第7批细菌内毒素国家标准品的建立

目的建立第7批细菌内毒素国家标准品。方法冻干制备了2批细菌内毒素国家标准品候选品。以第2批细菌内毒素国际标准品（94/580）为基准,采用凝胶法、动态浊度法和终点显色法3种方法,组织了13家单位进行协作标定。结果与结论通过比较2批候选品标定结果的精密性及对3种标定方法是否存在显著性差异,最终确定其中1批候选品为第7批细菌内毒素国家标准品,效价为10000EU.支-1,批号：150600-200707。     

重组人淋巴毒素α衍生物活性测定国家标准品的研制

目的:建立重组人淋巴毒素α衍生物(rhLT α)生物学活性测定用国家标准品.方法:标准品按WHO重组细胞因子要求制备、检测,采用L929细胞毒法测定rhLT α的生物学活性,并以NBSB提供的国际标准品为标准,由2家实验室对rhITα国家标准品的效价进行协作标定.结果:rhLT α国家标准品经检定各项指标均符合要求,效价协作标定结果经统计学分析,均数的95%可信区间为4.21×104～4.52×104IU/支,单次测定的95%标准值范围为3.07×104～6.19×104IU/支.这批国家标准品效价确定为4.40×104IU/支.加速热稳定性实验表明活性在-20℃,4℃,25℃条件下20个月保持稳定.结论:该批rhLTα经协作标定,质量可靠,效价稳定,可作国家标准品使用.     

人免疫球蛋白白喉抗体国家标准品的协作标定

目的协作标定人免疫球蛋白白喉抗体国家标准品。方法用世界卫生组织提供的白喉抗毒素国际标准品(批号:9897/762)为标准,采用被动血凝法标定我国人免疫球蛋白白喉抗体国家标准品,将待标品按标示量加水溶解后,置于4℃保存6个月和将冻干待标品分别置于4,25,37℃保存6个月,进行稳定性考查。结果人免疫球蛋白白喉抗体国家标准品的效价为0.4 HAU/支,稳定性好,其他项目符合国家标准品要求。结论该批冻干人免疫球蛋白白喉抗体国家标准品可取代上批国家标准品。     

第四批人凝血因子VIII国家标准品制备和标定

目的:建立经两步病毒灭活工艺制备的人凝血因子VIII国家标准品,以替代第三批人凝血因子VIII国家标准品。方法:按《中国药典》2010年版三部对人凝血因子VIII产品的生产工艺要求和质量标准,制备第四批人凝血因子VIII国家标准品(批号20100101),用WHO第七批人凝血因子VIII国际标准品(批号99/678),采用一期法进行协作标定,采用加速破坏试验进行稳定性考察。结果:批号20100101人凝血因子VIII国家标准品效价为12.1IU/支,稳定性好,其它项目指标均达到国家标准品的要求。结论:建立了符合国家标准品要求、并经病毒灭活的第四批人凝血因子VIII国家标准品。     

第1批重组人绒促性素(生物测定用)国家标准品的制备与协作标定

目的:制备并标定第1批重组人绒促性素(recombinant human chorionic gonadotrophin, rHCG)国家标准品(生物测定用)。方法:以WHO第5批绒促性素国际标准品07/364效价为162 IU·瓶^-1作为标准,采用2020年版《中华人民共和国药典》四部1209绒促性素生物测定法,联合5个实验室对第1批rHCG待标品进行生物活性协作标定。对待标品原液进行了等电点、肽图、相对分子质量测定等结构确认。对待标品进行了紫外分光光度法蛋白含量测定、SEC-HPLC法纯度和聚体分析、RP-HPLC法氧化亚基分析等关键理化性质分析,并进行了稳定性考察。结果:,rHCG素待标品经协作标定,最终定值其生物效价为6 400 IU·瓶^-1;,rHCG素含量约为290μg·瓶^-1,SEC-HPLC纯度约为100%。结构确认结果符合要求;聚体、解离亚基、氧化亚基等各项理化指标符合规定;稳定性考察结果满足要求。结论:本批待标品可作为第1批rHCG国家标准品,以供rHCG及相关制剂的生物效价测定用,定值为6 400 ...     

首批贝那鲁肽国家标准品的研制

目的:建立首批贝那鲁肽国家标准品。方法:采用质谱法、N-末端氨基酸序列测定、氨基酸比值法以及质量肽图法进行结构确证;采用HPLC法测定纯度;采用质量平衡法对原料药A(大规格样品)进行含量赋值,然后以原料药A为对照品,采用HPLC外标法对原料药B(待标品)的含量进行标定;采用体外细胞培养法对原料药B(待标品)进行效价测定。并对原料药B(待标品)稳定性及均一性进行了考察。结果:确证了贝那鲁肽的结构,并确定了首批贝那鲁肽国家标准品的含量为0.932 mg·支^-1,生物效价为1.0×10~4 U·支^-1。原料药B(待标品)分别在4℃及25℃,RH 80%条件下放置10 d,纯度无明显下降,光照10 d纯度明显下降。15支原料药B(待标品)含量测定结果的RSD为0.86%,均一性良好。结论:首批贝那鲁肽国家标准品可作为贝那鲁肽及相关制剂HPLC法鉴别、含量测定及生物活性测定用标准品。     

第二批人凝血酶国家标准品协作标定

目的协作标定第二批人凝血酶国家标准品。方法用世界卫生组织首批α 凝血酶国际标准品 (批号 :89/ 5 88)为标准 ,采用纤维蛋白原凝固法标定。并将标准品分别于 2 5℃、37℃、4 5℃保存 6个月 ,进行稳定性考查。结果第二批人凝血酶国家标准品的效价为 12 7IU/支 ,稳定性良好 ,其他项目符合国家标准品要求。结论已成功研制第二批人凝酶国家标准品 ,可以取代首批人凝血酶国家标准品。     

胰激肽原酶国家标准品的协作标定

目的 对第六批胰激肽原酶国家标准品的酶活力单位进行定值.方法 以第五批胰激肽原酶国家标准品为基准,采用纤维蛋白凝结法,以标准曲线计算,组织多个实验室协作标定,并对数据进行统计处理.结果 本批胰激肽原酶国家标准品酶活性单位为46 IU·支-1(加权均值标准差为0.0886,加权均值可信限范围为46.19～46,75).结论 第六批胰激肽原酶国家标准品通过了审核,可以取代第五批胰激肽原酶国家标准品.     

首批1型单纯疱疹病毒溶瘤活性测定国家候选标准品的研制

目的:研制首批1型单纯疱疹病毒(herpes simplex virus 1,HSV-1)溶瘤活性测定国家标准品。方法:按2020年版《中华人民共和国药典》三部相关要求,分别进行HSV-1溶瘤活性测定液体标准品和冻干标准品的制备和质量检测,并使用热加速试验进行稳定性考察,以U-2 OS细胞/CCK-8法分别在3家实验室对标准品的溶瘤活性进行协作标定。对比研究液体标准品和冻干标准品,选择其中更为适用的1种作为国家标准品。结果:制备的2种HSV-1溶瘤活性测定标准品的质量检测结果均符合要求,其中冻干标准品水分含量为1.09%,分装精度为0.15%。稳定性试验结果用阿伦尼乌斯公式计算,初步预测液体标准品溶瘤活性在-70℃下降低10%需7.7年;冻干标准品溶瘤活性在-70℃下降低10%需6.1×10⁵年,其稳定性得到很大提高。3个实验室协作标定进行了共21次测定,液体标准品的溶瘤活性值几何均数为7.08×10⁴ U·mL^-1,冻干标准品的溶瘤活性值几何均数为1.82×10⁴ U·支^-1...     

尿促性素第三批国家标准品的标定

目的:制备和标定第三批尿促性素国家标准品。方法:用幼龄大鼠卵巢、精囊增重方法,第四批人尿FSH、LH国际标准品为标准标定第三批尿促性素国家待标品。结果:第三批尿促性素国家标准品的生物效价分别为FSH190IU,LH242IU/支。结论:已成功研制第三批尿促性素国家标准品,可以取代第二批绝经期尿促性素国家标准品,现已分发使用。     

首批依诺肝素钠国家对照品1,6-脱水衍生物含量赋值的协作研究

目的： 建立首批1,6-脱水衍生物系统适用性对照品，完善国家标准。方法：以欧洲药典依诺肝素钠对照品(EP Enoxaparin Sodium，Batch5)为系统适用性对照品，采用依诺肝素钠新国家标准草案 “1,6-脱水衍生物”检查法，对依诺肝素钠国家对照品(批号：140810-201801)进行1,6-脱水衍生物含量测定，由全国14个药品检验机构及依诺肝素生产企业实验室协作标定。结果：对依诺肝素钠系统适用性国家对照品(批号：140810-201801)1,6-脱水衍生物含量标定结果为20.3%，并对实验室内误差进行考察，14个实验室中有1个实验室(Lab1)标准差(SD)为1.8%，5个实验室(Lab2、Lab4、Lab10、 Lab11和Lab13)的SD为0.5%~0.7%，其余8个实验室的SD值均小于0.5%。对实验室间误差进行考察，有效数据的SD值为0.6%，相对标准偏差(RSD)为3.2%。结论：经国家药品标准物质委员会审定后批准， 依诺肝素系统适用性国家对照品(批号：140810-201801)增加1,6-脱水衍生物含量赋值，可以用于依诺肝素钠1,6-脱水衍生物检查系统适用性考察使用。     

第3批缩宫素国家标准品的建立

目的 建立首批HPLC含量测定用缩宫素国家标准品。方法 第3批缩宫素国家标准品采用冻干制备。使用核磁共振和HPLC法对缩宫素进行结构确证;采用HPLC法测定待标品的质量分数,并测定待标品水分及氨基酸比值;以缩宫素USP对照品为标准,采用HPLC外标法和大鼠子宫法分别测定待标品的生物效价。结果 经核磁共振和HPLC法确证缩宫素的结构;待标品水分含量为4.8%,各氨基酸比值均在限度范围内,经HPLC检测质量分数为99.69%;待标品经HPLC法测定每支含量为274 IU,经大鼠子宫法测定每支含量为275 IU。结论 建立的待标品可作为第3批缩宫素国家标准品,供缩宫素效价测定及鉴别使用。     

首批酒石酸溴莫尼定国家对照品的研制

目的:建立首批含量测定用酒石酸溴莫尼定国家对照品.方法:应用红外光谱、核磁共振及液质联用仪对酒石酸溴莫尼定进行结构确证.采用高效液相色谱法测定纯度,并测定溶剂残留、炽灼残渣、水分等,通过质量平衡法计算酒石酸溴莫尼定含量.结果:确证酒石酸溴莫尼定的结构,确定首批酒石酸溴莫尼定对照品含量为99.8％.结论:首批酒石酸溴莫尼...     

不同色谱柱测定乙酰螺旋霉素原料及其制剂中各组分的含量

目的:对《中国药典》2005年版乙酰螺旋霉素原料及其制剂组分测定方法中"系统适用性"的控制要求进行修订。方法:以标准品图谱为标准,采用4款C18填料的色谱柱对4个厂家22个批次的原料及其制剂进行各组分的含量测定和分离度、柱效的考察。结果与结论:在原要求下,同一样品可因分离情况不同而导致测定结果的差异;只有在样品测定时记录的色谱与标准图谱中各组分的保留时间、分离杂质个数和杂质的基线分离完全一致的情况下,即以现行批乙酰螺旋霉素标准品的标准图谱作为"系统适用性"的控制,才可以保证测定结果的准确。     

HPLC-ELSD法测定BLP25脂质体疫苗中MPL的含量

目的 建立测定BLP25脂质体疫苗中免疫佐剂MPL含量的方法.方法 采用HPLC-蒸发光散射检测器(ELSD)法.色谱柱为孔径300A的WP Octadecyl C18柱；采用三元梯度洗脱；Alltech 2000型ELSD检测器的漂移管温度为80℃,载气流速为2.6 L·min-1.结果 所建方法能将MPL与脂质体中的其他成分完全分离；在48.6～486μg·mL-1浓度范围内,MPL校正曲线(1gA～1gC)的线性相关系数(r)为0.9998;平均加样回收率为100.0％(n=3×3)；连续进样、平行配制溶液、不同操作人员、不同实验室测定结果的相对标准偏差(RSD)分别为0.8％(n=6)、1.3％(n=3)、1.7％(n=2)和2.8％(n=3).结论 该HPLC-ELSD方法的专属性、线性、准确度、精密度和重现性均符合方法学要求,适宜于BLP25脂质体疫苗中MPL的含量测定.     

第5批人绝经尿促性腺素国家标准品的制备与标定

目的:制备和标定第5批人绝经尿促性腺素(HMG)国家标准品.方法:以WHO第5批国际标准品10/286作为标准,选择6个实验室,采用《中华人民共和国药典》2015年版四部1216卵泡刺激素(FSH)测定法和1217黄体生成素(LH)测定法对第5批HMG国家标准品待标品的生物效价进行标定;按照2015年版药典四部通则14...     

电感耦合等离子体质谱法测定左氧氟沙星片中8种元素杂质的含量

目的:建立电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法测定左氧氟沙星片中钒(V)、铁(Fe)、钴(Co)、镍(Ni)、砷(As)、镉(Cd)、汞(Hg)、铅(Pb)8种元素杂质的含量.方法:取左氧氟沙星片剂研磨成粉,用微波消解法进行处理.采用ICP-MS法进行方法学验证及样品检测,测定模式为He模式,等离子体模式为通用模式,...     

首批L-犬尿氨酸国家药品对照品的研制

目的：建立首批L-犬尿氨酸国家对照品。方法：采用紫外吸收光谱、红外吸收光谱、核磁共振谱及高分辨质谱对犬尿氨酸进行结构确证，测定了原料的水分含量、炽灼残渣量及元素含量，并考察了其引湿性、均匀性和稳定性，最后采用氮分析法、液相色谱法及定量核磁共振法对其含量进行测定，最后采用质量平衡法对其含量进行赋值。结果：确证了犬尿氨酸的结构，以质量平衡法计算，将本批次犬尿氨酸的含量定值为97.4%。结论：经过结构确证和含量测定，本批次犬尿氨酸能够满足相关药品检查使用，首批L-犬尿氨酸国家对照品研制成功并通过审定，可用于相关氨基酸药物的检查，有利于提高相关药品质量，保证用药安全。     

复方胰岛素凝胶的研制及含量测定

目的研制复方胰岛素凝胶并建立其含量测定方法。方法以卡波姆为基质制备复方胰岛素凝胶;采用紫外分光光度法测定胰岛素含量,并考察其稳定性及对家兔皮肤的刺激性。结果胰岛素检测浓度在10~150μg/ml范围内线性关系良好,线性方程为A=8.75120×10-4C—0.00245(r=0.99976,n=3),平均加样回收率为100.46%,RSD=1.26%;所得凝胶在室温或4℃冰箱中存放稳定性好,对家兔皮肤未见刺激性发生。结论该制剂制备工艺简单,稳定性好,检测方法快速、准确。