中性粒细胞性哮喘研究进展

支气管哮喘是一种常见的慢性呼吸道疾病,是多种炎症细胞及炎症介质参与的气道慢性炎症。这种慢性炎症导致气道高反应性、可逆性气流受限,并引起反复发作的喘息、气急、胸闷或咳嗽等症状。过去人们认为哮喘病人的气道炎症主要为嗜酸性粒细胞(eosinophil,EOS)所致。     

中性粒细胞与支气管哮喘的研究进展

1　PMN参与支气管哮喘发病的一些有关证据及可能机制2 0余年前已经发现 ,抗原激发的支气管哮喘 (哮喘 )患者PMN呈活化状态[1] 。以后的时间里 ,也有一些关于PMN与哮喘的关系研究 ,Diaz等[2 ] 给哮喘患者吸入变应原后 ,发现支气管粘膜和支气管肺泡灌洗液中PMN数量显著升高。Sur[3 ] 等发现突发致命性哮喘表现为以PMN浸润为主的气道炎症 ,而嗜酸性粒细胞 (Eos)不增多。稍后的研究证实哮喘患者气道内PMN的数量和活性不论是在稳定期还是急性发作期都会增加[4、5] 。1995年后的研究显示 ,高渗盐水诱导痰细胞组分析和支气管肺泡灌洗与支…     

炎症反应中组织损伤机制的探讨：中性粒细胞...

A significant increase of polymorphonuclear leukocytes (PMN) chemiluminescence (CL) was observed when PMN was treated with rat C5ades Arg (r-C5ai), FMLP, opsozined zymosan (STZ) or a calcium ionophore A23487 separately. These stimuli, as well as aggregated IgG (A-IgG), could also cause the release of beta-glucuronidase (beta-g) and myeloperoxidase (MPO) from PMN, on the other hand, elastase (NE) release was not noticed when PMN was treated with r-C5ai and FMLP, which generally stimulated PMN in a cytochalasin B-dependent manner. These results suggest that the kinetics of PMN CL and degranulation vary depending upon the stimulus.     

哮喘和中性粒细胞

长期以来 ,人们一直认为哮喘主要是由嗜酸性粒细胞、肥大细胞、Ｔ淋巴细胞所介导的 ,其中尤以嗜酸性粒细胞最具特征性。然而 ,随着近年来对哮喘研究的不断深入 ,逐渐发现中性粒细胞在哮喘的发病中也起着非常重要的作用。一、哮喘和中性粒细胞的关系在当今的许多哮喘研究中 ,中性粒细胞愈来愈显示出其在哮喘发病中的重要性 ,它与嗜酸性粒细胞、Ｔ淋巴细胞、肥大细胞等同样具有不可忽视的作用。尤其在重症哮喘和哮喘急性发作时 ,中性粒细胞的作用甚至已超过传统意义上的嗜酸性粒细胞。在对一些因哮喘突发而死亡的尸体解剖中发现 ,其痰液中占主…     

中性粒细胞相关细胞因子对哮喘的作用研究进展

哮喘是一种以慢性气道炎症和气道高反应性为特征的异质性疾病,其病因复杂且发病机制尚未完全阐明。多种细胞及细胞组分参与哮喘的发病过程,其中以中性粒细胞浸润为主的哮喘对常规口服或吸入类固醇激素治疗不敏感,且常伴有更严重的临床症状。近年来,中性粒细胞及其相关的多种细胞因子调节哮喘患者的气道高反应性、气道上皮细胞损害以及气道重塑等病理过程受到越来越多的关注。本文作者综述了中性粒细胞相关细胞因子在哮喘发生发展过程中的主要作用及其作用机制,以期为以气道中性粒细胞浸润为主的哮喘患者寻求治疗新策略提供理论依据。     

中性粒细胞哮喘的研究进展

支气管哮喘（简称哮喘）是由多种细胞和细胞组分参与的气道慢性炎症性疾病,发病机制未完全明确。根据诱导痰炎症细胞的类型分为嗜酸粒细胞哮喘（eosinophilic asthma ,EA）、中性粒细胞哮喘（neutrophilic asthma ,NA ）、寡细胞哮喘（pauci-granulocytic asthma ,PA ）和混合细胞哮喘（eosinophilic and neutrophilic asthma ,MA）。既往认为,痰嗜酸性粒细胞（eosin-ophils ,EOS）增多是哮喘气道炎症的特征之一,但近年发现部分患者未升高,且50％以上的哮喘存在以中性粒细胞（neutro-phil ,NEU ）浸润为主的气道炎症,甚至在哮喘恶化和持续期,升高的也是 NEU ［1-2］。近年发现,NEU 可能与重症哮喘及激素疗效差的哮喘等密切相关,已成为学术界关注的焦点。现将有关 NA 的研究进展综述如下。     

中重度哮喘患儿白细胞介素-17与中性粒细胞炎症反应的关系

[目的]探讨白细胞介素-17(IL-17)在中重度儿童哮喘发病、气道中性粒细胞炎症反应中的作用.[方法]中重度持续哮喘发作期儿童45例,其中中度持续组(20例)与重度持续组(25例);以健康儿童20例为对照组.以酶联免疫吸附法(ELISA)检测两组患儿外周血单个核细胞(PBMC)在CD3和CD28单克隆抗体刺激下分泌的IL-17水平,检测诱导痰中性粒细胞数量;对以上病例进行联合治疗3个月后随访,达到临床缓解的病例20例纳入哮喘缓解组,复查其IL-17水平.比较不同病情间IL-17的表达水平,了解IL-117与儿童哮喘临床病情、气道炎症反应的关系.[结果]哮喘患儿PBMC表达IL-17水平显著高于正常对照组(2685±1081)pg/mL,其中哮喘发作组(5355±813)pg/mL显著高于哮喘缓解组(4504±687)pg/mL(p均＜0.05);重度持续组患儿PBMC表达IL-17水平(5830±807)pg/mL.显著高于中度持续组(4962±751)pg/mL.(P＜0.05);急性发作期哮喘患儿IL-17水平(5355±813)pg/mL与诱导痰中性粒细胞比例(Xmin=0,Xmax=98.8,M=44.73)%、血中性粒细胞比例(51.72±13.43)%成正相关(r=0.820、0.736,P＜0.001).[结论]中重度哮喘患儿外周血单个核细胞IL-17表达水平升高,并与哮喘临床病情、气道炎症反应密切相关.     

中性粒细胞性哮喘临床特征分析

目的研究中性粒细胞性哮喘的临床特征,为临床防治提供参考。方法采用回顾性分析的方法,收集2010年1月至2010年12月期间在新桥医院门诊和住院诊治的中性粒细胞性哮喘患者的病史、肺功能和诱导痰细胞学检查等结果进行分析。结果中性粒细胞性哮喘（诱导痰中性粒细胞比例≥61%）占同期行诱导痰检查哮喘患者总数的33.1%（51/154）,共纳入资料完整的患者45例。其中住院患者20例（44.4%）,达到哮喘临床控制2例（4.4%）,咳嗽变异性哮喘3例（6.7%）,女性30例（66.7%）,12岁后发病者35例（77.8%）,特应性患者12例（26.7%）,急性加重患者27例（60%）。34例患者行肺功能检查,FEV1占预计值百分比〈60%和〉80%的患者分别为19例（55.9%）和5例（14.7%）,支气管舒张试验阳性率为64%（16/25）,平均可逆程度为11.7%。诱导痰中性粒细胞和嗜酸粒细胞比例分别为（74.5±9.1）%和（2.4±2.5）%,伴嗜酸粒细胞增多（〉3%）的患者占35.6%（16/45）。结论中性粒细胞性哮喘多数为重症和急性加重患者,但其临床特征多样。哮喘患者气道内中性粒细胞增多的机制和临床意义尚不完全清楚,有待更多的研究来阐明。     

腺苷及其受体对中性粒细胞在炎症中的作用与机制研究进展

腺苷,作为机体内ATP代谢过程中的重要产物,通过激活腺苷受体（adenosine receptors, AR）（A1R、A2AR、A2BR、A3 R）参与了机体的许多生理及病理过程的调节。腺苷受体在体内的各个组织器官具有广泛的分布,在免疫系统尤为丰富,如中性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞、树突状细胞均有较高表达。炎症,是机体抵御外来刺激的一种防御性免疫机制,过度的炎症反应则会对机体造成损伤,中性粒细胞是其中重要的参与者之一,腺苷及其受体的调节密切参与了其黏附、迁移、细菌杀伤作用、炎症介质产生、凋亡等过程,从而对炎症起到调节作用。     

槲皮素对支气管哮喘小鼠气道炎症的作用及机制研究

目的 研究槲皮素是否对支气管哮喘小鼠模型气道炎症具有抑制作用及可能的分子机制。方法 通过腹腔注射卵蛋白（OVA）致敏并行雾化激发复制小鼠支气管哮喘模型。将36只BALB/c雌性小鼠随机分为6组,分别为对照组（CON组）、哮喘模型组（OVA组）、槲皮素低剂量组（LOW组）、槲皮素中剂量组（MID组）、槲皮素高剂量组（HIGH组）剂量组、地塞米松阳性对照组（POS组）。对小鼠哮喘症状的程度进行评分;通过ELISA法检测小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）的上清液中白细胞介素-4（IL-4）和IL-5的水平;qRT-PCR检测肺组织miR-155的水平。结果 与CON组比较,OVA组小鼠的哮喘症状评分较高,IL-4、IL-5和miR-155表达水平上调（均P?<0.05）。与OVA组小鼠比较,随着槲皮素药物浓度的升高,槲皮素不同浓度组小鼠的哮喘症状评分下降,IL-4、IL-5和miR-155表达水平降低（均P?<0.05）。结论 槲皮素能改善支气管哮喘小鼠气道炎症,其机制可能与下调IL-4、IL-5和miR-155表达有关。     

黄芪多糖对哮喘模型小鼠肺组织炎症的抑制作用及其机制

目的：研究不同相对分子质量黄芪多糖（APS）对哮喘小鼠肺组织炎症的抑制作用,并阐述其作用机制。方法：选取30只BALB/c雌性小鼠,随机分为正常对照组,哮喘模型组（模型组）,低、中和高相对分子质量APS组,每组6只。模型组和APS组小鼠采用卵白蛋白（OVA）制备哮喘小鼠模型。低、中和高相对分子质量APS治疗组小鼠OVA雾化激发前30min给予腹腔注射0.1mL相对分子质量为4 500、15 000和30 000的APS,正常对照组小鼠采用等量生理盐水代替雾化致敏液和腹腔注射。雾化期间观察各组小鼠行为学变化,光学显微镜观察支气管肺泡灌洗液（BALF）中白细胞（WBC）总数和炎症细胞分类计数,HE染色观察各组小鼠肺组织病理形态表现,流式细胞小球微阵列术（CBA）检测小鼠血清和BALF中白细胞介素4（IL-4）和γ-干扰素（IFN-γ）水平;提取分选脾脏CD4⁺ T细胞,培养后流式细胞术检测Th1、Th2、Th17和Treg细胞比例,CBA检测细胞培养上清液中IL-4、IFN-γ、白细胞介素17（IL-17）和白细胞介素10（IL-10）水平。结果：与正常对照组比较,模型组小鼠出现明显打喷嚏、抓口鼻和气促等哮喘样症状,肺组织炎性浸润明显,气道黏膜水肿,平滑肌增厚,血清和BALF中IL-4水平明显升高（P<0.05）,IFN-γ水平明显降低（P<0.05）,细胞培养上清液中IL-4和IL-17水平明显升高（P<0.05）,IFN-γ和IL-10水平明显降低（P<0.05）,Th2和Th17细胞比例明显升高（P<0.05）,Th1和Treg细胞比例明显降低（P<0.05）。与模型组比较,APS组小鼠抓口鼻、气促和烦躁等哮喘样症状有不同程度缓解,肺组织炎性细胞浸润和管壁增厚等明显改善,血清和BALF中IL-4水平明显降低（P<0.05）,IFN-γ水平明显升高（P<0.05）,细胞培养上清液中IL-4和IL-17水平明显降低（P<0.05）,IFN-γ和IL-10水平明显升高（P<0.05）,Th2和Th17细胞比例明显降低（P<0.05）,Th1和Treg细胞比例明显升高（P<0.05）。不同相对分子质量APS组间比较,低相对分子质量APS组小鼠哮喘症状和肺组织炎症浸润改善最明显,血清和BALF中IL-4水平及Th2和Th17细胞比例降低最明显（P<0.05）,血清和BALF中IFN-γ水平及Th1和Treg细胞比例升高最明显（P<0.05）。结论：APS通过调节Th1/Th2及Th17/Treg细胞平衡、降低IL-4和IL-17水平、增加IFN-γ和IL-10水平发挥抗哮喘作用,且低相对分子质量APS作用最明显。     

和厚朴酚对哮喘小鼠肺组织炎症反应的干预作用及其机制

目的：探讨和厚朴酚（HNK）对哮喘小鼠肺组织炎症反应的影响,阐明其干预作用及相关机制。方法：选取健康雌性C57BL/6J小鼠20只,随机分为对照组、模型组、地塞米松（DXM）组和HNK组,每组5只。采用鸡卵清蛋白（OVA）联合氢氧化铝[Al（OH）₃]悬液腹腔注射致敏和OVA滴鼻激发构建哮喘小鼠模型,在激发前30 min分别对DXM组和HNK组小鼠予以腹腔注射DXM和HNK溶液,模型组小鼠予以等量生理盐水。处死小鼠后取小鼠肺组织,HE染色观察评估肺组织病理形态表现;收集支气管肺泡灌洗液（BALF）,行快速迪夫染色,观察炎性细胞浸润程度;ELISA法检测各组小鼠血清中白细胞介素4（IL-4）、白细胞介素6（IL-6）和白细胞介素17（IL-17）水平,比色法检测各组小鼠肺组织匀浆中丙二醛（MDA）水平和超氧化物歧化酶（SOD）及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性,Western blotting法检测各组小鼠肺组织中磷酸化c-Jun氨基末端激酶（p-JNK）、核因子κB（NF-κB）、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶（Caspase-3）、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）和H2AX组蛋白（γH2Ax）表达水平,检测各组小鼠肺组织中γH2Ax免疫荧光强度。结果：与对照组比较,模型组小鼠气道上皮细胞脱落坏死数量明显增多,气道管壁增厚及气道旁炎症细胞浸润程度明显增加;与模型组比较,DXM组和HNK组小鼠上述表现减轻,而HNK组和DXM组小鼠肺组织病理改变表现相似。与对照组比较,模型组小鼠血清中IL-4、IL-6和IL-17水平升高（P<0.05）;与模型组比较,DXM组和HNK组小鼠血清中IL-4、IL-6和IL-17水平降低（P<0.05）;而HNK组小鼠血清中IL-4、IL-6和IL-17水平与DXM组比较差异无统计学意义（P>0.05）。与对照组比较,模型组小鼠肺组织匀浆中MDA水平升高（P<0.05）,而SOD和GSH-Px活性降低（P<0.05）;与模型组比较,DXM组和HNK组小鼠肺组织匀浆中MDA水平降低（P<0.05）,而SOD和GSH-Px活性升高（P<0.05）;HNK组小鼠MDA水平和SOD及GSH-Px活性与DXM组比较差异无统计学意义（P>0.05）。与对照组比较,模型组小鼠肺组织中p-JNK、NF-κB、Caspase-3和γH2Ax蛋白表达水平升高（P<0.05）,而Bcl-2蛋白表达水平降低（P<0.05）;与模型组比较,DXM组和HNK组小鼠肺组织中p-JNK、NF-κB、Caspase-3和γH2Ax蛋白表达水平降低（P<0.05）,而Bcl-2蛋白表达水平升高（P<0.05）;HNK组小鼠肺组织中p-JNK、NF-κB、Caspase-3、γH2Ax和Bcl-2蛋白表达水平与DXM组比较差异均无统计学意义（P>0.05）。与对照组比较,模型组小鼠肺组织中γH2Ax免疫荧光强度明显增强;与模型组比较,DXM组和HNK组小鼠肺组织中γH2Ax免疫荧光强度减弱,HNK组小鼠γH2Ax免疫荧光强度与DXM组接近。结论：HNK可在一定程度上抑制哮喘小鼠的肺组织损伤及炎症反应,其机制可能与其抑制氧化应激反应及DNA损伤有关。     

白藜芦醇对呼吸道合胞病毒感染小鼠肺部病毒滴度及其气道炎症的影响

目的 研究白藜芦醇(resveratrol,RES)对呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus,RSV）感染小鼠肺部病毒滴度及其所致气道炎症的影响。方法6～8周龄雌性BALB/c小鼠,环磷酰胺100 mg/kg腹腔注射后,随机分为对照组、RSV感染组、白藜芦醇腹腔注射组、白藜芦醇雾化组,每...     

红景天苷对哮喘模型小鼠气道炎症的抑制作用及其机制

目的:探讨红景天苷(SAL)对小鼠急性哮喘气道炎症的干预作用,并阐明其作用机制.方法:将50只清洁级BALB/c雌性小鼠随机分为对照组、卵清蛋白(OVA)组、低剂量SAL组、高剂量SAL组和地塞米松组,每组10只.于实验第1、7和14天,腹腔注射混合液200μL(由生理盐水、10 mg OVA和1 mg氢氧化铝组成)建...     

外源性心钠素对小鼠过敏性哮喘气道炎症的影响及其机制分析

目的 探讨外源性心钠素对过敏性哮喘小鼠模型气道炎症的影响作用及其作用机制.方法 选取SPF级BALBc小鼠48只,采用随机数字表法分为对照组(等量生理盐水干预)、模型组(等量生理盐水干预)、实验组A(外源性心钠素0.5,μg/g)、实验组B(外源性心钠素0.5 μg/g+A71915).模型组、实验组A、实验组B建模成功后给予对应处理措施,在最后一次激发实验后24 h,采集各组血清、支气管肺泡灌洗液检查炎症因子,采用HE染色观察肺组织病理变化,采用Western blot技术检测肺组织中锌指转录因子(GATA3)蛋白的表达水平.结果 模型组小鼠的血液中EOS、淋巴细胞、中性粒细胞所占比例均高于对照组(P＜0.05),实验组A的血液中EOS、淋巴细胞、中性粒细胞所占比例均高于模型组、实验组B(P＜0.05);模型组小鼠的肺泡灌洗液中EOS、淋巴细胞、中性粒细胞计数、IL-6、TNF-α水平均高于对照组(P＜0.05),实验组A的肺泡灌洗液中EOS、淋巴细胞、中性粒细胞计数、IL-6、TNF-α水平均高于模型组、实验组B(P＜0.05);模型组小鼠的肺组织中GATA3蛋白表达水平均高于对照组(P＜0.05),实验组A肺组织中GATA3蛋白表达水平高于模型组、实验组B(P＜0..05).结论 外源性心钠素会进一步加剧过敏性哮喘小鼠模型的气道炎症反应,与激活炎性细胞、炎症因子释放及增强肺组织中GATA3蛋白表达有关.     

白藜芦醇对抗氧化型低密度脂蛋白诱导的内皮细胞损伤及其机制

目的探讨白藜芦醇对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的内皮细胞损伤的保护作用及其机制。方法体外培养人脐静脉内皮细胞,并随机分为对照组、ox-LDL组、不同浓度(10μmol/L、50μmol/L)白藜芦醇保护组,通过检测细胞活力、超氧化物歧化酶(SOD)水平、丙二醛(MDA)含量评价内皮细胞损伤程度。RT-PCR及Western blot法检测单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)和细胞间黏附分子1(ICAM-1)RNA和蛋白表达。结果与对照组比较,ox-LDL组细胞活力、SOD水平降低[(0.33±0.01)比(0.45±0.010),(12.8±0.31)U/m L比(15.5±0.150U/m L,P0.05],MDA含量增加[(2.10±0.51)nmol/mgprot比(1.05±0.06)nmol/mgprot,P0.05],MCP-1、ICAM-1 RNA表达明显升高(1.56±0.06比0.67±0.09,3.62±0.32比1.35±0.21,P0.05);与ox-LDL组相比,白藜芦醇(10、50μmol/L)保护组细胞活力升高(0.38±0.02、0.39±0.02比0.33±0.01,P0.05)、SOD水平升高[(14.4±0.61)U/m L、(14.8±0.57)U/m L比(12.8±0.31)U/m L,P0.05],MDA含量减少[(1.41±0.15)nmol/mgprot、(1.37±0.05)nmol/mgprot比(2.10±0.51)nmol/mgprot,P0.05],MCP-1、ICAM-1 RNA和蛋白表达明显降低(1.03±0.05、0.92±0.08比1.56±0.06,1.88±0.25、1.67±0.16比3.62±0.32,P0.05)。结论白藜芦醇对oxLDL诱导的血管内皮细胞损伤有保护作用。     

白藜芦醇对哮喘小鼠磷脂酶A2活性和气道炎症的影响

目的 探讨白藜芦醇对哮喘小鼠磷脂酶A2活性和气道炎症的影响.方法 采用卵清蛋白(OVA)刺激,建立小鼠哮喘模型,测定哮喘小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞总数及嗜酸粒细胞(EOS)计数;紫外分光光度法测定肺组织中前列腺素E2(PGE2)的含量;盐酸滴定法测定肺组织和血清中磷脂酶A2活性.结果 白藜芦醇能显著减少哮喘模型小鼠BALF中白细胞总数及EOS计数,减少肺组织中PGE2含量,降低磷脂酶A2活性.结论 白藜芦醇对哮喘小鼠有保护作用,可能与其降低磷脂酶A2活性、减轻炎性细胞浸润、减少炎症介质PGE2的产生有关.     

持续性不卧床腹膜透析并发感染性腹膜炎的临床分析

目的:初步探讨白藜芦醇(resveratrol,RV)对小鼠氧惊厥潜伏期及大发作时间的影响及可能机制,以期寻找预防氧惊厥的新途径.方法:应用小鼠氧惊厥模型(纯氧5 ATA暴露),尾静脉注射不同剂量RV(1.5、5、15 mg/kg),采用行为学观察方法,测定氧惊厥潜伏期及大发作时间;并测定RV 5 mg/kg注射剂量下不同时间点(5 ATA氧暴露后5、15、30 min)脑组织丙二醛(maleic dialdehyde,MDA)含量.结果:与对照组相比,RV 5、15 mg/kg组氧惊厥潜伏期及大发作时间均明显延长(P＜0.01),而RV 1.5 mg/kg组无显著差异.尾静脉注射RV 5 mg/kg后,RV 5、15、30 min各组顶叶皮质与海马MDA随氧暴露(5 ATA)时间的延长,呈现逐步升高的趋势;但与相应时间点对照组相比,RV 5、15 min组顶叶皮质和海马MDA含量均明显降低(P＜0.01),RV 30 min组皮质和海马MDA含量无统计学差异.结论:RV可能通过其抗氧化特性延长氧惊厥潜伏期,从而保护脑组织.     

白藜芦醇对肝癌HepG2细胞中脂肪合成的抑制作用及其机制

目的：探讨白藜芦醇（Res）对肝癌HepG₂细胞脂肪合成的影响,阐明其可能机制。方法：体外培养HepG₂细胞,分为Res组（40μmol·L^-1DMSO稀释的Res作用24h）和对照组（相同浓度的DMSO作用24h）。收集细胞上清,ELISA法检测2组细胞中甘油三酯（TG）和总胆固醇（TC）水平。采用实时荧光定量PCR （qRT-PCR）和Western blotting法分别检测2组细胞中脂肪合成酶乙酰辅酶A羧化酶（ACC1）、脂肪酸合成酶（FASN）、硬脂酰辅酶A去饱和酶（SCD1） mRNA和蛋白表达水平,采用Western blotting法检测2组细胞中氧链接N乙酰葡糖胺（O-GlcNAc）糖基化水平。结果：与对照组比较,Res组细胞中TG和TC水平均下降,但差异无统计学意义（t₁=1.886,P<0.05;t₂=2.457,P>0.05）;与对照组比较,Res组细胞中ACC1、FASN、SCD1 mRNA和蛋白表达水平均明显降低（P<0.05或P<0.01）,O-GlcNAc糖基化水平明显降低（t=2.87,P<0.05）。结论：Res具有抑制肝癌HepG₂细胞脂肪合成的作用,其机制可能与降低细胞中O-GlcNAc糖基化水平和FASN表达有关。