加强结核病病理学诊断的临床应用与研究

结核病是一种由结核分枝杆菌复合群引起的传染性疾病,严重危害着人类的健康。国家卫生和计划生育委员会于2017年11月9日发布了《WS 196—2017结核病分类》与《WS 288—2017肺结核诊断》两项强制性卫生行业标准,并且于2018年5月1日起施行;同时废止《WS 196—2001结核病分类》和《WS 288—2008肺结核诊断》。在《WS 288—2017肺结核诊断》标准中,显著提高了病理学诊断在肺结核诊断和精准治疗中的地位。病理学诊断阳性的患者即可确诊为肺结核;影像学检查结果支持肺结核的诊断,同时分子生物学检查阳性的患者也可以确诊为肺结核。多聚酶链反应(PCR)技术可以快速诊断结核分枝杆菌感染,核酸杂交技术可以快速检测基因的突变位点,判断结核分枝杆菌对抗结核药物的耐药种类和数量。深入学习与贯彻《WS 288—2017肺结核诊断》标准,对于明确和了解病理学诊断在结核病临床诊断和精准治疗方面作用具有十分重要的意义。     

我国结核病病理学诊断和研究的现状与展望

本文对我国结核病病理学诊断现状及分子病理学在未来结核病诊断和基础研究中的作用进行了阐述.与其他方法相比,病理学诊断依然是结核病、尤其是菌阴肺结核及肺外器官结核病确诊的重要手段.目前,我国结核病病理诊断总体上处于组织学和细胞学水平,仍以组织学形态特征和查找病原体作为结核病诊断依据.因PCR的临床检测对实验室、仪器设备及技术人员的要求较高,所以目前国内仅部分大型医院病理科开展了此项检查.分子病理学科的发展,将病理学的研究与诊断引领到蛋白、核酸等生物大分子水平,为结核病病理学诊断及研究带来了新的发展机遇.近年来,分子生物学检测技术发展迅速,在痰标本、体液标本等应用广泛,而在组织标本中推广较慢,因此,需要加快这些新技术在结核病分子病理学诊断中的临床应用.今后,结核病病理学诊断应在病理形态的基础上,进一步在寻找病原体、菌型鉴定及相关耐药基因的检测等方面做更多努力,为结核病的正确诊断与合理化治疗提供更准确的依据.     

结核病临床诊治进展年度报告（2012年）（第一部分结核病临床诊断）

近一年来,国内外在结核病临床诊断方面取得了诸多进展,不少诊断新方法、新技术得以在临床上开展应用。在细菌学诊断方面,两种新技术包括等温微量热技术及爆轰纳米金刚石技术与传统的培养法相结合,提高了阳性检出率,具有速度快、敏感度和特异度高等优点。分子影像学在肺结核及肺外结核诊断中也取得了较大的进展。γ-干扰素释放试验在菌阴肺结核及肺外结核的诊断方面具有较大优势。2012年结核病分子生物学诊断仍集中在以核酸扩增为核心的检测技术上,而最引人注目的是Xpert Mtb/RIF技术,其在结核病和耐药结核病诊断中取得了丰硕的成果,在儿童结核病及Mtb与HIV双重感染的诊断方面也发挥了重要作用。RNA恒温扩增技术不仅可用于诊断结核病,还可用于疗效的监测。内镜介入诊断部分介绍了呼吸内镜在肺结核、气管支气管结核、纵隔淋巴结结核及胸膜结核诊断中的应用进展。其中支气管内镜超声引导下经支气管针吸活检术引起了国内外学者的极大关注,该方法以其操作技术简单、微创、定位准确、敏感度和特异度高,以及可重复性强等优势,在纵隔及肺门淋巴结结核的诊断中发挥了越来越大的作用。     

结核病诊断技术的研究进展

结核病是危及我国人们的重大传染病之一,根据 WHO 的统计,我国是全球22个结核病疫情严重的国家之一,同时也是全球27个耐多药结核病严重的国家之一,对结核病的早期诊断规范治疗与控制耐药结核,是降低结核发病率的有效措施,由于临床表现不典型潜伏性结核感染及结核耐药问题,导致我国的结核疫情防控形势依然严峻,实验室检查是诊断结核的重要手段常用的实验室诊断,技术包括 PPD,结核抗体,细菌学检测方法,结核分枝杆菌感染 T 淋巴细胞斑点试验(T-SPOT),病理学检测,气管镜检查,分子生物学检测方法,免疫学检测方法等,各种技术在诊疗过程中,各有优缺点,在诊疗过程中,我们能利用检查手段的每个特点进行有效的诊断,需要考虑的重要因素,尽早正确的治疗督导用药,使结核病的疫情得以控制。     

部分抗结核分枝杆菌药物的耐药机理研究进展

结核病是危害严重的重大传染病之一,抗结核药物的应用在治疗结核病的过程中具有重要意义。然而抗结核药物治疗不当会引起耐多药和广泛耐药结核分枝杆菌的出现,导致结核病抬头。结核的耐药多与耐药基因突变有关,笔者总结了常见抗结核药物的耐药分子机制的研究进展,为耐药结核的诊断和治疗提供分子依据。     

结核病临床诊治进展年度报告（2013年）（第一部分 结核病临床诊断）

近一年来,结核病的诊断方面继续深入进行相关方面的研究,取得了不少进步.在细菌学诊断方面,使用新技术如新型移动数字化荧光显微镜痰检涂片技术可清晰显示并保存图像,发光二极管（LED）性能的荧光显微镜（FM）检查能够明显缩短常规涂片的染色时间,明显提高检出率.影像学诊断在结核病诊断的难点方面进行了详细的研究,如肺癌合并肺结核的临床分期、耐多药结核病与非结核分枝杆菌病的鉴别等.γ干扰素释放试验诊断结核分枝杆菌感染具有很大优势,今年对其诊断价值进行再评价.分子生物学诊断发展迅速,继续对XpertMtb/RIF诊断系统进行深入研究,超支化滚环扩增（hyperbranched rolling circle amplification,HRCA）技术简单、经济、省时,在贫困地区具有广泛的应用前景.介入诊断方面,将气管镜、腔镜技术与分子生物学、超声引导技术、细菌学、病理学检测技术相结合,使得结核病的诊断效率得到显著的提高,如气管镜下支气管冲洗液进行XpertMtb/RIF的检测等.病理学诊断方面以分子病理技术的发展较引人注目,使用活检标本行基因检测提高了结核病的检出率.     

IL-17与结核病的研究进展

白介素17(interleukin-17,IL-17)主要是由Th17细胞分泌的一种促炎症性细胞因子(cytokine,CK),其在慢性炎症疾病和抵御细胞内外病原体的免疫反应中有重要的作用。结核病(tuberculosis,TB)仍然是全球备受关注的公共卫生问题,目前有研究已经证明IL-17与结核病的免疫机制相关,在结核分枝杆菌感染的不同阶段发挥不同的作用,深入探究IL-17与结核分枝杆菌感染的免疫保护和免疫病理学的关系,对于结核病的疫苗改善设计、有效诊断和治疗都有极其深远的意义。     

结核病实验室诊断新技术的临床应用

结核分枝杆菌全基因组测序的完成,使得对结核分枝杆菌的认识进入分子水平,分子生物学和免疫学的发展为诊断新方法提供了技术平台,结核病实验室诊断技术得到快速发展。为帮助临床医生了解现有新技术,以便更好地应用,本文系统介绍现有结核病实验室诊断新技术的原理和临床应用特点。     

中国结核病诊疗现状及展望

中国是全球结核病高负担国家,结核病疫情较重。中国用于潜伏性结核感染诊断工具是结核菌素纯蛋白衍生 物(PPD) 试验以及γ- 干扰素释放试验(IGRA),其中IGRA 较PPD 试验具有一定优势。中国结核病诊断技术包括 细菌学、分子生物学、病理学、影像学以及血清学等,其中分子生物学技术是近年来出现的新的诊断技术。中国初复 治肺结核患者多采用标准化治疗方案,耐药结核病治疗方案应遵循国际原则。未来结核病诊断治疗应不断采用新技 术,并加强国际合作。     

石蜡包埋组织实时荧光定量聚合酶链反应检测在结核病诊断中的价值

目的探讨石蜡包埋组织实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测结核分枝杆菌DNA在结核病诊断中的价值。方法275例组织标本行常规组织病理学检查、抗酸染色,并对石蜡包埋组织应用实时荧光定量聚合酶链反应检测结核分枝杆菌DNA。结果275例FQ-PCR检测结核分枝杆菌DNA阳性211例(76.7%),病理诊断为结核183例(66.5%),抗酸染色阳性23例(8.4%)。病理诊断为结核者FQ-PCR阳性率为93.4%,抗酸染色阳性者FQ-PCR阳性率95.7%。结论实时荧光聚合酶链反应技术敏感性高、其与组织病理学相结合可以提高诊断率。     

猴源性结核分枝杆菌的分离和鉴定

目的探讨非人灵长类结核病的诊断方法，以及进行结核病的病原学的调查研究。方法利用病理学诊断方法，微生物分离方法以及分子生物学技术对结核菌素阳性的4只恒河猴，1只食蟹猴进行疾病诊断和病原分离。结果5只猴尸检，出现典型的干酪样病变；病变组织切片，显微镜检，可见典型的结核病特征。利用米氏7H9培养基和改良罗氏培养基进行病原分离，通过TCH和PNB等培养基进行生化鉴定，确认所分离的分枝杆菌是结核分枝杆菌；巢式PCR对石蜡包埋的病变组织抽提的DNA进行扩增，5只猴的DNA样品都扩增出结核分枝杆菌特异的123bp片段，证实感染猴的病变组织中含有结核分枝杆菌。结论非人灵长类死后，结核病的诊断可以通过常规的病理和微生物分离诊断方法进行。分子生物学技术在结核病的诊断中的应用逐渐成为必不可少的诊断方法，它将有利于对病理学诊断、病原分离困难的小的病变组织的诊断，以及对病原分离过程中分枝杆菌污染的判定。     

胃肠道结核的内镜与病理

目的总结胃肠道结核的内镜诊断经验，以引起对这个特殊疾病的重视，减少漏诊和误诊。方法内镜检查发现胃肠道黏膜隆起、结节、红斑、溃疡等病变，行黏膜活检病理。结果7例患者中，胃结核2例，其中溃疡型1例，增殖型1例；肠结核5例，其中增殖型4例，混合型1例。病变部位：胃窦部2例，回肠末端1例，回盲瓣1例，回肠末端和回盲瓣1例，回肠末端及结肠多处病变1例，升结肠1例。内镜诊断：1例结合有浸润型肺结核诊断为肠结核，2例诊断为结肠恶性肿瘤，4例诊断为胃肠黏膜隆起或溃疡性病变性质待定。7例患者活检组织病理均为干酪样坏死肉芽肿，符合结核。结论胃肠道结核病内镜下表现多种多样，与结肠癌、克罗恩病等炎性肠病及胃良恶性溃疡难以鉴别，需依赖黏膜活检病理诊断。     

分子病理学诊断颈部淋巴结结核及其耐药性的应用价值

目的 评价分子病理学方法诊断颈部淋巴结结核及其耐药性的临床应用价值。方法 搜集2010年3月至2013年10月首都医科大学附属北京胸科医院病理科收治的符合纳入标准(临床症状和体征均符合颈部淋巴结结核、抗结核药物治疗均有效)的全部97例颈部淋巴结结核患者(结核组);以及符合纳入标准(通过病理学或临床检测结果明确诊断为其他淋巴结疾病)的全部20例其他淋巴结病变患者(非结核组)的石蜡包埋标本。所有标本以萋-尼(Z-N)抗酸染色法查找抗酸杆菌,荧光定量聚合酶链式反应(FQ-PCR)检测结核分枝杆菌特异基因序列IS6110;以临床最后诊断为标准,比较两种方法的检测效能;并对FQ-PCR检查结果为阳性且结核分枝杆菌DNA含量满足耐药突变检测下限的标本,以探针熔解曲线法检测利福平、异烟肼耐药相关基因突变情况。结果 以临床最后诊断为标准,抗酸染色和FQ-PCR检测结核组的敏感度分别为22.7%(22/97)和67.0%(65/97);FQ-PCR技术检测敏感度明显高于抗酸染色法,差异有统计学意义(χ²=38.53,P<0.001)。抗酸染色和FQ-PCR检测非结核组标本均为阴性,特异度均为100.0%(20/20)。抗酸染色和FQ-PCR的阳性预测值分别为100.0%(22/22)和100.0%(65/65),阴性预测值分别为21.1%(20/95)和38.5%(20/52),符合率分别为35.9%(42/117)和72.6%(85/117)。对41例FQ-PCR检查结果为阳性且结核分枝杆菌DNA含量满足耐药突变检测下限的患者标本进行结核分枝杆菌耐药基因突变检测,利福平和异烟肼可评估标本分别为10份(例)和27份(例),其中利福平耐药1份(例),异烟肼耐药13份(例)。 结论 分子病理学诊断技术在颈部淋巴结结核石蜡包埋标本中检测结核分枝杆菌DNA的敏感度和特异度较高,并且能筛查可能的耐药患者,可为颈部淋巴结结核的正确诊断与合理化治疗提供依据。     

New tests for the diagnosis of tuberculosis

Over the last decade, molecular biology techniques for identifying mycobacteria in pulmonary secretions have become more and more sensitive and rapid, even in smear negative samples. Nuclear amplification techniques also allow the rapid detection of resistance to first or second line anti-tuberculous drugs. The sensitivity of these techniques for non respiratory samples is yet to be determined. The diagnosis of latent tuberculous infection (LTBI) has also increased in sensitivity, specificity and positive predictive value through the use of interferon-γ release assays (IGRAs), which are tending to replace the tuberculin skin test, except for children aged under five. These tests, however, do have limitations which are important for the clinician; especially their inability to distinguish active from latent tuberculosis and their inability, in most circumstances, to exclude a diagnosis of active TB.     

肺结核的影像学诊断——从形态分析到分子影像诊断

医学影像学已成为肺结核及肺部疾病诊断不可缺少的重要方法.病灶形态分析是肺结核影像学诊断与鉴别诊断的重要方法,CT增强扫描是病灶形态学诊断的重要补充方法,MRI既是形态学诊断也是分子影像诊断的重要技术,正电子发射计算机体层摄影术计算机体层摄影术（PET-CT）是重要的分子影像学诊断技术,在结核病的鉴别诊断和结核病灶活动性的评价方面具有重要意义.熟练掌握不同影像学技术,以及在肺结核诊断中应用的目的与意义,重视肺结核不典型影像表现和菌阴肺结核的影像诊断与鉴别,推进影像学形态分析和细菌学、病理学及免疫学等多学科联合诊断等,将是现在及未来的主要努力方向.     

Les nouveaux outils de diagnostic microbiologique de la tuberculose maladie

This review focuses on the role of new tools in the “modern” microbiological diagnosis of tuberculosis. Traditional techniques of microscopy and culture remain essential to diagnostic certainty, but some innovations replace daily the older techniques such as the identification of Mycobacterium tuberculosis complex by immunochromatography or mass spectrometry MALDI-TOF type from positive cultures, or susceptibility testing in liquid medium. New tools that use molecular techniques have become important. They all have in common to optimize the fight against tuberculosis by reducing diagnostic delay. They also allow rapid detection of drug resistance. However, the techniques of gene amplification directly from clinical samples are still less sensitive than culture. Bacteriological diagnosis of tuberculosis disease therefore still relies on the complementarities of different phenotypic and molecular techniques.     

免疫诊断技术在肺结核及肺外结核诊断中的价值

目前结核病免疫学诊断技术的研究热点是血清学诊断技术和基于细胞免疫反应的干扰素-γ释放试验.血清学诊断方法具有简单快速的优点,易于推广应用,是研究比较多的结核病诊断方法之一,但现有血清学试验试剂在结核病诊断的特异性和敏感性方面还有待提高.基于细胞免疫反应的干扰素-γ释放试验是结核免疫诊断技术的重要突破,在诊断结核潜伏感染...     

Videothoracoscopic lung biopsy in the diagnosis of interstitial lung disease

Video-assisted thoracoscopic surgery (VATS) is a diagnostic method, used with increasing frequency in recent years, in the diagnosis of interstitial lung diseases. There are significant differences in the diagnosis of diseases which are diagnosed with clinical, biochemical and radiological investigation and with pathological evaluation of material obtained by VATS. In our study, five patients with different clinical and VATS guided pathological diagnosis, were analyzed. VATS was applied to four patients with clinical and radiological diagnosis of lymphangioleiomyomatosis, hypersensitivity pneumonitis and idiopathic pulmonary fibrosis (IPF) (two patients) at the beginning and to another patient with pulmonary tuberculosis (Tbc) who was ARB positive and no regression could be achieved with anti-Tbc treatment at the third month. Clinical and pathological diagnosis was different in all patients. In a 22 year old female, who was thought to be lymphangioleiomyomatosis, was pathologically diagnosed as histiocytosis-X; in a 55 year old female, who was thought to be hypersensitivity pneumonitis, was diagnosed as sarcoidosis; in a 58 year old male, who was thought to be IPF, was diagnosed as nonspecific interstitial pneumonia. Sixty-two year old patient with ARB positive pulmoner Tbc who had no clinical and radiological regression with three month anti-Tbc therapy, and 65 year old male patient who was thought to be IPF were diagnosed by VATS as bronchoalveolar carcinoma. In conclusion; VATS is one of the most important methods for definite diagnosis of interstitial lung diseases, in patients with interstitial involvement.