O139霍乱弧菌生物学特性及药物敏感性分析

为了有效，准确地检测霍乱弧菌，在某地水样泻患者的粪便中分离４株Ｏ１３９霍乱弧菌，经对分离株的生物学特性，血清学及药物敏感性进行研究，并与Ｏ１群霍乱弧菌进行比较。结果表明，Ｏ１３９霍乱弧菌具有Ｏ１群同样的生化特性，但不与Ｏ１群霍乱弧菌抗血清凝集，仅与Ｏ１３９霍乱弧菌抗血清在玻片上呈强凝集，试管凝集滴度为１：６４０～１：２５６０，所有菌株都使鸡红细胞凝集，对羊红细胞溶血的作用可变，所有菌株对霍乱Ｏ１群     

我国某地首株O139霍乱弧菌某些特征的研究

我国某地１９９６年６月从一名腹泻病人粪便中分离出首例Ｏ１３９霍乱弧菌，并将该菌与国内外菌株形态，生化和遗传学特性进行了比较研究，结果表明此菌株与国内外Ｏ１３９流行菌株具有相似的表型特性（Ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ），形态，生化特性与Ｏ１群相似，但对弧菌抑制剂（Ｏ／１２９）不敏感，不被Ｏ１多价血清凝集；用已知的几种霍乱弧菌毒素基因探针与被测Ｏ１３９菌株ＤＮＡ杂交，结果显示都具有ｃｔｘ，ｚｏｔ，ａｃｅ基因；ＰＣＲ检测ｃｔｘＡ基因与Ｏ１群霍乱流行株具有相同的扩增产物；ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析外膜蛋白所有Ｏ１３９菌株图谱相似；用１６ＳｒＲＮＡ基因探针与ＢｇｌⅠ酶切的染色体ＤＮＡ杂交，结果表明此菌株与中国及国外菌株分属于不同的核糖体基因型（Ｒｉｂｏｔｙｐｅ，ＲＴ），而且与当年的Ｏ１群流行菌株具有相似的ＲＴ型，推测该菌株可能是Ｏ１群的突变株，对新毒株Ｏ１３９的出现应引起我们高度重视。     

O139霍乱弧菌的分子流行病学特征

利用ｃｔｘＡ，Ｚｏｔ，Ａｃｅ，ＲＳ１，ｓｔ和ｉｇａ等基因探针检测５７８株霍乱弧菌，发现其中１株埃尔托型霍乱弧菌和６株Ｏ１３９霍乱弧菌不含ｃｔｘＡ，进一步分析证明这７个菌株中，除１株含ＲＳ１序列外，其他毒力基因检测均为阴性，这为菌苗候选株的筛选提供了依据。用１６ＳｒＲＮＡ基因探针检测不同地区分离的６２株Ｏ１３９菌株和Ｏ－１群埃尔托型菌株，将其分为９个１６ＳｒＲＮＡ基因型。结合ｃｔｘＡ探针检测结果，认为我国流行的Ｏ１３９霍乱弧菌有两种类型，与印度、孟加拉国分离的菌株不尽相同。本文首次报导，通过１６ＳｒＲＮＡ基因检测，可区分Ｏ－１群埃尔托型霍乱弧菌与Ｏ１３９霍乱弧菌，并建议将ｃｔｘＡ、１６ＳｒＲＮＡ两个基因作为确定Ｏ１３９霍乱弧菌分子流行病学特征的指标。     

耐四环素非O1群O139霍乱弧菌的报告

耐四环素非Ｏ１群Ｏ１３９霍乱弧菌的报告李端，熊元甫（南昌市卫生防疫站，江西南昌３３０００６）非Ｏ１群Ｏ１３９霍乱弧菌国内外的报道均对四环素敏感，我们分离出一株耐四环素的菌株。１病原学检查某腹泻病人粪便，进行霍乱弧菌分离培养。结果检出１株革兰阴性弧菌，...     

O139群霍乱弧菌药物敏感性检测

为了解O１３９群霍乱弧菌耐药性情况,为防治用药提供参考,我们对本地区４株O１３９群霍乱弧菌进行了药物敏感性检测,现将结果报告如下：１材料与方法１．１菌株来源４株O１３９群霍乱来自本院分离株,经中国预防医学科学院流行病研究所鉴定,含有霍乱毒素等相关的毒力基因。１．２药敏纸片环丙沙星等,２０种药敏试纸片（北京天坛药物生物技术开发公司）,在有效期内使用。１．３培养基（１）庆大霉素琼脂（中国预防医学科学院流行病学微生物研究所）,批号：９９１０２０;（２）碱性蛋白胨琼脂（杭州微生物试剂厂）,批号：２００１…     

抗O／129的非O1群霍乱弧菌分子生物学特征研究

为了从遗传学基础上，探索抗Ｏ／１２９的非Ｏ１群霍乱弧菌的基因结构的特点，即对１９９２～１９９４年从肠道门诊急性腹泻患者粪便中分离到的２１株抗Ｏ／１２９的非Ｏ１群霍乱弧菌的分子生物学特性进行了研究。结果显示：染色体ＤＮＡ经核酸限制性内切酶ＰｓｔＩ消化后，用琼脂糖凝胶电泳分离ＤＮＡ，全部菌株表现为多样化特征的限制性酶谱；用Ｄｉｇ标记的基因探针做ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交，无一株菌具有Ｏ１群霍乱弧菌流行株所具有的ＣＴ毒素基因；质粒图谱分析，仅有６株菌各含有一条质粒带，而且这６株菌同时对３～８种临床常用抗生素耐药，表明该菌株对Ｏ／１２９的抗性是非质粒性的。结果表明，抗Ｏ／１２９的非Ｏ１群霍乱弧菌与Ｏ１群霍乱弧菌非流行株具相似的遗传学特性和毒力特征，因而，它不是引起霍乱暴发的病原体。     

急性腹泻患者粪便中分离出抗O／129的非O1群霍乱弧菌

从临床急性腹泻患者的粪便标本中分离到非Ｏ１群霍乱弧菌１７５株，检出率为５．１３％，其中有１７株（９．７１％）具有抗１０μｇ和１５０μｇ二氨基二异丙基喋啶磷酸盐（Ｏ／１２９）的作用。试验表明：该１７株抗Ｏ／１２９的非Ｏ１群霍乱弧菌其Ｏ抗原分属于ＶＢＯ２、３、４、７、８和１０型；并与抗霍乱弧菌鞭毛单抗ＳＰＡ制剂凝集；对氟哌酸等７种临床常用药物１００％敏感，对ＴＭＰ－ＳＭＺ１００％耐药。     

急性腹泻患者粪便中分离出抗O／129的非O1群霍乱弧菌

从临床急性腹泻患者的粪例标本中分离到非Ｏ１群霍乱弧菌１７５株，检出率为５．１３％，其中有１７株（９．７１％）具有抗１０μｇ和１５０μｇ二氨基二异丙基喋啶磷酸盐（Ｏ／１２９）的作用。试验表明：该１７株抗Ｏ／１２９的非Ｏ１群霍乱弧菌其Ｏ抗原分属于ＶＢＯ２、３、４、７、８和１０型，并与抗霍乱弧菌鞭毛单抗ＳＰＡ制剂凝集；对氟哌酸等７种临床常用药物１００％敏感，对ＴＭＰ－ＳＭＺ１００％耐药。．     

抗O／129的非O1群霍乱弧菌分子生物学特征研究

为了从遗传学基础上，探索抗Ｏ／１２９的非Ｏ１群霍乱弧菌的基因结构的特点，即对１９９２～１９９４年从肠道门诊急性腹泻患者粪便中分离到的２１株抗Ｏ／１２９的非Ｏ１群霍乱弧菌的分子生物学特性进行了研究，结果显示，染色体ＤＮＡ经核酸限制性内切酶ＰｓｔＩ消化后，用琼脂糖凝胶电泳分离ＤＮＡ，全部菌株表现为多样化特征的限制性酶谱，用Ｄｉｇ标记的基因探针做ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交，无一株菌具有Ｏ１群霍乱弧菌流     

从腹泻患者粪便中分离出霍乱弧菌

从腹泻患者粪便中分离出霍乱弧菌建美，罗兰，陈冬梅，钟发，陈景文，陈求刚，陈菊香我院１９９４年７～９月从某地急性腹泻患者粪便中分离出霍乱弧菌７株，其中６株为Ｏ１群霍乱弧菌小川型，均属埃尔托生物型；另１株为非Ｏ１群Ｏ１３９霍乱弧菌。与广州市防疫站复查结果...     

产色素O139群霍乱弧菌环境分离株的亲缘关系分析

目的 筛检霍乱弧菌O139血清群产褐色色素的环境分离菌株并分析其遗传近缘关系。 方法 在LBA平板上检测了1992-2010年分离保存的全国1530株O139群霍乱弧菌的色素产生能力,对其中能够产生水溶性褐色色素的菌株的马尿酸氧化酶基因VC1345进行测序,并用脉冲场凝胶电泳(PFGE)、多基因序列分型分析色素产生菌株之间的亲缘关系。 结果 筛选到不同年份不同地区的16株产色素的非产毒O139群菌株。所有的色素产生菌株具有完全一致的VC1345基因、相似的PFGE带型,多基因序列分型显示仅有2种型别。 结论 分离到的O139群产色素菌株来源于近缘的克隆群,而这些菌株之间已存在一定程度的变异。在水体中的持续存在显示其较强的环境生存能力,这些特征提示在霍乱弧菌的环境监测中需提高对这类菌株的关注。     

非O1/O139群霍乱弧菌:流行、致病因子和耐药

非O1/O139群霍乱弧菌引起的腹泻在许多发展中国家都有发生,其流行涉及到多个血清群。在有些地方,非O1/O139群霍乱弧菌腹泻的发病率甚至超过了O1/O139群霍乱弧菌腹泻的发病率。非O1/O139群霍乱弧菌的致病因子多种多样,肠毒素、蛋白酶、溶血素和三型分泌系统等被认为是重要的致病因子,但其致病机制非常复杂,至今仍然不完全清楚。随着抗生素使用的增加,出现了许多耐药甚至多重耐药菌株。本研究从非O1/O139群霍乱弧菌腹泻的流行情况、致病因子以及耐药方面加以综述。     

2005-2014年上海市O139群霍乱弧菌的分子特征和耐药性研究

目的 分析2005-2014年上海市O139群霍乱弧菌的分子特征和耐药性。方法 以聚合酶链反应(PCR)方法检测86株O139群霍乱弧菌的霍乱毒素基因(ctxA)、溶血素基因(hlyA)、毒素协调菌毛基因(tcpA)、调控蛋白基因(toxR)和编码霍乱毒素基因的CTX基因组基因(zot、ace)。采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)和多位点序列分型(MLST)方法对O139群霍乱弧菌菌株进行分子分型。采用WHO推荐的改良K-B纸片法,对O139群霍乱弧菌菌株进行11种抗菌药物(头孢曲松、强力霉素、诺氟沙星、环丙沙星、复方新诺明、丁胺卡那霉素、四环素、氯霉素、萘啶酸、氨苄西林、庆大霉素)敏感试验。结果 患者来源O139群霍乱弧菌菌株93.2%(41/44)为产毒株,水产来源菌株58.3%(21/36)为产毒株,6株水体来源菌株均为非产毒株。PFGE分析将O139群霍乱弧菌分为35个型别。MLST分析将O139群霍乱弧菌分为9个ST型,其中流行菌型为ST 69型,非产毒株以ST 162型为主。86株O139群霍乱弧菌经药物敏感试验分析显示O139群霍乱弧菌产毒株的耐药情况比非产毒株严重。O139群霍乱弧菌产毒株对强力霉素、复方新诺明、四环素、萘啶酸、氨苄西林、庆大霉素的耐药率高。O139群霍乱弧菌非产毒株对萘啶酸耐药严重。结论 上海市患者和水产来源O139群霍乱弧菌构成以产毒株为主。PFGE分型提示水产为霍乱疫情的主要传染源。O139群霍乱弧菌产毒株高度克隆化,流行菌型为ST 69型,耐药情况严重。     

2018-2021年湖南省人源非O1/非O139群霍乱弧菌药物敏感性及基因组特征

目的 了解2018—2021年间湖南省从病例分离到的非O1/非O139群霍乱弧菌的药物敏感性及基因组特征。方法 选取2018—2021年间湖南省腹泻病例肠道标本分离的非O1/非O139群霍乱弧菌分离株4株和非腹泻病例血液标本分离的非O1/非O139群霍乱弧菌分离株3株,进行药物敏感性测试以及基因组序列测定,分析其药物敏感性及基因组特征。结果 3株血液样品分离株对氨苄西林、诺氟沙星、头孢曲松、美罗培南、米诺环素、复方磺胺甲恶唑、庆大霉素、头孢噻肟、萘啶酸、环丙沙星全部敏感,1株对四环素中介,1株对氯霉素耐药;4株粪便样品分离株对诺氟沙星、头孢曲松、美罗培南、米诺环素、复方磺胺甲恶唑、庆大霉素、头孢噻肟全部敏感,1株对四环素、氯霉素中介,1株对氯霉素耐药,2株对氨苄西林、环丙沙星、萘啶酸耐药;其中1株对氨苄西林、萘啶酸、环丙沙星二重耐药;1株对氨苄西林、萘啶酸、环丙沙星、氯霉素多重耐药。7株非O1/非O139群霍乱弧菌的基因组序列表现出明显的多样性,但是部分菌株在核心基因组和泛基因组都高度相似。基因组序列中均未检出ctxAB基因、VPI-1和VSPII基因组岛。分离自粪便的菌株携带耐药基因...     

广东省霍乱病例与环境来源霍乱弧菌的

目的比较分析广东省霍乱病例及环境来源O1/O139群霍乱弧菌抗生素敏感性和分子分型特征。方法选取2006-2007年广东省霍乱病例及相关来源、环境（珠江水体和海水产品）来源的O1/O139群霍乱弧菌。采用血清学、药物敏感性试验和分子生物学方法,研究不同来源的霍乱弧菌在菌型分布、药物敏感性、毒素基因携带以及分子分型方面的异同。结果2006-2007年,广东省共分离各类来源O1/O139群霍乱弧菌170株。其中,病例及相关来源菌株37株,环境来源菌株133株（海水产品来源37株、珠江水体96株）。两种来源菌株的菌型构成均以O1群El Tor稻叶型为主;病例及相关来源菌株以产毒株为主,ctxA毒素基因携带率（83.8%）显著高于环境菌株（4.5%）;药物敏感性试验显示,以产毒株为主的病例及相关来源菌株对萘啶酸和复方新诺明的耐药率（78.8%,78.8%）高于以非产毒株为主的环境来源菌株（50.6%,13.9%,P0.05）。环境来源菌株对多西环素的耐药率（17.7%）高于病例及相关来源菌株（0%,P0.05）。O139群菌株对氨苄西林的耐药率（70%）高于稻叶型和小川型菌株（8.9%,0%,P0.01）。脉冲场凝胶电泳（PFGE）聚类分析显示,O139群霍乱弧菌产毒株之间,O1群霍乱弧菌流行株之间以及其他的O1/O139群霍乱弧菌之间,PFGE型别表现为明显的遗传多样性。结论广东省O1/O139群霍乱弧菌来源复杂多样,霍乱防控形势严峻,需要密切注意菌株型别变异情况及菌株变异趋势。     

临床分离非O1/O139群霍乱弧菌毒力及耐药特征分析

目的 了解临床分离的非O1/O139群霍乱弧菌毒力及耐药特征。方法 收集2014-2015年北京友谊医院4-10月肠道门诊分离到的非O1/O139群霍乱弧菌,采用微量肉汤稀释法检测霍乱弧菌对15种抗生素的耐药性;PCR检测霍乱弧菌的毒力相关基因。结果 35株非O1/O139群霍乱弧菌对复方新诺明的耐药率(40.0%)最高,其次是氯霉素(28.5%)和磺胺异恶唑(22.6%),对阿莫西林/克拉维酸、头孢曲松、头孢西丁、头孢吡肟及亚胺培南完全敏感。毒力基因检测显示所有菌株均携带hlyA和ompU,hapA(97.1%)、rtxA(91.4%)、Ⅵ型分泌系统T6SS(94.3%~97.1%)、Ⅲ型分泌系统T3SS(80.0%~85.7%)和nanH(62.9%)阳性率较高;主要的毒力基因型为hlyA-rtxA-hapA-ompU-nanH-vasA-vasK-vasH-vcsC-vcsV-vcsN-vspD(40.0%)。结论 临床分离非O1/O139群霍乱弧菌毒力基因多样化,对抗菌药物耐药性较高,需加强腹泻病例中非O1/O139群霍乱弧菌的毒力及耐药监测。     

2000-2021年江西省O1群和O139群霍乱弧菌非产毒株基因组学研究

目的 分析2000—2021年江西省O1群和O139群霍乱弧菌非产毒株的基因组变异特征。方法 使用基因组重测序技术获得菌株的基因组精细图,使用IQ-tree构建基于核心基因组单核苷酸多态性（SNP）的遗传系统发生树,使用脉冲场凝胶电泳（PFGE）研究密切相关菌株的差异,使用最小抑制浓度（MIC）测定菌株的抗生素敏感性。结果 江西省的O1群和O139群霍乱弧菌非产毒株基因组多态性较引起霍乱流行和大流行的产毒株高,其中部分O1群霍乱弧菌非产毒株携带耐药质粒,表现出对多种抗生素的敏感性降低。结论 O1群和O139群霍乱弧菌的基因组多态性高,应该密切关注携带多耐药质粒的霍乱弧菌非产毒株。     

甲鱼及养殖水中5株带毒力基因O1群霍乱弧菌的分离与鉴定

目的监测杭州市江干区水产品中O1群和O139群霍乱弧菌并对分离菌株进行病原学鉴定及分子分型。方法按《霍乱防治手册》第5版对51份样品进行霍乱弧菌分离与鉴定。运用改良Kirby-Bauer纸片法和PCR检测5株霍乱弧菌对14种临床常用抗生素的敏感性及是否携带ctxA和tcpA毒力基因,并用脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行分子分型。结果从51份样品中检出O1群霍乱弧菌5株,其中小川型4株,稻叶型1株。5株霍乱弧菌的ctxA和tcpA毒力基因结果均为阳性。5株菌株对11种抗生素敏感,对红霉素和利福平中介,稻叶型菌株对氨苄西林敏感,小川型菌株对其耐药。PFGE分为两型,两型间仅有一条带的差异。结论本次分离的5株O1群霍乱弧菌均携带ctxA和tcpA毒力基因,故有必要加强对水产品尤其是甲鱼的监测及管理。     

2018年北京市O1群霍乱弧菌表型及分子分型特征分析

目的了解2018年北京市O1群霍乱弧菌表型及分子分型特征。方法2018年收集北京市霍乱患者和外环境分离的29株霍乱弧菌,应用常规鉴定方法进行血清分型,荧光定量PCR检测霍乱弧菌ctxAB基因,应用96孔微量肉汤稀释法进行药物敏感试验（11类21种试验药物）,应用NotⅠ及ShifⅠ酶切进行脉冲场凝胶电泳（PFGE）分子分型。结果29株O1群霍乱弧菌中小川型非产毒株、稻叶型非产毒株和小川型产毒株构成比分别为62.07%（18/29）、24.14%（7/29）和13.79%（4/29）;29株菌头孢唑林耐药率最高82.76%,美罗培南敏感率100.00%;28株菌耐药;有9种耐药型别,最多耐13种药;有13种耐药类别,最多耐7类药;29株菌株PFGE分子分型为16个型别（BJ1801 ~ 1816）。结论北京市O1群霍乱弧菌以非产毒株为主,多重耐药严重;PFGE分子分型结果提示应注意食品安全问题,特别要加强水产品的监测。     

Distribution and content of class 1 integrons in different Vibrio cholerae O-serotype strains isolated in Thailand

In this study, 176 clinical and environmental Vibrio cholerae strains of different O serotypes isolated in Thailand from 1982 to 1995 were selected and studied for the presence of class 1 integrons, a new group of genetic elements which carry antibiotic resistance genes. Using PCR and DNA sequencing, we found that 44 isolates contained class 1 integrons harboring the aadB, aadA2, blaP1, dfrA1, and dfrA15 gene cassettes, which encode resistance to gentamicin, kanamycin, and tobramycin; streptomycin and spectinomycin; beta-lactams; and trimethoprim, respectively. Each cassette array contained only a single antibiotic resistance gene. Although resistance genes in class 1 integrons were found in strains from the same epidemic, as well as in unrelated non-O1, non-O139 strains isolated from children with diarrhea, they were found to encode only some of the antibiotic resistance expressed by the strains. Serotype O139 strains did not contain class 1 integrons. However, the appearance and disappearance of the O139 serotype in the coastal city Samutsakorn in 1992 and 1993 were associated with the emergence of a distinct V. cholerae O1 strain which contained the aadA2 resistance gene cassette. A 150-kb self-transmissible plasmid found in three O1 strains isolated in 1982 contained the aadB gene cassette. Surprisingly, several strains harbored two integrons containing different cassettes. Thus, class 1 integrons containing various resistance gene cassettes are distributed among different V. cholerae O serotypes of mainly clinical origin in Thailand.