羊心脏束细胞-心肌细胞演化系观察

目的:观察羊心室内膜下层束细胞演化形成心肌细胞的动态过程.方法:12只山羊取心脏后,常规石蜡切片,HE染色,光学显微镜观察.结果:正常成体羊心室内膜下Ⅰ型束细胞分裂增生为Ⅱ型束细胞团或心肌生成单位.生成单位经横向与纵向2种方式,演化形成蒲肯野纤维和工作心肌细胞;部分Ⅰ型束细胞经Ⅱ型束细胞直接演化为工作心肌.结论:正常成体羊心室传导心肌和工作心肌属同-细胞演化系,羊心室心肌主要来源于束细胞-心肌细胞演化系.     

羊心室心肌细胞动力学观察

目的:探讨成体羊心室心肌细胞增殖与死亡的方式及规律.方法:12只山羊取心脏后,常规石蜡切片,HE染色,光学显微镜观察.结果:正常成体羊心室心肌细胞,包括工作心肌细胞和传导心肌细胞,均可见明显的无丝分裂相和细胞死亡特征.结论:正常成体羊心室心肌细胞存在增生和死亡的动力学过程,且羊心室心肌细胞增殖的主要方式是无丝分裂.     

液态心肌细胞外基质心肌内注射联合应用地塞米松改善大鼠急性心肌梗死后心功能的实验研究

目的研究液态心肌细胞外基质心肌内注射联合应用地塞米松对大鼠急性心肌梗死后心功能的改善情况。方法制备液态心肌细胞外基质,结扎雄性Wistar大鼠冠状动脉左前降支制作急性心肌梗死模型,将制备成功的大鼠模型随机分为4组：Ⅰ组为液态心肌细胞外基质加地塞米松组（n=20）;Ⅱ组为液态心肌细胞外基质组（n=20）;Ⅲ组为地塞米松组（n=20）;Ⅳ组为生理盐水对照组（n=20）,并对各组予以相应处理。在大鼠心梗后6周用超声心动图评价各组动物的心功能,而后将动物处死取出心脏,用组织学及形态学方法观察各组动物心室重构的差异。结果液态心肌细胞外基质加地塞米松组大鼠心功能及心室重构情况优于其他各组。结论液态心肌细胞外基质心肌内注射联合应用地塞米松对大鼠急性心肌梗死后的心功能有明显的改善作用。     

钙调素对培养的大鼠心肌细胞自发性搏动及增殖活性的作用

目的:观察钙调素(CaM)对培养的心肌细胞收缩功能及增殖活性的作用.方法:以培养Wistar大鼠乳鼠心室肌细胞为靶系统,观察不同含量CaM对心肌细胞自发性搏动及心肌细胞增殖活性的影响.结果:CaM能显著提高心肌细胞的自发性搏动,3H-TdR掺入CPM值明显增高,但无剂量依赖性.结论:CaM能促进心肌细胞增殖,提高心肌细胞对钙离子的摄取.     

核素心肌断层显像对肺心病患者左右心室形态学的研究

核素心肌断层显像对肺心病患者左右心室形态学的研究首都医学院附属北京红十字朝阳医院核医学科郑柏洁，张金谷，王铁，武秀朵核素心肌断层显像既能了解心室壁厚度，又能观察心腔的大小，对心脏的形态学研究很有价值。既往心肌断层显像多在诊断冠心病方面应用，而对慢性肺...     

黄芪对体外培养心肌细胞保护作用的实验研究

目的：观察黄芪对体外培养的缺糖缺氧损伤心肌细胞的保护作用。方法：心肌细胞原代单层培养，观察心肌细胞形态学变化、细胞生化数据的改变以及超微结构形态学的变化。结果：药物组与药物对照组的心肌细胞内上述细胞损伤变化均得到明显恢复。结论：黄芪对体外培养的缺糖缺氧心肌细胞具有明显的保护作用。     

玄参水提物对心室重构大鼠心肌纤维化的影响

目的探讨玄参对心室重构大鼠心肌纤维化的影响及其作用机制。方法腹主动脉缩窄法制备大鼠心室重构模型。8周药物干预后,测定大鼠左室及全心肥厚指数(LVWI、HWI);紫外分光光度法测心肌羟脯氨酸的量(hydroxproline,Hyp);病理切片HE染色观察心肌细胞横断面面积;RT-PCR测定心肌组织转化生成因子β1基因(TGF-β1mRNA)表达水平。结果玄参水提液能降低心肌肥厚指数、羟脯氨酸量,减小左心室心肌细胞的横断面面积;显著降低TGF-β1mRNA表达水平。结论玄参水提液对心肌细胞和间质胶原重构两方面都有显著的抑制作用,抗心室重构的作用机制与抑制TGF-β1mRNA表达有关。     

干细胞移植治疗心肌梗死

心肌梗死使心肌细胞大面积死亡,久之坏死的心肌组织 由疤痕组织代替,周围正常心肌细胞代偿性肥大,导致心室 重构并最终发展成为心力衰竭。现行的药物、介入和手术治 疗因无法修复坏死心肌而对心室重构疗效不佳。研究人员 发现,自然条件下干细胞能够修复损伤心肌和血管组织[1,2]     

骨髓间充质干细胞体内诱导分化为心肌细胞的初步实验观察

目的：初步观察MSCs墨体内诱导分化为心肌细胞的能力。方法：从大鼠双侧股骨骨髓获得MSCs，在体外纯化、扩增后，DAPI进行细胞标记，然后注射到急性心肌梗塞模型鼠和正常大鼠的心肌组织内，饲养2～4周后，处死动物在注射点获取心肌标本，初步采用肛染色和电镜观察形态学的方法对分化的心肌细胞进行鉴定，并用免疫组化法从组织学上对转化心肌细胞进行心肌特异性抗原的检测。结果：MSC进行DAPI的标记效率高，电镜观察与宿主心肌细胞问形成了闰盘，组化检测有心肌特异性抗原的出现。结论：在宿主心肌组织内，MSCs具有分化为心肌细胞的能力。     

一种适用于膜片钳研究的豚鼠心室肌细胞急性分离方法

目的 获得适用于心肌细胞膜片钳研究的单个心室肌细胞.方法 应用酶消化和机械分离的方法分离出生25～30 d的豚鼠心室肌细胞,从形态学及电生理学方面鉴定急性分离的豚鼠心室肌细胞活性,在电镜下观察活性较好的豚鼠心室肌细胞形态学特点,并选用活性较好的单个心室肌细胞进行膜片钳钳制,记录心室肌细胞Ik电流.结果 形态学方面:活性...     

99mTc-MIBI心肌灌注断层显像与冠状动脉造影的对比研究

目的　探讨99mTc-甲氧基异丁基异腈 (MIBI)心肌灌注断层显像对冠心病的诊断价值。方法　 34例99mTc -MIBI心肌灌注断层显像与冠状动脉造影 (CAG)结果进行对比。结果　99mTc-MIBI心肌灌注断层显像对冠心病诊断的敏感性为 91.7%,特异性为 80 .0 %。对右冠状动脉、左冠状动脉前降支和左冠状动脉回旋支的诊断阳性率分别为 85 .7%、92 .3%和 71.4%,总的阳性预测值为 91.7%,阴性预测值为 80 .0 %。结论　99mTc -MIBI心肌灌注断层显像对冠心病的诊断有较大价值。     

原代心肌细胞培养

目的:探讨SD大鼠乳鼠心肌细胞的分离及培养方法,并进行形态学观察。方法:取出生1～3 d的SD大鼠的乳鼠,胰蛋白酶和Ⅱ型胶原酶分别消化心肌组织,差速贴壁法分离心肌细胞,并加入适量BrdU纯化心肌细胞,显微镜下观察心肌细胞形态及纯度。结果:成功分离培养心肌细胞并观察其形态,计算存活率92%,纯度90%,2～3 d出现同步搏动。结论:胰蛋白酶联合Ⅱ型胶原酶消化可分离存活率较高的心肌细胞,用差速贴壁法并加入适量BrdU可纯化心肌细胞,使细胞搏动良好。     

室间隔缺损儿童心房胶原的组织学和数字图像分析

目的　探讨正常和室间隔缺损儿童心房胶原纤维的分布及其含量。方法　应用Mas son染色及数字图像分析方法 ,光镜观测 6例正常和 12例室间隔缺损儿童心房胶原纤维网络构筑。结果　 (1)正常心房心肌细胞周围有较细的胶原纤维膜 ,彼此连接成蜂窝状。粗的胶原纤维包绕着若干个心肌细胞 ,分割形成心肌细胞群 ,细纤维以粗纤维为支架 ,编织成纤细的胶原网。(2 )室间隔缺损儿童心房胶原纤维的形态构筑与正常基本相似 ,但部分区域胶原纤维发生重排、消失或出现大量的不规则斑块及团块。 (3 )数字图像分析表明 ,室间隔缺损组胶原纤维的含量均较正常明显增多 (P <0 .0 1)。结论　室间隔缺损儿童心房胶原纤维部分区域明显改变 ,含量显著增加。     

一种高成活率培养大鼠原代心肌细胞的方法

【目的】探讨原代心肌细胞培养的条件和方法。【方法】取新生1～3d的SD大鼠心室肌,O．25％胰蛋自酶-0．02％EDTA消化后,培养于DMEM—F12培养液中,用差速贴壁法和化学抑制法相结合去除非心肌细胞。倒置显微镜下观察形态学变化,透射电镜观察细胞超微结构。【结果】培养的心肌细胞平均存活率（96．33±6．73）％,培养第4天细胞搏动率达（95．3±9.2）％,并出现单层同步搏动,具有典型的心肌细胞形态特征。【结论】本研究的心肌细胞培养方法操作简便,成活率高,是一种较为理想的原代心肌细胞培养方法。     

膜片钳技术研究中钙耐受的心室肌细胞分离方法

目的：探索并建立适合于膜片技术研究的心室肌细胞急性酶分离方法。方法：采用改进的自制的Langendorff心脏灌流系统,用无钙Tyrode液和酶解液逆行主动脉灌流之后,分次剪取心肌组织置于细胞保存液（KB液）中保存以供全细胞膜片钳方式记录膜电位和膜电流。结果：分离所得80%-90%的细胞呈杆状,边缘清楚,表面光滑,纹理清晰,可记录到典型的动作电位。结论：控制好分离心室肌细胞的实验条件以及熟练掌握实验操作的方法,是分离出适合于膜片钳实验的心室肌细胞的重要因素。     

HSV1-tk报告基因显像活体监测骨髓间充质干细胞移植治疗心肌梗死

目的:通过移植转染HSV1-tk报告基因的BMSCs至大鼠心肌梗死模型,探索报告基因显像用于活体监测移植BMSCs治疗心肌梗死的可行性。方法:采用MOI=100的Ad5-HSV1-tk转染BMSCs后,对BMSCs活性和分化能力进行鉴定。结扎大鼠冠状动脉建立心肌梗死模型并鉴定。采用Ad5-HSV1-tk体外转染BMSCs(3×106个细胞),随后移植到大鼠心肌梗死模型的左心室下壁心肌后,采用Micro PET/CT成像(18F-FHBG)进行活体监测移植干细胞。对完成显像研究后的心肌组织进行相关体外分析。结果:采用腺病毒作为载体将HSV1-tk转入BMSCs后,干细胞的形态及流式表面抗原特征没有改变。随后将BMSCs移植到心肌梗死大鼠模型左心室下壁,成功采用18F-FHBG Micro PET/CT显像在心脏移植区域获得了干细胞的特异性影像,大鼠心脏区域18F-FHBG摄取为(0.413±0.128)%ID/g;对照大鼠心脏区域18F-FHBG摄取仅为(0.017±0.003)%ID/g。随后体外分析证实HSV1-tk基因在BMSCs中正确表达。结论:移植在心肌梗死大鼠模型的BMSC可以通过放射性核素显像技术进行在体示踪,HSV1-tk报告基因可以用于活体监测移植干细胞治疗心肌梗死。     

刺五加叶皂苷对急性心肌梗塞大鼠心室重构的作用

目的：通过大鼠急性心肌梗塞心室重构模型观察刺五加叶皂苷（ASS）对急性心肌梗塞大鼠心室重构的作用。方法：大鼠结扎左冠状动脉前降支造成急性心肌梗塞心室重构模型，同时应用ASS，给药4周后测定心室重构大鼠血液动力学、生化学及形态学参数。 结果： ASS对急性心肌梗塞心室重构大鼠，能明显升高左心室内压最大上升和下降速率（±dp/dtmax）及其校正值（±dp/dtmax/LVSP），降低左心室舒张末压（LVEDP），亦能明显降低左心室容积(LVV)、左心室长轴(LVLA)长度、左心室短轴(LVSA)长度、左心室绝对重量(LVAW)、左心室相对重量(LVRW)，但对右心室绝对重量(RVAW)、右心室相对重量(RVRW)、心率(HR)、左心室收缩压（LVSP）、平均动脉压（MAP）及体重(BW)均无明显影响。ASS可明显降低血清脂质过氧化物 (LPO)及心肌血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和肾上腺素(E) 含量，提高超氧物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。 结论：ASS能有效抑制急性心肌梗塞大鼠的心室重构。     

低分子RNA与高三尖杉酯碱联用对白血病细胞系HL-60细胞作用的实验观察

目的:研究低分子RNA与抗白血病药物高三尖杉酯碱联用对HL-60细胞药物敏感性的影响。方法:采用细胞形态学观察、四唑盐(MTT)比色法分析细胞增殖以及应用凯氏定氮法测定细胞蛋白质的含量。结果:①0.05~50μg/ml高三尖杉酯碱对HL-60细胞增殖有抑制作用,并与时间和剂量相关。②低分子RNA与高三尖杉酯碱联用能显著降低HL-60细胞的增殖率,并进一步降低细胞内蛋白质的合成。结论:低分子RNA能提高HL-60细胞对白血病药物高三尖杉酯碱的敏感性,两者联用能有效抑制白血病细胞系HL-60细胞的增殖。