尖锐湿疣患者外周血及皮损T淋巴细胞亚群的检测

目的:了解尖锐湿疣(CA)患者系统和局部皮损细胞免疫功能的变化,以探讨细胞免疫功能对CA复发的影响。方法:通过流式细胞仪对21例初发CA患者、18例复发CA患者及23名正常人外周血进行T淋巴细胞亚群的检测,同时采用免疫组化染色方法对皮损进行CD4+/CD8+淋巴细胞染色,高倍显微镜下观察阳性细胞的数目。结果:初发CA和复发CA两组CD4+与CD8+细胞比值(1.04±0.50和1.01±0.59)均明显低于正常对照组(1.51±0.66,P<0.05),而两组间差异无显著性(P>0.05)。与正常对照组相比,两组CA局部皮损CD4+/CD8+比值(0.87±0.75和1.51±0.96)均明显降低(P<0.05),且复发CA组CD4+/CD8+比值也明显低于初发CA组,差异有显著性(P<0.05)。男女性患者不同部位皮损CD4+/CD8+比值均低于正常对照组,差异有显著性(P<0.05)。结论:CA患者存在全身和局部的细胞免疫功能低下,特别是局部细胞免疫功能低下在CA的复发中起着一定的作用。     

尖锐湿疣患者外周血Toll样受体7、髓系分化因子88、肿瘤坏死因子受体相关因子6的表达

【摘要】 目的 探讨Toll样受体7（TLR7）及其相关信号转导分子在人类乳头瘤病毒（HPV）感染和尖锐湿疣复发机制中的作用。方法　用双色免疫荧光抗体染色流式细胞仪检测30例健康人、35例初发尖锐湿疣患者,32例复发尖锐湿疣患者和30例使用咪喹莫特联合氨基酮戊酸光动力疗法（ALA-PDT）治疗的复发性尖锐湿疣患者外周血不同亚群T细胞内TLR7的表达,使用SPSS 13.0软件进行t检验。用Western印迹方法检测各组尖锐湿疣患者及健康人外周血CD3+ T细胞内接头蛋白MyD88及相关信号分子TRAF6、PI3K、AKT、p42/44和核因子κB（NF-κB）等表达的变化。结果　健康人外周血CD3+ CD4+ T细胞和CD3+CD8+ T细胞内均可检测到TLR7的表达。与健康对照组比较,初发和复发尖锐湿疣患者外周血CD3+CD8+ T细胞内TLR7的表达水平无显著改变,而CD3+CD4+ T细胞内TLR7的表达明显增加（健康对照组为12.6% ± 6.3%,初发尖锐湿疣组为23.3% ± 8.4%,t = 4.72,P ＜ 0.01;复发尖锐湿疣组为32.8% ± 8.9%,t = 10.76,P ＜ 0.01）;与复发尖锐湿疣患者比较,咪喹莫特联合ALA-PDT治疗组尖锐湿疣患者外周血CD3+CD4+ T细胞内TLR7的表达水平显著降低（20.3% ± 5.7%,t = 5.41,P ＜ 0.01）。初发和复发尖锐湿疣患者外周血CD3+ T细胞内MyD88、TRAF6、PI3K、p42/44和NF-κB蛋白表达显著增加,而AKT蛋白表达变化不明显;咪喹莫特联合ALA-PDT治疗组尖锐湿疣患者外周血CD3+ T细胞内MyD88、TRAF6、p42/44和NF-κB蛋白表达显著降低。结论　尖锐湿疣患者外周血CD3+CD4+ T细胞内表达上调的TLR7可作为HPV病毒感染的识别受体,参与机体的抗HPV免疫应答。 【关键词】 尖锐湿疣; α乳头状瘤病毒属; Toll样受体7; T淋巴细胞; 肿瘤坏死因子受体相关肽和相关蛋白质类; 髓系分化因子88     

尖锐湿疣患者皮损Toll样受体4、9和C型凝集素受体的表达

目的探讨初发和复发尖锐湿疣(CA)患者皮损中TLR4、TLR9和DC-SIGN的表达及意义.方法采用免疫组化SP法检测30例初发CA皮损、30例复发CA皮损和20例正常人皮肤(包皮)中TLR4、TLR9和DC-SIGN的表达及分布.结果初发CA皮损和复发CA皮损中TLR4、TLR9和DC-SIGN的表达水平均显著高于正常包皮组织(P<0.001),且集中分布于基底层和棘层细胞.TLR4、TLR9和DC-SIGN三者在初发CA皮损和复发CA皮损中的表达差异均无统计学意义(三者均P>0.05).TLR4、TLR9与DC-SIGN的表达均呈正相关性关系.结论 TLR4、TLR9和DC-SIGN的表达增强可能在CA的发病和复发过程中起到一定作用.     

尖锐湿疣患者皮损Toll样受体4、9和C型凝集素受体的表达

目的探讨初发和复发尖锐湿疣(CA)患者皮损中TLR4、TLR9和DC-SIGN的表达及意义.方法采用免疫组化SP法检测30例初发CA皮损、30例复发CA皮损和20例正常人皮肤(包皮)中TLR4、TLR9和DC-SIGN的表达及分布.结果初发CA皮损和复发CA皮损中TLR4、TLR9和DC-SIGN的表达水平均显著高于正常包皮组织(P<0.001),且集中分布于基底层和棘层细胞.TLR4、TLR9和DC-SIGN三者在初发CA皮损和复发CA皮损中的表达差异均无统计学意义(三者均P>0.05).TLR4、TLR9与DC-SIGN的表达均呈正相关性关系.结论 TLR4、TLR9和DC-SIGN的表达增强可能在CA的发病和复发过程中起到一定作用.     

尖锐湿疣患者皮损Toll样受体4、9和C型凝集素受体的表达

目的探讨初发和复发尖锐湿疣(CA)患者皮损中TLR4、TLR9和DC-SIGN的表达及意义.方法采用免疫组化SP法检测30例初发CA皮损、30例复发CA皮损和20例正常人皮肤(包皮)中TLR4、TLR9和DC-SIGN的表达及分布.结果初发CA皮损和复发CA皮损中TLR4、TLR9和DC-SIGN的表达水平均显著高于正常包皮组织(P<0.001),且集中分布于基底层和棘层细胞.TLR4、TLR9和DC-SIGN三者在初发CA皮损和复发CA皮损中的表达差异均无统计学意义(三者均P>0.05).TLR4、TLR9与DC-SIGN的表达均呈正相关性关系.结论 TLR4、TLR9和DC-SIGN的表达增强可能在CA的发病和复发过程中起到一定作用.     

不同预后尖锐湿疣组织中Toll样受体3、9的表达

目的探讨不同预后尖锐湿疣(CA)患者皮损局部Toll样受体3(TLR3)和Toll样受体9(TLR9)表达定位及TLR3 mRNA、TLR9 mRNA的表达情况.方法免疫组化SP法及反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测10例CA复发者、14例CA无复发者及10例包皮组织中TLR3及TLR9表达情况.结果 TLR3、TLR9在无复发CA皮损中表达以棘层、颗粒层为主;在复发组CA皮损中表达以基底层、棘层为主.无复发组CA组织中TLR3mRNA表达较对照组及复发组均明显升高(P<0.01、P<0.05),TLR9mRNA较对照组明显升高(P<0.05),较复发组差异无统计学意义.结论表皮TLR3及TLR9的表达部位和表达量的改变可能与CA预后有关,TLR3的影响可能更大.     

不同预后尖锐湿疣组织中Toll样受体3、9的表达

目的探讨不同预后尖锐湿疣(CA)患者皮损局部Toll样受体3(TLR3)和Toll样受体9(TLR9)表达定位及TLR3 mRNA、TLR9 mRNA的表达情况.方法免疫组化SP法及反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测10例CA复发者、14例CA无复发者及10例包皮组织中TLR3及TLR9表达情况.结果 TLR3、TLR9在无复发CA皮损中表达以棘层、颗粒层为主;在复发组CA皮损中表达以基底层、棘层为主.无复发组CA组织中TLR3mRNA表达较对照组及复发组均明显升高(P<0.01、P<0.05),TLR9mRNA较对照组明显升高(P<0.05),较复发组差异无统计学意义.结论表皮TLR3及TLR9的表达部位和表达量的改变可能与CA预后有关,TLR3的影响可能更大.     

不同预后尖锐湿疣组织中Toll样受体3、9的表达

目的探讨不同预后尖锐湿疣(CA)患者皮损局部Toll样受体3(TLR3)和Toll样受体9(TLR9)表达定位及TLR3 mRNA、TLR9 mRNA的表达情况.方法免疫组化SP法及反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测10例CA复发者、14例CA无复发者及10例包皮组织中TLR3及TLR9表达情况.结果 TLR3、TLR9在无复发CA皮损中表达以棘层、颗粒层为主;在复发组CA皮损中表达以基底层、棘层为主.无复发组CA组织中TLR3mRNA表达较对照组及复发组均明显升高(P<0.01、P<0.05),TLR9mRNA较对照组明显升高(P<0.05),较复发组差异无统计学意义.结论表皮TLR3及TLR9的表达部位和表达量的改变可能与CA预后有关,TLR3的影响可能更大.     

尖锐湿疣患者HPV感染与细胞免疫功能的相关性

目的研究尖锐湿疣初发、复发患者之间,以及不同病程患者之间T淋巴细胞亚群的表达情况。方法选择56例尖锐湿疣患者,经冷冻治疗后至疣体消失后随访3个月,未复发者计入A组(20例),再次复发者计入B组(36例),应用三色荧光抗体染色法检测各组患者外周血CD4+,CD8+T淋巴细胞的表达,比较A,B两组CD4+,CD8+T细胞百分率及CD4+/CD8+比值的差异,并与正常对照组进行比较。同时根据病程长短,病程<3个月者计入C组(37例),病程≥3个月者计入D组(19例),比较C,D两组CD4+,CD8+T细胞百分率及CD4+/CD8+比值的差异,并与正常对照组进行比较。结果①初发及复发患者组T淋巴细胞亚群的变化:A组CD4+,CD8+T细胞百分率及CD4+/CD8+比值分别为(34.61±4.98)%,(29.46±4.56)%和(1.20±0.22),B组分别为(30.33±4.84)%,(33.10±5.90)%和(0.94±0.21),正常对照组分别为(39.58±4.31)%,(25.44±3.54)%和(1.57±0.17),与正常对照组相比,A,B两组CD4+细胞百分率及CD4+/CD8+比值明显降低,CD8+T细胞百分率明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),且B组变化更为明显,与A组差异有统计学意义(P<0.05);②不同病程患者组T淋巴细胞亚群的变化:C组CD4+,CD8+T细胞百分率及CD4+/CD8+比值分别为(33.03±4.51)%,(30.60±5.36)%和(1.11±0.23),D组分别为(29.57±5.98)%,(34.12±5.73)%和(0.89±0.22),C,D两组与正常对照组相比,CD4+细胞百分率及CD4+/CD8+比值明显降低,CD8+T细胞百分率明显升高,差异有统计学意义(P<0.01),且D组变化更为明显,与C组差异有统计学意义(P<0.05)。结论与正常对照组比较,尖锐湿疣患者存在细胞免疫功能降低,且随着病程延长、病情反复,全身细胞免疫功能降低更为明显,导致CA迁延不愈。     

朗格汉斯细胞表面分子与尖锐湿疣复发的相关性

目的:确定朗格汉斯细胞(Langerhans cells,LC)表面分子与尖锐湿疣(condyloma acuminatum,CA)复发的相关性。方法:采用免疫组化方法对正常包皮、CA初发和复发患者皮损组织中LC进行CD1a、S100、HLA-DR标记,并对其表达强度进行半定量分析。结果:正常对照组、CA初发组及CA复发组CD1a免疫组化染色IOD值分别为7644.84±2865.10、4075.62±2410.39和2308.08±1256.34;S100分别为4400.34±2962.29、1815.78±1013.35及1414.46±1337.13,CA组织中LC的CD1a及S100分子表达较正常组织显著下降(P0.05),在复发组尤为明显。HLA-DR IOD值分别为583.91±592.85、2262.87±2983.09和1191.75±1698.36。HLA-DR的表达在CA初发组和复发组均强于正常组,但复发组较初发组下降。结论:HPV感染人体后,会导致HPV感染的免疫逃避,造成CA的持续感染和易复发。     

尖锐湿疣患者皮损Toll样受体4、9和C型凝集素受体的表达

目的 探讨初发和复发尖锐湿疣（CA）患者皮损中TLR4、TLR9和DC-SIGN的表达及意义。方法 采用免疫组化SP法检测30例初发CA皮损、30例复发CA皮损和20例正常人皮肤（包皮）中TLR4、TLR9和DC-SIGN的表达及分布。结果 初发CA皮损和复发CA皮损中TLR4、TLR9和DC-SIGN的表达水平均显著高于正常包皮组织（P < 0.001）,且集中分布于基底层和棘层细胞。TLR4、TLR9和DC-SIGN三者在初发CA皮损和复发CA皮损中的表达差异均无统计学意义（三者均P > 0.05）。TLR4、TLR9与DC-SIGN的表达均呈正相关性关系。结论 TLR4、TLR9和DC-SIGN的表达增强可能在CA的发病和复发过程中起到一定作用。     

女性生殖道尖锐湿疣患者外周血淋巴细胞B7-CD28/CTLA-4的表达及意义

目的 探讨B7-CD28/CTLA-4(CD152)T淋巴细胞活化协同刺激分子在女性生殖道尖锐湿疣发病、发展及转归中的作用.方法 用流式细胞仪检测30例女性生殖道尖锐湿疣患者和15例正常人外周血淋巴细胞中CD80/CD86及CD4⁺/CD8⁺T淋巴细胞中CD28/CD152(CTLA-4)的表达.结果 CD80/CD86及CD4⁺、CD8⁺/CD28阳性表达水平初发组(17例)、复发组(13例)与正常人对照组(15例)比较,差异无统计学意义;恢复组(15例)CD4⁺、CD8⁺/CD28及CD80阳性表达水平分别较复发组明显增高(P<0.05).CD4⁺、CD8⁺/CD152在尖锐湿疣复发组和初发组阳性表达水平均较正常人对照组明显增高(P<0.05),且复发组较初发组进一步增高,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);恢复组CD4⁺、CD8⁺/CD152阳性表达水平较初发组及复发组明显降低(P<0.05),与正常人对照组比较差异无统计学意义.结论 女性生殖道尖锐湿疣患者外周血淋巴细胞和CD4⁺、CD8⁺T淋巴细胞中B7-CD28/CTLA-4(CD152)表达异常,并与其病程发展关系密切.     

生殖器疱疹患者外周血单核细胞Toll样受体的表达

【摘要】 目的 探讨生殖器疱疹反复发作的免疫学机制。方法 将42例RGH患者分为年复发次数≧6次和年复发次数<6次两个亚组,采用双色免疫荧光抗体染色流式细胞术检测其外周血单核细胞TLR4、TLR8、TLR9的表达及T淋巴细胞亚群,采用双抗体夹心ELISA法检测其外周血IFN-?、IL-2、IL-12水平,并均以30例正常人作为对照。结果 RGH组外周血单核细胞TLR4表达增高,差异具有统计学意义（?<0.05）, TLR8表达降低,差异具有统计学意义（?<0.05）;RGH患者外周血IFN-?、IL-2、IL-12水平以及CD3+ T细胞、CD4+ T细胞、CD4+/CD8+比值均下降,差异具有统计学意义（?<0.05）。结论 TLR4可能为HSV的识别受体,在机体抗HSV感染中发挥重要的识别作用,检测外周血单核细胞TLR4表达的变化有可能成为HSV感染观测指标之一;TLR8的表达下降,机体产生Th1型细胞因子障碍,可能为GH反复发作的免疫学机制之一;机体细胞免疫功能低下可能是GH反复发作的重要原因。     

复发性尖锐湿疣患者HPV感染模式和细胞免疫功能的分析

目的:了解复发性尖锐湿疣(CA)患者的人乳头瘤病毒(HPV)感染亚型和感染模式,以及其外周血T淋巴细胞亚群的表达情况。方法:据纳入标准,选择135例初诊CA患者,将治疗3个月后疣体复发患者81例设为复发组;疣体治疗消失后,随访3个月内未复发患者54例设为治愈组;治疗前对两组患者用聚合酶链式反应(PCR)方法检测HPV亚型;在治疗和随访3个月的截止点采血,应用流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群,并与20例健康对照者进行比较。结果:复发组和治愈组HPV感染均以低危亚型HPV6/11为主。复发组单一亚型感染40例(49.38%),混合亚型感染41例(50.62%);治愈组单一亚型感染36例(66.67%),混合亚型感染18例(33.33%),两组HPV感染模式的构成比有统计学差异(2=3.93,P0.05)。复发组外周血T细胞与治愈组比较,CD3+总T细胞[(68.13±8.03)%]降低,CD4+T细胞百分率[(32.42±4.88)%]降低,CD8+T细胞百分率[(38.61±4.19)%]升高,CD4+/CD8+比值降低,差异均有统计学意义(P值均0.01);复发组与正常对照组比较,CD4+T细胞、CD8+T细胞和CD4+/CD8+比值差异均有统计学意义(P值均0.05)。结论:HPV亚型混合感染模式和T淋巴细胞亚群免疫功能异常是促使尖锐湿疣复发的重要因素。     

复发性生殖器疱疹患者外周血T淋巴细胞和共刺激分子的检测

目的检测复发性生殖器疱疹(RGH)患者外周血中T细胞亚群和共刺激分子的表达,探讨其在RGH免疫中的作用。方法用免疫荧光技术和流式细胞仪检测RGH及对照组血中T细胞亚群和共刺激分子(CD28,CD25,Fas,FasL,4-1BB)的水平。结果 RGH组CD3+,CD4+/CD8+,CD4+CD28+细胞百分数(59.48±10.9,0.89±0.20,27.69±7.34)显著低于健康对照组(69.79+5.63,1.14+0.39,33.68±7.32),差异均有统计学意义(P<0.05);CD4+CD28-,CD25+细胞百分数及Fas(6.55±4.46,15.81±8.62,27.58±3.10)显著高于健康对照(1.93±1.36,7.13±5.13,23.11±5.63),差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。结论 RGH外周血CD3+,CD4+/CD8+下降,CD4+CD28+低表达,及CD25+和Fas高表达,可能是RGH复发的免疫障碍环节之一。     

HIV/AIDS患者CD4~+ T细胞中CD25和CD8~+ T细胞中CD28的表达

目的探讨外周血CD4+ T细胞中CD25表达率和CD8+ T细胞中CD28表达率在HIV/AIDS患者发病中的作用。方法应用流式细胞仪荧光染色技术检测35例HIV/AIDS患者CD4+ T细胞中CD25表达和CD8+ T细胞中CD28的表达,以41名健康体检人员做对照。结果HIV/AIDS患者和健康对照组之间CD4+ T细胞中CD25表达率(27.51±4.23)%,(44.41±9.17)%,CD4+25+ T细胞占淋巴细胞的比例(2.00±1.42)%,(16.62±4.60)%,CD4+25- T细胞占淋巴细胞的比例(5.16±3.37)%,(21.03±6.19)%,CD8+ T细胞中CD28中的表达率(25.12±6.33)%,(44.24±8.61)%,CD8+28- T细胞占淋巴细胞的比例(36.85±8.98)%,(13.33±4.58)%的差异均有显著性(P<0.01),CD8+ 28+ T细胞占淋巴细胞的比例(12.31±4.14)%,(10.51±3.71)%差异无显著性(P>0.05)。结论HIV/AIDS患者CD25在CD4+ T细胞与CD28在CD8+ T细胞的表达率降低可能与HIV感染后引起的免疫缺陷有关,CD8+ CD28- T细胞的增加有助于促进HIV/AIDS患者的炎性反应和免疫激活。