某院金黄色葡萄球菌感染PFGE溯源分析

目的利用脉冲场凝胶电泳(pulsed field gel electrophoresis,PFGE)技术对某院新生儿室发生的1例金黄色葡萄球菌院内感染进行调查和溯源分析。方法对某院新生儿室环境和新生儿室患者样本进行采样和细菌培养。对金黄色葡萄球菌采用PFGE检测技术进行分子分型。结果医生工作站电脑键盘分离出1例金黄色葡萄球菌,新生儿病房环境监测未发现金黄色葡萄球菌。PFGE分析显示,未分离出与院内感染株同源的菌株。结论应用PFGE技术对新生儿病区的院内感染株进行监测,新生儿病区并未发生金黄色葡萄球菌院内感染株的暴发流行。     

PFGE方法在医院感染病原学监测中的应用

目的应用ＰＦＧＥ对我院１９９５年９月～１９９６年１１月间，金黄色葡萄球菌引起的医院感染进行病原学监测。方法收集、鉴定分离菌株，检测ＭＲＳＡ，分析病历资料并进行了ＰＦＧＥ分型研究。结果共分离到８４株金黄色葡萄球菌，ＭＲＳＡ４４株（５２．４％）。病历资料显示有５３株为医院感染菌，其中４１株为ＭＲＳＡ；经ＰＦＧＥ分析儿科、肾内科、皮科、骨科等有ＭＲＳＡ流行株存在，社区感染菌多为散发。结论引起医院感染的金黄色葡萄球菌多为ＭＲＳＡ，ＰＦＧＥ是一个研究感染流行情况、进行感染管理的有力手段     

北京市西城区食源性与临床感染性单核细胞增生 李斯特菌ＰＦＧＥ 和ＭＬＳＴ 分型研究

摘要：目的　研究北京市西城区食源性和临床感染性单核细胞增生李斯特菌（ｌｉｓｔｅｒｉａｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ,Ｌｍ） 的脉冲场凝胶电泳（ｐｌｕｓｅｄ ｆｉｅｌｄｇｅｌｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ,ＰＦＧＥ） 和多位点序列分型（ｍｕｌｔｉｌｏｃｕｓｓｅｑｕｅｎｃｅｔｙｐ ｉｎｇ,ＭＬＳＴ）分型特征,分析两种分型方法的应用价值。方法　采用ＰＦＧＥ 和ＭＬＳＴ 两种方法对２０１２－ ２０１５年５０株食源性和临床感染性单核细胞增生李斯特菌进行分型研究。结果　５０株单核细胞增生李斯特 菌ＰＦＧＥ 分型得到２３种型别,ＧＸ６Ａ１６．ＣＮ０００４为优势带型。ＭＬＳＴ 分析获得１２ 个型别,ＳＴ９ 为优势型 别。其中５组数据是ＳＴ 型别只对应一种ＰＦＧＥ 型别,３种ＰＦＧＥ 型别同时存在食源性和临床感染性单核细 胞增生李斯特菌,并且其ＳＴ 型别进化关系比较远。结论　北京市西城区不同来源单核细胞增生李斯特菌 污染长期存在,出现致病型别,并且致病性单核细胞增生李斯特菌的遗传关系呈多元化。两种分子分型方 法的结合,从基因水平上解释了单核细胞增生李斯特菌的变化趋势及流行特征。 关键词：单核细胞增生李斯特菌;ＰＦＧＥ 分型;ＭＬＳＴ 分型;进化树;分子分型;食源性致病菌;人源性 中图分类号：Ｒ５１７．７　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００９ ６６３９ （２０１７）０９ ０６７５ ０５     

福建省非典型肠致病性大肠埃希菌的分子特征研究

摘要：目的　研究福建省非典型肠致病性大肠埃希菌（ａＥＰＥＣ）菌株的毒力基因特征和菌株间的遗传相似
度;结合菌株的背景资料分析不同的分子特征对ａＥＰＥＣ 流行的影响。方法　运用ＰＣＲ 技术进行系列的相
关毒力基因扩增;同时运用脉冲场凝胶电泳分子分型技术,对福建省２０１０－２０１２年分离的ａＥＰＥＣ 菌株进
行脉冲场凝胶电泳（ＰＦＧＥ）分子分型。结果　分离３０株实验菌株毒力基因的检测呈阳性的分别为：犫１１２１
５３．３％ （１６）,狔犻犪犃３６．７％ （１１）,狊犲狋／犲狀狋、狀犾犲犅、狀犾犲犈均为３０％ （９）,犾狆犳犃犚１４１２３．３％ （７）,犲犳犪／犾犻犳犃
２０％ （６）,犲犺狓犃３．３３％ （１）;其余毒力基因均未检出;９３．３％ （２８）菌株不同程度地携带有相关的毒力因
子。２９株菌按照１００％的相似度分为１５个ＰＦＧＥ 型别（Ｐ１ Ｐ１５）;其中存在４组不同的ＰＦＧＥ 簇（Ｉ Ⅳ）,
相同ＰＦＧＥ 簇的病例在发病的时间和地区上有聚集性,同时相同簇内菌株的毒力基因谱也表现相同。结论
　犫１１２１、狔犻犪犃和ＥＨＥＣ 毒力岛ＯＩ １２２ 相关基因（犲犳犪１／犾犻犳犃,狀犾犲犅,狀犾犲犈,狊犲狋／犲狀狋） 在福建省ａＥＰＥＣ 菌
株中携带率较高。非典型肠致病性大肠埃希菌的毒力谱表现为多样性, 基因组也呈现遗传多态性;同时
ＰＦＧＥ 分析发现福建省存在由ａＥＰＥＣ 新发病原菌引起的聚集性病例。
关键词：非典型肠致病性大肠埃希菌;毒力基因;ＰＦＧＥ
中图分类号：Ｒ３７８　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００９ ６６３９ （２０１４）０３ ０２１６ ０５
犕狅犾犲犮狌犾犪狉犮犺犪狉犪犮狋犲狉犻狊狋犻犮狊狅犳犪狋狔狆犻犮犪犾犲狀狋犲狉狅狆犪狋犺狅犵犲狀犻犮     

脉冲凝胶电泳技术在细菌学上的应用

脉冲凝胶电泳（Ｐｕｌｓｅｄ－ｆｉｅｌｄｇｅｌｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ．ＰＦＧＥ）是以琼脂糖作为电泳介质,通过方向发生周期性变化的电场的作用将ＤＮＡ分子分离出的一种电泳方法。１９８４年,Ｓｃｈｗａｒｔｚ和Ｃａｎｔｏｒ〔１〕首次利用此技术成功地分离...     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌暴发流行菌株的基因分型研究

目的研究急诊重症监护病房(EICU)耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)暴发流行菌株的分子流行病学特征,以追踪传染源、了解传播途径,确定预防流行的策略。方法采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术,对我院EICU在2004年12月临床患者感染部位分离的MRSA暴发流行株及暴发期间分离自环境和患者、医务人员携带的MRSA作同源性分析。结果17例患者中有6例感染MRSA,共分离出7株病原菌(其中有两株来自同一患者的不同部位);分别从一患者鼻腔、换药室台面、一护士的手、一病床床栏和病区的空气分离出5株MRSA;12株MRSA的PFGE分型结果显示共有4个型:所有患者感染部位分离的7个菌株和患者鼻腔及护士手上分离的两个菌株都是A型,为暴发菌株;换药室台面、病床床栏和空气中分离的菌株分别为B型、C型和D型。结论基因分型阐明了本次MRSA暴发流行的来源和传播途径,其可能是患者鼻腔携带的MRSA经由医护人员的手在病区中传播。     

基因分型技术在食物中毒调查中的溯源应用

目的：运用基因分型技术分析金黄色葡萄球菌的分子特征，为流行病学溯源提供有效手段。方法：对一起由金黄色葡萄球菌引起的食物中毒进行常规鉴定后，用荧光定量PCR检测特异耐热核酸酶基因（nuc）和5种常见肠毒素基因（sea，seb，sec，sed，see），并应用脉冲场凝胶电泳（PFGE）进行分型和聚类分析。结果：23株分离菌的nuc基因检测均为阳性，其中22株检测出sea肠毒素基因，21株细菌属于同一个PFGE型别。结论：此次食物中毒由同一株金黄色葡萄球菌引起，基因分型技术可以显示食物中毒诊断证据链，为流行病学调查和溯源提供可靠依据。     

利用IRS-PCR技术分析金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌基因多态性

目的：利用IRS-PCR技术分析院内感染金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌基因组多态性,以期进行更加行之有效的院内感染监控。方法：收集重症监护病房中引起院内感染的金黄色葡萄球菌23株和铜绿假单胞菌10株;利用IRS-PCR方法进行基因组多态性分析。结果：金黄色葡萄球菌表现明显同源性,与质控菌株显著不同;同病房不同来源铜绿假单胞菌则呈现不同型别多态性特征。结论：重症监护病房短期内存在金黄色葡萄球菌暴发流行;利用IRS-PCR技术进行细菌多态性分析快速、准确、可靠,而且可用于不同菌种,是用于流行病学监测的有效方法。     

MRSA呼吸系统医院感染的分子流行病学调查

目的对广州呼吸疾病研究所2001年7月～2003年3月间,金黄色葡萄球菌引起的呼吸系统医院感染进行病原学监测. 方法收集临床分离菌株,应用脉冲场凝胶电泳的方法(PFGE)进行分型,确定菌株亲缘关系,结合临床资料分析. 结果在各种呼吸道采集标本中共收集到76株金黄色葡萄球菌,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)68株,占金黄色葡萄球菌检出率89.47%,MRSA在我所病区中引起59例医院感染,属于暴发形式发病的有23例,属于聚集性发病的有19例,散发病例17例,PFGE分型表明,绝大多数MRSA属于同一型(A型)共有60株,其中A1亚型28株,A2亚型14株,A3亚型17株,A4亚型1株. 结论MRSA引起的呼吸系统医院感染十分严重,并主要由少数菌株的传播引起,及时采取有效措施控制MRSA的流行和播散非常必要.     

食源性金黄色葡萄球菌肠毒素基因分布、耐药性及分型研究

目的 对2017—2021年上海市松江区不同食品来源的金黄色葡萄球菌进行肠毒素基因检测、药敏试验和脉冲场凝胶电泳分子分型，以了解金黄色葡萄球菌病原特征。方法 利用PCR方法检测金黄色葡萄球菌肠毒素基因，微量肉汤稀释法进行药物敏感试验，脉冲场凝胶电泳进行基因分型。结果 108株食源性金黄色葡萄球菌中有39株检出肠毒素基因，检出率为36.1%,其中sea(28.02%,11/39)、seb(41.0%,16/39)、sec(33.3%,13/39)、sed(12.8%,5/39);药敏试验结果显示氨苄西林(83.3%)、青霉素(80.6%)和红霉素(42.6%)耐药率最高；最低为万古霉素(100.0%)、达托霉素(98.1%)和庆大霉素(94.4%),且有15株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌，20株表现出多重耐药，其中1株最高耐受6类抗生素。脉冲场凝胶电泳分子分型结果显示108株金黄色葡萄球菌中有11株不能分型，其他97株共分为19簇，包括77种型别，呈现多样性。结论 2017—2021年上海市松江区食源性金黄色葡萄球菌肠毒素基因携带率较高、多重耐药性情况需引起重视，并加强食品中金黄色葡萄球菌的...     

农村医疗站物表金黄色葡萄球菌脉冲场电泳分型

目的:了解农村医疗站物表分离的金黄色葡萄球菌的基因型及耐药性.方法:采用脉冲场凝胶电泳技术对金黄色葡萄球菌进行分型.结合药物敏感试验进行分析.结果:17株金黄色葡萄球菌的脉冲场谱分6型(A-F),耐药性试验结果显示菌株对21种药物耐药,最多耐药种类达18种,出现13种耐药谱,菌株存在多重耐药性.结论:在医疗站物表金黄色葡萄球菌的分子流行病研究中,脉冲场凝胶电泳是一种较好的基因分型方法.     

细菌分子生物学分型技术及其应用评价

随着对细菌感染研究的日益深入 ,传统的细菌鉴定技术已不能很好地满足医院感染的诊断和流行病学调查的需要 ,从型、亚型、株甚至分子水平上去认识细菌变得愈来愈重要了 ,近年来分子生物学的理论和技术在细菌感染诊断中的渗透和广泛应用使得细菌鉴定、耐药基因的检测、分子流行病学的调查变得更加准确、简洁和快速。现将常用的基因分型技术的方法介绍如下。1　方法原理1·1　染色体ＤＮＡ的脉冲场凝胶电泳　从 1984年Ｓｃｈｗａｒｔｚ和Ｃａｎｔｏｒ首先报道了用脉冲场凝胶电脉分离酵母染色体获得成功以来 ,ＰＦＧＥ以其重复性好 ,分辨力强而…     

268份新生儿脐部分泌物病原菌检测

新生儿脐炎多为医院内获得性感染，此乃新生儿免疫功能发育尚未完善，易被各种病原菌感染所致。我们从本院婴儿室和新生儿病区送检的２６８份疑似新生儿脐部感染的分泌物进行了病原菌分离，并调查了部分抗生素的耐药状况，现报告如下。 材料与方法 １．标本来源：１９９７．１－１９９９、６年间本院婴儿室和新生儿病区疑似新生儿脐部感染的患者，用生理盐水湿润的无菌棉拭子采集后立即送检，共送检标本２６８份。 ２．药敏质控菌株，以大肠埃希氏菌ＡＴＣＣ２５９２２、绿脓假单胞菌ＡＴＣＣ２７８５３和金黄色葡萄球菌ＡＴＣＣ２５９２３…     

金黄色葡萄球菌所致的新生儿院内感染的调查报告

金黄色葡萄球菌所致的新生儿院内感染的调查报告林玫，李翠云，董柏青，王树声，刘兵，王鸣柳，谭国珠１９９３年９月，南宁市区直某医院发生一起新生儿感染的爆发流行，病情来势凶猛，病死率高，主要临床表现是持续性发烧、腹泻等，发病１１例，死亡４例。流行历时１５天...     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌引起医院内感染的基因分型及耐药监测

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)是儿科医院内感染常见致病菌,常引起爆发性流行,故进行MRSA分型监测非常重要.本研究采用脉冲场凝胶电泳方法(PFGE)对儿童医院烧伤病房2003年10-11月小规模流行的金黄色葡萄球菌(金葡菌)进行基因分型及联合耐药表型分型分析流行原因.     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌PFGE分型与医院感染暴发的分子流行病学研究

目的了解医院感染耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的同源性及院内流行特征,为临床控制MRSA感染、制定合适的预防控制措施提供依据。方法收集2011年6-7月全院患者各类标本中分离出的MRSA 36株,金黄色葡萄球菌鉴定采用法国生物梅里埃公司的VITEK-2全自动微生物分析系统,根据美国CLSI标准用头孢西丁K-B法确认MRSA;运用脉冲场凝胶电泳(PFGE)对医院感染MRSA进行基因分型,并进行流行病学分析。结果临床分离的36株MRSA,PFGE分型为6型8个亚型,其中以A型为主;在研究期间,NICU及ICU发生两次MRSA感染暴发。结论 MRSA在NICU及ICU易发生交叉感染;PFGE是医院感染暴发及流行病学的较好的研究手段。     

一对母婴同时携带的金黄色葡萄球菌同源性分析

目的分析一对母婴同时携带的金黄色葡萄球菌的同源性,了解金黄色葡萄球菌在母婴之间传播的可能性。方法对分离的3株金黄色葡萄球菌（其中1株分离自受母乳喂养,患有脐炎的新生儿脐分泌物;另2株分别分离自该新生儿健康母亲左右两侧乳房分泌的乳汁）进行药敏试验表型分型和脉冲场凝胶电泳（PFGE）基因分型,分析其同源性。结果此对母婴携带的3株金黄色葡萄球菌对常用抗菌药物的药敏试验结果完全相同,PFGE图谱具有100%的相似度,PFGE结果聚类图处于同一分支。结论此对母婴携带的金黄色葡萄球菌是相同型别菌株,推测金黄色葡萄球菌在母婴之间传播的可能性大。     

肝癌高发区HBV感染与肝癌关系的流行病学研究

目的：为了探讨同安县原发性肝癌高发的主要危险因素。方法：应用流行病学调查研究的方法，开展了１：２配对的ＰＨＣ危险因素病例－对照，ＥＬＩＳＡ法的高危人群筛检，ＨＢＶ感染与ＰＨＣ关系的前瞻性研究。结果：ＨＢｓＡｇ携带率病例组高于对照组，抗－ＨＢｓ阳性率病例组低于对照组；ＨＢｓＡｇ携带率病例组高对对照组，抗－ＨＢｓ阳性率病例组低于对照组；ＨＢＳａＧ，ＡＦＰ阳性率男性高于女性，抗－ＨＢｓ阳性率男性低于女性     

神经外科重症监护室MRSA医院感染暴发分析

目的调查某院神经外科重症监护室(NSICU)耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)医院感染暴发的原因。方法采用前瞻性和回顾性调查相结合的方法,对2014年6月15—28日某院NSICU发生的8例下呼吸道MRSA感染患者进行流行病学调查。结果 2014年6月15—28日该院NSICU患者医院MRSA下呼吸道感染罹患率为22.86%,该期间住院患者临床标本、鼻前庭标本及环境卫生学标本共分离MRSA16株,脉冲场凝胶电泳(PFGE)结果证实此次暴发为2个MRSA亚型感染;危险因素分析显示,住ICU时间长及使用支气管镜吸痰是MRSA下呼吸道感染的危险因素。结论推断NSICU支气管镜污染是此次MRSA医院感染暴发传播的关键因素。     

医院金黄色葡萄球菌耐药性及RAPD研究

目的：研究医院金黄色葡萄球菌耐药性及其与医院环境的相关性，了解医院病原菌的来源。方法：比较金黄色葡萄球菌院感株和环境株的耐药谱和RAPD型别间差异，判断相关性。结果：从耐药谱和RAPD分型综合研究表明，金黄色葡萄球菌院感株和环境株有较大相关性。结论：提示金黄色葡萄球菌的医院感染主要是外源性感染。