活性胃蛋白酶在阳离子化PET表面的自组装功能膜研究

利用分子沉积法在表面阳离子化的聚对苯二甲酸乙二酯基材上制备活性胃蛋白酶分子的自组装生物膜，并利用原子力显微镜和X-射线光电子能谱对基材和活性胃蛋白酶/PET-NH3^ 组装膜的表面形貌及组分进行了研究。     

RmIL-18多克隆抗体的制备及辣根过氧化物酶的标记

目的用纯品rmIL-18免疫新西兰兔，制备多克隆抗体，并予辣根过氧化物酶标记。方法使用免疫佐剂包被rmIL-18分次免疫新西兰兔，得到兔血清，再采用硫酸铵沉淀粗提法和QAE-Sephadex A-50离子交换层析法提纯IL-18抗体，最后用HRP简易过碘酸钠法标记IL-18抗体。结果用以上方法标记的IL-18抗体酶标记率为40．29％，酶标抗体的效价为1：3200，最佳工作浓度为1：1600。结论成功制备出标记HRP的IL-18多克隆抗体，建立了IL-18抗原的酶联免疫检测，以进一步用于实验研究。     

化学发光法测定辣根过氧化物酶浓度的实验条件探讨

探讨了对碘苯酚增强的鲁米诺－过氧化氢－辣根过氧化物酶体系的反应特性，通过正交试验并经方差分析，获得了增强发光酶免疫检测法测定辣根过氧化物酶及其标记物的最佳实验条件。     

用化学发光法测定辣根过氧化物酶几种体系的研究

Four systems were studied used for chemiluminescent determination of HRP and the determination conditions optimized. In luminol-H2O2 (NaOH) system, HRP was determined conveniently in the range of 0.05-4 pmol, with a correlation coefficient of 0.998 for the linear log-log equation and a limit of detection of 16 fmol HRP. In pyrogallol-H2O2 (pH 6.5) system, 0.1-100 pmol of HRP were determined, based on three log-log regression equations with correlation coefficients of 0.997, 0.994 and 0.999, respectively, and limits of detection of 3-17 fmol HRP. Luminol-H2O2-para iodophenol system was used to determine HRP in the range to 10-50 fmol, based on the chemiluminescence intensity at 1 min and the correlation coefficient of the log-log equation being 0.996 with a limit of detection of 10 fmol HRP. When p-hydroxybiphenyl was used to take the place of p-iodophenol and the chemiluminescence intensity at 1 min or 3 min measured, 6-40 fmol HRP were determined with a correlation coefficient of 0.994 or 0.995 for the log-log equation and a limit of detection of 6.5 or 3.3 fmol HRP.     

狗坐骨神经荧光素及辣根过氧化物酶逆行追踪实验研究

目的：确定狗周围神经逆行示踪试验的最佳示踪剂及示踪时间。方法：用快蓝（ＦＢ）、碘化丙啶（ＰＩ）及辣根过氧化物酶（ＧＲＰ）注射于正常狗坐骨神经,选择不同时间观察脊髓及相应脊神经背根神经节的神经元。结果：１４天时神经元胞体开始出现ＦＢ,随后荧光逐渐加强和阳性标记细胞逐渐增多;而ＰＩ及ＨＲＰ追踪组,仅少量胞体中出现很细的ＨＲＰ未能观察到ＰＩ。结论：狗的周围神经逆行示踪试验最好选择易溶解、激发波长较短的荧     

化学发光法测定辣根过氧化物酶浓度的实验条件探讨

探讨了对碘苯酚（PIP）增强的鲁米诺—过氧化氢—辣很过氧化物酶（Luminol-H_2O_2-HRP）体系的反应特性,通过正交试验并经方差分析,获得了增强发光酶免疫检测法测定辣根过氧化物酶（HRP）及其标记物的最佳实验条件（缓冲液的pH=8.2,Luminol的浓度5×10~(-4)mol/L,H_2O_2的浓度4×10~(-3)mol/L,PIP的浓度4×10~(-4)mol/L,乙二胺四乙酸的浓度0.25mg/ml,温度25℃.反应时间10min）。在上述最佳条件下检测HRP的浓度,其线性范围为:10~(-9)～10~(-12)g/L,Y=-0.05 1.07X（r=0.96,P<0.01）,最低检出限为 0.2pg（5 amol）。     

用化学发光法测定辣根过氧化物酶几种体系的研究

作者采用四种体系,确定了用化学发光法测定辣根过氧化物酶(HRP)的最佳测定条件和操作步骤。用鲁米诺-H_2O_2(NaOH)可以方便地测定0.05～4pmol HRP,绝对检测限16fmol。用邻苯二酚-H_2O_2(pH6.5)体系可测定0.1～100pmol HRP,绝对检测限3～17fmol。用鲁米诺-H_2O_2-对碘苯酚(pH8.5)体系,可由1分钟时的光强度测定10～50fmol HRP,绝对检测限10fmol。用对羟基联苯代替对碘苯酚,测1或3分钟时的光强度可测定6～40fmol HRP,绝对检测限6.5或3.3fmol.     

辣根过氧化物酶酶促体系引发丙烯酰胺聚合的研究

对辣根过氧化物酶(HRP)、H2O2和乙酰丙酮(ACAC)组成的三元醇促体系引发的丙烯酰胺(AAM)聚合进行了研究。在膨胀计中考察了反应温度和HRP、ACAC、H2O2及AAM初始浓度对酶促体系引发AAM聚合动力学行为的影响，确定了适宜的反应条件。用FTIR和GPC对聚合产物进行表征，得到的聚丙烯酰胺的数均分子量为10^5-10^6，分子量分布指教DI为2-3。     

利用辣根过氧化物酶作为示踪物质研究大鼠局部淋巴结抗体产生的动态变化

利用辣根过氧化物酶(HRP)为抗原,加入弗氏佐剂,注入大鼠足掌皮内.对抗原在局部淋巴结中的存留时间;巨噬细胞对抗原的处理;特异性抗 HRP 抗体的产生以及抗原刺激对其它免疫球蛋白合成的影响等进行了追踪观察.共采用了4种不同的组织化学和免疫组织化学方法,在光镜下进行比较.实验证明,采用 HRP、DAB 和 H_2O_2作为追踪物质和底物,研究细胞生物学和病理学问题,既可在光学显微镜又可在电子显微镜下观察反应产物,同时,也可以在细胞水平上和超微结构水平上,对结果进行比较研究.     

利用辣根过氧化物酶作为示踪物质研究大鼠局部淋巴结抗体产生的动态变化

利用辣根过氧化物酶(HRP)为抗原,加入弗氏佐剂,注入大鼠足掌皮内.对抗原在局部淋巴结中的存留时间;巨噬细胞对抗原的处理;特异性抗HRP抗体的产生以及抗原刺激对其它免疫球蛋白合成的影响等进行了追踪观察.共采用了4种不同的组织化学和免疫组织化学方法,在光镜下进行比较.实验证明,采用HRP、DAB和H₂O₂作为追踪物质和底物,研究细胞生物学和病理学问题,既可在光学显微镜又可在电子显微镜下观察反应产物,同时,也可以在细胞水平上和超微结构水平上,对结果进行比较研究.     

辣根过氧化物酶在Au-Gemini纳米复合物修饰玻碳电极上的直接电化学

将辣根过氧化物酶(HRP)固定在Au-Gemini纳米复合物修饰的玻碳(GC)电极表面,制备了HRP修饰电极(HRP/Au-Gemini/GC),研究了HRP在AuGemini纳米复合膜中的直接电化学,考察了其对H2O2的电催化还原作用。研究表明,HRP在AuGemini 纳米复合膜中发生了准可逆的电化学反应,其氧化峰峰电位(Epa)和还原峰峰电位(Epc)分别为-0.236 V和-0.273 V。HRP/Au-Gemini/GC修饰电极对H2O2具有良好的电催化还原响应,其表观米氏常数Km=2.0×10-5 mol/L,H2O2浓度在1.0～7.0 μmol/L范围内与催化电流呈线性关系。该研究为实现氧化还原酶的直接电子传递和生物传感器的构制提供了一种有效途径。     

酚类化合物酶处理反应机理初探

研究了辣根过氧化物酶处理酚和氯酚的反应机理和动力学特征。根据酶反应动力学特征判断辣根过氧化物酶催化酚和氯酚氧化耦合反应属于乒乓双双反应机制。阐明了Ｈ２Ｏ２抑制机理，测定了酶反应中Ｈ２Ｏ２抑制的动力学参数。通过测定不同底物酶反应的动力学参数，比较了取代基数目及取代位置对酶反应的影响。     

HRP标记DNA探针的制备及杂交条件探讨

目的：用辣根过氧化物酶(HRP)直接标记DNA探针,并对其斑点杂交条件进行探讨。方法：以对苯醌(PBQ)氧化HRP使其产生活化位点,并与聚乙烯亚胺PEI缩合形成HRP-PBQ-PEI复合物,再以戊二醛连接DNA,共价结合构建直接酶标探针进行斑点杂交,利用HRP可与底物发生颜色反应的特点观察结果,并对不同杂交条件进行研究。结果：成功构建了HRP标记的DNA探针,并进行了斑点杂交反应,归纳出较好的杂交条件。结论：直接酶标DNA探针有较高的特异性及敏感性,操作简便快速,经济可行。     

对组织内雌激素受体CG—HRP—E2标记技术影响因素的研究

研究了组织内雌激素受体胶体金－辣根过氧化物酶－雌二醇（ｃｏｌｏｉｄａｌｇｏｌｄ－ｈｏｒｓｅｒａｄｉｓｈｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ－ｅｓｔｒａｄｉｏｌ，ＣＧ－ＨＲＰ－Ｅ２）标记技术中的几个影响因素。结果表明：胶体金颗粒直径在１０ｎｍ左右，固定液的ｐＨ为７．４，缓冲液ｐＨ为７．６，固定的温度及时间分别是４°和４～８分钟，ＣＧ－ＨＲＰ－Ｅ２标记稀释度以１∶３为最佳条件。此研究对于该技术定位受体的成功率具有重要意义。     

投射至下丘脑室旁核神经元的定位——HRP法研究

将HRP注入大白鼠一侧下丘脑室旁核,用TMB成色,观察逆行标记的神经元结构。标记神经元见于同侧的下列结构:1.边缘系统:外侧隔核,杏仁内侧核及中央核,海马及海马下脚。2.下丘脑:下丘脑前核,视前内侧核,视上核,交叉上核,弓状核,下丘脑后核,前乳头体核,乳头体上核,乳头体外侧核。3.脑干:中脑中央灰质,中缝背核,兰斑,旁结合臂背侧核,外侧网状核,孤束核。     

N-酚噻嗪丙磺酸的合成及其对HRP-LuminoI-H2O2化学发光的增强作用

目的:合成和表征N-酚噻嗪丙磺酸,探讨其对HRP-Luminol-H2O2化学发光体系的增强作用.方法:将N-酚噻嗪丙磺酸加入HRP-Luminol-H2O2化学发光体系,记录发光强度和发光持续时间,并用于HRP含量的测定.结果:N-酚噻嗪丙磺酸可使HRP-Luminol-H2O2化学发光体系的发光强度增强,发光持续时...