健脾补肺化痰方对幼龄哮喘大鼠EGF、MMP-9的含量影响

目的:研究表皮生长因子(EGF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在幼龄哮喘大鼠气道重塑中的表达及其之间的相关性分析,通过实验初步探讨健脾补肺化痰方对哮喘患儿平喘作用的机理,为中医药防治小儿哮喘提供新的研究思路。方法:48只SD幼龄大鼠随机分成正常对照组,哮喘模型组,辅舒酮组,健脾补肺化痰方高剂量、中剂量和低剂量组,以卵蛋白(OVA)致敏制备幼龄大鼠哮喘模型。采用HE染色观察肺病理组织学变化,采用酶联免疫法(ELISA)检测血清中EGF、肺组织MMP-9的含量变化。结果:正常对照组哮喘大鼠镜下无炎症反应,无气道重塑。模型组炎症反应很重;气道壁明显增厚,气道壁受损,气道管腔狭窄,气道平滑肌层和网状基底膜层增厚;气道上壁纤维化改变明显,具备气道重塑的特征。健脾补肺化痰方低中高剂组大鼠病理变化炎症程度依次减轻,高剂组与辅舒酮组炎症反应相当,炎症反应很轻。各组大鼠血清中EGF、肺组织MMP-9含量与模型组之间有差异性(P0.05或P0.01)。     

健脾补肺化痰方对哮喘气道重塑模型幼龄大鼠全血中五种微量元素的影响

目的探讨健脾补肺化痰方对哮喘气道重塑模型幼龄大鼠全血五元素的影响。方法将180只幼龄大鼠随即分为正常组、模型组、西药组和健脾补肺化痰方组,考察大鼠血浆中Cu、Zn、Ca、Mg和Fe的含量。结果模型组大鼠全血五元素含量与正常组存在显著差异,Zn、Ca浓度低于正常组,Fe浓度高于正常组,说明哮喘的发生与低Zn、低Ca、高Fe密切相关;健脾补肺化痰方各组与模型组比较,Zn浓度明显高于模型组,Cu、Fe浓度明显低于模型组,说明健脾补肺化痰方能改善哮喘气道重塑模型幼龄大鼠的低zn、低Cu、高Fe状态。结论健脾补肺化痰方能改善哮喘气道重塑模型幼龄大鼠的低zn、低Ca、高Fe状态,从而纠正体内各元素的失调,预防哮喘发作具有十分重要意义。     

健脾补肺化痰方对哮喘大鼠血清VCAM-1、ICAM-1、VEGF水平的影响

目的:探讨健脾补肺化痰方对幼龄哮喘大鼠的血清VCAM-1、ICAM-1、VEGF水平的影响。方法:将40只大鼠随机分为正常组、模型组、健脾补肺化痰方组、地塞米松组4组,每组10只。用卵白蛋白(OVA)雾化激发建立哮喘大鼠模型,用双抗体夹心法检测大鼠动脉血清VCAM-1、ICAM-1、VEGF的水平。结果:与正常组比,哮喘各组大鼠血清VCAM-1、ICAM-1、VEGF水平明显升高,差异有统计学意义(P0.01)。与模型组比,健脾补肺化痰方组、地塞米松组VCAM-1、ICAM-1、VEGF水平偏低,有显著差异(P0.01)。健脾补肺化痰方组、地塞米松组之间比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:健脾补肺化痰方可降低大鼠血清VCAM-1、ICAM-1、VEGF的表达,进而对哮喘气道重塑产生抑制。     

健脾补肺化痰方对哮喘大鼠肺组织中TGF-β_1、c-fos表达影响

目的:探讨健脾补肺化痰方对幼龄哮喘大鼠肺组织中TGF-β_1、c-fos表达的影响。方法:将120只雄性SD幼龄大鼠,随机分为正常组4周(Z4)、8周(Z8)、12周(Z12),模型组4周(M4)、8周(M8)、12周(M12),健脾补肺化痰方组4周(J4)、8周(J8)、12周(J12),地塞米松组4周(D4)、8周(D8)、12周(D12),每组30只,采用卵白蛋白(OVA)雾化激发建立哮喘大鼠模型,用Masson染色法及Img-Pro6.0图像分析系统,分别测定上述时间段各组大鼠肺组织中WAt/Pbm、WAi/Pbm及WAm/Pbm等气道形态学参数,同时采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测各组大鼠肺组织中TGF-β_1、c-fosm RNA的表达。结果:与正常组相比,模型组肺组织中TGF-β_1、c-fos的表达及WAt/Pbm、WAi/Pbm、Wam/Pbm等气道形态学参数均有不同程度升高(P0.05);与模型组相比,各治疗组以上指标均有不同程度下调(P0.05);健脾补肺化痰方组与地塞米松组比较,差异无显著性(P0.05)。结论:健脾补肺化痰方可通过下调TGF-β_1、c-fos的表达实现对气道重塑的抑制。     

调补肺肾法对COPD大鼠肺组织胶原和基质金属蛋白酶的影响及远后效应

目的观察调补肺肾方法(补肺健脾、补肺益肾、益气滋肾)对慢性阻塞性肺疾病(chronicobstructive pulmonary disease,COPD)大鼠肺组织胶原和基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)表达的影响及远后效应。方法将大鼠随机分为正常对照组、模型组、补肺健脾组[4.84 g/(kg.d)]、补肺益肾组[4.44 g/(kg.d)]、益气滋肾组[4.84 g/(kg.d)]和氨茶碱组[2.3 mg/(kg.d)],采用香烟熏吸联合细菌感染法制造COPD稳定期模型。于第9周起分别给予补肺健脾方、补肺益肾方、益气滋肾方和氨茶碱,给药12周,于第20、32周分批取材,观察肺组织病理、MMP-9、MMP-2、金属蛋白酶组织抵制剂(TIMP)-1和Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原等表达。结果模型组肺组织病理损害明显。第20周时,补肺健脾、补肺益肾、益气滋肾中药可明显减轻肺组织病理损伤,改善支气管壁增厚、支气管狭窄、肺泡破裂和融合、肺小动脉壁增厚(P<0.05或P<0.01),降低肺组织MMP-9、MMP-2、TIMP-1和Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原等表达(P<0.05或P<0.01),在32周仍显著改变(P<0.05或P<0.01),且较氨茶碱组显著(P<0.05或P<0.01)。结论补肺健脾、补肺益肾、益气滋肾法可明显改善COPD肺组织损害,降低肺组织胶原和基质金属蛋白酶表达,且远后效应良好。     

丙酸氟替卡松对哮喘小鼠气道壁胶原沉积及MMP-9表达的影响

目的:观察丙酸氟替卡松对哮喘小鼠模型气道壁胶原、基质金属蛋白-9(MMP-9)含量的影响。方法:将30只BALB/c小鼠随机分为哮喘组(A组)、正常对照组(B组)、丙酸氟替卡松治疗组(C组)3组,每组动物10只。制备小鼠肺组织病理切片,HE染色观察各组气道结构改变情况,天狼猩红染色,采用医学图像分析软件测定气道Ⅰ、Ⅲ型胶原的面积,肺组织石蜡切片行MMP-9免疫组化染色后计算机图像分析测定其灰度值。结果:光镜下可见A组小支气管上皮细胞脱落、管壁炎症细胞浸润、杯状细胞增生、基底膜增厚、平滑肌增厚,而C组上述改变较A组明显减轻。A组支气管壁Ⅰ型、Ⅲ型胶原较B组增多(P<0.05),而丙酸氟替卡松干预后C组较A组显著降低(P<0.05);A组MMP-9灰度值较B组明显降低(P<0.05),丙酸氟替卡松干预后的C组MMP-9灰度值较A组显著增高(P<0.05)。结论:吸入丙酸氟替卡松可以减少气道壁Ⅰ型、Ⅲ型胶原的沉积和MMP-9的表达,对胶原沉积的抑制可能是通过抑制MMP-9表达而实现。     

NGF对支气管哮喘大鼠气道重塑影响及其机制

目的研究神经生长因子(NGF)在支气管哮喘气道重塑中的作用及其可能机制,为哮喘治疗寻求新的靶点。方法将30只SPF级健康雄性Wistar大鼠随机分为对照组、哮喘模型组和NGF抗体干预组。苏木精-伊红染色观察大鼠气道壁组织学改变,Masson染色观察气道上皮下胶原层厚度,免疫组化法检测肺组织血管内皮生长因子(VEGF)、Ⅲ型胶原表达。结果哮喘模型组及NGF抗体干预组支气管壁厚度、支气管平滑肌厚度、支气管平滑肌细胞核数、支气管壁血管密度、上皮下胶原层厚度、VEGF及Ⅲ型胶原的表达较对照组显著增加,NGF抗体干预组以上改变较哮喘模型组减轻,差异均有统计学意义(F=108.29~554.21,P<0.01)。大鼠支气管壁血管密度和管壁厚度与肺组织中VEGF蛋白表达,气道胶原层厚度与Ⅲ型胶原含量均呈正相关(r=0.82~0.87,P<0.05)。结论 NGF可能通过调控肺组织VEGF、Ⅲ型胶原的表达参与哮喘气道重塑。     

地塞米松对哮喘大鼠气道壁胶原沉积和转化生长因子-β1表达的影响

目的:观察地塞米松对哮喘大鼠模型气道壁胶原、转化生长因子β_1(TGF-β_1)含量的影响。方法:30只SD大鼠随机分成正常对照组、哮喘模型组和激素干预组,以卵蛋白致敏并长期吸入激发制备大鼠慢性哮喘模型,干预组于每次吸入前腹腔注射地塞米松,模型组以生理盐水代替。肺组织石蜡切片行胶原和TGF-β_1免疫组化染色后计算机图像分析测定其含量。结果:模型组气道壁Ⅲ型胶原及TGF-β_1含量均高于对照组(q值分别为13.57、12.76,P值均<0.001);激素于预组Ⅲ型胶原及TGF-β_1含量低于模型组(q值分别为12.88、11.23,P值均<0.001),较之对照组差异均无显著性;各组间Ⅰ型胶原的含量差异不大(P值均>0.05)。TGF-β_1的表达与Ⅲ型胶原的含量呈显著正相关(r=0.606,P<0.01)。结论:地塞米松可以减少气道壁Ⅲ型胶原的沉积和TGF-β_1的表达,对Ⅲ型胶原沉积的抑制可能部分通过抑制TGF-β_1表达而实现的。     

活血止痛膏对兔骨骼肌急性钝挫伤后Ⅱb型MHC、Ⅰ型及Ⅲ型胶原mRNA表达的影响

目的:观察活血止痛膏剂对兔骨骼肌钝挫伤后内源性IIb型肌球蛋白重链(MHC)、Ⅰ型及III型胶原mRNA表达的影响。方法:63只大白兔随机分为活血止痛膏高、中、低剂量组与青鹏膏对照组、外伤对照组,每组12只。另取3只为正常对照组。各实验组采用"重物自由落体打击法"制作大白兔骨骼肌急性钝挫伤模型。受伤第1天即于伤处贴敷相应药物。各组伤后3、10、20、27天各处死大白兔3只,取腓肠肌标本,共6个。RT-PCR技术检测内源性Ⅱb型MHC、Ⅰ型及Ⅲ型胶原mRNA。结果:①伤后第3、10、20天活血止痛膏高、中剂量组和青鹏膏组内源性Ⅱb型MHCmRNA表达量高于外伤组和低剂量组(P<0.05);第10、20天活血止痛膏高剂量组内源性IIb型MHCmRNA表达高于中剂量组(P<0.05);②内源性I型胶原mRNA表达量:第3天各组比较无统计学意义(P>0.05);第10、20天活血止痛膏高、中剂量组和青鹏膏组表达量低于外伤组、低剂量组(P<0.05);第10、20天中剂量组高于高剂量组(P<0.05)。③内源性Ⅲ型胶原mRNA表达量:第3、10、20天活血止痛膏高、中剂量组和青鹏膏组内源性Ⅲ型胶原mRNA表达低于外伤组和低剂量组(P<0.05);第3、10、20天高剂量组和青鹏膏组表达量明显少于中剂量组(P<0.05)。三个检测指标各个时间点青鹏膏组和高剂量组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:活血止痛膏可有效促进骨骼肌急性钝挫伤后Ⅱb型MHCmRNA表达,减少Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达,其作用与青鹏膏相当。     

地塞米松对支气管哮喘模型大鼠气道重建的影响

目的:观察地塞米松对哮喘模型大鼠气道重建的影响.方法:24只SD大鼠随机分成哮喘模型组、激素干预组和正常对照组,每组8只,前2组以卵蛋白致敏并长期吸人激发大鼠慢性哮喘模型,正常对照组以生理盐水代替卵蛋白同法处理大鼠.激素干预组每次激发前给予地塞米松0.5 mg/只腹腔注射,哮喘模型组给予等量生理盐水,共4周.最后1次激发后24 h内处死大鼠,取大鼠肺组织行免疫组化测定Ⅰ、Ⅲ型胶原和转化生长因子β1(TGF-β1)的含量,同时测定气道内外径及平滑肌层、网状基底膜的厚度.结果:哮喘模型组气道壁平滑肌和基底膜层厚度及Ⅲ型胶原与TGF-β1含量均高于正常对照组和激素干预组(P均＜0.001),内外径比值低于正常对照组和激素干预组(P＜0.001),而激素干预组和正常对照组以上指标差异无统计学意义;3组间Ⅰ型胶原含量差异无统计学意义(P＞0.05).结论:地塞米松可减少气道壁胶原沉积和平滑肌增生,从而抑制哮喘大鼠气道重建,其机制可能与抑制TGF-β1的表达有关.     

加味六安煎对咳嗽变异性哮喘大鼠气道重塑病理形态学的影响

目的观察加味六安煎对咳嗽变异性哮喘(CVA)大鼠气道炎症及肺组织气道重塑病理变化的影响,探讨加味六安煎治疗咳嗽变异性哮喘的作用机制。方法将60只Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、孟鲁司特钠组、加味六安煎(低、中、高)剂量组。以卵蛋白、氢氧化铝致敏并吸入卵蛋白激发法复制咳嗽变异性哮喘大鼠模型,观察各组大鼠肺组织的炎性细胞浸润、胶原沉积(胶原面积及胶原容积分数)程度以及气道形态学参数的变化。结果与正常组相比,模型组镜下可见肺组织炎性细胞浸润、充血、水肿;与模型组相比,各治疗组肺组织炎性细胞减少,充血、水肿程度减轻;与正常组相比,模型组胶原面积增加(P 0.05),各治疗组间相比,加味六安煎高剂量组胶原面积减少最明显(P 0.05),加味六安煎各剂量组与孟鲁司特钠组相比差异无统计学意义(P0.05);与正常间组相比,模型组胶原容积分数增加(P 0.05),各治疗组间相比,加味六安煎高剂量组胶原容积分数降低最明显(P 0.05),加味六安煎各剂量组与孟鲁司特钠组相比差异无统计学意义(P0.05);与正常组相比,模型组平滑肌面积/支气管基底膜周径(Wam/Pbm)、气管内壁面积/支气管基底膜周径(Wai/Pbm)均明显增大(P 0.05),各治疗组间相比,加味六安煎高剂量组Wam/Pbm、Wai/Pbm比值均为最小(P 0.05),孟鲁司特钠组与加味六安煎各剂量组相比差异无统计学意义(P0.05)。结论加味六安煎治疗咳嗽变异性哮喘的可能作用机制之一是通过减轻肺组织炎性细胞浸润、充血、水肿程度,减少气道周围胶原沉积,干预咳嗽变异性哮喘大鼠气道重塑,从而达到防治本病的目的。     

补肺益肾方对慢性阻塞性肺疾病模型大鼠肺泡表面活性蛋白A、D及肺泡结构的影响

目的:观察补肺益肾方对慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)模型大鼠肺泡表面活性蛋白(Surfactant-associated Proteins,SP)-A、SP-D及肺泡结构的影响。方法:将36只COPD大鼠随机分为空白组,模型组,补肺益肾高剂量组、中剂量组、低剂量组,氨茶碱组,采用香烟暴露联合反复细菌感染制备COPD稳定期大鼠模型,空白组、模型组给予生理盐水灌胃,补肺益肾高剂量组、中剂量组、低剂量组分别给予补肺益肾方7.4 g·(kg·d)~(-1)、3.7g·(kg·d)~(-1)、1.85 g·(kg·d)~(-1)灌胃,氨茶碱组给予氨茶碱54 mg·(kg·d)~(-1)灌胃。治疗12周后取材,检测肺组织病理、肺泡Ⅱ型上皮细胞超微结构,荧光定量PCR检测肺组织SP-A、SP-D基因表达,激光共聚焦检测肺组织SP-A、SP-D阳性表达。结果:肺组织病理示,空白组大鼠肺组织结构基本正常;模型组大鼠肺泡壁部分断裂融合,细支气管壁增厚,管壁周围结缔组织增生、炎症细胞浸润,气道内黏液分泌;补肺益肾高剂量组、中剂量组、低剂量组和氨茶碱组均有不同程度减轻,补肺益肾中剂量组减轻尤为明显。肺组织超微结构示,空白组大鼠肺组织肺泡Ⅱ型细胞中可见线粒体丰富,线粒体嵴排列整齐,板层小体完整;模型组Ⅱ型细胞线粒体较小,线粒体嵴较为清晰,但板层小体脱颗粒、空泡化;补肺益肾高剂量组Ⅱ型细胞中线粒体丰富,线粒体嵴清晰,板层小体较少但结构完整;补肺益肾中剂量组Ⅱ型细胞中线粒体丰富且排列整齐,线粒体嵴较为清晰,板层小体丰富且结构完整,细胞边缘绒毛完整;补肺益肾低剂量组和氨茶碱组Ⅱ型细胞中线粒体较少,结构不清晰,板层小体少且部分空泡化。荧光定量PCR示,与空白组比较,模型组肺组织SP-A、SP-D mRNA显著降低(P≤0.01);与模型组比较,补肺益肾高剂量组、中剂量组,氨茶碱组SP-A、SP-D mRNA均显著升高(P≤0.01),补肺益肾低剂量组SP-A mRNA升高(P≤0.01);与补肺益肾高剂量组、中剂量组比较,低剂量组和氨茶碱组SPA、SP-D mRNA均显著降低(P≤0.01)。激光共聚焦显示,与空白组比较,模型组肺组织SP-A、SP-D阳性表达细胞数明显降低(P≤0.01);与模型组比较,补肺益肾高剂量组、中剂量组和氨茶碱组SP-A、SP-D均升高(P≤0.01);与补肺益肾高剂量组比较,中剂量组SP-A、SP-D均升高(P≤0.05或P≤0.01);与补肺益肾中剂量组比较,补肺益肾低剂量组和氨茶碱组SP-A、SP-D均降低(P≤0.01)。结论:补肺益肾方能够改善COPD模型大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞中板层小体的结构,调节肺泡表面活性蛋白的合成和分泌,从而维持肺泡结构稳定,以补肺益肾中剂量尤为显著。     

补肺方对缓解期哮喘豚鼠气道重塑作用机制的研究

目的:观察中药补肺方对缓解期哮喘豚鼠气道重塑的影响.方法:将48只雄性健康豚鼠随机分为4组,空白对照组A、模型组B、强的松组C和中药补肺方组D,每组12只.采用坞卵蛋白致敏加激发法制作缓解期支气管哮喘豚鼠模型,用中药补肺方灌服,并与空白对照组、模型组、强的松组比较.取各组豚鼠右肺下叶制作石蜡切片,行MASSON 染色和免疫组化染色,分别观察豚鼠肺组织气道重塑和转化生长因子-β1(TGF--β1).结果:上皮黏膜层面积(Wamuc)/支气管基底膜周径(Pbm)在强的松组低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05).TGF-β1,B组与A组比较P<0.01,c、D组与A组比较P<0.05,C、D组与B组比较P<0.05,D组与C组比较P<0.05.结论:中药补肺方可改善缓解期支气管哮喘豚鼠气道重塑,降低肺组织中TGF--β1浓度,在缓解期对哮喘进行中药干预对预防气道重塑有实验意义.     

连花定喘片治疗支气管哮喘的疗效

 目的  评价连花定喘片治疗支气管哮喘的疗效。方法  将50只SPF级BALB/C小鼠随机分为对照组、模型组、地塞米松组、连花高剂量组、连花低剂量组,每组10只。采用卵清白蛋白＋氢氧化铝致敏,并雾化激发复制小鼠支气管哮喘模型,给药组于每次激发前30 min给药,共计7次。采用特殊气道阻力值评估气道高反应性,肺组织HE染色及肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)细胞分类计数评价各组小鼠气道炎症性改变,ELISA法和磁性Luminex分析法检测BALF和血清中IL-4、IL-13、INF-γ的表达。结果  地塞米松组和连花高剂量组能显著降低气道阻力(P<0.05)。地塞米松组和连花高、低剂量组BALF中的各类炎性细胞数量和IL 13的表达均明显减少(P<0.05)。血清IL-13的表达在地塞米松组明显降低(P<0.05),但在连花高、低剂量组中没有变化。各组小鼠BALF和血清中IL-4和INF-γ的表达没有统计学差异。结论  连花定喘片可缓解哮喘症状,可能与其降低Th2型细胞因子IL-13的含量,从而减轻气道炎症有关。     

加味六安煎对咳嗽变异性哮喘大鼠模型气道重塑的影响

目的观察咳嗽变异性哮喘(cough variant asthma,CVA)大鼠模型咳嗽次数、气道炎症、肺组织气道重塑病理变化及加味六安煎对其干预后的影响,探讨加味六安煎治疗咳嗽变异性哮喘的作用机制,为临床治疗提供依据。方法将60只Wistar大鼠随机分为正常对照组、CVA模型组、孟鲁司特钠组、加味六安煎低、中、高剂量组。以卵蛋白、氢氧化铝致敏并吸入卵蛋白激发法复制咳嗽变异性哮喘大鼠模型,观察各组大鼠咳嗽次数、肺组织的炎性细胞浸润、胶原沉积(胶原面积及胶原容积分数)程度。结果(1)与正常对照组比较,CVA模型组咳嗽次数明显增多(P<0.05),与模型组比较,各治疗组咳嗽次数明显减少,其中加味六安煎高剂量组咳嗽次数减少最明显(P<0.05);(2)与正常对照组比较,CVA模型组镜下可见肺组织炎性细胞浸润、充血、水肿;与CVA模型组比较,各治疗组肺组织炎性细胞减少,充血、水肿程度减轻;(3)胶原面积:与正常对照组比较,CVA模型组胶原面积增加(P<0.05),各治疗组比较,加味六安煎高剂量组胶原面积减少最明显(P<0.01),加味六安煎各剂量组与孟鲁司特钠组比较组间差异无统计学意义(P>0.05);(4)胶原容积分数:与正常对照组比较,CVA模型组胶原容积分数增加(P<0.05),各治疗组比较,加味六安煎高剂量组胶原容积分数降低最明显(P<0.01),加味六安煎各剂量组与孟鲁司特钠组比较,组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论加味六安煎可以有效减少CVA大鼠的咳嗽次数,其作用机制可能是通过减轻肺组织炎性细胞浸润、充血、水肿,减少气道胶原沉积从而达到干预CVA大鼠气道重塑的目的。     

不同浓度地塞米松对慢性哮喘大鼠肺部组织学干预作用

目的:观察不同浓度地塞米松对慢性哮喘大鼠一般情况及肺部组织学的干预作用,探索地塞米松(地米)在慢性哮喘大鼠模型中适合的灌胃剂量。方法:75只雄性SD大鼠,应用随机数字表法分为正常组、模型组及地米低剂量、中剂量和高剂量组。卵清蛋白致敏和激发法构建慢性哮喘大鼠模型。从实验第20天,地塞米松各组分别按0.062 5、0.125、0.5mg·kg~(-1)·d~(-1)灌胃给药。观察记录大鼠一般情况,HE染色法、Masson染色法观察大鼠肺部组织学改变。结果:模型组大鼠支气管及周围组织炎性浸润程度较正常组增加,气道壁和平滑肌的厚度以及气道胶原的沉积均明显高于正常组(P<0.01)。地米高剂量组干预一周后大鼠日均进食量及体质量均明显低于模型组(P<0.01);地米中、低剂量组干预后各周体质量增加较模型组明显减缓(P<0.01);地米中、低剂量组大鼠日均进食量在干预2周后较模型组明显减少(P<0.01),地米中剂量组大鼠日均进食量在干预4周后明显少于低剂量组(P<0.01);大鼠肺组织炎性浸润情况地米中、低剂量组较模型组明显减轻,气道壁和平滑肌厚度以及气道胶原沉积亦明显降低(P<0.01),二组间无差异(P>0.05);地米高剂量组大鼠在干预5次后大量死亡。地米中剂量组干预第5周死亡3只,余组均无死亡。结论:地塞米松中、低剂量均可用作慢性哮喘大鼠实验中的阳性对照剂量,但低剂量后期副作用更少,故地塞米松低剂量在慢性哮喘大鼠实验中可能是更安全、合适的灌胃剂量。     

椒目油对大鼠气道重建的防治作用

目的:研究椒目油对哮喘大鼠模型Ⅲ型胶原、增殖细胞核抗原(PCNA)的表达水平及气道重建的影响,为椒目的临床应用提供理论依据.方法:将雄性SD大鼠30只随机分为3组:哮喘组、治疗组、对照组,每组动物10只,用卵白蛋白(OVA)腹腔注射致敏和雾化吸入激发建立哮喘大鼠模型,采用计算机图像分析免疫组化气道璧中Ⅲ型胶原的表达,并测量各组支气管壁的厚度.结果:免疫组化结果显示,Ⅲ型胶原阳性表达的平均吸光度:哮喘组大鼠(19.24±0.24)明显高于对照组(2.75±0.22,P＜0.01);治疗组(10.16±0.37)明显低于哮喘组(P＜0.01).PCNA的表达哮喘组明显高于对照组(P＜0.05);治疗组低于哮喘组(P＜0.05).哮喘组支气管壁厚度(10.24±2.05)明显高于对照组(5.81±0.73,P＜0.01);治疗组(8.45±1.67)明显低于哮喘组(P＜0.01).结论:椒目油不但能有效治疗哮喘,而且还能有效防止气道重建,其作用机制可能是抑制了Ⅲ型胶原和PCNA的生成.     

健脾补肺化痰方对小儿支气管哮喘缓解期肺功能的影响

【目的】观察健脾补肺化痰方对小儿支气管哮喘缓解期肺功能的影响,探讨中医药防治小儿支气管哮喘的机制。【方法】将60例支气管哮喘缓解期患儿随机分为治疗组和对照组各30例。对照组给予糖皮质激素(丙酸氟替卡松)吸入治疗,治疗组在对照组西药治疗的基础上,给予健脾补肺化痰方(由炙黄芪、太子参、炒白术、防风、茯苓、陈皮、半夏、炙甘草、煅龙骨、煅牡蛎、葶苈子等组成)治疗。观察并比较2组临床疗效及治疗1、2、3、6、9、12个月后呼气峰流速(PEF)值及呼气峰流速变异率(PEFv)等肺功能指标的变化情况。【结果】(1)治疗组总有效率为93.33%,显著优于对照组的83.33%(P0.05)。(2)在整个治疗过程中,治疗组患儿的PEF值均显著高于对照组,PEFv值均显著低于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。【结论】健脾补肺化痰方可改善肺脾气虚型支气管哮喘缓解期患儿的临床症状,增强患儿的肺功能,降低气道的高反应状态。     

抗哮喘药物对大鼠气道重塑模型干预效果的评价

目的：观察辅舒酮和喘乐宁联合用药和孟鲁斯特对大鼠哮喘气道重塑模型的干预效果,阐明哮喘及气道重塑的发病机制。 方法：40只Wistar大鼠随机分为阴性对照组、阳性对照组（模型组）,给药1组（辅舒酮和喘乐宁雾化吸入）和给药2组（给予孟鲁斯特）,每组10只。采用卵清蛋白（OVA）致敏和激发, 建立大鼠哮喘气道重塑模型。观察各组大鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中炎性细胞数目的变化;检测大鼠血清IL-12水平的变化及与气道重塑的关系,观察气道纤毛上皮细胞、成纤维细胞、平滑肌细胞结构的变化。结果：与阴性对照组比较,阳性对照组大鼠BALF中炎性细胞数明显升高(P<0.05）;与阳性对照组,给药1组和给药2组大鼠BALF中炎性细胞数明显降低(P<0.05）,但给药1组与给药2组比较差异无显著性(P<0.05）。与阴性对照组比较,阳性对照组大鼠血清IL-12水平明显降低(P<0.05）;与阳性对照组比较,给药1组和给药2组大鼠血清IL-12水平明显升高(P<0.05或P<0.01）;且给药1组与给药2组比较差异有显著性(P<0.01）。与给药2组比较,给药1组大鼠气道纤毛排列整齐,弹力纤维基本正常,胞核及胞质无明显改变;平滑肌轻度增厚,淋巴细胞中度浸润。结论：辅舒酮和喘乐宁联合用药较孟鲁斯特更能抑制炎性细胞浸润,减轻气道慢性炎症,从而减弱哮喘气道重塑,降低气道高反应性,保护气道形态和功能。     

基质金属蛋白酶及其抑制剂在哮喘气道重塑中的作用及止喘胶囊的干预

目的:探讨基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase, MMP)及其抑制剂(tissue inhibitor of metalloproteinase, TIMP)在支气管哮喘气道重塑中的可能作用以及止喘胶囊(补肾纳气法)对气道重塑的干预作用.方法:通过长期反复地给予致敏大鼠吸入不同浓度的卵蛋白,建立大鼠慢性哮喘气道重塑模型.分别在哮喘激发后第2、4、6、8周动态观察模型大鼠MMP/TIMP的表达情况.并在激发第8周观察中药组、西药组、中西医结合组的治疗效果.免疫组化技术检测气道壁MMP-9、TIMP-1以及Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅴ型胶原蛋白表达,计算机图像分析显微测定气道壁厚度.结果:模型大鼠气道上皮损伤、脱落,嗜酸性粒细胞浸润;MMP-9在初始阶段表达上调,在后期下降;TIMP-1在整个过程中呈持续上升状态.模型组气道壁厚度、胶原沉积、TIMP-1表达明显高于正常对照组(P<0.05),中药组、西药组、中西医结合组的气道壁厚度、胶原沉积、TIMP-1表达明显低于模型组(P<0.05),其中中西医结合组与其他组比较,疗效最佳(P<0.05).结论:MMP/TIMP比例失衡,比值下降,是哮喘气道重塑的一个重要因素.TIMP-1过度表达与纤维化相关;止喘胶囊能显著抑制TIMP-1的高表达,减少气道壁厚度和胶原沉积,从而阻抑气道重塑的发生和发展,与地塞米松有协同作用.