套式聚合酶链反应结合直接荧光法检测女性生殖道沙眼衣原体

目的建立一种敏感、特异、快速诊断女性生殖道沙眼衣原体（ＣＴ）感染的方法。方法应用套式聚合酶链反应（ＮＰＣＲ）技术和直接荧光（ＤＦＡ）法检测女性生殖道沙眼衣原体。对两者结果不符的标本用细胞培养法验证。结果３００份受检标本，ＤＦＡ法阳性７１份，阴性２２９份，ＮＰＣＲ法阳性９０份，阴性２１０份；其中ＮＰＣＲ和ＤＦＡ均为阳性者６８份，另有２２份ＮＰＣＲ阳性，而ＤＦＡ为阴性，再经细胞培养证实系阳性。但另有３份ＤＦＡ阳性，ＮＰＣＲ却为阴性，再经细胞培养证实亦属阳性。综合ＮＰＣＲ与ＤＦＡ并对照细胞培养，结果显示ＮＰＣＲ的敏感性为９６７％（９０／９３），特异性为１００％（２０７／２０７），ＤＦＡ的敏感性为７６３％（７１／９３），特异性为１００％（２０７／２０７）。结论ＮＰＣＲ技术与ＤＦＡ法检测ＣＴ感染，均具有高度特异性、操作简便等优势；ＮＰＣＲ的敏感性优于ＤＦＡ法；ＤＦＡ法具有费用低、重复好的特点。两法结合起来检测ＣＴ，将获得理想的检测效果。     

孕早期特异性IgM抗体检测Torch感染的实际诊断价值

目的：探讨孕早期检测特异性ＩｇＭ抗体诊断Ｔｏｒｃｈ感染的实际诊断价值。方法：采用ＥＬＩＳＡ法和ＰＣＲ技术对照测定１０２例早孕妇女的特异ＩｇＭ抗体和Ｔｏｒｃｈ病原体。结果：以ＰＣＲ检测阳性作为金标准，弓形体ＩｇＭ的敏感性达１００％，特异性为７２４％，阳性预测值为１２９％，阴性预测值为１００％；风疹病毒ＩｇＭ和ＰＣＲ检测无阳性发现；巨细胞病毒ＩｇＭ的敏感性为９５７％。特异性为４４３％，阳性预测值为３３３％，阴性预测值为９７２％，疱疹病毒的敏感性为８８９％，特异性为５７０％，阳性预测值为１６７％，阴性预测值为９８１％。其中弓形体和巨细胞病毒的敏感性高，但阳性预测值低。结论：ＥＬＩＳＡ法检测Ｔｏｒｃｈ特异性ＩｇＭ抗体作为临床筛查是非常有用和必要的，但仅凭ＩｇＭ抗体阳性尚不能说明孕妇目前是否感染，应对ＩｇＭ抗体阳性者进一步做ＰＣＲ－ＤＮＡ测定。     

PCR法和14C呼气试验检测幽门螺杆菌的比较

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和１４Ｃ呼气试验（１４Ｃ－ＵＢＴ）对６６例上消化道疾病患者进行幽门螺杆菌（Ｈｐ）检测，结果ＰＣＲ检出率为６９．７％，１４Ｃ－ＵＢＴ检出率为７１．２％，ＰＣＲ、１４Ｃ－ＵＢＴ两种方法诊断Ｈｐ感染的敏感性均为１００％，特异性分别为９５．２％和９０．５％，精确性分别为９８．５％和９７．０％；慢性萎缩性胃炎和慢性浅表性胃炎Ｈｐ检出率分别为７７．８％和６５．０％，两者无显著性差异；Ｈｐ感染无性别差异。研究结果表明，１４Ｃ－ＵＢＴ和采用自制的采样器获取胃粘膜组织进行ＰＣＲ检测Ｈｐ均具有非创伤性、简便、高敏感性和特异性的优点，后者还可进行Ｈｐ细胞毒株和非细胞毒株的区分，克服了１４Ｃ－ＵＢＴ具有一定的放射性和使用有毒试剂的缺点     

彩色多普勒超声对肾动脉狭窄的评价

报道８２例共１６３条肾动脉的彩色多普勒超声检查结果。其中，１８例可疑肾动脉狭窄的患者，肾脏病及甲状腺机能亢进症各１０例，高血压病１５例，健康自愿者２９名。经血管造影证实，肾动脉内径减少０％～４９％１９条，５０％～９９％１１条，闭塞５条。每例患者的肾动脉峰值流速（Ｖｐ）及其与腹主动脉峰值流速之比（ＲＡＲ）进行了测量。结果表示，对于≥５０％的肾动脉狭窄，Ｖｐ＞１８０ｃｍ／ｓ显示９０．９％的敏感性和９８．５％的特异性，ＲＡＲ＞２．０显示８１．８％的敏感性和９７．９％的特异性。肾动脉闭塞的诊断正确率为１００％。     

结核杆菌（TB）PCR荧光诊断试剂盒的临床应用

目的：探讨半定量ＴＢ－ＰＣＲ荧光探针诊断试剂盒的临床应用价值。方法 以双盲法对１１５例结核病和５９例非结核病人的痰标本进行厚涂片抗酸染色检查、结核菌培养、荧光探针ＴＢ－ＰＣＲ检查对比。结果：三种方法检测的敏感性分别为３２．２％，５９．１％，７１．３％，荧光探针ＴＢ－ＰＣＲ法的敏感性显著高于培养法和涂片法（Ｐ〈０．０１和Ｐ〈０．０５）。特异性分别为９３．２％、９１．５％、９４．９％，差异无显著性。结     

沙眼衣原体和解脲支原体感染与不孕

目的探讨沙眼衣原体（ＣＴ）、解脲支原体（ＵＵ）的生殖道感染与不孕关系。方法采用聚合酶链反应技术（ＰＣＲ）检测沙眼衣原体和解脲支原体的ＤＮＡ。结果不孕组８８例中，ＣＴ阳性率２５０％，ＵＵ阳性率６２５％，对照组１４１例中，ＣＴ阳性率１１３４％，ＵＵ阳性率２８４％，ＣＴ和ＵＵ的χ２值分别为７０３和２６０１，Ｐ＜００１，有显著性差异。结论沙眼衣原体和解脲体支原体的生殖道感染是不孕的重要因素之一。     

双平面食管超声与经胸超声对左心耳血栓的诊断价值

应用经胸及双平面食管超声心动图（ＴＴＥ和ＴＥＥ）检测５５例手术证实的风湿性二尖瓣病变者左心耳血栓形成情况，ＴＥＥ对左心耳血栓的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值及准确性分别为１００％、９７．４％、９４．１％、１００％及９８．２％，而ＴＴＥ的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值及准确性分别为３１．３％、８９．７％、５５．６％、７６．０％、及７２．７％。左心耳血栓多附着于心耳顶部及外侧壁。结果表明：ＴＥＥ对左心耳的检测价值明显高于ＴＴＥ；双平面ＴＥＥ不能进一步提高ＴＥＥ对左心耳血栓的检测能力；提高ＴＴＥ对左心耳的检测能力有赖于对左心耳的完整显示及对血栓附着部位的认识。     

PCR检测HBV-DNA不同试剂和方法的比较

本文对目前部分市售的ＨＢＶＰＣＲ试剂进行了灵敏度和检测率的测定，并在检测ＨＢＶ低水平感染中，用ＰＣＲ和斑点杂交作了比较。结果不同公司试剂盒的ＨＢＶ－ＤＮＡ最低检测浓度从０．１ｆｇ到１ｐｇ不等，同一公司不同批号的ＨＢＶ－ＤＮＡ最低检测浓度也从１００ｆｇ到１００ａｇ不同，差达１０３～１０４倍。ＰＣＲ和斑点杂交在三组不同乙肝标志组中的阳性检测率为ＨＢｓＡｇ（＋）ＨＢｅＡｇ（－）抗ＨＢｅ（－）组：ＰＣＲ７０％，斑点杂交４６．４％；ＨＢｓＡｇ（＋）ＨＢｅＡｇ（－）抗ＨＢｓ（＋）组：ＰＣＲ３５．７％，斑点杂交２．９％；ＨＢｓＡｇ（－）抗ＨＢｅ（＋）抗ＨＢｓ（＋）／ＨＢｃ（＋）组：ＰＣＲ１６．６％，斑点杂交３．３％。三组检测率均Ｐ＜０．０１。因此，目前市售的ＨＢＶＰＣＲ试剂必须标化，ＰＣＲ更适合于检测ＨＢＶ低水平的感染     

聚合酶链反应检测肺炎衣原体方法的建立与初步应用

目的探讨聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术在肺炎衣原体检测中的应用。方法参照Ｃａｍｐｂｅｌ报道的肺炎衣原体全基因序列、Ｇ＋Ｃ比例和次级结构设计一对引物，采用ＰＣＲ法检测肺炎衣原体ＤＮＡ及临床标本中的肺炎衣原体感染。结果经对肺炎衣原体、沙眼衣原体、大肠埃希菌、溶血性链球菌、白色念珠菌和结核分枝杆菌培养物进行ＰＣＲ扩增，结果只有肺炎衣原体出现单一４３７ｂｐ的扩增区带；敏感性试验可检测出１０ｆｇ的肺炎衣原体ＤＮＡ；１０份模拟标本均扩增出４３７ｂｐ区带；２２份小儿肺部感染的咽拭子标本中有５份为阳性，阳性率为２２．７％，而显微镜检查只有２例可见包涵体；１２份正常小儿咽拭子标本均为阴性。结论ＰＣＲ法检测肺炎衣原体，具有特异、敏感、快速、准确的特点，为肺炎衣原体感染的临床诊断提供了科学的依据     

套式聚合酶链反应单管法检测单纯疱疹病毒

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法、套式ＰＣＲ双管法及套式ＰＣＲ单管法分别检测１３０份散发性脑炎患者脑脊液（ＣＳＦ）中单纯疱疹病毒（ＨＳＶ）的ＤＮＡ，阳性率依次为１８．５％（２４／１３０）、２９．２％（３８／１３０）、２９．２％（３８／１３０）；６０份非中枢神经系统感染者ＣＳＦ标本的检测阳性率分别为０、３．３％（２／６０）、０。结果显示：套式ＰＣＲ虽然提高了检测的敏感性，但假阳性也大大增加。改良的套式ＰＣＲ单管法则大大减少了污染机会，使操作更方便、省时，适于临床推广应用。     

用通用引物建立的RT-PCR诊断肠道病毒性脑炎及脑膜炎

目的　用通用引物建立逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ），达到广谱、特异及快速诊断肠道病毒（ＥＶ）性脑炎及脑膜炎。方法　用针对ＥＶ基因组５’端非编码区保守区的１对通用引物建立的ＲＴ－ＰＣＲ检测多种ＥＶ标准血清型，同时检测病毒性脑膜炎和脑炎患儿的脑脊液。结果　此种ＲＴ－ＰＣＲ可检测４２种ＥＶ的标准血清型，所用毒株在１０－１ＴＣＩＤ５０时仍可见到１９４ｂｐ的阳性条带。检测了３２例病毒性脑膜炎和脑炎患儿的脑脊液中ＥＶ－ＲＮＡ，１８例为阳性（５６．３％）。ＥＶ－ＲＮＡ阳性患儿的昏迷、瘫痪、抽搐、ＣＳＦ－蛋白质及低密度灶数（ＣＴ）分别为４（２２．２％）、８（４４．４％）、１２（６６．７％）、４６２ｍｇ／Ｌ（ｘ）及４（２２．２％）；ＥＶ－ＲＮＡ阴性患儿的昏迷、瘫痪、抽搐、ＣＳＦ－蛋白质、及低密度灶数（ＣＴ）分别为１０（７１．４％）、６（４２．９％）、１２（８５．７％）、３８６ｍｇ／Ｌ（ｘ）及４（２８．８％），仅昏迷发生率有极显著差异（Ｐ＜０．０１）。结论　用通用引物建立的ＲＴ－ＰＣＲ诊断ＥＶ性脑膜炎和脑炎，具有广谱性、特异性、敏感性及简洁、快速的特点，诊断ＥＶ性脑膜炎和脑炎主要依靠病原学检查。     

斑点杂交法检测TTV DNA

用ＴＴＶ基因组ＯＲＦ１区段的引物进行ＰＣＲ扩增，扩增产物用地高辛标记的特异性探针进行斑点杂交检测。结果检测了５４３例肝炎病人和献血员血清标本中ＴＴＶＤＮＡ，阳性检出率为１８．４％（１００/５４３），其中甲型肝炎阳性率为６．０％（２/３３），乙型肝炎为７．８％（５/６４），丙型肝炎为２．３％（１/４３），非甲－戊型肝炎为３９６％（４０/１０１），输血后肝炎为１２．５％（５/４０），献血员为１７．９％（４７     

用PCR技术检测沙眼衣原体主要外膜蛋白基因序列

本实验应用ＰＣＲ技术从宫颈分泌物中直接检测沙眼衣原体。ＰＣＲ所用的引物衣原体主要外膜蛋白（ＭＯＭＰ）基因中具有特异性的稳定区域中的两条核苷酸序列，扩增片段长度为１４４ｂｐ。将经过蛋白酶Ｋ处理的标本作了模板，经变性，退火和延伸，在毛细管ＰＣＲ仪上循环６０个周期后，扩增出的衣原体特异性片段在２．０％的琼脂糖凝胶上电泳后即可被检出。在７７个标本中，１６个为ＰＣＲ阳性。与荧光单克隆抗体免疫学方法比较证明。     

聚合酶链反应检测肺炎衣原体方法的建立与初步应用

目的 探讨聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术在肺炎衣原体检测中的应用。方法 参照Ｃａｍｐｂｅｌｌ报道的肺炎衣原体全基因序列、Ｇ＋Ｃ比例和次级结构设计一对引物，采用ＰＣＲ法检测肺炎衣原体ＤＮＡ有临床标本中的肺炎衣原体感染。结果 经对肺炎衣原体、沙眼衣原体、大肠埃希菌、溶血性链球菌、白色念珠菌和结核分枝杆菌培养物进行ＰＣＲ扩增，结果只有肺炎衣原体出现单一４３７ｂｐ的扩增区带；敏感性试验可检测出１０ｆｇ的肺炎衣     

应用Hep-2细胞分离泌尿生殖道沙眼衣原体

目的为泌尿生殖道沙眼衣原体感染的诊断提供科学、可靠的依据。方法应用人喉癌上皮细胞（Ｈｅｐ－２细胞）对５０份泌尿生殖道分泌物进行沙眼衣原体分离培养，通过镜下直接观察Ｈｅｐ－２细胞中沙眼衣原体包涵体及活动的原体进行鉴定，同时用相应的细胞培养液进行聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测。结果８份标本分离培养为阳性，其对应的ＰＣＲ亦为阳性，检出率为１６％。结论用细胞培养法分离泌尿生殖道沙眼衣原体是诊断其感染的最可靠方法。     

用微板核酸杂交-ELISA技术检测皖北地区不同人群TTV感染情况

目的：用微板核酸杂交－ＥＬＩＳＡ技术检测皖北地区不同人群ＴＴＶ感染情况。方法：用ＰＣＲ法将患者血清标本中的ＴＴＶ ＤＮＡ扩增后,与两条特异性探针夹心杂交,通过酶联显色检测血甭标本中的ＴＴＶ ＤＮＡ,进行分型并与套式ＰＣＲ方法比较。结果：ＴＴＶ在学生、血透患者、肝病患者中的阳性率分别为３．３％,１６．７％和１３．５％,前者与后两者比较差异均有显著意义（Ｐ〈０．０５）;１４例非甲－非戊（ＮＡ－ＮＥ）肝     

聚合酶链反应检测沙眼衣原体和解脲脲原体

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对１５６例非淋病性尿道炎（ＮＧＵ）和１２８例淋病性尿道炎（ＧＵ）患者进行沙眼衣原体（Ｃｔ）和解脲脲原体（Ｕｎ）检测，其中ＮＧＵ中Ｃｔ、Ｕｕ的阳性率分别为２６．３％、１７．９％，Ｃｔ、Ｕｕ双阳性率为７．７％；ＧＵ患者Ｃｔ、Ｕｕ的阳性率分别为４３．８％、３３．６％，Ｃｔ、Ｕｕ双阳性率的为１６．４％。     

逆转录套式聚合酶链反应检测庚型肝炎病毒

目的建立敏感、特异的逆转录套式聚合酶链反应（ＲＴ－ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ）方法，以检测中国人庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）感染。方法根据中国人感染ＨＧＶ者ＮＳ５区部分核苷酸序列分析结果，设计套式ＰＣＲ引物，用于ＨＧＶＲＮＡ的检测，并与用国外报道引物所作的一次ＰＣＲ和套式ＰＣＲ检测结果进行比较。结果共检测标本１３３份。以国外报道引物作一次ＰＣＲ和套式ＰＣＲ检出率分别为８．３％和１１．３％，作者建立的套式ＰＣＲ检出率为１８．０％，对部分ＰＣＲ产物进行序列分析证实为ＨＧＶ特异性基因。结论建立的方法可在中国人群中显著提高ＨＧＶＲＮＡ检出率。     

下肢深静脉血栓超声不同方法的对比研究

本文对４４例临床疑诊下肢深静脉血栓（ＤＶＴ）患者进行了二维彩色多普勒血流显像（２Ｄ－ＣＤＦＩ）和上行性静脉造影对比，旨在评估超声不同方法诊断ＤＶＴ的准确性。超声诊断ＤＶＴ的方法包括：血栓回声法（ＴＨ法）、探头加压法（ＣＯＭ法）、脉冲Ｄｏｐｐｌｅｒ法（ＰＤ法）和彩色Ｄｏｐｐｌｅｒ法（ＣＤ法）。３０条静脉造影确诊为ＤＶＴ，１４条阴性。单一指标以ＣＯＭ法最好，敏感性为９０．０％、特异性９２．８％和准确性９０．９％；不同指标联合以ＣＯＭ＋ＰＤ＋ＣＤ和ＴＨ＋ＣＯＭ＋ＰＤ＋ＣＤ法最佳，其敏感性均为９６．７％、特异性１００％和准确性９７．６％。超声是无创伤性评价下肢ＤＶＴ的敏感方法，全方位检查可更准确地诊断ＤＶＴ。     

套式聚合酶链反应单管法检测单纯疱疹病毒

应用聚合酶链反应方法，套式ＰＣＲ双管法及套式ＰＣＲ单法分别检测１３０份散发性脑炎患者脑脊液中单纯疱疹病毒的ＤＮＡ，阳性率依次为１８．５％（２４／１３０）、２９．２％（３８／１３０）、２９．２％（３８／１３０）；６０份非中枢神经系统感当者ＣＳＦ标本的检测阳性率分别为０、３．３％（２／６０）、０。结果显示：套式ＰＣＲ虽然提高了检测的敏感性，但假阳性也大大增加。改良的套式ＰＣＲ单管法则大大减少了污染机会