尿毒症病人红细胞变形能力与红细胞膜硒浓度的关系

①目的从硒与红细胞膜收缩蛋白（ＳＰ）的关系探讨尿毒症病人红细胞变形能力（ＥＤ）变化机理。②方法检测了４８例尿毒症病人和４０例健康人ＥＤ、红细胞膜硒（Ｅ－Ｓｅ）浓度，红细胞膜脂质过氧化物（Ｅ－ＬＰＯ）、膜收缩蛋白二聚体（ＳＰ－Ｄ）和四聚体（ＳＰ－Ｔ）的变化。③结果尿毒症病人红细胞滤过指数（ＥＦＩ），Ｅ－ＬＰＯ，ＳＰ－Ｄ和ＳＰ－Ｄ／ＳＰ－Ｔ明显增高，Ｅ－Ｓｅ，ＳＰ－Ｔ明显降低，与对照组比较差异有极显著性（ｔ＝４．８２０～５．１９４，Ｐ均＜０．００１）。尿毒症病人ＥＦＩ与Ｅ－Ｓｅ，ＳＰ－Ｄ呈负相关（ｒ＝－０．４８２，－０．５１０，Ｐ均＜０．００１），与Ｅ－ＬＰＯ，ＳＰ－Ｄ，ＳＰ－Ｄ／ＳＰ－Ｔ呈正相关，（ｒ＝０．５７０，０．５２９，０．６１７，Ｐ均＜０．００１）；Ｅ－Ｓｅ与Ｅ－ＬＰＯ，ＳＰ－Ｄ，ＳＰ－Ｄ／ＳＰ－Ｔ呈负相关（ｒ＝－０．５２１，－０．５８２，－０．５５６，Ｐ均＜０．００１），与ＳＰ－Ｔ呈正相关（ｒ＝０．５１９，Ｐ＜０．００１）。④结论尿毒症病人红细胞膜硒缺乏所致的膜收缩蛋白异常是ＥＤ降低的重要原因之一。     

示波极谱直接测定人发中的铅

在０．１０ｍｏｌ·Ｌ￣（－１）盐酸－０．４０ｍｏｌ·Ｌ￣（－１）六次甲基四胺－５．０×１０￣（－３）ｍｏｌ·Ｌ￣（－１）邻菲啉－５．０×１０￣（－３）ｍｏｌ·Ｌ￣（－１）硫氰酸钾底液中用示波极谱法测定铅的方法，峰电位为－０．７０Ｖ（ＶＳ，ＳＣＥ）左右，线性范因为０．０４－１．６μｇ·ｍｌ￣（－１），检出限为０．００８μｇ·ｍｌ￣（－１）。该方法简便、快速、选择性好，直接应用于人发中铅的测定；变异系数为２．４－５．９％；样品加标回收率为９７．４－１０５％。     

3—氨甲基吡啶树脂的合成及五种氨基吡啶树脂对金铂吸附性的比较

研究了反应物配料比３－ＡＭＰ／Ｃｌ（摩尔比）、反应温度与时间对大孔型３－氨甲基吡啶树脂（３—ＡＭＰＲ）性能的影响规律．在最佳合成工艺条件下制得３－ＡＭＰＲ的功能基含量为３．１６ｍｍｏｌ／ｇ树脂．３－ＡＭＰＲ对ＡｕＣｌ６（２－），ＰｔＣｌ６（２－），ＩｒＣｌ６（２－），ＰｄＣｌ４（２－），ＲｈＣｌ６（３－）的吸附容量分别为８００．８，３８７．８，３８６．３，１３３．０，１０５．５ｍｇ金属／ｇ树脂；配位比分别为１．２９，０．６３，０．６４，０．４０，０．３３。比较了３—ＡＭＰＲ、２－ＡＭＰＲ、４－氨基吡啶树脂（４－ＡＰＫ）、３—ＡＰＲ、２－ＡＰＲ五种树脂对ＡｕＣｌ４－、ＰｔＣｌ６（２－）的吸附性，其中３－ＡＭＰＲ为最佳。     

Taurine-activated chloride currents in the rat sacral dorsal commissural neurons

Theelectrophysiologicalandpharmacologicalpropertiesoftaurine（Tau）－activatedCl－currents（nau）wereinvestigatedinthedissociatedratsacraldorsalcommissuralnucleus（SDCN）neuronsusingthenystatinperforatedpatchrecordingconfigura－tionundervoltage－clampconditions．ThereversalpotentialofITauwasclosetotheCl－equilibriumpotential．TheITauwasnotaffectedbyaprecedingGABAresponsebutcross-desensitizedbyaprecedingglycine(Gly)response．Strychnine（STR）,picro－toxin（PIC），bicuculline（BIC）and…     

Effect of TCM on plasma β-endorphin and placental endocrine in threatened abortion

Objective：ToexploretheeffectofChineseherbalmedicineonplasmaβ－endorphin（β－EP）andplacentalendocrineinpatientsofthreatenedabortions（TA）．MethodS：Changesofplasmaβ－EP，gonadotrophinreleasinghormone（GnRH），humanchorionicgonadotrophin（HCG）andprogesterone（P4）levelsweremeasuredbyRIAin40casesofTAwithahistoryofrecurrentspontaneousabortiontreatedwithChineseherbalmedicineforreinforcingKidneyandQi，hemostasisandanti－abortion．Andtheresultswerecomparedwiththoseofnormalpregnantwom…     

B超测定正常儿童肾脏大小和形态

用Ｂ超测定６９名正常儿童肾脏长、宽、厚径、集合系统大小及肾实质厚度。结果显示正常儿童肾脏大小与性别无关，与年龄、体重呈正相关。肾脏长度（Ｙ－１，ｃｍ）与年龄（Ｘ－１，岁）和体重（Ｘ－２，ｋｇ）的关系分别为Ｙ－１＝０．３６Ｘ－１＋５．２和Ｙ－１＝０．１４Ｘ－２＋４．６。肾实质厚度（Ｙ－２，ｃｍ）与年龄（Ｘ－１，岁）和体重（Ｘ－２，ｋｇ）的关系分别为：Ｙ－２＝０．０５Ｘ－１＋０．９１和Ｙ－２＝０．０２Ｘ－２＋０．８３。左肾略大于右肾，二者无显著差异（Ｐ＞０．０５）。     

儿童急性肾小球肾炎血清白细胞介素2，6，8变化及临床意义

目的 探讨细胞因子在儿童急性肾小球肾炎（ＡＧＮ）中的变化及意义。方法 采用放射免疫法测定儿童急性肾小球肾炎急性期与恢复期血清白细胞介素２，６，８（ＩＬ－２，ＩＬ－６，ＩＬ－８）的变化并探索其临床意义。结果３５例ＡＧＮ患儿急性期ＩＬ－２，ＩＬ－６，ＩＬ－８分别为（３８±３．１）μｇ/Ｌ，（８６．８±７７．２）ｎｇ/Ｌ，（０．７６±０．５２）μｇ/Ｌ，较对照组（０．９３±０．６９）μｇ/Ｌ，（６５．９±４９．２）ｎｇ／Ｌ，（０．２４±０．３６）μｇ/Ｌ差异有显著性（Ｐ＜０．０１），恢复期接近正常。结论 儿童ＡＧＮ急性期ＩＬ－２，ＩＬ－６，ＩＬ－８增高，且在病程中发挥重要的作用。     

Effect of Ginkgo Biloba Extract on Brain Edema after Subarachnoid Hemorrhage in Rats

TheaimofthisstudywastoinvestigatetheprotectiveeffectofGinkgobilobaextract（EGb）onbrainedemaaftersubarachnoidhemorrhage．EightymaleandfemaleWistarrats，weighing３００～３５０g，wereusedintheex－periment．AnimalsweredividedintopureSAHgroupandEGb－treatedgroup．Dynamicchangesofregionalcerebralbloodflow（rCBF）weredetectedineightratsfromeachgroup．Brainwaterandelectrolytescontentsatdifferenttimepointsweredetectedinthirty－tworatsfromeachgroup（eightratsateachtimepointfromeachgroup）．EGb，p…     

幽门螺杆菌对胃窦部粘膜氧自由基的影响

幽门螺杆菌是造成慢性胃炎，溃疡的重要病源。我们用化学发光分析法测定胃窦部粘膜ＲＯＭ，观察ＨＰ（＋）和ＨＰ（－）国粘膜ＲＯＭ产生的不同，８４例ＨＰ（＋）发光值为３６．６４（９５％ＣＩ８．１８－２４８．２２）／ｍｇ／ｍｉｎ，５４例ＨＰ（－）为２．８８％（９５ＣＩ－２．０９－１２．６５）／ｍｇ／ｍｉｎ，ＨＰ（＋）组明显高于ＨＰ（－）组（Ｐ＜０．０１）。从两组发光值进行分析，其值同炎症有一定关系，炎症重发     

RP－HPLC法分析白花前胡中Pd－Ia和紫花前胡中Pd－C－I的含量

建立了ＲＰ－ＨＰＬＣ测定白花前胡根中３′（Ｒ）－ａｎｇｅｌｏｙｌｏｘｙ－４′（Ｒ）－ａｃｅｔｏｘｙ－３′，４′－ｄｉｈｙｄｒｏｓｅｓｅｌｉｎ（Ｐｄ－Ｉａ）和紫花前胡根中３′（Ｒ）－ｓｅｎｅｃｉｏｙｌｏｘｙ－４′（Ｓ）－ｈｙｄｒｏｘｙ－３′，４′－ｄｉｈｙｄｒｏｘａｎ－ｔｈｙｌｅｔｉｎ（Ｐｄ－Ｃ－Ｉ）含量的方法。色谱柱为ＯＤＳ，甲醇－水（７１２９ｖ／ｖ）为流动相，流速为０．４ｍｌ／ｍｉｎ，紫外检测波长３２０ｎｍ，线性范围分别为０．０２～０．０６μｇ和０．０１～０．０５μｇ，相关系数分别为ｒ＝０．９９９０和ｒ＝０．９９９６，平均回收率分别为９９．５３％和１００．９３％。本法结果准确，步骤简便，灵敏度高，分析速度快，重现性好，为常用中药前胡的质量检测提供了现代可靠手段。     

τ蛋白磷酸化位点与其促微管组装及微管结合活性的体外 …

目的　探讨 Alzheimer病 (AD) τ蛋白异常磷酸化位点与其促微管组装及与微管结合活性抑制的关系。方法　采用超速离心和离子交换柱层析法分离制备重组 τ蛋白及 τ蛋白的体外磷酸化 ,以 Fe Cl3亲和柱分离纯化 32 Pτ肽 ,手工 Edman降解和氨基酸自动分析仪鉴定 32 Pτ肽磷酸氨基酸位点。结果　 (1)酪蛋白激酶 - 1(CK- 1)、c AMP依赖性蛋白激酶 (PKA )和糖元合成酶激酶 - 3(GSK- 3)的磷酸化作用可不同程度地抑制τ蛋白的功能 ,CK - 1或 PKA的预处理可明显增强 GSK - 3对τ促微管组装活性的抑制 ,其中 PKA加 GSK- 3的抑制作用最强。 (2 )单纯GSK- 3磷酸化τ蛋白的位点为 :苏氨酸 (Thr) - 181,丝氨酸 (Ser) - 184,Ser- 2 6 2 ,Ser- 35 6和 Ser- 40 0 ,而 GSK- 3对PKA预处理τ蛋白的磷酸化位点为 :Ser- 195 ,Ser- 198,Ser- 199,Ser- 2 0 2 ,Ser- 2 35 ,Ser- 2 6 2 ,Ser- 35 6 ,Ser- 40 4,Thr-2 0 5和 Thr- 2 31。其中 Ser- 198,Ser- 199,Ser- 2 0 2 ,Thr- 2 0 5 ,Thr- 2 31,Ser- 2 35 ,Ser- 2 6 2 ,Ser- 40 0和 Ser- 40 4为 AD患者τ蛋白异常磷酸化位点。此外 ,Ser- 2 6 2磷酸化仅轻度抑制τ蛋白活性 ,而 Ser- 198,Ser- 199,Ser- 2 0 2 ,Thr- 2 31,Ser- 2 35 ,Ser- 40 0和 Ser- 40 4位点则同时存在于胎脑τ蛋     

INHIBITION OF MELATONIN BIOSYNTHESIS ACTIVATES PROTEIN KINASE A AND INDUCES ALZHEIMER-LIKE TAU HYPERPHOSPHORYLATION IN RATS

HYPERPHOSPHORYLATED microtubule-associ-atedproteintauisa major component ofneurofi-brillartyangle,sone ofthetwo hallmarksinAlzh-eimer'sdisease(AD )brain.1,2 Imbalancedregulatioinnproteinkinasesand proteinphosphatasesisa recognizedmechanismfortauhyperphosphorylati,onhowever,theupstreamfactorsleadingto deregulationof the phosphorylationsystem arestilnlotunderstood.Recent studiesshowed thatserum and cerebrospinalfluidlevelsofmelatonininAD patientdsecreased,and cog-nitionimprovement in th…     

INHIBITION OF MELATONIN BIOSYNTHESIS ACTIVATES PROTEIN KINASE A AND INDUCES ALZHEIMER-LIKE TAU HYPERPHOSPHORYLATION IN RATS A

Objoctive To investigate effect of inhibiting melatonin biosynthesis on activities of protein kinase A (PKA), glycogen synthase kinase-3 (GSK-3) and tan phosphorylation at PS214 and M4 epitopes using haloperidol, a specific inhibitor of 5-hydroxyindole-O-methyltransferase. Methods Brain ventricular and intraperitoneal injections were used for haloperidol administration, Western blots for tan phosphorylation, 32p-labeling for PKA and GSK-3 activity, and high performance liquid chromatograph for detection of serum melatonin levels. Haloperidol injection through the lateral ventricle and intraperitoneal reinforcement significantly stimulated PKA activity with a concurrent hyperphosphorylation of tan at M4 (Thr231/Ser235) and PS214 (Ser214) sites. Prior treatment of the rats using melatonin supplement for one week and reinforcement during the haloperidol administration arrested PKA activity and attenuated tau hyperphosphorylation. GSK-3 activity showed no obvious change after haloperidol injection, however, melatonin supplements and reinforcements during haloperidol infusion inactivated basal activity of GSK-3. Conclusion Decreased melatonin may be involved in Alzheimer-like tau hyperphosphorylation, and overactivation of PKA may play a crucial role in this process.     

马钱苷通过抑制蛋白磷酸酶2A催化亚基C磷酸化降低tau蛋白过度磷酸化

目的 探讨马钱苷对tau蛋白过度磷酸化的影响及其作用机制。方法 马钱苷（500、1 000 μmol/L）与人神经母细胞瘤细胞株（SK-N-SH细胞）预孵育24 h,之后加入PI3K抑制剂Wortmannin（WT）及PKA抑制剂GF-109203X（GFX）与SK-N-SH细胞孵育3 h,采用Western blotting方法观察马钱苷对tau蛋白在Thr205、Thr217、PHF-1位点的磷酸化,GSK-3β-Ser9、GSK-3β、PP2A催化亚基C（protein phosphatase 2A catalytic subunit C,PP2Ac）磷酸化/甲基化及PP2Ac的表达。结果 WT/GFX明显抑制p-GSK-3β-ser9的表达,引起GSK-3β活性增高,从而导致tau蛋白Thr205、Thr217、PHF-1位点高度磷酸化。马钱苷能够明显抑制模型细胞tau蛋白在Thr205、Thr217、PHF-1位点的过度磷酸化,但是不能增高p-GSK-3β-ser9的表达,提示马钱苷抑制tau蛋白磷酸化的作用不是通过影响GSK-3β通路实现的。但是实验显示马钱苷能够抑制PP2A催化亚基C Tyr307位点的磷酸化,但对Leu309位点甲基化无影响。结论 马钱苷能够抑制tau蛋白过度磷酸化,机制可能与其抑制PP2A催化亚基C Tyr307位点的磷酸化,提高PP2A活性有关,与GSK-3β通路无关。     

异氟烷麻醉后低体温对大鼠海马的影响

目的 探讨异氟烷麻醉后低体温对大鼠海马tau蛋白和炎性因子的影响.方法 SD大鼠135只,随机分为3组:健康对照组、麻醉保温组(大鼠异氟烷麻醉后利用加温垫保持体温在36.0～37.0℃)和麻醉低体温组(大鼠麻醉后暴露于22℃室温).蛋白印迹分析方法检测磷酸化tau蛋白、total tau蛋白表达变化.利用丝氨酸-苏氨酸磷酸醇测定系统进行蛋白磷酸醇2A(PP2A)活性测定.实时定量PCR分析IL-1 β mRNA和TNF-α mRNA变化.结果 异氟烷麻醉后2h诱发低体温.室温下暴露于异氟烷诱发大鼠脑内tau蛋白磷酸化,Thr205位点和Ser396位点与对照组比较分别增加了10倍和2.9倍.麻醉诱发的低体温抑制大鼠脑内PP2A活性下降45％.麻醉低体温组在麻醉后2h、麻醉后1、3d,IL-1 β mRNA表达分别增加12.7倍、17.9倍和2.3倍.麻醉低体温组在麻醉后1、3d,TNF-α mRNA表达同样增加2.0倍和1.6倍.结论 异氟烷麻醉后可以导致大鼠持久的低体温,抑制PP2A活性,诱发tau蛋白高度磷酸化,增加炎性因子IL-1β mRNA和TNF-αmRNA的表达.     

蛋白激酶A催化微管相关蛋白tau磷酸化的研究

目的：研究蛋白激酶A（PKA）对微管相关蛋白tau的磷酸化作用。方法：采用免疫印迹技术，利用位点特异性、磷酸化依赖的tau蛋白抗体，检测PKA对tau蛋白磷酸化作用的位点特异性及磷酸化作用动力学。用双倒数作图，计算PKA催化tau磷酸化以及各个位点磷酸化的Km值，并结合培养细胞的实验，研究PKA对tau蛋白磷酸化作用的位点特异性。结果：PKA催化tau蛋白在Ser214，Ser262，Ser409三个位点磷酸化，而且各位点磷酸化作用的Km值不同，PKA对Ser214的Km值最低，即对Ser214位点的亲和性最高，催化其磷酸化的能力最强。在细胞实验中，也显示了PKA引起Ser214位点的磷酸化最明显。结论：PKA催化tau蛋白在Ser214，Ser262，Ser409三个位点磷酸化，其中Ser214是PKA催化tau磷酸化反应的最好位点。     

吡格列酮对AD大鼠模型学习记忆及GSK-3β、p-tau蛋白的影响

目的观察吡格列酮对阿尔茨海默病（AD）大鼠模型学习记忆能力及海马糖原合成激酶3-β（GSK-3β）活性、tau蛋白异常磷酸化（p-tau）的影响,为临床防治AD提供一条新的思路。方法健康雄性Wistar大鼠32只,随机分为4组,除对照组外其余组大鼠海马CA1区注射冈田酸（OA）制备AD模型;低、高吡格列酮组给予吡格列酮灌胃4周,其余组给生理盐水灌胃;通过水迷宫检测各组大鼠学习记忆能力;免疫组化法观察各组大鼠海马GSK-3β活性、tau蛋白异常磷酸化。结果与对照组相比,模型组学习记忆能力明显下降（P〈0.05）,海马GSK-3β、tau蛋白磷酸化的表达明显增多（P〈0.05）;与模型组相比,低、高吡格列酮组学习记忆能力明显提高（P〈0.05）,海马GSK-3β、tau蛋白磷酸化的表达明显减少（P〈0.05）,而低、高吡格列酮组二者相比无明显差异（P〉0.05）。结论吡格列酮可改善AD大鼠模型学习记忆能力,可能与降低GSK-3β活性、减少tau蛋白过度磷酸化有关。     

糖尿病大鼠脑皮质tau过度磷酸化的机制及氯化锂的作用

目的研究糖尿病大鼠并发阿尔茨海默病的可能机制以及氯化锂(LiCl)的作用。方法用链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病大鼠模型,用32P放射性标记法检测对照组、糖尿病(DM)组、DM NaCl组和DM LiCl组的糖原合酶激酶-3(GSK-3)的活性,用蛋白印迹法检测tau蛋白磷酸化水平,用电跳台试验检测大鼠的保留记忆。结果DM组与对照组相比,GSK-3活性明显增加,tau蛋白磷酸化程度明显升高,且伴有记忆障碍(P<0·05)。与DM组相比较,DM LiCl组GSK-3活性和tau蛋白过度磷酸化程度均降低(P<0·05,P<0·01),记忆障碍改善(P<0·05)。结论糖尿病大鼠脑皮层GSK-3活性升高,LiCl通过抑制GSK-3活性,降低tau蛋白过度磷酸化,改善糖尿病大鼠的记忆障碍。     

山茱萸环烯醚萜苷对蛋白磷酸酶2A催化亚基C磷酸化的调节机制

目的 探讨山茱萸环烯醚萜苷（Cornel iridoid glycoside,CIG）上调蛋白磷酸酶2A（protein phosphatase 2A,PP2A）,PP2A活性抑制tau蛋白磷酸化的作用机制。方法 1确定最佳转染条件：将Src质粒DNA（0.2、0.4、0.6、0.8 μg）瞬时转染入小鼠神经瘤母细胞（Neuro-2A cell,N2a细胞）,观察不同量Src对PP2A催化亚基C磷酸化和tau蛋白磷酸化的影响;2将0.6 μg Src质粒DNA转染入N2a细胞,24 h后加入CIG（50、100、200 μg/mL）共同孵育24 h,观察CIG对Src、蛋白酪氨酸磷酸酯酶1B（protein tyrosine phosphatase 1B,PTP1B）、p-PP2Ac及tau蛋白磷酸化的作用。结果 1转染Src（0.2、0.4、0.6 μg）质粒DNA到N2a细胞,Src蛋白表达明显增加,p-PP2Ac水平上调,PP2Ac蛋白总量表达无变化,tau蛋白在Ser 199/202、Ser 396位点磷酸化显著增加;转染0.8 μg Src质粒DNA到N2a细胞与转染0.6 μg Src相比,p-PP2Ac表达下降,PP2Ac蛋白总量表达无变化,tau蛋白在Ser 199/202、Ser 396位点磷酸化降低。2转染0.6 μg Src质粒DNA到N2a细胞,Src蛋白表达增加,p-PP2Ac表达增加,tau蛋白在Ser 199/202、Thr 205、Thr 217以及Ser 396位点的磷酸化明显增加;CIG对Src蛋白表达无影响,能够抑制p-PP2Ac的表达,抑制tau蛋白在Ser 199/202、Thr 205、Thr 217以及Ser 396位点的磷酸化。此外,CIG能上调PTP1B蛋白表达。结论 CIG对Src蛋白无明显调节作用,但能通过增加PTP1B的表达,降低PP2A催化亚基C磷酸化,从而升高PP2A活性,进一步降低tau的过度磷酸化。CIG对tau蛋白过度磷酸化的抑制作用,将会给阿尔茨海默病的治疗带来广阔的应用前景。     

脑益康对阿尔茨海默病大鼠tau蛋白过度磷酸化及其相关酶类表达的影响

目的探讨脑益康对阿尔茨海默病（AD）模型大鼠海马神经元tau蛋白过度磷酸化及其相关酶类表达的影响。方法采用β-淀粉样蛋白1-40（Aβ1-40）右侧海马注射制备AD大鼠模型,免疫组化法和Western blot法检测大鼠海马神经元tau蛋白在Ser404位点的磷酸化水平、蛋白磷酸酯酶2A（PP-2A）的表达情况,ELISA法检测糖原合酶激酶-3β（GSK-3β）蛋白的水平。结果AD模型组大鼠海马组织p-tau（Ser404）、GSK-3β表达增加,PP-2A表达减少,与假手术组的差异有高度统计学意义（P〈0.01）;脑益康治疗组大鼠的p-tau（Ser404）、GSK-3β表达显著减少,PP-2A表达显著增加,差异均有高度统计学意义（均P〈0.01）。结论脑益康可通过增加PP-2A的表达和抑制GSK-3β的表达减轻AD模型大鼠tau蛋白的过度磷酸化。