镰形棘豆黄酮类成分提取工艺与体外抗氧化活性研究

摘要 目的用正交实验法对镰形棘豆提取工艺进行优化,体外实验评价镰形棘豆总黄酮提取物的抗氧化活性。方法以镰形棘豆总黄酮的提取率和出膏率为评价指标,采用L9（34）正交实验设计法,优化镰形棘豆水提取工艺。选择清除羟自由基的Fenton法、清除1,1 二苯基 2 三硝基苯肼（DPPH）自由基法及还原能力,检测镰形棘豆总黄酮的体外抗氧化能力。结果镰形棘豆最佳水提取工艺为用药材10倍量体积的水,80 ℃热回流提取3次,每次1.0 h。该水提物中总黄酮含量达到（72.92±5.04） mg·g－1。镰形棘豆总黄酮提取物对羟自由基、DPPH自由基具有良好的清除能力,达到50%清除率所需药物的浓度（EC50）分别为1.10 mg·mL－1和262.57 μg·mL－1。结论该工艺可以显著提高提取物中黄酮类成分的含量,方法可靠,简便易行。富集后的镰形棘豆总黄酮具有良好的抗氧化活性,且活性与剂量呈正相关。     

大孔树脂吸附分离荆芥总黄酮工艺研究

目的 筛选大孔树脂吸附法分离荆芥总黄酮的最佳洗脱工艺条件.方法 采用D-101型大孔树脂对荆芥总黄酮洗脱吸附,观察上样液流速、浓度、洗脱液浓度对荆芥总黄酮含量影响.结果 实验结果表明,D-101型大孔树脂最佳洗脱工艺参数为上样药液流速3 ml/min,浓度10 mg/ml,洗脱液乙醇浓度70%.结论 D-101型大孔树脂洗脱条件可行方便,适合于荆芥总黄酮分离工艺.     

大孔树脂分离纯化独一味总黄酮的工艺研究

目的 研究大孔树脂分离纯化独一味总黄酮的工艺条件与技术参数.方法 采用高效液相色谱法测定山栀苷甲酯和8-0-乙酰山栀苷甲酯的含量,紫外分光光度法测定独一味中总黄酮的含量.结果 D-101树脂对独一味总黄酮的富集效果最好.吸附条件为药液质量浓度1 g/mL,原液室温上样,吸附流速3 BV/h,洗脱剂为70%乙醇,洗脱流速5 BV/h,洗脱剂用量为10 Bv.结论 试验工艺稳定、可行.     

大孔树脂纯化山楂叶总黄酮和金丝桃苷工艺研究

目的 研究大孔吸附树脂分离纯化山楂叶中总黄酮和金丝桃苷的工艺条件.方法 采用高效液相色谱法测定山楂叶提取物中金丝桃苷的含量;紫外-可见分光光度法测定山楂叶提取物中总黄酮的含量.结果 D101型树脂对山楂叶中总黄酮和金丝桃苷均有很好的吸附和洗脱性能,洗脱率达91.20%和98.25%.结论 D101型大孔吸附树脂可用作山楂叶提取物总黄酮和金丝桃苷的精制.     

结合药效的刺五加纯化工艺优选

目的优选刺五加水提物的纯化工艺。方法将刺五加水提物分别采用D-101大孔树脂、聚酰胺和正丁醇萃取工艺纯化,测定紫丁香苷和总黄酮含量,并比较3种纯化样品对模型大鼠缺血再灌注损伤和模型小鼠断头张口的抗脑缺血作用。结果3种纯化样品均具有抗脑缺血作用,其中D-101大孔树脂纯化样品的作用强于其它2种样品;紫丁香苷含量与刺五加抗脑缺血作用成正相关。结论D-101大孔树脂吸附法是刺五加提取物较佳的纯化工艺。     

用D101大孔吸附树脂富集仙茅中苯甲酸酯类酚苷的工艺研究

目的:研究用D101大孔吸附树脂富集仙茅中苯甲酸酯类酚苷的纯化工艺。方法:以仙茅苷乙和仙茅苷的吸附量和解吸附率为指标,考察了D101大孔吸附树脂对仙茅中苯甲酸酯类酚苷的静态和动态吸附及解吸附性能。结果:D101大孔吸附树脂富集仙茅中苯甲酸酯类酚苷的最佳工艺条件如下:吸附时间为8h,药液pH值为6,洗脱溶剂pH值为8,上样吸附和洗脱均在室温下进行,药液中苯甲酸酯类酚苷浓度为0.22mg/ml为最佳上样浓度,吸附流速为2.5Bv/h,洗脱溶剂为30%乙醇,洗脱剂用量为12Bv,二次纯化样品中苯甲酸酯类酚苷浓度为0.17mg/ml。结论:本纯化工艺简单、稳定,能将仙茅中仙茅苷和仙茅苷乙的总含量从0.022%的平均含量提高到1.60%,经二次纯化含量能达到5.08%。     

二氯氧锆比色法测定镰形棘豆水提取物中的总黄酮

目的比色法测定镰形棘豆水提取物中的总黄酮。方法以芦丁为对照品、2.5 mo.lL-1盐酸甲醇溶液于90℃水解30min,3.0%二氯氧锆显色剂于453 nm测定镰形棘豆水提取物中的总黄酮。结果水提物中总黄酮含量为5.79%。结论方法简便,结果可靠。     

西番莲叶中总黄酮的大孔树脂纯化工艺研究

目的研究6种大孔树脂吸附富集西番莲叶中总黄酮工艺条件和参数.方法以西番莲叶中总黄酮为考察指标,考察大孔树脂富集西番莲叶总黄酮的最佳工艺.结果西番莲叶提取液（每毫升含生药60 mg）20 mL上D 101大孔树脂柱,吸附20 min后,用纯化水洗脱除去杂质,然后用70%乙醇120 mL,洗脱速度为2 mL&;#8226;min 1,洗脱剂用量为7倍量的树脂,树脂重复利用3次,为最佳工艺.结论该法可较好富集西番莲叶中有效成分.     

分离纯化野马追总黄酮精制工艺中大孔树脂的筛选方法

目的筛选野马追总黄酮的精制工艺中分离纯化效果最好的大孔吸附树脂。方法以总黄酮含量为评价指标,考察静态吸附、解吸附、动态洗脱性能等参数,对D101型、D201型、D301型、D401型等大孔吸附树脂吸附分离纯化野马追总黄酮进行评价。结果D301型大孔吸附树脂静态饱和吸附量为18.48mg.g-1;在60%、80%乙醇中静态解吸附率为83.66%和85.36%,乙醇洗脱时动态解吸附率为93.70%,综合性能较好。结论D301型大孔吸附树脂综合性能最好,适合野马追总黄酮的精制。     

Plackett-Burman联用Box-Behnken响应面法优选镰形棘豆总多糖纯化工艺

摘要：目的:运用Plackett-Burman实验设计联合Box-Behnken响应面法,筛选大孔树脂法优化镰形棘豆中总多糖的纯化工艺。方法:通过单因素试验探讨各因素对镰形棘豆总多糖吸附率或洗脱率的影响。在此基础上,采用Plackett-Burman实验设计筛选影响镰形棘豆多糖回收率3个显著性因素,再采用Box-Behnken响应面法对这3个主要影响因素进行工艺优化,得到最佳纯化条件,并进行验证分析。结果:大孔树脂为ADS-7,径高比为1∶11,上样液浓度为0.2 mg·ml-1,上样量为60 ml,上样速率为1.0 ml·min-1,洗脱液为51%乙醇,洗脱量60 ml,洗脱速率为1.0 ml·min-1,验证试验中镰形棘豆多糖平均回收率达87.03%,RSD为0.52%,与预测值的偏差为2.80%。通过该工艺镰形棘豆总多糖的纯度由19.2%提高到66.5%。结论:Plackett-Burman联用Box-Behnken响应面法优化的镰形棘豆多糖纯化工艺稳定可靠、简便易行,可为镰形棘豆总多糖的开发利用奠定基础。     

大孔树脂纯化铁皮石斛叶中总黄酮的研究

目的 优选大孔吸附树脂纯化铁皮石斛叶总黄酮的工艺条件。方法 采用静态吸附-解吸方法,以吸附量和解吸率为指标,优选大孔吸附树脂型号;采用单因素试验分别考察上样浓度、上样体积、洗脱剂及其用量,以铁皮石斛叶总黄酮的纯度为指标,优选大孔吸附树脂纯化铁皮石斛叶总黄酮的最佳工艺条件。结果 ADS-17型大孔吸附树脂对铁皮石斛叶总黄酮的纯化效果最优,最优纯化工艺条件为上样液总黄酮浓度0.7 mg·mL^-1,上样体积30 mL,洗脱剂为50%乙醇,洗脱剂用量为7 BV。总黄酮的纯度为（18.07±0.42）%,回收率为（39.91±0.30）%。结论 ADS-17型大孔吸附树脂在所确定的工艺条件下能有效分离纯化铁皮石斛叶中的总黄酮成分,黄酮纯度提升17倍左右。     

洋葱总黄酮大孔树脂纯化工艺的研究

目的：研究洋葱总黄酮的大孔树脂纯化工艺条件.方法：通过对洋葱总黄酮在4种大孔树脂上的吸附与解析附特性的比较,筛选最佳树脂,并对该树脂影响因素进行系统研究.结果：纯化工艺以AB-8大孔树脂分离洋葱总黄酮,样品浓度为3.48 mg·ml^-1,上样体积为2倍柱体积（BV）,先用蒸馏水洗脱3BV除杂,再用3BV的70%乙醇解析.结论：所得产品总黄酮平均含量为66.84%,此工艺操作简便,稳定性好.     

聚酰胺-大孔树脂联用纯化樱花叶总黄酮及其抗炎活性

目的:以聚酰胺-大孔树脂联用纯化樱花叶超临界CO₂(SFE-CO₂)萃取液中总黄酮及其抗炎活性研究.方法:采用SFE-CO₂提取樱花叶中总黄酮成分,以聚酰胺吸附,以水洗脱至无色.再加到大孔树脂柱中,以乙醇洗脱,测定总黄酮含量.同时,初步检测总黄酮的抗炎作用.结果:供试液(ml)-聚酰胺(g)比例为1.5:1,选择AB-8型树脂,树脂(g)-提取液(ml)为3:1,以80%乙醇作为洗脱剂.色谱柱径高比1:20,洗脱液收集量为20 BV,总黄酮纯度达83.04%.药理实验证明,超临界萃取的樱花叶总黄酮能够明显抑制二甲苯致小鼠耳肿胀和降低冰醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性(P <0.01),其抑制率较超声提取的樱花叶总黄酮抑制率分别高出27.11%,53.62%.结论:聚酰胺-大孔树脂联用纯化SFE-CO₂萃取液工艺稳定,其纯化后的总黄酮具有一定的抗炎活性优势.     

葛根总黄酮和葛根素的纯化工艺研究

目的研究葛根总黄酮和葛根素的纯化工艺。方法以葛根总黄酮和葛根素为指标,对萃取法、盐析法、活性炭吸附法以及大孔树脂吸附法四种纯化方法进行综合评价,并对大孔树脂吸附法进行了工艺优化。结果四种纯化方法中,大孔树脂吸附法效果最佳。非极性大孔树脂更加有利于葛根总黄酮及葛根素的纯化,且以HPD 300最佳。结论HPD 300树脂吸附纯化时,以上样液浓度1g.mL-1(相当于原生药),20%乙醇洗脱效果最佳,其中葛根总黄酮可达90%以上,葛根素纯度可达50%以上,能满足大工业生产的要求。     

黄蜀葵花总黄酮的大孔树脂纯化工艺

目的选择5种大孔树脂分别对黄蜀葵花总黄酮进行静态与动态的吸附和解吸,筛选纯化黄蜀葵花总黄酮的最佳树脂。方法研究影响分离的各种因素如上样流速、上柱浓度和洗脱剂等优化分离工艺。结果研究结果表明：D101树脂宜于黄蜀葵花总黄酮的提纯,最佳工艺为：流速1BV·h^-1,黄蜀葵花总黄酮水溶液的上样浓度为4．15g·L^-1,乙醇为洗脱剂,洗脱浓度为70％。结论经D101树脂吸附分离纯化后,总黄酮含量提高15倍以上。     

大孔树脂纯化柽柳总黄酮工艺的研究

目的 研究D-101大孔吸附树脂分离纯化柽柳总黄酮的工艺条件. 方法 以柽柳总黄酮为指标,对上样量、吸附时间、洗脱速度、乙醇浓度和上样药液pH进行考察. 结果大孔树脂分离柽柳总黄酮的最佳工艺条件为上样量15 mL,pH 6～7,吸附30 min,流速3 BV.h^-1,乙醇浓度70%,乙醇用量3 BV. 结论 D-101大孔吸附树脂能有效分离纯化柽柳总黄酮.     

正交设计优化DM301大孔树脂纯化中药补肾方总黄酮的工艺

目的:优化DM301大孔吸附树脂纯化补肾方总黄酮的工艺条件及参数。方法:以总黄酮和指标成分含量(二苯乙烯苷、淫羊藿苷和柚皮苷)为指标,采用正交试验方法考察上样量、径高比、洗脱溶剂用量和洗脱速度4个因素对纯化效果的影响,并进行了优化工艺的重复性试验和纯化前后指标成分含量比例变化的考察。结果:经优化的纯化工艺条件为:树脂药材质量比为2∶1,树脂柱径高比为1∶10,洗脱溶剂量为4BV,洗脱速度为2.3BV.h-1,经纯化后总黄酮纯度达50%以上,总黄酮的保留率为76.30%,纯化前后3个指标成分的含量比例基本相同。结论:经该工艺纯化后明显提高了总黄酮的纯度,减少了纯化固形物的量,从而减少服用量。     

应用大孔树脂分离纯化野牡丹总黄酮的研究

目的：研究D101型大孔树脂分离纯化野牡丹总黄酮的工艺。方法：以提取物中总黄酮含量为考察指标,通过试验研究确定大孔吸附树脂分离纯化野牡丹总黄酮的工艺参数。用紫外分光光度法测定野牡丹总黄酮含量,用HPLC法测定总黄酮水解后槲皮素的含量。结果：制得的野牡丹提取物中总黄酮含量为92．3％,槲皮素的含量为50．2％。结论：D101型大孔吸附树脂可用于分离纯化野牡丹总黄酮。     

大孔吸附树脂分离纯化甘草总黄酮工艺研究

目的:研究大孔吸附树脂分离纯化甘草总黄酮的工艺条件。方法:比较D101、Hz-806、AB-83种大孔吸附树脂对甘草总黄酮的静态解吸率,然后通过对甘草醇提取液上的大孔吸附树脂柱,以不同浓度乙醇依次洗脱,并考察洗脱液中甘草总黄酮的含量、固形物重量和纯度。结果:AB-8型解吸率最好,具体工艺参数为上样速度3ml/min、药液浓度1.5mg/ml、pH值5,及80%乙醇为洗脱剂。结论:AB-8型大孔吸附树脂能有效分离纯化甘草总黄酮,纯度大于50%并,符合中药有效部位研究要求。