新甲型H1N1流感病毒分子生物学研究进展

甲型流感是由甲型流感病毒引起,可致人或其他动物宿主发生不同程度呼吸道症状的疾病。2009年3月新甲型H1N1流感突然在墨西哥暴发,由于疫情迅速扩散,世界卫生组织（WHO）于2009～06—11将流感流行级别调整为最高级六级,即宣布新甲型H1N1流感发生全球流行。现病毒已传播至212个国家和地区,并处于继续扩散的状态,由于感染人数巨大,目前世卫组织已无法统计罹患人数,仅统计报告确诊死亡人数（至2010—02—19死亡15921人）。     

甲型H1N1流感病毒隐性感染者1例

甲型H1N1流感自今年3月暴发以来,虽然各国政府始终在积极采取各种防控措施,但疫情仍在不断蔓延和扩大.WHO报告,截至2009年7月5日,此起流感疫情已波及全球五大洲的126个国家和地区,确诊病例达89 922例,死亡382人.我周内地也有24个省份累计报告确诊病例1 040例,包括输入性病例758例,本土病例282例.     

甲型H1N1流感病毒性肺炎的影像学表现

目的:回顾性讨论12例甲型H1N1流感病毒性肺炎患者的胸部X线和CT表现特征。方法:经临床证实的甲型H1N1流感病毒性肺炎病例12例,男8例,女4例,年龄范围6~51岁,平均年龄21岁。所有患者在发病后1周内均行胸部X线检查及胸部CT扫描。结果:本组病例中,出现临床症状1~4天胸片像表现为阳性者10例,占83%;4~8天胸片像上为阳性者2例,占17%。多数患者的病灶多发。进展期病变发展迅速,常累及多部位及双肺。好转期一般在7~14天。结论:甲型H1N1流感病毒性肺炎主要影像学表现为:①病变位于肺的外周多,多部位受累,双肺各叶均可发生,以双肺下叶为著;②病变多发,大小不等;③早期最常见的影像学表现为斑片状磨玻璃影;④病变变化迅速。     

科学应对甲型H1N1流感

甲型H1N1病毒在世界范围内的广泛流行引起了WHO的高度重视,疫情警告级别一度从3级提高到4级,又提高到5级.本文从流感病毒的发现、历史上流感大流行的有关情况出发,介绍此次甲型H1N1流感疫情的科学应对方法 ,包括甲型H1N1病毒的传播及甲型H1N1流感的临床表现、治疗、主要防控措施等.     

甲型H1N1流感胸部影像学表现

甲型H1N1流感是2009年在全球爆发流行的呼吸道传染病.引起胸部异常者少见但病人症状较重.主要胸部影像学表现为肺内磨玻璃影和实变影.胸部X线摄影和CT是常用检查手段.就2009年H1N1流感的胸部影像学表现进行综述.     

国外甲型H1N1流感疫情特点与疫苗使用建议

自2009年4月墨西哥、美国等地接连暴发新型甲型H1N1流感疫情以来,截至2009年11月29日,已有超过207个国家或地区报告发现甲型H1N1流感病例,共计死亡患者8700余例。     

甲型H1N1流感病毒肺炎的CT表现

目的：探讨甲型H1N1流感病毒性肺炎CT表现,提高对该病的认识。方法：回顾性分析34例经临床、实验室证实的甲型H1N1肺炎胸部CT表现。结果：34例中累及两肺5个肺叶17例,占50%;累及4个肺叶3例,占8.8%;累及3个肺叶6例,占17.6%;累及2个肺叶5例,占14.7%;累及1个肺叶3例,占8.8%。单纯毛玻璃样阴影15例,占44.1%,表现为斑片状及云雾样淡薄影,边缘模糊,病灶中心密度相对较高,可见血管纹理通过;单纯实变阴影5例,占14.7%,表现为团片状、斑片状及棉球样影,密度较高;毛玻璃影与实变阴影同时存在14例,占41.2%,表现为云雾样淡薄影、棉球样实变影同时存在,肺周边区域及下叶基底部的病灶密度高于其它部位。实变阴影中可见支气管充气征12例,占35.3%;病灶内合并网格样改变19例,占55.9%;小结节影3例,占8.8%;支气管壁增厚3例,占8.8%;两侧胸腔少量积液1例,占2.9%。结论：甲型H1N1肺炎病变分布范围广,变化快,CT表现具有一定特征性。     

甲型H1N1流感疫情问答

1．问：什么是甲型H1N1流感？ 答：美国疾病控制和预防中心专家解释说,甲型H1N1流感是由甲型H1N1流感病毒引起的一种急性呼吸道传染病,这种病在猪中经常发生,但很少导致猪的死亡。     

军人甲型H1N1流感273例临床特点分析

自2009年5月10日我国发现首例输入性甲型H1N1流感病例以来,疫情随之在我国逐渐蔓延。2009年8-12月,我们共收治军人甲型H1N1流感273例。现将其临床特点分析报告如下。     

中西医结合治疗甲型H1N1流感41例分析

2009年11-12月,我们采用中西医结合的方法治疗甲型H1N1流感41例,疗效满意。现分析报告如下。     

2009年新型甲型H1N1流感病毒全基因组序列重组分析及同源性比对

目的 分析2009年新型甲型H1N1流感爆发以来流感病毒的全基因组进化变异及重组情况.方法 从NCBI基因数据库下载2009年新型甲型H1N1流感病毒(A/H1N1)代表性全基因组序列,先用MEGA4.0软件对8个基因序列片段进行比对和拼接;然后将历史上流行的H1N1、H5N1、H3N2等不同宿主(人、禽、猪)的流感病毒全基因组序列用MEGA做比对拼接,并用NJ法构建进化树.采用Simplot 3.5.1软件分析2009年新型甲型H1N1流感病毒基因重组情况.结果 自2009年3月爆发新型甲型H1N1流感以来,截至9月,病毒基因没有出现变异,同源性为99.69%～99.93%.基因重组分析显示,新型甲型H1N1病毒株PIE、PBI、PA、HA、NP和NS基因来源于近年来北美地区猪源人H1N1,同源性分别为95.25%,95.08%,95.21%,93.52%,95.23%,94.78%;NA和MP与欧洲地区猪H1N1同源性较高,分别为90.21%,94.43%.全基因序列同源性分析发现2009年新型甲型H1N1流感病毒与北美地区猪H1N1病毒同源性最高,为92.22%.结论 2009年新型甲型H1N1流感病毒是由2005年北美地区猪H1N1病毒与欧洲猪H1N1的NA和MP片段重排进化而成,新病毒暂未发生变异,H1N1新流感疫苗具有保护作用.     

一株新型甲型H1N1流感病毒H275Y的奥司他韦耐药变异分析

目的 探讨2009年新型甲型H1N1流感病毒神经氨酸酶(NA)基因的进化规律,分析NA蛋白酶活性位点以及糖基化位点变化情况.方法 从NCBI检索获得110株不同年代、不同地域甲型流感病毒NA基因序列,用MEGA 4.0软件进行基因进化分析,并用NJ法构建进化树;对NA基因核苷酸序列同源性及编码蛋白氨基酸序列进行分析.结果 2009年新型甲型H1N1流感病毒世界各地不同毒株间的NA基因同源性极高,达到99.5%～100%,但与以往甲型H1N1人流感病毒的NA基因差异较大.2009年新型甲型H1N1流感病毒与欧洲A/swine/H1N1的NA基因同源性高,达到89.6%～92.9%,且糖基化位点分布一致,分别在50、58、63、68、88、146、235和386位存在糖基化现象.另外2009年新型甲型H1N1流感病毒与A/chicken/H5N1的NA基因同源性也较高,达到83.6%～85.3%.绝大部分2009年新型甲型H1N1流感病毒的NA蛋白酶活性中心及周围相关位点氨基酸组成保守,仍然表现为R118、D151、R152、R225、E277、R293、R368、Y402、E119、R156、W179、S180,D199、1223、E228、H275、E278、N295和FA25,但丹麦、日本、我国香港及湖南分离到的4株病毒出现H275Y突变.2009年新型甲型H1N1流感病毒NA基因可能来源于欧洲A/swine/H1N1流感病毒,并与A/chicken/H5N1病毒有较近的亲缘关系.结论 2009年新型甲型H1N1流感病毒并非由以往人H1N1流感病毒逐渐进化而来,而是一种新型重排病毒,我国湖南地区发现的一株新型甲型H1N1流感病毒具有H275Y奥司他韦耐药变异.     

北京市房山区甲型H1N1流感抗体血清流行病学调查

 目的 了解北京市房山区人群甲型H1N1流感免疫水平,为完善该区甲型H1N1流感疫情防控措施提供科学依据.方法 选择房山区常住人口784名,按照年龄组进行分层和问卷调查,采集血清标本进行甲型H1N1流感病毒血凝抑制(hemagglutination-inhibition,HI)抗体检测,比较不同人群甲型H1N1流感保护性抗体阳性率和抗体几何平均滴度(geometric mean titer,GMT).结果 784名调查对象甲型H1N1抗体阳性率为40.9%(321/784),抗体几何平均滴度为1∶ 18.39.6~15岁年龄组抗体阳性率最高(57.5%),其次是16~24岁年龄组(54.7%),而≥60岁年龄组HI抗体阳性率最低(21.2%).非条件多因素logistic回归分析显示,年龄及接种甲型H1N1流感疫苗与HI抗体阳性呈显著性相关.结论 房山区有超过40%的人群具有甲型H1N1流感保护性抗体,普通人群中已经建立一定的免疫屏障.     

国产奥司他韦治疗甲型H1N1流行性感冒临床研究

目的研究国产奥司他韦治疗甲型H1N1流行性感冒的有效性和安全性。方法采用随机对照方法,共治疗245例甲型H1N1流行性感冒患者,全部患者随机分2组,治疗组（123例,服用奥司他韦75mg,2次/d,共5d）及对照组（122例,不服用奥司他韦）,两组同时给予双黄连注射液（3.6g,1次/d,共5d）,比较两组患者的临床转归及血常规、尿常规和肝肾功能,以了解其疗效及不良反应情况。结果治疗组和对照组的显效率分别为75.61%和9.84%（P〈0.01）,总有效率分别为95.12%和54.92%（P〈0.01）;退热时间治疗组（28.17±15.92）h,对照组（52.12±20.70）h（P〈0.01）;两组临床症状缓解时间有显著性差异（P〈0.01）,治疗组抗菌药物使用率及对乙酰氨基酚使用率均降低（P〈0.05）;两组均未见明显不良反应。结论国产奥司他韦用于治疗甲型H1N1流行性感冒,可以明显缩短疾病持续时间,快速缓解症状,且其安全、耐受性较好。     

2009年新型甲型H1N1流感病毒基质蛋白基因进化的新探讨

目的 探讨甲型H1N1流感病毒基质蛋白(M)基因的进化规律及M2蛋白的氨基酸替代情况.方法 从NCBI数据库下载甲型H1N1病毒M基因179条进行预分析,最终选取50条采用MEGA 4.0软件对其进行比对,采用NJ法构建进化树,同时采用MEGA 4.0软件对M2蛋白氨基酸序列进行比对.结果 不同地区新型甲型H1NI流感病毒M基因同源性高,达99.6%～100.0%,但与历史上流行的H1N1和H3N2流感病毒M基因差异较大,仅与1999-2002年间香港地区流行的H3N2亚型猪流感病毒同源性较近,为96.7%~97.7%.2009年流行的新型甲型H1N1流感病毒与历年来流行的H1N1人流感病毒相比,在第11、13、14、16、20、28、31、43、54、57、77、78、82、86、89、93位氨基酸位点发生了变异;与历年来流行的H1N1禽流感病毒相比,在第13、14、16、31、43、55、77、89位氨基酸位点发生了变异;与H1N1猪流感病毒相比,在第13、14、19、43、55位氨基酸位点发生了变异.2009年流行的甲型H1N1流感病毒与历年来流行的H3N2人流感病毒相比,在第11、13、16、20、28、31、43、54、57、77、78、82、86、89、93位氨基酸位点发生了变异;与历年来在欧亚大陆流行的猪流感病毒相比,所比较的19个位点均有部分毒株发生变异;而与1999-2002年间在香港流行的H3N2猪流感病毒相比,仅在第13、14、21、43位氨基酸位点发生变异.结论 此次新型甲型H1N1流感病毒M基因可能由香港地区流行的H3N2猪流感病毒重组而来.M2蛋白胞外编码区氨基酸位点发生变异,提示在疫苗研制方面应注意由此带来的影响.跨膜区的突变可能是导致此次新型甲型H1N1流感病毒对金刚烷胺类特异性抗病毒药物产生耐药性的原因,第43位氨基酸位点可能为引起此次耐药的主要位点.     

大流行甲型H1N1流感病毒变异株的小鼠感染实验研究

目的对甲型H1N1流感病毒变异株的小鼠感染特征进行观察。方法经过体外鸡胚/MDCK细胞传代和筛选,获得1株甲型H1N1流感病毒变异株（vCA07）;使用不同剂量流感病毒滴鼻感染BALB/c小鼠后,计算半数致死量和半数感染量,观察小鼠感染后的体质量变化、肺部病毒增殖、肺部组织病理变化等。结果与野生型毒株相比,甲型H1N1流感病毒变异株对BALB/c小鼠的致病性显著提高,其可在小鼠肺组织中高效增殖,并导致显著的病理损伤。结论甲型H1N1流感病毒变异株感染特征得以明确,为进一步建立高致病性甲型H1N1流感病毒的小鼠感染模型以及大流行甲型H1N1流感病毒致病机制的研究奠定了基础。     

甲型H1N1流感81例临床特征

目的：描述甲型H1N1流感的临床特征。方法：回顾性分析81例甲型H1N1流感患者的病史、临床表现、实验室辅助检查及临床转归。结果：75.3%的患者为青少年学生,发热（100%）、咳嗽（74.1%）和咽痛（37.0%）是其主要症状。体征可见咽部充血（96.2%）和扁桃体肿大（40.7%）。67.9%的患者表现为外周血中性粒细胞百分比增加,而出现肺部X线异常的比例低（7.4%）。96.3%的患者未经抗病毒治疗临床治愈。结论：此次甲型H1N1流感的临床表现与普通季节性甲型流感类似。对甲型H1N1流感的抗病毒治疗共识值得进一步商榷。     

聚合酶螺旋反应快速检测甲型H1N1流感病毒

目的 建立利用聚合酶螺旋反应(PSR)快速检测甲型H1N1流感病毒的方法.方法 针对甲型H1N1流感病毒的特异性HA基因设计了6套引物,通过实时浊度法和显色法两种方法判断结果.结果与结论 从6套引物中筛选出了最佳引物,并确定最佳温度为65℃;进一步实验表明最佳引物能特异性地检测H1N1病毒,与14种其他呼吸道病原核酸无交叉反应,敏感性达到100拷贝,与PCR敏感性一致.所建立的方法简单快速、特异性强、敏感性高,适合现场和基层单位应用推广.     

6种核酸提取试剂盒对甲型H1N1流感病毒核酸提取效果的比较

目的研究5种国产病毒RNA提取试剂盒对甲型H1N1流感病毒检测的相对效率、耗时和成本,为各级实验室甲型H1N1流感病毒核酸提取检测提供技术参考。方法对滴度为105pfu/ml的甲型H1N1流感病毒参考株悬液作10-1~10-4系列稀释,采用德国Qiagen公司的QIAamp Viral RNAMini Kits和5种国产试剂盒对上述样本进行核酸提取,用复合探针实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）对其提取效率进行平行检测,分析5种国产试剂盒与QIAamp Viral RNA Mini Kits提取效率的差异,同时对试剂盒提取时间及价格进行比较。结果对不同稀释度流感病毒样本的提取检测,各试剂盒存在显著差异,均以QIAamp Viral RNA Mini Kits提取效率最高。综合提取效率、耗时及成本等因素考虑,B试剂盒性价比最高。结论不同核酸提取试剂盒对病毒核酸的提取,可影响RT-PCR的检测效果,各实验室应根据自身条件及试验目的,合理选择性价比较高的试剂盒对临床样本进行核酸提取。