三氧化二砷诱导Hela细胞凋亡的机制研究

目的:了解三氧化二砷(As2O3)诱导的细胞凋亡是否与线粒体跨膜电位(Δψm)改变有关。方法:以Hela细胞为体外模型,应用碘化丙啶(PI)/Rhodamine123(Rh123)双重染色检测Δψm,通过测定细胞活力、流式细胞仪、HE染色及DNA电泳检测细胞凋亡。结果:As2O3处理Hela细胞后。台盼蓝拒染法测定细胞活力降低,流式细胞仪检测发现凋亡细胞明显增多,HE染色可见明显的细胞凋亡形态特征,琼脂糖凝胶电泳出现DNA梯形条带;As2O3使线粒体膜电位降低(P<0.01)。结论:As2O3在体外诱导Hela细胞凋亡的机制可能与降低线粒体膜电位有关。     

三氧化二砷诱导肿瘤细胞凋亡机制的研究进展

细胞凋亡 (apoptosis)是一个主动的由基因决定的自动结束生命的过程 ,由于其受到严格的由遗传机制决定的程序性调控 ,又称编程性细胞死亡 (programmedcelldeath ,PCD)。细胞凋亡是生物生长发育过程中不可缺少的一个重要方面。及时清除不再需要的细胞 ,如在胚胎发育中完成生理功能而退化的细胞、被病原体感染的细胞等 ,才能保证个体正常发育及维持正常的生理功能。因此 ,细胞凋亡的失调可引起多种严重疾病。研究表明 ,许多肿瘤重要的发病机制之一是细胞凋亡的减少或受到抑制[1] 。肿瘤细胞通过下调凋亡相关基因 ,从而赋予肿瘤恶性增殖的特…     

三氧化二砷诱导宫颈癌细胞凋亡的研究

目的:研究三氧化二砷能否诱导宫颈癌细胞凋亡。方法:AnnexinV/PI双染,流式法检测早期凋亡;倒置显微镜观察、HE染色检测凋亡过程的形态学变化;琼脂糖凝胶电泳检测凋亡晚期出现的DNALadder。结论:适合浓度的三氧化二砷可以诱导宫颈癌细胞发生明显凋亡。     

三氧化二砷诱导肝癌细胞凋亡的作用研究

自从20世纪90年代我国哈尔滨医科大学首先用三氧化二砷治疗急性早幼粒细胞性白血病取得显疗效后，近年来人们对三氧化二砷的抗肿瘤作用也展开了深入的研究。研究表明砷剂既可诱导肿瘤细胞凋亡、部分分化，也可抑制其增生。多项研究表明诱导凋亡为其杀伤肿瘤细胞的主要机制。本拟就三氧化二砷对肝癌细胞凋亡诱导作用的研究进展作一综述。     

三氧化二砷诱导实体瘤细胞凋亡的研究进展

近年来国内学者在研究三氧化二砷（As2O3)治疗急性早幼粒细胞白血病的作用机理时，发现其具有诱导白血病细胞凋亡的效应，而且更多的研究证实，这种效应不仅存在于血液肿瘤细胞，还存在于某些实体瘤，如胃癌细胞、胰腺癌细胞、食管癌细胞等，提示三氧化二砷具有一个相对较广的诱导凋亡效应谱。本文综述了近年来国内学者对三氧化二砷诱导某些实体瘤细胞，如肺癌细胞、肝癌细胞、胰腺癌细胞、结肠癌细胞、食管癌细胞、胃癌细胞、舌癌细胞、宫颈癌细胞、恶性淋巴瘤细胞、骨髓瘤细胞、神经母细胞瘤细胞凋亡的研究状况。     

中药诱导肿瘤细胞凋亡的研究进展

自Ｋｅｒｒ１９７２年提出调亡（ｏｐｏｐｔｏｓｉｓ）的概念以来,人们逐渐认识到：细胞凋亡是普遍存在于多细胞生物体内的一种自发、主动的细胞死亡过程,是生物体维持细胞数量相对稳定的固有机制,这一机制若有障碍或发生异常,就可能引发肿瘤或其他病变。肿瘤是一种细胞凋亡过少而增殖过多的疾病,若能抑制肿瘤细胞的增殖并诱导其调亡,则肿瘤细胞就有可能停止生长。近年来,中药诱导肿瘤细胞凋亡已成为一条很有希望治疗肿瘤的新途径,其研究方兴未艾。本文就其近期内研究进展情况作一综述。１ 中药有效提取成分诱导肿瘤细胞凋亡 紫杉醇…     

三氧化二砷诱导人胃腺癌细胞SGC7901凋亡机制的研究

目的 :探讨三氧化二砷 (As2O3)诱导人胃腺癌细胞SGC7901的凋亡效应以及细胞线粒体跨膜电位 (ΔΨm )的改变。方法 :通过形态学观察以及测定细胞活力、亚G1 期细胞含量 ,细胞膜磷脂酰丝氨酸 (PS)外翻量 ,罗丹明123(Rh123)/碘化丙啶 (PI)双染色 ,流式细胞仪检测ΔΨm变化等方法鉴定细胞凋亡。结果 :As2O3 诱导细胞凋亡效应与其诱导ΔΨm下降密切相关。结论 :细胞ΔΨm下降是As2O3 诱导肿瘤细胞凋亡的机制之一。     

细胞因子诱导肿瘤细胞凋亡的实验研究

目的 观察干扰素（ＩＦＮ－ａ）和肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－ａ）单独应用或与化疗药物联合作用于肿瘤细胞的凋亡诱导作用。方法 开矿学观察和流式细胞仪检测细胞因子对培养的人早幼粒白血病细胞（ＨＬ－６０）、小鼠淋巴细胞性白血病细胞（Ｌ－１２１０）和小鼠肝癌细胞（Ｈ２２）的凋亡诱导作用。结果 用光学显微镜、荧光显微镜和电子显微镜均观察到细胞因子诱导肿瘤细胞凋亡的典型形态学改变,流式细胞仪检测结果表明,干扰素与阿     

三氧化二砷诱导粒细胞性白血病原代细胞凋亡的研究

目的：探讨三氧化二砷（As2O3)对慢性粒细胞性白血病（CML）慢性期原代细胞生长的影响。方法：通过细胞增殖,活力检测,形态学观察,粒系髓系集落形成（CFU－GM）集落培养,凝胶电泳等方法检测。结果：As2O3可抑制CML原代细胞增殖,经平均浓度5．0umol.L^-1 As2O3处理5d时抑制率为50％,经大于等于2．6－5．0umol.L^-1 As2O3培养2－5d,可引起细胞凋亡的形态学改变及DNA片段化,As2O3浓度2．5umol.L^-1,CFU－GM的形成抑制率＞50％,结论：As2O3可以抑制CML慢性期原代细胞的增殖,并诱导凋。     

Inhibition of mitogen-activated protein kinase kinase enhances apoptosis induced by arsenic trioxide in human breast cancer MCF-7 cells

Arsenic trioxide (As2O3) has recently been used to treat acute promyelocytic leukaemia and has activity in vitro against several solid tumour cell lines where the induction of differentiation and apoptosis are the prime effects. The mechanism of As2O3-induced cell death has yet to be clarified, especially in solid cancers. In the present study, the human breast cancer cell line MCF-7 was examined as a cellular model for As2O3 treatment. The involvement of extracellular signal-regulated kinase (ERK), p38 and c-Jun N-terminal kinase (JNK) was investigated in As2O3-induced cell death. 3. It was found that As2O3 activates the prosurvival mitogen-activated protein kinase kinase (MEK)/ERK pathway in MCF-7 cells, which, conversely, may compromise the efficacy of As2O3. Hence, a combination treatment of As2O3 and MEK inhibitors was investigated to determine whether this treatment could lead to enhanced growth inhibition and apoptosis in MCF-7 cells. 4. Inhibition of MEK/ERK with the pharmacological inhibitors U0126 (10 micromol/L) or PD98059 (20 micromol/L) together with As2O3 (2 and 5 micromol/L) resulted in a significant enhancement of growth inhibition in breast cancer MCF-7 cells as determined by the 3-(4,5-dimethyl-2 thiazoyl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide assay and [Methyl-3H]-thymidine incorporation. Furthermore, the results demonstrated that combined treatment with As2O3 and the MEK1/2 inhibitor U0126 could augment breast cancer MCF-7 cell apoptosis approximately twofold compared with the effects of the two drugs alone, as determined by Hoechst 33258 or annexin V/propidium iodide (PI) staining and flow cytometry. 5. In addition, As2O3 activated p38 in a dose-dependent manner, but had no effect on JNK1/2. Treatment with a p38 inhibitor did not prevent As2O3-induced apoptosis. 6. In conclusion, the results of the present study showed that enhanced apoptosis is detected in breast cancer MCF-7 cells in the presence of As2O3 and an MEK inhibitor, which may be a new promising adjuvant to current breast cancer treatments.     

三氧化二砷通过JNK信号通路诱导K562细胞凋亡

目的:探讨c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路在三氧化二砷(As2O3)诱导K562细胞凋亡中的作用及机制。方法:体外培养K562细胞,用As2O3及特异性JNK抑制剂SP600125对K562细胞进行处理;倒置相差显微镜下观察细胞形态学变化;MTT法检测不同时间点细胞增殖抑制率;AnnexinV/PI染色结合流式细胞术检测细胞凋亡率;ELISA检测p-JNK蛋白表达的变化;流式细胞术检测突变型P53表达。结果:ELISA显示4μmol/LAs2O3作用48h后p-JNK蛋白表达增强,经SP600125预处理后,As2O3诱导的K562细胞p-JNK蛋白表达明显减弱(P<0.01),As2O3诱导的细胞增殖抑制率和细胞凋亡率均下降,与As2O3单作用组相比突变型P53表达增加(P<0.05)。结论:JNK信号转导通路在As2O3诱导K562细胞凋亡过程中发挥重要作用,是As2O3诱导K562细胞凋亡的主要途径之一。     

三氧化二砷对MDA-MB-231细胞增殖、凋亡的影响

目的观察不同浓度的三氧化二砷对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、凋亡的影响。方法噻唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度(0.2、0.4、0.6、0.8、1.0μmol.L-1)的三氧化二砷作用于三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞24、48、72 h后的细胞增殖率,Western blot检测不同浓度的三氧化二砷作用于MDA-MB-231细胞24 h的PCNA水平。结果不同浓度的三氧化二砷作用于三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞24、48、72 h后,随着时间的推移和浓度的升高,细胞增殖抑制率增加,有浓度和时间依赖性,以1.0μmol.L-1三氧化二砷作用最明显,Western blot检测显示,与对照组比较,随着浓度的升高,PCNA蛋白降低,其中以1.0μmol.L-1三氧化二砷作用后最明显。结论三氧化二砷能促进MDA-MB-231细胞的凋亡,其机制可能与下调PCNA表达的促凋亡途径有关。     

三氧化二砷诱导乳腺癌细胞株MCF-7凋亡对端粒酶活性的影响

<正>乳腺癌是严重威胁妇女健康的恶性肿瘤之一,近年发病率逐年上升,且发病年龄也趋于年轻化。近年来研究发现As2O3不仅对APL细胞,而且对其他血液肿瘤细胞和许多实体瘤细胞均具有诱导凋亡作用。Wang等研究表明端粒酶与恶性肿瘤发生有着紧密的关联,p21特异性核苷     

三氧化二砷对恶性黑色素瘤A_(375)细胞的增殖抑制作用

目的　研究三氧化二砷 (As2 O3 )对人恶性黑色素瘤A3 75细胞的增殖抑制作用和抗转移作用 ,为砷及其化合物治疗恶性黑色素瘤提供新的理论和实验依据。方法　用MTT比色法测定A3 75细胞活力 ,用免疫组化方法分析nm2 3蛋白的表达。结果　As2 O3 与人恶性黑色素瘤细胞株A3 75细胞生长抑制率之间有明显的浓度依赖关系 ,IC50 为 13 0 5 μmol·L-1,用药组 (As2 O3 浓度为 2 μmol·L-1)A3 75细胞中有nm2 3抗肿瘤转移基因的表达 ,而对照组则没有。结论　As2 O3 对恶性黑色素瘤A3 75细胞的增殖有浓度依赖性抑制作用 ,并可诱导体内产生nm2 3蛋白 ,对抑制肿瘤的转移和复发及判断预后有重要意义     

四种砷拮抗剂对三氧化二砷诱导的三种粒系白血病细胞凋亡和端粒酶活性的减量调节作用(英文)

目的:研究巯基供体N-乙酰半胱氨酸(NAC)和二巯丁二钠(NDMS)、抗氧化剂过氧化氢酶(CAT)和Ca~(2 )清除刘(Quin 2)对三氧化二砷诱导的三种粒系白血病细胞凋亡和端粒酶活性改变的调控作用。方法:用流式细胞仪和PCR ELISA法分别检测NAC、NDMS、CAT或Quin 2与三氧化二砷共同作用于三种粒系白血病细胞后其凋亡和端粒酶活性的变 化。结果:三氧化二砷0.6、2.7和8.1μmol/L可分别诱导急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4,慢性粒细胞白血病细胞株K562,急性粒细胞白血病细胞株HL-60细胞发生40％-60％的凋亡,同时下调三种细胞的端粒酶活性。NAC 4mmol/L,NDMS 200μmol/L,CAT 80kU/L,Quin 220μmol/L不同程度抑制这种凋亡作用。NAC和CAT既可独立降低三种细胞的端粒酶活性,也可促进三氧化二砷对端粒酶的下调作用,而Quin 2可抑制K562和HL-60细胞中的这种下调作用。结论:三氧化二砷诱导的三种细胞的凋亡过程涉及了疏基失活、自由基的改变、细胞内Ca~(2 )浓度改变及端粒酶活性下降。NAC、NDMS、CAT及Quin 2可不同程度拮抗三氧化二砷对三种细胞的作用。     

三氧化二砷诱导人宫颈癌细胞凋亡及bcl-2高表达对其影响

采用脂染素（ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ）介导的ＤＮＡ 转染,Ｎｏｒｔｈｅｒｎ 印迹, ＭＴＴ和克隆形成实验,流式细胞术和细胞凋亡原位检测法探讨Ａｓ２Ｏ３ 对人宫颈癌ＳｉＨａ 和ＨｅＬａ 细胞的生物学效应和ｂｃｌ－２ 高表达对这一效应的影响． 结果表明,Ａｓ２Ｏ３ 处理的ＳｉＨａ 和ＨｅＬａ 细胞,存活率和克隆形成能力明显降低,细胞周期的Ｇ１ 期前有低于２ 倍体的凋亡峰,细胞被阻滞在Ｇ２／Ｍ 期,有细胞凋亡时出现的ＤＮＡ 断裂． 而Ａｓ２Ｏ３ 处理的ｂｃｌ－２ 高表达的ＳｉＨａ 和ＨｅＬａ 细胞存活率和克隆形成能力增加,凋亡率减少,Ｇ２／Ｍ 期阻滞程度显著降低． 结果表明,Ａｓ２Ｏ３ 可诱导ＳｉＨａ 和ＨｅＬａ 细胞凋亡,Ｇ２／Ｍ 期阻滞可能是其诱导凋亡的原因之一;ｂｃｌ－２ 高表达可能通过减轻Ｇ２／Ｍ 期阻滞的程度而部分阻止Ａｓ２Ｏ３ 诱导的细胞凋亡．     

三氧化二砷对胃癌细胞SGC7901/ADR GST-π和TopoⅡ表达的影响

目的探讨三氧化二砷(As2O3)对胃癌细胞SGC7901/ADR阿霉素(ADM)耐药性的逆转作用和对GSTπ和TopoⅡ表达的影响。方法用MTT法检测As2O3的非细胞毒性浓度和SGC7901/ADR细胞对ADM的敏感性,用流式细胞仪检测细胞内药物浓度及用免疫组织化学法检测细胞GSTπ和TopoⅡ的表达。结果与结论0.4~0.8μmol.L-1As2O3对耐药细胞SGC7901/ADR无明显毒性(P<0.01),As2O3可下调GSTπ表达,提高SGC7901/ADR细胞内ADM浓度,部分逆转SGC7901/ADR细胞对ADM的耐药性。     

三氧化二砷体外对哮喘患者外周血T细胞凋亡和白细胞介素4分泌的影响(英文)

目的探讨三氧化二砷治疗哮喘的可能机制。方法分离21例哮喘患者和20例健康对照者外周血T细胞,分别加入三氧化二砷(0.1mg·L-1)或地塞米松(5mg·L-1)培养24 h。用ELISA方法检测培养上清液中白细胞介素4(IL-4)的含量,用荧光显微镜、流式细胞术和细胞色素c试剂盒检测细胞凋亡。结果哮喘患者T细胞自发释放IL-4较健康对照者明显增多;三氧化二砷对健康对照者T细胞IL-4的释放无影响,对哮喘患者T细胞IL-4释放增加具有抑制作用;地塞米松可使两组T细胞IL-4的释放明显降低。哮喘患者外周血T细胞体外培养24h凋亡百分率较健康对照者明显降低,细胞浆细胞色素c含量降低;三氧化二砷明显增加哮喘患者T细胞凋亡的百分率和细胞色素c的含量,对健康对照者作用不明显;地塞米松可使两组的T细胞凋亡百分率和细胞色素c含量增加。结论三氧化二砷治疗哮喘的机制可能与诱导哮喘患者T细胞凋亡和IL-4分泌减少有关。