Kupffer细胞在乙肝和丙肝病毒感染中的作用机制

乙肝病毒或丙肝病毒(hepatitis B virus or hepatitis C virus, HBV/ HCV)感染是肝脏慢性疾病最常见原因。 Kupffer 细胞(KC)定植于肝血窦中,是机体数量最多的内脏巨噬细胞,在 HBV/ HCV 病毒感染后肝脏慢性炎症疾病发展中扮演了极为重要的角色。 KC 通过各种信号通路影响细胞因子的分泌及细胞间作用,调节着机体的炎性反应和免疫活动。它的激活决定着炎症和抗炎的平衡,维持机体的内环境的稳态。研究 KC 对了解肝脏 HBV/ HCV 感染的致病机制及治疗有重要意义。     

角质形成细胞在银屑病中作用的研究进展

银屑病是慢性复发性皮肤疾病,其发生与免疫功能失调、环境因素、信号转导通路紊乱及银屑病易感基因相关。既往研究表明角质形成细胞(KC)在银屑病的发生发展中发挥重要作用。银屑病中KC如何影响炎症细胞的募集、活化,及炎症因子如何导致炎症级联放大尚不明确。KC作为银屑病治疗的靶标,具有广泛的应用前景。本文从银屑病中KC的屏障功能、增殖分化及角质形成细胞与免疫细胞的相互作用作综述。     

枯否细胞的负向免疫调节作用

目前认为肝脏是淋巴器官,它倾向于产生免疫耐受而非免疫应答。枯否细胞(KC)是肝内固有的巨噬细胞,其在发挥免疫防御的过程中可释放多种化学介质介导肝损伤并参与肝纤维化的病理改变。近来研究发现活化的KC与肝脏免疫耐受的形成和维持有关,KC能够分泌免疫抑制性细胞因子,抑制T细胞增殖并诱导T细胞凋亡,从而发挥负向免疫调节功能。对KC负向免疫调控的研究将大大拓展对致耐受性APC尤其是巨噬细胞的认识与理解,为深入研究肝脏内环境稳定和免疫耐受形成的机制开拓新的思路。     

人类肝脏NK 细胞与肝脏疾病

肝脏疾病的发生发展与免疫反应密切相关。自然杀伤(NK)细胞是固有免疫系统的重要淋巴细胞,在肝脏内的含量十分丰富。人类肝脏NK细胞与外周循环NK细胞的表型和功能差异较大,含有组织驻留特性的NK细胞亚群。NK细胞在抵御病毒感染与肿瘤免疫监视中发挥重要作用。近来研究表明,慢性肝脏疾病中NK细胞表型发生改变,且功能紊乱,不能有效控制病毒感染和肿瘤发展。本文总结了人类肝脏NK细胞的特性和亚群组成,探讨其与固有淋巴细胞(ILC)之间的联系,以及与肝脏疾病的关系,为肝脏疾病的治疗展现新思路。     

调节性B淋巴细胞在肝脏疾病中的研究进展

近年来,调节性B淋巴细胞(regulatory B cells,Bregs)与慢性炎症、自身免疫及移植耐受等疾病关系的研究越来越多,其在肝脏疾病中的作用也逐渐引起广大学者的关注,了解Breg细胞在肝炎、肝癌、自身免疫性肝病等疾病发生发展中的作用,可为治疗提供新的研究方向。本文在总结了Breg细胞的基本生物学功能的基础上,主要阐述了Breg细胞在肝脏疾病方面的研究进展。     

肝脏特异敲除腺苷酸活化蛋白激酶小鼠模型的建立EI北大核心CSCD

腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)与肝癌等肿瘤发生、发展有关。然而这方面的研究大都是基于体外细胞实验或小鼠移植瘤模型开展的。本文介绍一个运用白蛋白启动子驱动Cre(Alb-Cre)转基因,通过基因重组技术成功构建基因型为AMPKα1^(-/-)-Alb-Cre的转基因小鼠模型,肝脏特异表达的Cre重组酶在转基因小鼠中实现对肝脏AMPKα1特异性高效敲除。肝脏AMPKα1敲除后不影响小鼠的生长、繁殖及肝脏的结构。肝脏特异敲除AMPKα1小鼠模型的成功构建,为实现在动物整体水平对AMPK与肝脏代谢或肝癌的发生、发展的关系等方面的研究提供了基础。     

Fas配体对HepG2细胞凋亡的影响

细胞凋亡 (apoptosis)与肿瘤的发生、增殖与转移有着较为密切的关系 ,而Fas Fas配体 (FasLigand ,FasL)被认为是传导细胞凋亡信号的“死亡信号传递分子”。其中FasL主要存在于免疫活性细胞 ,通过与靶细胞膜Fas结合 ,导致靶细胞凋亡。为研究FasL在肝癌细胞凋亡过程中的作用 ,我们首先采用ELISA法对慢性乙型肝炎、肝硬化与肝癌患者血清中Fas及可溶性FasL(sFasL)水平进行了初步检测 ,结果显示肝癌患者血清中sFas明显升高 ,而FasL的浓度又明显低于慢性肝炎及肝硬化者 ,提示在肝癌的发生中 ,FasL及Fas与肝癌细胞凋亡有重要关系。我们…     

脾内途经的肝脏靶向性基因治疗中Kupfier细胞的抗原提呈作用

目的探讨肝脏Kupffer细胞(KC)在脾内途径的肝脏靶向性基因治疗中的抗原提呈作用及可能机制。方法以结肠癌肝转移小鼠为模型,以脾内移植GM-CSF基因修饰的胎肝细胞(FILC-GM)与低剂量IL-2、5-Fu腹腔注射作为基因治疗与化学免疫治疗联合应用方案。结果荷瘤小鼠治疗后2w,整个肝小叶KC数目均扩增;KC对99mTc-亚锡植酸钠吞噬功能明显增强;与KC抗原提呈功能和活化T细胞功能密切相关的共刺激分子CD40虽在对照组KC中有基础性表达,但在基因治疗联合化学免疫治疗组中,其表达水平皆有不同程度的上调;此外,联合治疗后KC体外能有效诱导同种T细胞增殖反应,细胞因子IL-12和IL-12的分泌水平亦升高,并且这些反应能被抗CD40L抗体所封闭。结论脾内途径的肝脏靶向性基因治疗能有效提高KC的抗原提呈功能,CD40/CD40L分子在其中发挥了重要的共刺激作用。     

细胞外囊泡在慢性肝病中作用的研究进展

正慢性肝病是危害人类健康的重大疾病,系指在各种病因的刺激下,肝脏的正常生理和生化功能发生长期损伤,进而出现的一系列临床症状,主要包括病毒性肝炎、酒精性脂肪肝、非酒精性脂肪肝、肝纤维化和肝癌等。慢性肝病的发病机理复杂,与肝脏中不同类型细胞间的信息与物质交流异常密切相关。近年来,生命科学研究领域的一项突破是发现细胞外囊泡(extracellular vesicles,EVs)作为细胞间     

卵圆细胞转化过程中生物学标志物的表达变化及其意义

卵圆细胞为肝内的干细胞,大量研究认为,卵圆细胞参与了肝脏肿瘤的发生,可能是肝癌发生的始动细胞.鉴于卵圆细胞在原发性肝癌的发生中具有特殊作用,将其体外培养,使之成为细胞癌变多步骤发生发展的体外模型,动态观察其在转化过程中的生物学特征和蛋白表达变化,对于探讨卵圆细胞分化调控的机制以及进一步研究肝癌的发生机制都具有重要意义.     

急性胆道感染和胆道梗阻时肝脏枯否细胞吞噬功能和有效肝脏血流量的实验研究

研究了大鼠急性胆道感染(AOC)和胆道梗阻(BDL)时祜否细胞(KC)吞噬功能和有效肝脏血流量(EHBF)的改变,发现:KC吞噬功能在AOC组2h明显增强,并持续至48h,在BDL组48h见有明显增强;EHBF在AOC组2h明显降低,6h逐渐恢复至正常,48h又见有明显升高,在BDL组24h明显降低,持续至48h。提示:EHBF的改变与KC吞噬功能的改变无相关性,KC吞噬功能增强可能是机体对细菌或内毒素的快速防御机制之一,严重胆道梗阻早期可能常常伴有内毒素血症的发生。     

二甲双胍促进Kupffer细胞向M2型极化治疗肝纤维化的机制研究

目的探讨二甲双胍(metformin)治疗肝纤维化的免疫学新机制。方法将小鼠随机分成3组:对照组(control,Ctrl)、模型组(carbon tetrachloride,CCl_4)、二甲双胍组(metformin,Met)。纯橄榄油溶液腹腔注射小鼠制备对照组;CCl_4橄榄油溶液腹腔注射小鼠制备模型组;在CCl_4橄榄油溶液腹腔注射第5周,对小鼠连续腹腔注射二甲双胍溶液7 d,制备二甲双胍组。在造模第8周时取材,采用HE染色与Masson染色观察小鼠肝脏组织病理学变化;运用酶联免疫吸附反应(ELISA)检测小鼠血清炎症因子水平;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测小鼠肝脏Kupffer细胞(Kupffer cell,KC)炎症因子表达;Western blot法检测小鼠肝脏KC转录因子蛋白水平与磷酸化程度。结果二甲双胍能够显著减少小鼠肝脏纤维蛋白沉积,减少炎症细胞浸润,降低血清炎症因子水平,减少肝脏KC细胞炎症因子表达,抑制肝脏KC细胞STAT3与NF-κB信号通路,增强STAT6信号通路。结论二甲双胍促进KC细胞向M2型极化改善肝纤维化程度。     

大蒜油对枯否氏细胞分泌白介素18的影响

白细胞介素-18(IL-18)是新近发现的具有多种生物学活性的多功能细胞因子，IL-18最明显的生物学活性是抗肿瘤。人和小鼠的IL-18主要由巨噬细胞样细胞产生。肝脏枯否氏细胞(KC)是机体巨噬细胞中最大的群体，有学者发现生物反应调节剂能激活KC的抗癌活性。本实验在体外培养中，观察大蒜油刺激小鼠KC前后IL-18的分泌功能变化。     

天然化合物调控细胞焦亡治疗急慢性肝炎的研究进展

细胞焦亡是一种炎性相关的细胞程序性死亡方式,其特征是由炎性小体,半胱天冬氨酸蛋白酶以及消皮素蛋白家族介导发生,导致胞膜形成微孔,细胞肿胀破裂,进而释放大量的炎症因子以及细胞内容物.大量研究证实细胞焦亡参与了酒精性肝病(Alcoholic liver disease,ALD),非酒精性脂肪性肝病(Non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)和肝纤维化等多种肝脏疾病的发病过程.当前,基于细胞焦亡学说如何有效防治肝脏疾病成为该领域新的研究热点.天然化合物来源广泛,具有多靶点、多通路、多药效等特点,是治疗肝脏疾病的重要物质来源.该文简要概述了细胞焦亡发生的分子机制和焦亡与肝脏疾病的关系,对近年来天然化合物靶向细胞焦亡改善肝脏疾病的研究进行归纳总结,以期为临床开发新药治疗肝脏疾病提供最新的思路和方向.     

HMG-CoA2裂解酶在鼻咽癌组织中表达及其对鼻咽癌细胞增殖、侵袭能力的影响

目的探讨HMG-CoA2裂解酶(HMGCL)在鼻咽癌(NPC)组织中表达及其过表达对鼻咽癌细胞行为学的影响。方法 Western blot检测64例鼻咽癌组织和42例正常鼻咽上皮组织(NNE)及5个NPC细胞系(HK-1、CNE1、CNE2、HONE1和HNE-1)和正常鼻咽上皮细胞NP69中HMGCL表达水平;以HK-1细胞为研究对象,构建过表达HMGCL的细胞株;MTT法、集落形成实验、Transwell实验分别检测过表达HMGCL后HK-1细胞增殖、集落形成和迁移侵袭能力。结果 HMGCL在NPC和NPC细胞系中普遍低表达(P0.05),在NNE和NP69细胞中普遍高表达(P0.05);成功构建了过表达HMGCL的HK-1细胞株,过表达HMGCL后HK-1细胞增殖、集落形成和迁移侵袭能力均显著降低(P0.05)。结论 HMGCL在鼻咽癌组织中低表达可能与鼻咽癌细胞恶性表型有关,为将来寻找抑制鼻咽癌发生进展提供了新的靶标。     

p62/SQSTM1在鼻咽癌中的表达

目的:研究p62在鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)细胞、组织中的表达情况及其自身抗体在外周血中的水平,探究p62与NPC发生、转移的关系及其在临床中的应用价值.方法:采用Western印迹法和免疫组织化学染色法分别检测NPC细胞株NP69,6-10B和5-8F和NPC患者组织中的p62表达;ELISA检测患者血清中抗p62抗体浓度,并分析其与临床病理特征的关系.结果:p62在NP69,6-10B和5-8F细胞中的表达水平依次升高(P＜0.05);NPC组织中p62高表达,其水平与患者有无转移(x2=9.332,P=0.002)有关.NPC患者血清中抗p62水平较慢性鼻咽炎组明显升高(t=-4.653,P＜0.001),且抗p62抗体水平与患者是否转移有关(t=14.255,P=0.016);血清抗p62抗体筛查NPC的最佳临界值为51.82 μg/L,判别是否发生转移的临界值为62.03 μg/L.结论:p62高表达与NPC发生及转移密切相关,组织中p62蛋白和血清中抗p62抗体可能作为NPC病情监测和判断预后的新指标.     

大蒜油激活枯否氏细胞分泌一氧化氮的实验研究

一氧化氮(NO)在免疫细胞对肿瘤细胞产生毒性方面具有重要意义，可影响肿瘤的增殖生长及死亡。肝脏枯否氏细胞(Kuppfer cell,KC)是机体巨噬细胞中最大的群体，有学者发现生物反应调节剂能激活枯否氏细胞的抗癌活性。本实验在体外培养中，观察大蒜油刺激小鼠枯否氏细胞前、后NO的分泌功能变化。     

前列腺癌过表达蛋白1作为鼻咽癌患者疾病预后不良生物标志物的可行性研究

目的 前列腺癌过表达蛋白1(prostate tumor overexpressed 1,PTOV1)对多种肿瘤的增生具有促进作用,然而其在鼻咽癌(NPC)患者临床疾病的发生和发展中的作用尚未见报道,本研究旨在探讨PTOV1在NPC中表达情况及其与患者临床病理学特征相关性.方法 以NPC细胞系为对照,采用Western blotting和real-time PCR对NPC患者和健康人群进行PTOV1蛋白和基因检测.采用免疫组织化学方法对123例患者的肿瘤病灶进行检测,对PTOV1的表达结果进行显著性统计检验.结果 NPC细胞系和NPC患者临床样本中PTOV1 mRNA和蛋白表达水平明显升高.免疫组织化学结果表明,NPC患者中PTOV1高表达患者68例(55.3％),统计结果表明,PTOV1的表达与患者疾病临床分期(P＜0.001)、T分期(P=0.042)和N分期(P=0.001)密切相关.PTOV1高表达患者的总生存期显著短于低表达患者.多变量分析表明PTOV1表达是NPC患者生存的独立诊断标志物.结论 PTOV1过表达与患者预后不良密切相关,特别是对于NO ～1患者.因此,PTOV1可以帮助检测鼻咽癌患者早期淋巴结转移,作为鼻咽癌的独立的预后标志物.     

小鼠肝脏原代Kupffer细胞的分离和纯化

目的利用低速离心和差速贴壁的特性,探索一种高效分离纯化BALB/c小鼠Kupffer细胞(KC)的方法。方法采用0.5 g/L 4型胶原蛋白酶原位灌注和消化肝脏组织,低速分离肝脏的细胞后差速贴壁分离纯化KC,与Percoll密度梯度离心分离方法比较KC的产量和活性,应用F4/80免疫荧光染色鉴定细胞形态、流式细胞术检测F4/80的表达、墨汁吞噬实验进行吞噬功能鉴定。构建KC缺氧/复氧模型,流式细胞术检测主要组织相容性复合体(MHC)Ⅱ、CD40、CD68和CD86的表达,ELISA检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达。结果每只小鼠肝脏可获得(5.83±0.54)×106个KC,细胞存活率达92%,Percoll密度梯度分离仅能获得(2.19±0.43)×106个KC,F4/80免疫荧光染色显示贴壁后KC呈梭形或棘状,流式细胞术鉴定F4/80阳性细胞占比接近90%,吞墨实验可见胞质内大量被吞噬的碳颗粒。KC在缺氧复氧模型下MHC-Ⅱ、CD40、CD86分子表达增多,并分泌TNF-α参与炎症反应。结论成功建立了BALB/c小鼠KC分离纯化的方法。     

TGF-β/Smad信号通路在肝纤维化中的研究进展

转化生长因子β (Transforming Growth Factor-β,TGF-β) 信号通路在调节细胞进程中起着至关重要的作用。就肝脏而言,TGF-β信号通路贯穿肝脏疾病始终,即从最初的肝细胞损伤到炎症、纤维化、肝硬化直至癌症发生。TGF-β导致肝星状细胞活化为成纤维细胞,并促使大量肝细胞死亡,促进了肝纤维化向肝硬化发展,而过度激活的TGF-β信号与肝癌发展密切相关。在本综述中,作者将阐述TGF-β/Smad信号通路在肝纤维化进程中的作用机制,以及目前在实验和临床诊治方面通过TGF-β信号通路靶向治疗肝脏疾病取得的新进展。以期为研究肝纤维化提供新的论据。