC-2位于质粒上,并且可以在细菌之间进行水平传播。结论质粒介导的KPC-2型碳青霉烯酶是我院肠杆菌科细菌耐药性水平传播的机制之一。     

碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌在某院的耐药流行分析

目的:了解我院碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)耐药流行情况.方法:收集佳木斯大学附属第一医院CRKP,VITEK 2 Compact药敏鉴定,K-B法复核;mCIM初步鉴定碳青霉烯酶,PCR扩增相关耐药基因进行验证.结果:31株CRKP对亚胺培南、美罗培南及哌拉西林/他唑巴坦耐药率较高,对左氧氟沙星及阿米卡星耐药率较低;31株CRKP经表型鉴定有30株产碳青霉烯酶;30株CRKP全部携带KPC-2型碳青霉烯酶基因,1株携带NDM型,未检出OXA-48型,31株CRKP菌株12株分离自ICU病房.结论:CRKP以产KPC-2型酶为主,在ICU病房CRKP易传播流行.     

重症监护室患者耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌感染危险因素分析

目的：了解重症监护室（ICU）中导致肺炎克雷伯菌感染患者耐碳青霉烯类抗菌药物的危险因素,为减少耐药菌的产生提供依据,以减少医院感染的发生。方法：收集某院2017-2018年ICU内经细菌培养鉴定为肺炎克雷伯菌的菌株,按药敏试验结果分为耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌组（CRKP组,43例）和非耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌组（KP组,109例）。统计每例患者基本情况、感染部位、住院时间、手术、首次检出阳性前抗菌药物使用情况等,分析其与耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌产生的相关性。结果：2组中均是痰标本中分离的占首位,其次是血液、尿液以及创面分泌物等。CRKP感染危险因素的单因素分析可见,患者高龄（P=0.032）,合并慢性肾功能不全（P=0.019）、恶性肿瘤（P=0.024）,患者机械通气时间、ApacheⅡ评分、感染部位个数是感染CRKP的危险因素（P<0.05）。首次检出CRKP/KP前,患者接受碳青霉烯类或者喹诺酮类药物治疗（P<0.001）是CRKP感染的危险因素。非线性Logstic回归分析显示,患者年龄、住院时间、合并恶性肿瘤、感染部位个数、机械通气时间、ApacheⅡ评分,接受碳青霉烯类、喹诺酮类治疗为CRKP感染的独立危险因素（P<0.05）。结论：应进一步规范碳青霉烯类及喹诺酮类药物的使用,同时针对危险因素高的患者做好有效医院感染预防控制措施,以减少耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌医院感染的发生,延缓耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的传播。     

贵阳某医院耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的分子流行病学分析

目的 研究耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(carbapenem resistant Klebsiella pneumoniae, CRKP)的耐药性、耐药基因与同源性，为临床用药与院感控制提供依据。方法 收集贵州省人民医院2016年5月-2017年2月临床上分离的50株CRKP，检测其对19种抗菌药的药物敏感性。PCR法扩增碳青霉烯酶基因(blaKPC、blaIMP、blaVIM、blaOXA和blaNDM-1)并对扩增阳性产物进行测序，所得序列与GenBank数据库进行比对，确定耐药基因分型。采用ERIC-PCR法进行同源性检测。结果 50株CRKP均为多重耐药菌。19种抗菌药物中，耐药率低于50%的抗菌药物有多黏菌素0、替加环素4%、米诺环素20%、四环素38%。对复方磺胺甲噁唑的耐药率为60%，对碳青霉烯类、头孢菌素、氨曲南、含酶抑制剂、以及喹诺酮类、氨基糖苷类的耐药率为84%~100%。50株CRKP中，48株(96%)检出碳青霉烯酶基因，其中41株(82%)blaKPC-2、3株(6%)blaIMP-8和4株(8%)blaNDM-1。41株检出KPC-2型碳青霉烯酶的CRKP分为6个基因型(A-F型)，其中A型18株、B型6株、C型12株、D型3株、E型、F型各1株。结论 CRKP的耐药率高，主要耐药机制是产KPC-2型碳青霉烯酶，其次是产NDM-1、IMP-8型碳青霉烯酶。CRKP存在科室间、科室内的克隆传播，应加强对CRKP的监测和院感控制。     

临床药师参与1例CRKP血流感染患者抗菌治疗分析

肺炎克雷伯菌导致的血流感染高居医院血流感染的第2位，耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)的耐药机制主要是产碳青霉烯酶。临床药师应根据微生物流行病学、循证药学、临床表现及实验室检查，为患者制定了个体化抗菌方案，在选择抗菌药物时需充分考虑抗菌药物的特性。该文就1例CRKP血流感染患者抗感染治疗方案进行了分析。     

碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌分子流行病学及耐药机制

目的 研究碳青霉烯类耐药的肺炎克雷伯菌分子流行病学及对碳青霉烯类耐药机制。方法 KB法筛选对碳青霉烯类耐药的肺炎克雷伯菌临床分离株24株,同时采用微量肉汤稀释法测定这些细菌的最低抑菌浓度,改良Hodge实验检测碳青霉烯酶;PCR检测碳青霉烯酶基因(blaKPC、blaIMP、blaNDM、blaVIM、blaIMI、blaSPM、blaNDMOXA-23、blaNDMOXA-24、blaNDMOXA-48和blaNDMOXA-58)。结果 药敏试验显示碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌具有多重耐药性。PCR扩增碳青霉烯酶基因,blaIMP阳性率为58.3%,经测序为IMP-4,其余均为阴性。结论 肺炎克雷伯菌临床分离株对碳青霉烯类抗生素的耐药机制主要与产IMP-4金属酶有关。     

耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌感染临床特征及危险因素分析

目的 分析耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(carbapene-resistant Klebsiella pneumoniae, CRKP)感染临床特征及危险因素,为临床有效防控CRKP感染提供科学依据。方法 选取兰州大学第一医院2020年1月—2021年12月检出肺炎克雷伯菌的住院患者作为研究对象,采用回顾性病例-对照研究方法,选取该时段检出CRKP的住院患者113例作为CRKP组,同期检出碳青霉烯类敏感肺炎克雷伯菌(carbapenem-susceptible Klebsiella pneumoniae, CSKP)的住院患者113例作为CSKP组,收集两组患者临床资料,采用单因素分析和二元Logistic回归分析方法,分析CRKP感染的危险因素。结果 CRKP菌株的耐药率均高于CSKP菌株的耐药率;113株CRKP对甲氧苄啶/磺胺甲恶唑和阿米卡星耐药率相对稍低(70.80%和75.22%);对氨曲南、庆大霉素、左氧氟沙星和四环素的耐药率分别为99.12%、84.96%、87.61%和87.61%,对其余抗菌药物的耐药率均高达100%;二元Logistic回归分析显示,神经系统疾病、低白蛋...     

关于肺炎克雷伯菌产碳青霉烯酶特性及耐药趋势分析

目的:分析肺炎克雷伯菌产碳青霉烯酶特性与耐药趋势。方法:选取2016年1月~2016年4月期间,某院分离的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌183株,分别采用VITEK-2Compact全自动细菌分析仪与K-B纸片法,对菌株对于药物的敏感性进行检测,通过改良Hodge试验,检测其是否产生碳青霉烯酶,采用EDTA抑制试验方法,检测其是否产出金属酶。结果:临床分离出的肺炎克雷伯菌中CRKP的比例为2015年0.2%,2016年3.7%,耐药性呈显著上升趋势(P0.05),且药敏结果显示,肺炎克雷伯菌除了对碳青霉烯类药物有较高的耐药性之外,对氨曲南、头孢曲松以及环丙沙星等抗菌类药物均有多重耐药性;改良Hodge试验结果显示,183株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌中有180株呈阳性。结论:2015年~2016年间,分离的CRKP比例呈逐年上升趋势,且对多种抗菌药物均有耐药性,而产出的KPC-2型碳青霉烯酶,是导致分离菌株对碳青霉烯类抗菌药物耐药性的主要原因。     

血流感染肺炎克雷伯菌临床特征、毒力基因及分子流行病学研究

摘要：目的 探讨血流感染肺炎克雷伯菌(KPN)的临床及分子生物学特征。方法 收集2019年1月-2020年12月，血流感染患者血液分离的KPN。应用Microflex LT型质谱仪进行菌种鉴定，Vitek-2分析仪进行药敏试验，结果判定参照CLSI 2019版标准。检测KPN多位点序列分型、荚膜分型及毒力因子等。应用全基因组测序技术分析其中碳青霉烯类耐药KPN(CRKP)分子生物学特征。结果 2年内共有72株KPN纳入研究，根据感染类型分为医院感染(HABSI)组(39株，54.2%)及社区感染(COBSI)组(33株，45.8%)。在入住ICU＞10d、侵袭性诊疗、使用碳青霉烯类药物和死亡或放弃治疗方面，HABSI组患者的比例高于COBSI组(P<0.05)。HABSI组对常用抗菌药物的耐药率高于COBSI组。HABSI组菌株中共检出19株CRKP(26.4%)，94.7%的CRKP携带blaKPC-2，主要为K64-ST11型，且存在高度亲缘关系，所有K64-ST11型CRKP均携带IncHI1B型质粒。结论 血流感染患者血液分离的CRKP呈现多重耐药，K64-ST11型为其主要分子型别，携带多种质粒介导的毒力因子，且存在医院内感染的克隆播撒。     

耐碳青霉烯类抗生素肺炎克雷伯菌种群结构和耐药机制研究

耐碳青霉烯类抗生素肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae, CRKP)是临床常见的耐药菌之一。本研究对88株全国49家医院收集的CRKP菌株进行碳青霉烯类耐药基因检测,其中65株(73.9%)检出blaKPC类基因(64株检出blaKPC-2、1株检出blaKPC-3)、9株(10.2%)检出blaNDM类基因(均为blaNDM-1)、7株(8.0%)检出blaIMP类基因(均为blaIMP-4)。通过多位点序列分型(multi-locus sequence typing, MLST)将88株CRKP分为25个MLST型,其中ST11型为优势型别,包含48株菌。88株CRKP通过脉冲场凝胶电泳(pulsed field gel electrophoresis, PFGE)分为79个PFGE型,呈现高度多态性。本研究揭示了我国blaKPC-2阳性CRKP菌株存在克隆化现象,存在ST11型流行克隆;而blaNDM-1和blaIMP-4阳性CRKP菌株分子型别多态性大,还没形成流行克隆。需要密切监测并采取措施控制携带blaKPC-2基因的ST11型CRKP的传播扩散。     

广东省肇庆市肺炎克雷伯菌临床分离株的耐药性与MLST分型研究

目的 了解广东省肇庆市肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae, KP)临床分离株的抗生素耐药情况及多位点序列分型(multilocus sequence typing, MLST)特征。方法 收集肇庆市两家医院KP临床分离株63株，采用肉汤微量稀释法进行30种抗生素的体外药物敏感性试验，并对所有菌株进行多位点序列分型。结果 63株KP临床分离株的耐药谱特点可分为4类，即全敏感的高毒力肺炎克雷伯菌(hypervirulent K. pneumoniae, hvKP)、产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌(extended spectrum β-lactamases K. pneumoniae, ESBLsKP)、耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant K. pneumoniae, CRKP)和其他类型的多重耐药肺炎克雷伯菌(multidrug-resistant K. neumoniae，MDRKP)；MLST分型结果显示63株临床分离株可分成41个ST型。其中，ESBLsKP以ST37型(9株，39.13%)为主，CRKP以ST11型(5株，62.50%)为主，hvKP以ST65(5株，25.00%)型和ST23(3株，15.00%)型为主，而其他类型的多重耐药KP的ST型(12株9种ST型)则呈现明显的多态性。结论 我市肺炎克雷伯菌临床分离株的耐药情况比较严重，要加强院内感染监测，警惕其成为优势菌型并引发院内感染的风险。     

广东省肺炎克雷伯菌临床分离株病原特征分析

目的 了解广东省肺炎克雷伯菌临床分离株的抗生素耐药情况与多位点序列分型(multilocus sequence typing, MLST)特征。方法 收集了广东省9个地市的肺炎克雷伯菌临床分离株102株,采用微量肉汤稀释法测定菌株对30种抗菌药物的敏感性,同时对所有分离株进行MLST分型,分析其菌群分布特征。结果 根据药敏试验与黏液拉丝试验结果,广东省9个地市102株肺炎克雷伯菌临床分离株的耐药特点可分成4类,即(ESBLs)KP(43株,其中9株为ESBLs-hvKP)、CRKP(8株,其中1株为CR-hvKP)、较敏感的KP(30株,均为hvKP)和其它类型多重耐药KP(MDRKP)(21株,其中6株为MDR-hvKP)。MLST分型结果显示102株临床分离株可分成54个MLST型,其中有6种为新发现的ST型,地区分布上看,湛江地区以ST23(4/30)为主;茂名地区以ST1224(4/12)为主;阳江地区以ST11(3/6)为主;珠海地区以ST15(3/8)为主,其他地区的ST型呈多态性。结论 我省肺炎克雷伯菌临床分离株的耐药情况较严重,菌群分布多样,在某些地区存在耐药变异株,应加强对此类菌株的耐药性和菌群结构变化的监测。     

肺炎克雷伯菌临床分离株的耐药性与分子流行病学分析

目的了解我院住院患者临床肺炎克雷伯菌分离株的耐药性与分子流行特征,为临床抗感染及合理用药提供依据。方法收集2018年4-12月我院住院病人肺炎克雷伯菌临床分离株,采用纸片扩散法或自动化仪器法按统一方案进行抗菌药物敏感性试验;聚合酶链反应(PCR)法检测耐药基因;脉冲场凝胶电泳(PFGE)和多位点序列分型(MLST)技术对菌株进行同源性分析和分型。结果共分离到肺炎克雷伯菌211株,对第3代头孢(头孢噻肟)和第四代头孢(头孢吡肟)的耐药率分别为54.5%和44.1%,对碳青霉烯类抗菌药物亚胺培南和美罗培南的耐药率为32.7%和34.1%;其中107株(107/211,50.6%)菌株分离自ICU病房,56株(56/107,52.3%)为碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CR-KP),MLST分型显示以ST11为主,PFGE分型结果主要为A型和F型两大聚类。结论肺炎克雷伯菌耐药率高,特别是分离自ICU病房的菌株耐药情况尤为严重,且携带KPC-2基因的ST11克隆株在ICU病房流行传播。     

广东省肺炎克雷伯菌临床分离株病原特征分析

目的 了解广东省肺炎克雷伯菌临床分离株的抗生素耐药情况与多位点序列分型(multilocus sequence typing, MLST)特征。方法 收集了广东省9个地市的肺炎克雷伯菌临床分离株102株,采用微量肉汤稀释法测定菌株对30种抗菌药物的敏感性,同时对所有分离株进行MLST分型,分析其菌群分布特征。结果 根据药敏试验与黏液拉丝试验结果,广东省9个地市102株肺炎克雷伯菌临床分离株的耐药特点可分成4类,即(ESBLs)KP(43株,其中9株为ESBLs-hvKP)、CRKP(8株,其中1株为CR-hvKP)、较敏感的KP(30株,均为hvKP)和其它类型多重耐药KP(MDRKP)(21株,其中6株为MDR-hvKP)。MLST分型结果显示102株临床分离株可分成54个MLST型,其中有6种为新发现的ST型,地区分布上看,湛江地区以ST23(4/30)为主;茂名地区以ST1224(4/12)为主;阳江地区以ST11(3/6)为主;珠海地区以ST15(3/8)为主,其他地区的ST型呈多态性。结论     

耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌医院感染、耐药性及治疗的研究进展

医院感染的主要病原菌是肠杆菌科细菌。由于临床上对于抗菌药物的不合理使用,使得耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(carbapenem-resistant Enterobacteriaceae,CRE)的检出率不断增加,而耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae,CRKP)是临床所分离CRE中最为常见的。本文将从CRKP感染现状、影响因素、耐药机制等方面进行介绍,提高人们对CRKP感染的重视和控制,以期对临床治疗CRKP提供有效的抗菌药物及联合治疗方案。     

2014—2018年耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌分离及耐药率分析#br#

目的 通过对耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae, CRKP)和非耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的分离结果和耐药性分析,为临床提供合理治疗方案。方法 回顾性对比分析2014年1月—2018年12月分离出的284株CRKP和2272株非CRKP的标本来源、病区分布和耐药性。数据分析采用Whonet5.6统计软件,使用 SPSS 20.0软件进行差异显著性分析,耐药率比较采用χ2检验。结果 2014—2018年5年CRKP分离率分别为0、0.6%、0.2%、3.2%和26.5%,平均分离率为11.1%;病区分布主要为重症监护病房(ICU)、干部保健病房、神经内科、呼吸内科、肿瘤外科,构成比分别为33.8%、26.1%、8.8%、7.0%和4.9%。ICU的CRKP分离率明显高于非ICU(χ2=101.514, P<0.05),二者比较差异具有显著性。CRKP标本来源主要是痰液,构成比达到48.6%。CRKP出现多重耐药,CRKP对常用的革兰阴性抗菌药物头孢菌素类、氟喹诺酮类、碳青霉烯类耐药率均超过95%,对氨基糖苷类的耐药率也超过90%;而非CRKP耐药率较低,对所有11种抗菌药物耐药率<28.6%,非CRKP对11种抗菌药物的耐药率均低于CRKP,且差异有显著性(P<0.05)。结论 CRKP分离率和耐药率较高,CRKP的耐药率明显高于非CRKP,检验科应及时报告CRKP的分离和耐药情况,加强抗菌药物的管理,强化消毒、隔离等感染控制措施。     

耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌医院感染、耐药性及治疗的研究进展

医院感染的主要病原菌是肠杆菌科细菌。由于临床上对于抗菌药物的不合理使用,使得耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(carbapenem-resistant Enterobacteriaceae,CRE)的检出率不断增加,而耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiella