辐射诱发外周血淋巴细胞HPRT基因位点突变的研究进展

在分析和定量辐射诱发体细胞基因突变增高的方法中,应用最广的是抗6-p琉基鸟嘌呤(6-thioguanine resistance,6-TG)突变分析,用于检测次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(Hypoxanthine-guanine phosphoribosyl transgerase,HPRT)基因位点的突变.     

^60Coγ射线诱发的V79细胞HPRT位点突变频率

用中国仓鼠Ｖ７９细胞次黄嘌呤－鸟嘌呤磷酸核糖基转移酶（ＨＰＲＧ）位点正向突变试验方法（Ｖ７９／ＨＰＲＴ ＳＹＳＴＥＭ）检测了不同剂量的＾６Ｃｏ－ｙ射线诱发的Ｖ７９细胞ＨＰＲＴ位点的突变频率。     

γ射线诱发GPA基因位点突变的剂量效应关系研究

60Coγ射线照射能引起人红白血病K562细胞株的血型糖蛋白A基因发生随机突变.通过对其第3外显子上的SacI内切酶位点进行分析,发现其基因突变率与受照剂量有着较好的线性关系,这与染色体畸变分析法所得的结果一致.分析基因突变率有可能推知受照剂量.     

氡及其子体诱发大鼠体细胞HPRT基因位点的突变

[目的]用多核细胞法研究氡及其子体诱发大鼠外周血淋巴细胞和气管-支气管上皮细胞的次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HPRT)基因位点突变情况。[方法]Wistar雄性大鼠24只,采用HD-3型多功能移动式氡室进行动态吸入染毒,按照氡染毒的累计暴露量,分为3个实验组和1个对照组;获取大鼠外周血淋巴细胞和气管-支气管上皮细胞,以多核细胞法检测该两种细胞的HPRT基因突变频率。[结果]大鼠外周血淋巴细胞和气管-支气管上皮细胞的HPRT基因突变频率均随氡累积暴露剂量的增加而相应增加,剂量-效应关系明显,拟合的函数分别为(?)=1.785×10~(-5)D~2 1.174×10~(-3)D 1.054和(?)=3.538×10~(-5)D~2 8.338×10~(-4)D 1.032。[结论]氡及其子体能诱发大鼠外周血淋巴细胞和气管-支气管上皮细胞的HPRT基因突变,呈现一定的剂量-效应关系。     

健康成人体细胞HPRT基因位点突变频度值测定

健康成人体细胞ＨＰＲＴ基因位点突变频度值测定黄权光，史纪兰，商希梅，李志荣，贾喜铭，刘伟，乔健维（山东省医科院放射医学研究所济南２５０００１）近年来新近发展起来的次黄嘌呤一鸟嘌呤转磷酸糖基酶位点（ＨＰＲＴ）检测是一种快速、灵敏测定人体细胞突变的方法，...     

醋酸铅体外诱发人外周血淋巴细胞HPRT基因位点突变的研究

目的 了解醋酸铅对人外周血淋巴细胞HPRT基因位点的影响,以探讨铅的致突变性。方法 采用多核细胞法体外研究醋酸铅对人外周血淋巴细胞HPRT基因位点的影响及突变频率。结果 0．25mmol/L醋酸铅即可诱发人外周血淋巴细胞HPRT基因位点突变,且突变频率随着染毒浓度的增加而升高,突变频率Y(10^-3)与醋酸铅浓度C(mmol/L)之间存在一定的剂量-效应关系,直线方程分别为：Y=1．0566 0．1661C(r=0．9582)和Y=1．0762 0．1987C(r=0．9434)。结论 在一定条件下,醋酸铅对人外周血淋巴细胞HPRT基因位点及突变频率有影响,HPRT基因突变频率可望成为接触环境致突变物人群检测的敏感指标。     

X射线工作者体细胞HPRT基因位点突变频率的测定与分析

采用多核细胞法检测了３０例Ｘ线工作者的体细胞ＨＰＲＴ基因突变频率，并根据Ｘ线诱发的人体细胞ＨＰＲＴ基因位点突变剂量效应刻度曲线，推算了受照者的累积剂量和年剂量当量，对其工龄与突变率的关系等进行了分析。     

氯化镉诱发大鼠血淋巴细胞HPRT基因位点突变频率的研究

目的了解氯化镉对大鼠外周血淋巴细胞HPRT基因位点的影响,寻找化学诱变物致机体损伤的早期检测的指标.方法采用多核细胞法研究化学诱变物氯化镉对大鼠血淋巴细胞HPRT基因位点的影响及突变频率.结果氯化镉可诱发大鼠血淋巴细胞HPRT基因位点突变,突变频率随着染毒浓度的增加而升高,突变频率Y(×10-3)与氯化镉浓度C(mg/kg)之间存在剂量-效应关系.结论氯化镉对大鼠血淋巴细胞HPRT基因位点及突变频率有影响,HPRT基因突变频率检测有望作为早期的效应标志物,用于接触环境致突变物人群的分子流行病学调查.     

次黄嘌呤磷酸核糖转移酶基因位点突变测定的方法探讨

人体外周血淋巴细胞中抗 6 硫代鸟嘌呤 (6 TG)突变体是在次黄嘌呤磷酸核糖转移酶 (HPRT)基因位点上的突变细胞 ,通过检测人外周血抗 6 TG细胞出现的份额 ,便可知外周血淋巴细胞突变频率[1- 3 ]。国内外已广泛用于某些肿瘤患者、接触环境中各种诱变剂的人群及电离辐射者监测。研究结果显示 ,其突变率都有不同的增加趋势 ,且具有一定的剂量依赖关系[1- 3 ]。目前检测和定量抗 6 TG细胞常用的方法为放射自显影、克隆检测及细胞松弛素B(Cyt B)法 ,各有其不同优点和不足 ,前两者使用仪器、试剂较繁杂或用血量大 ,培养时间长 ,要求条件高 ,…     

健康成人和放射工作者体细胞HPRT基因位点突变率的检测和比较

目的为了解健康成人和放射工作者体细胞ＨＰＲＴ基因位点突变率。方法应用人外周血淋巴细胞抗６－ＴＧ分析技术检测了３０例健康成人和３０例放射工作者体细胞ＨＰＲＴ位点突变频率。结果健康成人ＨＰＲＴ基因位点突变频率均值为０１６２８×１０－３,变化范围为０１３００×１０－４～０２９０３×１０－３,放射工作ＨＰＲＴ基因位点的突变频率均值为０２２２５×１０－３,变化范围为０３３７×１０－４～０４７８×１０－３。ｔ检验Ｐ＜００５,两者差异显著。从检测结果亦可看出,随着放射工龄的延长,ＨＰＲＴ基因位点突变频率也随之增加。结论体细胞ＨＰＲＴ基因位点突变频率可作为各种有害因素对机体遗传损伤的生物标识物之一。     

γ射线诱发GPA基因位点突变的剂理效应关系研究

60Coγ射线照射能引起人红白血病K562细胞株的血型糖蛋白A基因发生随机突变,通过对其第3外显子上的SacI内切酶位点进行分析,发现其基因突变率与受照剂量有着较好的线性关系,这与染色体畸变分析法所得的结果一致。分析基因突变率有可能推知受照剂量。     

晚期混合裂变产物内照射诱发体细胞HPRT基因位点突变率与剂量率关系的研究

运用多核细胞法及胞质分裂阻断微核（CBMN）法对5组Wistar雄性大鼠外周血淋巴细胞HPRT基因位点突变频率及微核进行检测。实验组注射不同放射性比活度的晚期混合裂变产物，在达到累积剂量近似相等（约4.66cSv）时心脏穿刺取血。结果显示，在总累积剂量近似相等条件下，HPRT位点突变频率、微核细胞率、微核率均随剂量率的增加而增加，4个剂量率点间的HPRT位点突变频率、微核细胞率和微核率总体上均有显著差异（P＜0．01）。HPRT基因位点突变频率、微校率与剂量率之间的关系可分别用函数Y=a＋blnX表示。HPRT位点突变频率与微核率间存在线性相关。     

细胞质分裂阻滞法检测体细胞HPRT基因位点突变的作用

细胞质分裂阻滞法检测体细胞ＨＰＲＴ基因位点突变的作用杨素霞樊飞跃李煜曹珍山周淑珍刘国廉（北京放射医学研究所，北京１００８５０）人和啮齿类细胞的ＨＰＲＴ基因位于Ｘ染色体上，其基因产物为次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶（ＨＰＲＴ）。此酶特异性不强，可把嘌呤类...     

晚期混合裂变产物内照射诱发体细胞HPRT基因位点突变率与剂 …

运用多核细胞法及胞质分裂阻断微核（ＣＢＭＮ）法对５组Ｗｉｓｔａｒ雄性大鼠外周血淋巴细胞ＨＰＲＴ基因位点突变频率及微核进行检测。实验组注射不同放射性比活度的晚期混合裂变产物，在达到累积剂量近似相等（约４．６６ｃＳｖ）时心脏穿刺取血。结果显示，在总累积剂量近似相等条件下，ＨＰＲＴ位点突变频率、微核细胞率、微核率均随剂量率的增加而增加，４个剂量率点间的ＨＲＰＴ位点突变频率、微核细胞率和微核率总体上均有显     

乙肝基因分型与耐药位点突变的关系

目的:检测本地区乙肝病毒复制病人中基因型分布情况,探讨HBV基因型与抗病毒疗效关系。方法:应用乙肝病毒型特异性引物采用巢式PCR方法,对45例HBV-DNA阳性患者进行HBV基因型分析,用DNA测序方法检测耐药位点突变。结果:B型7例,占15.56%;C型34例,占75.56%;未分型3例,占6.67%;B+C混合型1例,占2.22%。未发现其他型别。C型病人人均病毒载量5.67±1.61(1oglncopies/m1)较B+C混合型5.54(只有1例)、B型(4.42±1.39)及未分型(2.65±0.57)高。C型病人耐药变异位点多,病人比例高。结论:浙江等地区HBV—DNA基因分型以C、B为主,而B基因型抗病毒治疗疗效最好,C型、混合型及其它型对抗病毒治疗药物疗效较差。     

低剂量X射线照射离体人血诱发淋巴细胞染色体畸变的剂量—效应关系研究

自Bender,M. A用染色体畸变作为生物剂量计的研究以来,许多实验室应用染色体畸变分析技术,进行生物计量测定,它是物理剂量测定的良好补充。随着核工业的发展以及X线在工、农、医方面的应用日益增多而受到重视,为确保从事有关工作人员的健康,并使之用于实践,各实验室有必要建立自己的刻度曲线。本实验室继1982和1983年相继报道中子、γ射线照射诱发染色体畸变与剂量效应的刻度曲线以来,现把低剂量X射线照射离体人血诱发淋巴细胞染色体畸变的剂量—效应关系研究报道如下:     

核工业部分超剂量受照人员辐射危害的细胞和分子遗传学调查

目的 了解核工业超剂量受照人员的健康状况,探求辐射危害所致早期改变指标。方法 采用现场调查与实验室细胞遗传学和体细胞基因位点突变检测相结合的方法,对核工业某厂５０名超剂量受照人员和５０名对照人员进行调查。结果 染色体畸变率（ＣＡ）、微核形成率（ＭＮ）和ＨＰＲＴ（次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶）基因位点突变频率（ＨＰＲＴ）超剂量组均高于对照组,其中ＣＡ和ＨＰＲＴ结果两组之间存在统计学显著差异。超剂量组     

1-溴丙烷致中国仓鼠肺细胞hprt基因位点突变作用研究

目的 探讨1-溴丙烷(1-BP)对中国仓鼠肺细胞(V79)次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(hprt)基因位点的致突变作用.方法 将V79分为大鼠肝微粒体混合功能氧化酶(S9)代谢活化系和非S9代谢活化系,每系各设3.375、6.750、13.500 g/L3个不同质量浓度的1-BP实验组;另设1.000 g/L甲磺酸乙酯阳性对照组(非S9代谢活化系)、0.001g/L甲基硝基亚硝基胍阳性对照组(S9代谢活化系)和溶剂对照组,溶剂对照组加等体积的无血清培养基.染毒时间为6h.应用细胞克隆检测法检测V79 hprt基因位点的突变率.结果 非S9代谢活化系,1-BP实验组突变率与溶剂对照组比较,差异均无统计学意义(P＞0.05);S9代谢活化系,3.375、6.750 g/L 1-BP实验组突变率均高于溶剂对照组,差异均有统计学意义(P＜0.01),但不存在剂量-反应关系.结论 1-BP经代谢活化后可能对V79 hprt基因位点具有致突变作用.     

杭州市医用X射线工作者血液学和细胞遗传学调查

本文报道了129例医用X射线工作者的血液学和细胞遗传学调查。结果表明血液学指标放射组与对照组无显著性差异。淋巴细胞微核阳性检出率和微核率均值放射组高于对照组,但无显著性差异(P>0.05)。96例放射组的染色体总畸变细胞率、染色体型畸变细胞率、染色单体型畸变细胞率和总畸变率四项畸变值均明显高于对照组(P<0.01)。     

UHRF1的高表达降低人乳癌细胞对X射线敏感性的研究

目的：了解基因UHRF1的高表达对乳癌细胞MDA-MB-231辐射敏感性的影响.方法：利用克隆形成实验观察细胞存活;流式细胞术测定细胞周期;利用DNA片段分析和Annexin V 试剂盒测定细胞凋亡;Western blot 测定蛋白表达变化;利用经典的染色体分析,观察染色体畸变（着丝粒环和双着丝粒）.结果：与对照相比, UHRF1转染可明显降低MDA-MB-231细胞对X射线的敏感性.利用UHRF1-siRNA抑制UHRF1的表达,可显著增强细胞的辐射敏感性.UHRF1的高表达,可诱导G2/M期阻滞,抑制细胞凋亡,下调促凋亡蛋白Bax,上调DNA损伤修复蛋白Ku70和 Ku80的表达水平,而且,能抑制X射线诱导的染色体畸变.结论：UHRF1可能通过影响凋亡和DNA损伤修复成为乳癌放疗的新靶标.