白血病患者骨髓中CTGF、CYR61、VEGF-C、VEGFR-2mRNA、蛋白的表达及其临床相关性研究

本研究旨在探讨白血病患者骨髓单个核细胞中结缔组织生长因子（CTGF）、富含半胱氨酸蛋白61（CYR61）、血管内皮生长因子-c（VEGF—C）和血管内皮生长因子受体-2（VEGFR-2）mRNA及蛋白的表达水平以及它们在白血病发生、发展、浸润转移中的作用和临床意义。初发白血病100例患者,26例完全缓解后急性白血病患者,30例对照者纳入本研究。收集骨髓单个核细胞,应用realtimePCR和Westernblot分别检测白血病患者及对照者CTGF、CYR61、VEGF-C、VEGFR-2mRNA及蛋白的表达水平。结果表明,急性白血病患者骨髓中上述4种因子mRNA、蛋白水平明显高于对照组（P〈0．05）。急性白血病缓解后只有CTGFmRNA表达与对照组比较有差异（P〈0．05）,且CTGFmRNA表达在急性白血病不同骨髓增生中有统计学意义（P〈0．05）。CTGF蛋白表达在白血病不同染色体核型组有差异（P〈0．05）,CYR61和VEGF—C蛋白表达在急性白血病不同程度骨髓增生组中比较差异有统计学意义（P〈0．05）。CML组CTGF、CYR61、VEGF—CmRNA和蛋白表达高于对照组（P〈0．05）,CLL组CTGF和CYR61蛋白表达水平高于对照组。在性别、髓外浸润等因素分组比较中,上述4种因子mRNA和蛋白表达水平比较均无差异有统计学意义（P〉0．05）。在相关性分析中,白血病患者上述4种因子mRNA表达水平与骨髓原始细胞计数呈正相关（P〈0．05）,CTGF、CYR61、VEGF—C蛋白表达水平与其呈正相关（P〈0．05）。除了VEGFR-2与骨髓原始细胞计数无相关性外,这些因子的mRNA及蛋白表达水平与骨髓原始细胞计数呈正相关。结论：CYR61、CTGF、VEGF-C和VEGFR-2mRNA和蛋白表达在急慢性白血病中都有作用。在急性白血病（AML／ALL）中上述4种因子高表达,在CML中除了VEGFR-2外其他因子也高表达,多数因子的表达与骨髓原始细胞计数呈正相关。联合阻断这些相关的血管性因子可能对白血病靶向治疗有重要作用。     

c-IAP2与Smac基因在白血病中的表达及其临床意义

为了研究c-IAP2及其拮抗素Smac基因在白血病中的表达及对成人急性白血病（AL）患者的预后意义，采用半定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测103例白血病患者c-IAP2、Smac的mRNA表达水平，20名健康人为正常对照，K562、Kg-1a细胞株为阳性对照。结果表明：c-IAP2、Smac在初治AL中的表达较正常对照组明显升高，两者的表达为高度正相关，治疗缓解后c-IAP2、Smac的表达明显下降，与初治AL组有明显差异（P〈0．05），复发后c-IAP2、Smac基因的表达又复升高。c-IAP2 mRNA和Smac mRNA在慢性粒细胞性白血病慢性期（CML-CP）组的表达率和表达水平均高于正常对照组，但无统计学意义（P〉0．05）。在初治AL患者中，c-IAP2、Smac表达阳性的患者缓解率均低于表达阴性的患者。结论：c-IAP2 mRNA、Smac mRNA过度表达和急性白血病的发病呈正相关；c-IAP2、Smac高表达的患者完全缓解率低，预后不良；c-IAP2、Smac可作为急性白血病的发病、复发及预后判断的指标之一。     

ERK和P38信号转导途径对慢性髓系白血病细胞周期的调控作用

本研究探讨ERK和P38信号转导途径对慢性髓系白血病（CML）细胞周期的调控作用。以RT-PCR、Western blot和FCM方法分别检测CML患者白血病细胞和K562细胞中ERK、p38、cyclin D2、cyclin E、p27的mRNA表达及蛋白表达（其中ERK和P38为磷酸化ERK和磷酸化P38）及细胞周期分布,并分析其相关关系。结果表明：CML患者白血病细胞和K562细胞中ERK、P38、cyclin D2、cyclin E的mRNA表达和蛋白表达增高,P27的表达降低,且cyclin D2蛋白表达与cyclin E、ERK和P38蛋白表达呈正相关（P〈0.01）,与P27蛋白表达呈负相关（P〈0.01）。G0/G1期细胞减少,S期细胞增多,与对照组相比有显著性差异。结论：CML中P38、ERK mRNA表达和活性增加,激活下游的cyclin D2、cyclin E和P27等细胞周期调控因子,致使G0/G1期缩短,细胞快速通过G1/S转换点进入S期,加速细胞周期进程和细胞增殖,导致CML的发生。     

抑癌基因pten在骨髓增生异常综合征及急性髓系白血病的表达

为了研究pten基因在骨髓增生异常综合征（MDS）、急性髓系白血病（AML）患者中的表达及其意义，采用逆转录．聚合酶链反应（RT—PCR）和免疫印迹杂交（Western blot）方法检测Jurkat细胞株、35例MDS、45例AML及20例正常人骨髓有核细胞中pten mRNA及其蛋白的表达。结果表明：pten mRNA在阴性对照Jurkat细胞株不表达。MDS组的阳性表达率（77．1％）低于正常对照组（90．0％），但差异无统计学意义（P〉0．05）；AML组阳性表达率（60．0％）低于正常对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）；MDS—RAEB组阳性表达率（70．0％）低于MDS—RCMD组（86．7％），初发／复发AML组阳性表达率（53．3％）低于完全缓解AML组（73．3％），但差异均无统计学意义（p〉0．05）。对各组pten mRNA相对表达量分析发现，MDS及AML组均明显低于正常对照组（P〈0．005）；MDS-RAEB组低于MDS-RCMD组（P〈0．05）；初诊／复发的AML组明显低于完全缓解的AML组（P〈0．001）；MDS组与AML组相比，差异无统计学意义（p〉0．05）。PTEN蛋白表达阳性率在MDS组（65．7％）及AML组（54．8％）均低于正常对照组（90％）（P〈0．05）；MDS—RCMD组（80．O％）与MDS—RAEB组（55．0％）相比，阳性表达率均无统计学意义（P〉O．05），但初诊／复发的AML组（44．4％）与完全缓解的AML组（73．3％）相比，差异有统计学意义（p〈0．05）。结论：pten mRNA在MDS、AML中表达完全缺失并不多见，但表达强度较正常人明显减弱。PTEN蛋白在MDS、AML中阳性表达率低于正常人，且与mRNA表达水平不一致。pten基因的表达异常参与了MDS及AML的发病。     

急性髓系白血病初诊患者β-连环蛋白和周期蛋白D1mRNA的表达及其意义

本研究旨在检测急性髓系白血病（AML）患者β-连环蛋白（beta—catenin）及周期蛋白D1（cyclinD1）mRNA的表达变化,分析其相关性,为探讨Wnt／β联蛋白（Wnt／beta—catenin）通路在AML发病机制中的作用提供理论依据。采用实时荧光定量RT—PCR的方法检测beta—catenin及cyclin D1 mRNA的相对表达水平,分析两者在AML不同亚型及良性血液病患者中的表达变化及相关性。结果表明,AML骨髓单个核细胞（BMMNC）中beta-cateninmRNA的表达水平明显高于良性血液病患者（P〈0．05）,但在AML各亚型之间其表达量无统计学差异（P〉0．05,在AML中存在cyclinD1 mRNA的过度表达,其表达水平明显高于良性血液病组（P〈0．05）,在各亚型间其表达量无统计学差异（P〉0．05）。Beta-catenin与cyclinD1的表达水平在AML-M1、M2、M4中存在显著正相关性（r值分别为0．822,0．627,0．712,P值分别为0．001,0．020,0．002）。结论：在AML患者中存在beta—catenin及cyclin D1的过度表达,且在部分亚型中存在显著相关性;Wnt／beta-catenin通路在AML中被异常激活,很可能是通过该通路下游靶基因cyclinD1的激活,参与白血病细胞的周期紊乱和异常增殖的调节。     

急性白血病病人黏着斑激酶的表达及临床意义

目的观察黏着斑激酶（FAK）在急性白血病（AL）病人白血病细胞中的表达及临床意义。方法采用半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测50例AL病人白血病细胞FAK mRNA的表达水平,以10例健康人作为正常对照。收集病人骨髓细胞,用24h常规培养方法制备染色体,采用R显带技术分析其染色体核型。结果正常对照组FAK mRNA阳性表达率为20.0%,AL病人为66.0%,差异有显著性（χ2=5.49,P〈0.05）。其中急性淋巴细胞白血病（ALL）和急性非淋巴细胞白血病（ANLL）病人FAK mRNA阳性表达率和表达水平均高于正常对照组（P=0.04,χ2=4.44,t=7.98、5.60,P〈0.05）,但ALL和ANLL比较差异无显著性（P〉0.05）。初诊和复发AL病人白血病细胞FAK mRNA阳性表达率和表达水平比较差异无显著性（P〉0.05）,但均高于正常对照组（χ2=9.38,P=0.02,t=8.79、7.58,P〈0.05）。缓解组病人FAK mRNA阳性表达率和表达水平明显低于初诊组和复发组（χ2=10.26,P=0.02,t=4.43、7.82,P〈0.05）,与正常对照组相比差异无统计学意义（P〉0.05）。AL病人异常核型检出组FAK mRNA的表达率和表达水平均明显高于未检出组（χ2=5.82,t=6.72,P〈0.05）。结论 FAK mRNA在AL中存在较高的表达,且与疾病的转归相关,可能为白血病的治疗提供新靶点。     

Cyclin E2和Survivin在急性白血病的表达及其相关性

为了解细胞周期蛋白E2（cyclin E2）和存活蛋白（survivin）在急性白血病中基因表达及两者间的相关性，采用逆转录-聚合酶链反应的方法检测了84例成人急性白血病患者（16例复发患者，60例初治患者和8例持续缓解患者）和20例正常人的cycfin E2和survivin mRNA的表达。结果表明：①cyclinE2在急性白血病中表达的阳性率（70．24％）高于对照组（0％）；survivin在急性白血病中表达的阳性率（72．62％）高于对照组（30％）；②在急性白血病中cyclin E2的表达与survivin的表达呈正相关性，r=0．65；③cyclinE2阳性组缓解率（55．81％）低于cycfin E2阴性组（88．24％），cyclin E2阳性组复发率（41．67％）高于阴性组（20％）；复发组cyclin E2表达率在三组中最高。持续缓解组cyclin E2表达率在三组中最低，④cyclin E2在急性髓系白血病患者表达率（59．32％）低于急性淋巴细胞白血病患者的表达率（96％）；与发病时白细胞计数未见有统计学意义的相关。结论：首次证实cyclin E2在急性白血病中有异常表达，且对临床预后有不良影响；cyclin E2在急性白血病中的表达与survivin有正相关，提示cyclin E2在急性白血病中有可能作为一种微小残留病变的检测指标。     

SALIA及BMI-1在急性白血病中的表达

本研究旨在探讨SALL4及BMI-1基因在急性白血病患者中的表达及其临床意义。运用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）半定量检测62例急性白血病患者和10例对照者（非恶性血液病患者）骨髓细胞中SALL4及BMI-1的mRNA的表达水平。结果表明：①SALL4mRNA在除M3及T—ALL外的急性白血病中均高表达，在髓系白血病中表达显著高于B淋巴细胞白血病（P=0．022，〈0．05）；在对照者中9例不表达，1例低表达；②SALL4 mRNA在初治AL中表达较对照组明显增高，完全缓解组的表达明显下降，与初治组有显著差异（P〈0．05）；复发组的表达也明显增高，且略高于初治组患者（P=0．414）；③BMI-1除在M3型中也高表达外与SALL4的表达规律一致，两者表达呈显著正相关（r=0．684，P〈0．01）。结论：SALIA及BMI-1在急性白血病中异常高表达，影响白血病的发生和发展，它可作为急性白血病的发病、复发及预后判断的可能指标。     

Stathmin1在急性白血病中的表达及意义

本研究探讨stathmin1基因和蛋白在急性白血病初治、复发和缓解患者中的表达及其意义.应用FQ-PCR和Western blot检测25例正常人和76例急性白血病患者外周血细胞中stathmin1 mRNA和stathmin1蛋白的表达水平.结果显示,在正常人体内检测不出stathmin1蛋白表达,其mRNA在正常人体内则低水平表达.急性白血病初治患者stathmin1 mRNA表达高于正常人（P＜0.05）,急性白血病复发者stathmin1 mRNA表达显著高于初治者（P＜0.05）,急性髓系白血病与急性淋巴细胞白血病之间stathmin1 mRNA表达无显著差别（P＞0.05）.急性白血病初治患者stathmin1蛋白表达的阳性率为89％,stathmin1蛋白在急性白血病患者缓解后表达明显下降或不表达,急性白血病复发者stathmin1蛋白表达与初治者无显著差别（P＞0.05）,急性髓系白血病与急性淋巴细胞白血病之间stathmin1蛋白表达无显著差别（P＞0.05）.结论：stathmin1蛋白和mRNA在急性白血病初治及复发患者体内高表达,而在缓解后体内仍有弱表达的患者,具有一定的复发风险,因此stathmin1可能成为判断微残留白血病的一个新的生物学指标.     

白血病患者血清硒、VEGF和sFas水平相关性的初步研究

为了解白血病患者体内具有防癌作用的微量元素硒与促血管新生因子VEGF和凋亡抑制因子sFas的相关性，应用原子荧光法测定白血病患者血清硒浓度，用酶联免疫吸附试验（ELISA）法同步测定血清VEGF和sFas水平，并以直线相关比较硒、VEGF和sFas水平变化的相关性。结果显示：白血病患者硒浓度低于正常人，其中初发和难治／复发组与对照组相比差异有显著性（P〈0.05，P〈0．01）；硒浓度降低尤以难治／复发组明显，与初发组相比亦有显著性差异（P〈0．01）；缓解组与对照组之间差异无统计学意义（P〉0．05）。初发和难治／复发组的VEGF水平明显高于对照组，差异有统计学意义（P〈0．01）；难治／复发组VEGF水平亦显著高于初发组（P〈0．01）；缓解组与对照组无显著性差异（P〉0．05）。初发和难治／复发组的sFas水平明显高于对照组和缓解组（P值均〈0．01），而缓解组与对照组之间无显著性差异（P〉0.05）。白血病患者血清硒浓度与血清VEGF和sFas水平之间均成显著负相关关系（分别为r=-0．529，P〈0．01；r=-0．432，P〈0．01）。血清VEGF与sFas水平之间呈正相关关系（r=0．663，P〈0．01）。结论：硒、VEGF和sFas与白血病细胞耐药有关。硒与VEGF和sFas水平呈显著负相关关系，本研究结果为硒作为化疗辅助用药应用于临床提供了部分实验依据，但仍有待于在更多病例中作系统深入的探索。     

儿童急性髓系白血病WT1基因的实时荧光定量RT-PCR检测及其临床意义

本研究建立实时荧光定量RT-PCR方法检测儿童急性髓系白血病WT1基因(AML)mRNA的表达并探讨其临床意义。采用SYBR G reen I实时荧光定量RT-PCR方法,检测30例初治AML患儿、12例缓解期患儿(30份)、18例复发患儿,30例细胞形态学正常人的骨髓标本中的WT1基因的表达水平,并动态检测20例初治患儿WT1基因的表达。以ABL为内参照,采用2-△△ct法计算其相对表达量。结果表明:①初治AML患儿WT1基因的表达高于正常对照组和缓解组(p<0.001);缓解AML患儿WT1基因的表达与正常对照组的差异无统计学意义(p>0.05);复发AML患儿WT1基因的表达与初治组的差异无统计学意义(p>0.05);②动态监测儿童AML20例显示,初治时W T1高表达,完全缓解后W T1表达水平下降,复发时W T1表达水平明显升高。20例中5例在临床复发前3-7个月表达水平开始上升。③动态检测的20例患儿初治时W T1阳性组和阴性组完全缓解率(CR)、3年总生存率(O S)无显著差异(p>0.05),治疗后第22-30天的W T1阳性组3年O S显著低于阴性组(p<0.05)。结论:SYBR G reen I实时荧光定量RT-PCR方法是一种快速有效,灵敏度高,特异性好的方法。WT1基因在儿童急性AML中表现为促癌基因的作用,WT1基因表达水平的变化有助于疗效评价,微小残留病的检测和预后判断。     

Cyclin B1 and p21cipl在急性白血病中的表达及其相关性研究

细胞周期蛋白（cyclin）B1作为调节细胞进行有丝分裂的正性调节因子,在细胞增殖中起到重要作用.本研究旨在评价cyclin B1在急性白血病（AL）发生、发展中的作用及其对AL患者预后判断的价值.采用流式细胞术对136例初治AL成人患者、10例持续完全缓解（CCR）患者及17例正常人进行cyclin B1、p21^cipl蛋白表达水平检测和细胞周期分布分析;采用RT-PCR测定Cyclin B1、p21^cipl和增殖细胞核抗原（PCNA）mRNA水平.结果显示：136例初治AL患者cyclin B1蛋白表达水平明显高于正常对照组;复发AL患者的cyclin B1表达水平明显高于正常对照组,但低于初治AL患者;缓解AL患者及CCR的AL患者cyclin B1蛋白表达水平与正常对照比较均无显著性差异;所有cyclin B1高表达的AL患者出现非顺序表达（cyclin B1在G1期出现,有些甚至G2期高表达）,cyclin B1与p21^cipl的蛋白表达呈负相关;cyclin B1蛋白表达与其mRNA水平呈正相关;cyclin B1表达与PCNA及细胞增殖指数（PI）表达水平呈正相关;cyclin B1表达水平高的AL患者有较高的缓解率和生存率,但有较高的复发率.结论：本研究首次发现cyclin B1在成人AL患者有过度表达和异常分布,认为cyclin B1与AL发生、发展有关,是影响AL患者预后的因素之一.     

急性白血病患者血浆锌含量变化与多药耐药关系的探讨

【目的】探讨急性白血病（AL）患者血浆锌含量变化与病情及临床疗效的关系。【方法】采用原子吸收分光光度法,检测52例AL患者血浆锌含量及免疫组化法检测化疗后33例AL患者骨髓单个核细胞p-糖蛋白的表达。【结果】①52例AL患者,其中初治未化疗19例血浆锌含量（2．62±1.12μg／mL）较正常对照组（4．28±1．68μg／mL）明显减低（P〈0．01）,化疗后病情缓解16例锌含量（4．66±2．18μg／mL）较难治／复发17例（3．34±0．93μg／mL）明显增高（P〈0．05）,缓解组血浆锌含量较初治未化疗组明显增高（P〈0．01）;②17例难治／复发AI。患者其中15例骨髓单个核细胞P-gP表达阳性细胞率与血浆锌含量呈明显的负相关（r=0．69,P〈0．01）。【结论】①AL患者血浆锌含量变化与病情及临床疗效有关。②AL患者血浆锌含量测定可作为判断病情、疗效及预后指标之一。锌可能参与AL多药耐药的发生。     

急性白血病患者细胞周期蛋白B1表达的临床意义

目的　探讨细胞周期蛋白B1(cyclinB1)在白血病发生、发展中的作用及对成人急性白血病 (AL)预后的判断价值。方法　对 85例成人AL初治患者 ,并对其中 4 7例达到缓解及 18例复发的患者、10例持续完全缓解 (CCR)期的AL患者采用流式细胞术检测cyclinB1、p2 1cip1蛋白表达水平和细胞周期分布 ;采用半定量RT PCR检测cyclinB1、p2 1cip1、增殖细胞核抗原 (PCNA)mRNA水平。结果　 85例初治AL患者全周期或G1/S期cyclinB1蛋白表达水平明显高于正常对照 (P <0 .0 0 1) ;缓解患者cy clinB1蛋白表达与正常对照组比较差异无统计学意义 (P =0 .2 1) ,复发患者cyclinB1蛋白表达高于正常对照 (P <0 .0 5 ) ,但低于AL初治组 (P <0 .0 1) ,CCR组cyclinB1与正常对照组比较差异无显著性 (P=0 .6 94 ) ;初治AL患者的cyclinB1表达率高于正常对照组 (P <0 .0 0 1) ;cyclinB1蛋白高表达者均有G1期异常高表达 ;cyclinB1与p2 1的蛋白表达呈负相关 ;cyclinB1蛋白表达与其mRNA水平呈正相关 ;cy clinB1表达与细胞增殖指数 (PI)及PCNA表达水平呈正相关 ;cyclinB1表达水平高的患者有较高的治疗缓解率 (P <0 .0 1) ,但有较高的复发率 (P <0 .0 1) ,cyclinB1高表达者有较高的生存率。结论　cyclinB1在成人AL患者中有过度表达和周期分布 ,其     

细胞周期蛋白G2 mRNA在急性白血病患者中的表达及临床意义

为了探讨急性白血病(AL)患者中细胞周期蛋白G2(cyclin G2)的mRNA表达及其临床意义,采用逆转录 聚合酶链反应(RT-PCR)法检测74例急性白血病患者及10例正常人骨髓细胞中的cyclin G2、G1和P53的mRNA 表达,对cyclin G2的阳性扩增产物进行序列分析。结果表明:①AL患者中cyclin G2的阳性率及mRNA表达水平 (52.7％,0.552±0.498)明显低于正常人(100％,1.953±0.675)(P<0.01)。②在初治的AL患者中,cyclin G2 阳性表达患者的完全缓解(CR)率高于阴性者(分别为69.2％和40％;P<0.05)。③耐药组AL患者cyclin G2的 阳性率(43.6％)明显低于敏感组(68.6％)(P<0.05)。④对初治28例CR的AL患者进行随访14.3个月(11- 18.5个月),11例cyclin G2低表达患者中有10例复发(90.9％),而17例cyclin G2高表达患者中有7例复发 (41.2％),两者之间有显著性差异(P<0.05)。结论:CyclinG2是影响AL患者CR的因素,其高表达可能是AL患 者良好预后的指标之一。     

急性髓细胞白血病病人骨髓geminin和cdt1基因表达及意义

目的探讨急性髓细胞白血病（AML）病人骨髓细胞中geminin和cdt1基因表达水平及其与AML发病和预后关系。方法采用SYBR Green实时定量逆转录聚合酶链反应（SYBR-RT-PCR）技术,检测47例不同病程AML病人（包括25例初治者,16例完全缓解者,6例未缓解或复发者）骨髓细胞中geminin和cdt1 mRNA的表达,并对25例初治病人进行6个月随访。结果初治、未缓解或复发AML病人geminin和cdt1表达较对照组及完全缓解组高,差异有显著性（H=4.95、3.22,Z=2.67~4.95,P〈0.01）;完全缓解组geminin和cdt1表达水平与对照组相比,差异无统计学意义（P〉0.05）。AML病人骨髓细胞中geminin和cdt1的表达呈明显正相关（r=0.59,P〈0.01）;且初治组、完全缓解组及未缓解或复发组两者的表达均呈明显正相关（r=0.49~0.87,P〈0.05）。25例AML初治病人随访6个月,死亡6例,存活19例,死亡组geminin表达高于存活组,差异有统计学意义（t=2.16,P〈0.05）,而两组cdt1表达差异无显著性（t=0.61,P〉0.05）。结论 AML病人骨髓细胞中geminin和cdt1表达可能与AML的病程有关;geminin在初治病人中的高表达可能是AML病人的不良预后因子。     

TGF-β1和(或)三氧化二砷作用于HL-60细胞后P27~(Kip1)表达及凋亡情况的研究

本研究观察三氧化二砷(As2O3)和/或TGF-β1对HL-60细胞凋亡及细胞周期的影响,以及作用前后P27Kip1、内源性TGF-β1、cyclinE和BCL-2的变化情况。As2O3和/或TGF-β1作用于HL-60细胞,用细胞形态学观察及流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期改变情况,应用免疫组织化学检测药物处理前后P27Kip1、内源性TGF-β1、cyclinE以及BCL-2表达的变化情况。结果表明:As2O3和TGF-β1单用均可以诱导HL-60细胞发生凋亡,联合处理对HL-60细胞生长抑制作用强于单药处理,其中5μmol/LAs2O3作用最强,5ng/mlTGF-β1处理可引起HL-60细胞的细胞周期阻滞于G1期(p0.05)。5ng/mlTGF-β1和联合处理组P27Kip1的表达较对照组增强(p0.05);5μmol/LAs2O3处理组P27Kip1的表达与对照组比较无明显差异(p0.05)。5ng/mlTGF-β1和联合处理组均可见cyclinE蛋白表达下调(p0.05)。5μmol/LAs2O3和联合处理组可见内源性TGF-β1表达上调(p0.05)。结论:As2O3、外源性TGF-β1均可诱导HL-60细胞凋亡,联合处理组诱导凋亡作用强于对照组和单药处理组,TGF-β1处理可引起HL-60细胞周期阻滞于G1期。TGF-β1诱导HL-60细胞凋亡过程中P27Kip1表达增强,拮抗cyclinE和BCL-2的作用,细胞周期阻滞,诱导细胞发生凋亡,这表明P27Kip1是TGF-β引起细胞周期阻滞的关键效应物,外源性TGF-β1又通过上调内源性TGF-β1的表达增强As2O3诱导原代APL细胞凋亡的作用。     

MMP-2和MMP-9在急性B淋巴细胞白血病中的表达及临床意义

本研究探讨急性B淋巴细胞白血病（B-ALL）患者骨髓细胞中基质金属蛋白酶-2和-9（MMP-2,MMP-9）的表达及临床意义。采用半定量RT-PCR方法检测初治、复发B-ALL患者和正常对照骨髓中单个核细胞MMP-2,MMP-9mRNA的表达。采用明胶酶谱检测B-ALL患者和正常对照骨髓单个核细胞孵育上清中MMP-2,MMP-9的酶活性。结果表明,初治、复发组B—ALL患者中MMP-2表达率明显高于正常对照组（P〈0．05）;MMP-9表达率明显低于正常对照组（P〈0．05）。髓外浸润组患者MMP-2和MMP-9表达率均明显高于无髓外浸润组（P〈0．05）,而MMP-2／MMP-9（＋）组髓外浸润发生率明显高于MMP-2／MMP-9（-）组。高危组B—ALL患者MMP-9表达率明显高于标危组,而两组间MMP-2表达率无显著性差异（P〉0．05）。结论：B-ALL患者白血病细胞可以产生MMP-2,MMP-9,可能参与了B-ALL的髓外浸润,MMP-9表达可能提示预后不良。     

实时荧光定量RT-PCR检测SALL4基因的临床应用研究

本研究旨在建立实时荧光定量RT-PCR（FQ RT-PCR）检测婆罗双树样基因4（sal-like4,SALL4）mRNA的方法并研究该基因在各类型白血病中表达情况.应用实时荧光定量RT-PCR技术定量检测60例急、慢性白血病患者和10例志愿者的标本SALL4基因.结果表明,SALL4基因在完全缓解（CR）组各类型白血病中不表达或低表达,与对照组相比无显著差异（P＞0.05）,而在初诊和复发组中高表达,表达量显著高于CR组（P＜0.05）,但在初诊和复发两组间表达量无显著差异（P＞0.05）,其中SALL4基因在CLL、T-ALL、M3中不表达或低表达;相关BMI-1基因与其表达规律一致,两者显著相关（r=0.825,P＜0.01）.结论：实时荧光定量RT-PCR技术检测SALL4基因具有高敏感性和高特异性等优点,可作为进一步研究SALL4基因的方法;SALL4基因有可能成为部分白血病治疗转归及白血病微小残留病（MRD）监测指标之一.