生物可降解高分子材料载内皮前体细胞CD34抗体涂层支架防治犬冠脉再狭窄的研究

目的评估携带内皮前体细胞CD34抗体冠脉内支架对冠状动脉支架置入术后血管内膜增生的影响。方法以多聚物为载体应用N-琥珀酰亚胺基-3-（2-吡啶二硫）-丙酸酯（SPDP）方法制成内皮前体细胞CD34抗体洗脱支架。以球囊扩张法建立犬冠状动脉狭窄模型，随机分为三组，每组5只，将紫杉醇支架、CD34抗体支架、裸支架分别植入到每组犬的冠状动脉狭窄段，4周后处死取出支架段血管行病理学观察及计算机图像分析血管总面积（TA）、内膜增生面积（IA）以及内膜增生面积百分比。结果CD34抗体支架组内膜增生面积及内膜增生百分比较裸支架组减低（P〈0．05），紫杉醇支架组内膜增生面积及内膜增生百分比较裸支架组也减低（P〈0．05），但较CD34抗体支架组无明显差别（P〉0．05）。结论生物可降解担载内皮前体细胞CD34抗体支架较裸支架，可明显加速内皮修复，明显隆低再德窄的枯毕．县一极具前景的研究方向。     

纤维蛋白胶释放血管内皮生长因子加速损伤动脉血管内皮化

背景：血管去内皮化，血栓形成和内膜增生极大的限制了血管治疗方法的临床效果。目的：利用含血管内皮细胞生长因子的纤维蛋白胶作用于球囊损伤血管内膜来评估其对血管内皮化、细胞增殖和内膜增生的影响。设计：随机对照、重复测量设计。单位：解放军第四军医大学西京医院血管外科及神经外科研究所。材料：实验于2002-10／2004-06在解放军第四军医大学西京医院神经外科研究所完成。15只健康杂种犬（雌雄不限，体质量12．5～18．9kg）由西京医院动物实验外科提供。方法：损伤犬双侧颈动脉，一侧为纤维蛋白胶／血管内皮细胞生长因子／肝素处理组，另一侧为生理盐水对照组。损伤后10，30和90d观察对比内膜损伤和处理的结果。切片应用BioquantBQ0S／2计算机形态测量仪测量血管内膜和中层厚度。5-溴脱氧尿苷掺人免疫组化切片用于计算细胞增殖率，40倍光镜下计算5-溴脱氧尿苷阳性细胞数。电镜检查血管腔内表面内皮细胞覆盖率。主要观察指标：内皮细胞覆盖情况、新生内膜和中层厚度及细胞增殖率。结果：所有犬均存活至标本收集时，无脱失值。①内皮细胞覆盖率：在10d和30d时，处理侧颈动脉的内皮细胞覆盖率明显高于对照侧[（66．73&;#177;30．783l％，（40．8&;#177;27．74）％，P=0.04；（96．67&;#177;10.29）％，（82．07&;#177;22．82）％，P=0．0481。②增殖率：10d时，血管各层细胞增殖达到高峰，90d恢复正常。和对照组相比，处理组在30d对新生内膜和血管中层内侧半中层及血管中层的细胞增殖率明显增强[（7．41&;#177;6．75）％．（3．56&;#177;2．72）％；（2．81&;#177;2．65）％，（0．83&;#177;059）％；（2．06&;#177;1．81）％，（0．62&;#177;0．31）％．P〈0．051。③新生内膜厚度：和对照组相比，处理组在30d和90d时双侧近端和中段的内膜厚度／中层厚度比值明显增加（0．18&;#177;0．22。0．10&;#177;0．06；0．21&;#177;0．23，0．14&;#177;0．14；0．12&;#177;0．08，0．09&;#177;0．08；0．29&;#177;0．40，0．12&;#177;0．12，P〈0．05，P〈0．01），但远端没有变化。结论：纤维蛋白胶能将细胞因子释放入动脉血管壁并保持生物学活性。纤维蛋白胶释放血管内皮细胞生长因子加肝素能有效加速损伤血管内皮化但伴有平滑肌细胞增殖和内膜增生。     

PEG-PLA-PGL／RGD 涂层支架对冠脉支架置入术后再狭窄的影响

目的 探 PEG-PLA-PGL/RGD 涂层支架置入后对猪冠状动脉内皮化及内膜增生的影响。方法 以 PEG-PLA-PLG 聚脂肪酸为载体,通过载体接枝精氨酸-甘-天冬氨酸三肽聚合物（RGD）,制成生物可降解高分子载 RGD冠脉支架。实验分为裸支架组、紫杉醇涂层支架组、PEG-PLA-PGL/RGD 涂层支架组,每组实验小型猪6只,将相应支架分别置入到每组猪的冠状动脉损伤段,分别4周及12周后处死,取出支架段血管行病理学观察及计算机图像分析测定管腔面积（lumen area,LA）、内弹力膜面积（internal elastic membrane area,IEMA）,并根据 LA 及 IEMA 计算出新生内膜面积（neointima area,NA）及面积狭窄百分数（percentage of area stenosis,％AS）。结果 PEG-PLA-PGL/RGD 涂层支架组内膜增生面积较裸支架组明显减低（P ＜0．05）,PEG-PLA-PGL/RGD 涂层支架组内膜增生面积与紫杉醇涂层支组无明显差别（P ＞0．05）。结论 PEG-PLA-PGL/RGD 涂层支架较裸支架,可明显加速内皮修复,明显降低再狭窄的发生,是一极具前景研究方向。     

表阿霉素PLGA缓释涂膜支架在猪门静脉中应用的实验研究

目的：通过表阿霉素涂膜金属内支架在正常家猪门静脉中的应用，评价带药支架在门静脉系统的急性血栓形成，炎症反应，异物反应和血管内膜增生程度。方法：10头正常家猪均分为实验组和对照组。经皮穿肝行门静脉造影并测量门静脉直径，实验组置入带药金属内支架，对照组为金属裸支架，重复测量门静脉直径。2组配对分别于术后4d、1周、2周、4周、6周处死动物，处死前行门静脉造影并测量门静脉直径。门静脉标本行病理检查和透射电镜检查。结果：实验组4d未发生急性血栓．对照组4d发生血管壁部分急性血栓；实验组4周、6周门静脉直径分别为支架置放即刻的88、9％和87．5％，对照组4周和6周为自身的60％和50％。术后1～6周实验组均可见血管壁出血并呈逐渐加重，炎症细胞浸润，异物巨细胞出现，血管壁小血管增生，中膜增生不明显；对照组术后2～6周主要表现中膜增生改变为主，血管壁亦有出血改变，血管壁小血管增生较实验组明显，炎症细胞浸润较轻，弹力纤维增生明显，管腔变窄。实验组1～6周电镜显示胶元纤维排列整齐，增生不明显，内皮细胞较完整，未见明显破坏，平滑肌细胞部分破坏，细胞核染色变深，胞浆内脂质增多。成纤维细胞和平滑肌细胞未见明显增生。对照组电镜下可见成纤维细胞代谢活跃，内质网增多，合成活跃；平滑肌细胞内充满肌丝，血管壁胶元增多，排列未见明显紊乱。结论：带表阿霉素的PLGA涂膜支架在正常家猪门静脉中，发生内膜增生，血管腔狭窄的机会比金属裸支架少，发生局部炎症反应和异物反应的程度较金属裸支架组重。     

雷帕霉素释放生物可降解性血管内支架预防小型猪肾动脉球囊损伤后内膜增生的实验研究

目的 究雷帕霉素释放生物可降解性血管内支架在抑制小型猪肾动脉球囊损伤后内膜增生中的作用。方法将雷帕霉素释放BES与裸BES分别植入到6只实验小型猪球囊扩张后的双侧肾动脉内，8周后处死进行病理学观察，对两种BES的内膜厚度、内膜面积、管腔面积及PCNA染色增殖指数进行比较。结果8周时所有BES在血管内展开良好，雷帕霉素释放BES内膜厚度、内膜面积明显小于裸BES，管腔面积明显大于裸BES，PCNA指数明显小于裸BES（P〈0．05）。结论BES能完成血管内支撑任务；与裸BES相比，雷帕霉素释放BES能有效抑制小型猪肾动脉球囊损伤后血管内膜增生。     

冠状动脉支架置入后靶血管病变与C-反应蛋白变化

背景：冠状动脉粥样硬化的形成和发展与炎症反应密切相关，C-反应蛋白是一项反映机体炎症反应的敏感指标，可用于预测临床预后。目的：探讨冠状动脉粥样硬化性心脏病患者行冠状动脉支架置入前血浆C-反应蛋白水平对靶血管病变的预测价值。设计：回顾性病例分析。对象：选择2005—03／2007—03解放军第三0五医院住院的单支或多支血管病变患者82例，稳定型心绞痛30例，急性冠状动脉综合征52例，均符合WHO冠状动脉粥样硬化性心脏病的诊断标准。方法：所有患者均接受单支血管经皮冠状动脉心血管支架置入，置入前采血测定基础血浆c反应蛋白水平，根据具体值将患者分为C-反应蛋白〈3．0mg／L33例和C-反应蛋白≥3．0mg／L49例。置入后12个月复查冠状动脉造影，支架内及支架两端5mm范围内管腔直径丢失≥50％为支架内再狭窄，其他部位新出现的病变使管腔狭窄≥30％为新生血管病变。主要观察指标：支架内再狭窄及靶血管病变与C-反应蛋白水平的关系。结果：C-反应蛋白〈3．0mg／L的33例患者支架内再狭窄率为6．1％，显著低于C反应蛋白≥3．0mg／L的49例患者支架内再狭窄率18.4％（P〈0．01）。C-反应蛋白〈3．0mg／L的33例患者靶血管新生病变率为3．0％（1／33），亦明显低于C-反应蛋白≥3．0mg／L的49例患者靶血管新生病变率6．1％（P〈0．05）。结论：经皮冠状动脉心血管支架置入前基础C-反应蛋白水平与置入后1年支架内再狭窄及靶血管新生病变的发生呈正相关。     

药物涂层材料对支架置入后血管内再狭窄的影响

目的：评价不同材质的血管内支架置入的安全性,分析不同血管内支架材料置入后抗凝血性、耐腐蚀性和生物相容性的变化。方法：以计算机检索方法在检索中国期刊全文数据库中（CNKI：2002/2007）检索关于不同血管内支架材料置入后抗凝血性、耐腐蚀性和生物相容性的变化的自身前后对照实验,检索词为＂血管内支架、药物涂层材料、再狭窄＂。检索后对每项研究的资料结果进行提取、分析。结果：共有19项实验2731例血管内支架置入患者符合纳入标准,血管内支架置入后血管脉狭窄率均较术前降低,随访结果显示药物涂层支架较金属裸支架能明显减低再狭窄率,支架形态良好,无变形,支架处血流通畅,无血管内再狭窄发生。同时对比得出血管内支架置入后的炎症过程的激活对血管内皮的增生与再狭窄起着重要作用。结论：血管内支架置入治疗动静脉狭窄的成功率高,具有很好的临床效果,特别是药物涂层支架能够显著降低血管内再狭窄的发生率,临床应用安全有效。但由于纳入试验少,证据的强度不足,其他有效性指标和安全性,有待更多证据加以评价。     

血管内超声对支架后再狭窄的初步探讨

目的：研究血管内超声指导支架置入，改进支架放置是否能降低支架置入后再狭窄，方法：54例患者接受支架置入，所有患者均接受血管内超声检查以达到理想的支架放置，达到预定的血管内超声标准，,澡则将使用高压或较大球囊进一步扩张。术后及6个月后行血管内超声测量，分别测量支架及参考血管的最小腔内径，外弹力膜面积，腔面积及面积狭窄百分率，术后仅用阿司匹配及抵克力得低替过度抗凝治疗。结果：血管内超声检查表明术后再狭窄组的最小腔内径腑腔面积小于非狭窄组，6个月后，再狭窄组的最小腔内径缩小伴随面积再狭窄率的增加及腔面积的下降，11例再狭窄发生于支架内最小腔内径（术后）＜3mm，而32例支架内最小腔内径（术后）≥3mm中仅1例发生再狭窄（3．1％）， 血管内超声发现12例支架边缘内膜撕裂及8例斑块脱垂，其中8例发生于最小腔内径＜3mm者都发展为再狭窄。10例再狭窄位于支架边缘，结论：支架后超声检查显示支架最小内径未达3mm者，支架内斑块脱垂者，支架两端有内膜撕裂者术后6个月再狭窄率上升。     

辛伐他汀对平滑肌增殖的影响和可能的分子机理

目的：观察辛伐他汀对免腹主动脉支架植入术后平滑肌增殖和和血管平滑肌（VSMC）中α-平滑肌肌动蛋白、P27kipl蛋白、增殖细胞核抗原PCNA表达量的变化。方法：45只健康的新西兰雄性大白兔随机分为正常组（n=15），给予正常饮食；对照组（n=15）和实验组（n=15），采用含1．5％胆固醇的高脂饮食加腹主动脉内皮剥脱术制造免腹主动脉狭窄模型。内皮剥脱术后第10周实验组和对照组服用阿司匹林25mg／d，氯吡格雷12．5mg／d，3d后，分别行支架植入术。术后实验组继续服用辛伐他汀5mg／d，服药至第30d处死动物，取腹主动脉含支架段血管，进行血管组织形态学变化观察和检测P27kipl蛋白、PCNA、α-平滑肌肌动蛋白在各组的表达量的变化。结果：血管造影发现内皮剥脱术后第10周实验组和对照组腹主动脉均可见有不同程度的粥样硬化斑块和血管内狭窄（P〉0．05）。组织形态学观察发现服用辛伐他汀的实验组免腹主动脉支架段内的血管膜厚度（P〈0．01）、新生内膜面积（P〈0．01）均明显降低，而残余管腔面积明显增大（P〈0．01），且血管的狭窄程度较轻。Western blot结果显示：对照组腹主动脉α-平滑肌肌动蛋白的表达明显比正常组下降55．4％，辛伐他汀治疗组α-平滑肌肌动蛋白的表达比对照组进一步降低了约29．7％（P〈0．05）。实验组免腹主动脉支架段内的血管新生内膜中的VSMC的胞核P27kipl蛋白表达量明显升高（P〈0．01），而血管新生内膜中VSMC的胞核PCNA表达量明显降低（P〈0．01）。结论：辛伐他汀能明显抑制支架植入术后平滑肌细胞增殖，降低α-平滑肌肌动蛋白的表达，其机理可能与抑制平滑肌细胞DNA增殖周期的P27kipl蛋白表达量增加和促进DNA增殖标志物PCNA表达量降低有关。     

脱细胞支架复合犬骨髓源内皮祖细胞构建组织工程血管

背景：目前临床使用的小口径（〈6cm）人工血管因生物相容性差、远期通畅率低，效果并不理想。 目的：将犬骨髓源内皮祖细胞与脱细胞血管支架动态复合培养，尝试构建一种全新的组织工程血管代用品。 设计、时间及地点：随机对照实验，细胞学、组织病理学体外观察，于2005—12／2007-12在南京大学医学院附属鼓楼医院实验室完成。 材料：通过去污剂-酶消化法制备犬颈动脉脱细胞支架；采用密度梯度离心法和内皮系条件培养法，分离扩增犬骨髓源内皮祖细胞，将扩增后的内皮祖细胞种植于脱细胞支架并置于生物反应器中动态构建组织工程血管。 方法：20只犬均暴露两侧颈总动脉及一侧股动脉，每只犬在3段血管随机移植组织工程血管、脱细胞血管支架及自体静脉，分别为组织工程血管组、脱细胞血管支架组及自体静脉组，每组的移植血管数量均为20例。 主要观察指标：对培养的内皮祖细胞进行免疫组化鉴定；血管移植术后6个月行数字减影血管造影、病理切片、扫描电镜等观察移植效果。 结果：犬骨髓单个核细胞在体外培养10d后形成“铺路石样”细胞，免疫组化结果符合内皮祖细胞表型特征；将内皮祖细胞与脱细胞支架置于生物反应器培养10d后，种子细胞在血管腔内黏附生长；犬动脉移植术6个月后，组织工程血管及白体静脉通畅率分别为85％，90％，均优于脱细胞支架移植组25％。 结论：犬骨髓源内皮祖细胞复合脱细胞血管支架，可获得一种具有良好生物相容性和通畅率的生物人工血管。