应用淋球菌PCR方法检测临床标本214份总结

应用淋球菌聚合酶链反应(PCR)方法检测了临床诊断为尿道炎、阴道炎、前列腺炎的标本214份,总阳性率为45.8％(98/214)。其中33份做了涂片对照,涂片阳性率为24.2％(8/33),而PCR阳性率为48.4％(16/33)。表明PCR法的敏感性远比常规涂片法强,对慢性淋病患者的诊断更有意义。     

荧光定量聚合酶链反应在淋球菌检测中的应用评价

目的 以淋球菌porA假基因为靶序列,建立灵敏度高,且特异性强的荧光定量(FQ)聚合酶链反应(PCR)检测方法.方法 以淋球菌porA假基因为靶序列设计引物和探针,在实时荧光PCR Master Mix基础上优化PCR反应体系和方法,并评价方法的灵敏度、特异性和稳定性等.结果 经评估表明该法特异性和敏感性均为100.0%,灵敏度较高,达到检测淋球菌小于50 CFU/mL的检测限;批间和批内检测变异系数均小于5%.结论 以淋球菌porA假基因为靶序列建立FQ-PCR检测方法,灵敏度高,特异性强,且稳定性好,适合于作为淋病临床实验室辅助诊断和淋球菌阳性结果的确证方法.     

应用聚合酶链反应技术检测淋球菌1394例结果分析

性传播疾病是当今世界上广泛流行的传染性疾病,其中以淋病的发生率最高。淋病是由淋病双球菌(淋球菌)引起,由于其临床表现缺乏特异性,传统的实验室检查主要依靠直接涂片镜检和细菌培养,但其影响的因素较多,阳性率也不高,我院于1995年1月以来应用聚合     

荧光定量聚合酶链反应检测淋球菌感染的临床价值

由淋球菌引起的淋病是重要的性传播疾病之一。男性患者 ,淋球菌常引起带有脓性分泌物和严重排尿困难的急性尿道炎 ;女性患者 ,主要感染子宫颈内膜 ,起初症状轻微而不易察觉 ,如不加处理会使感染上行 ,最后导致较严重后果[1] 。在潜伏期间毫无症状的带菌者极易感染他人 ,所以对高危人群的定期筛检、早期诊断非常重要。为了摸索出一种既简便、快速、经济 ,又特异、敏感的实验室检测方法 ,我们以细菌培养法为金标准 ,比较荧光定量聚合酶链反应 (FQ PCR)和拭条快检法与细菌培养检测淋球菌感染的敏感性和特异性 ,并探讨这三种方法的临床应用价…     

四种淋病实验室检测方法的比较和评价

本文对３０例来自妇科门诊的非性病患者和７０例来自皮肤科，妇科和泌尿科门诊的疑淋病患者分别作涂片、培养、ＰＣＲ检测ＮＧ和酶标法检测ＮＧ抗体四项检测，以培养为对照评价各方法的临床应用价值。结果表明，在３０例非性病患者中，培养和涂片均为阴性，但ＰＣＲ和ＮＧ抗体检测各有一例假阳性，假阳性率为３．３％。在７０例疑淋病患者中，有１５例培养阳性，其中ＰＣＲ阳性为１３例，故ＰＣＲ的假阴性率为１３．３％。因此，ＮＧ     

淋病奈瑟菌PCR检验质量控制结果分析

临床分离的淋病奈瑟菌以无菌生理盐水１０倍系列稀释，制备成不同浓度的菌悬液，作为ＰＣＲ质控 发给广东省部分开展淋病ＰＣＲ检验的实验室，２３个回报结果中，假阳经１７．６％。１０ＣＦＵ淋球菌检出率１５．７％，１０＾２ＣＦＵ检出率２７．２％，１０＾３ＣＦＵ检出率５３．９％。总符合率４４．８％，结果表明，一些实验室不仅存在假阳性问题，而且阳性检出率也不高，应引起主度重视。     

聚合酶链反应诊断女性淋病性尿道炎和宫颈炎

本文报告用聚合酶链反应诊断女性淋病性尿道炎和宫颈炎17例,将聚合酶链反应与淋菌分离培养比较,认为聚合酶链反应检测淋菌优于淋菌分离培养,具有快速、特异性和敏感性高的特点。     

聚合酶链反应快速检测结核杆菌的临床应用

聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)又称体外 DNA 扩增技术或体外核酸克隆技术,自1985年初 Saiki 建立以来,在短短的几年内获得了很大发展。Hance 最先把 PCR 技术应用到结核杆菌的诊断后,国内外相继研究应用。参考国外文献,我们设计合成了一对引物。特异性地扩增结核菌 B 蛋白基     

聚合酶链反应在淋病诊断及随访中的意义

我们应用PCR技术检测了大宗可疑淋病患者,并与培养法对照,试图了解PCR技术在淋病诊断及随访中的价值。1 对象与方法1.1 研究对象 366例可疑淋病患者,其中173例为广州市槎头妇教所1998年3月31日至6月30日的劳教人员,年龄18～48岁;193例为广州市性病防治监测中心1998年3月1日至5月17日性传疾病门诊的患者,年龄5～57岁。临床表现为阴道分泌物增多,或脓性分泌,病程3天至2月,平均15.6天,部分患者无症状。     

聚合酶链反应技术诊断淋病的体会

2009年1月至2011年1月,我科采用聚合酶链反应技术(PCR)检测淋病标本1568份,现将检测结果报告如下. 1 材料与方法 1.1 研究对象 本组泌尿生殖器分泌物采集标本共1568例,均来自于我院泌尿外科和妇科门诊病例.其中男性标本656例,女性标本912例.年龄18～60岁,其中18～30岁526例(33.55％);31～40岁437例(27.87％),41～50岁386例(24.62％),51岁以上者219例(13.97％),本组均为有淋病症状的疑似病人.     

聚合酶链反应检测结核杆菌的临床应用价值

５８例结核病患者与２８例非结核病呼吸系统疾病患者的痰中胸水标本，分别进行聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测结核杆菌及直接涂片找抗酸杆菌，同时用酶联法（ＥＬＩＳＡ）查血清结核抗体。对照研究表达ＰＣＲ检测结核杆菌特异性好，敏感性强，临床应用前景好。     

聚合酶链反应检测霍乱弧菌

为快速，准确地检测霍乱弧菌，控制霍乱流行，研究建立了一种聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测方法，根据霍乱弧菌肠毒素ＣＴ基因序列，自行设计一对特异引物，扩增片断为２９６ｂｐ，同时采用一种高效率，快速，简便的方法提取并纯化ＤＮＡ，该法能成功地检测各种样品中的产ＣＴ肠毒素Ｏ１群霍乱弧菌，应用ＰＣＲ技术和常规分离培养方法对９０９份腹泻患者粪例标本和１８份环境水样标本进行平行检测。结果表明，两种方法的检测结果一致。     

聚合酶链反应检测霍乱弧菌

为快速、准确地检测霍乱弧菌，控制霍乱流行，研究建立了一种聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测方法。根据霍乱弧菌肠毒素ＣＴ基因序列，自行设计一对特异引物，扩增片断为２９６ｂｐ，同时采用一种高效率、快速、简便的方法提取并纯化ＤＮＡ，该法能成功地检测各种样品中的产ＣＴ肠毒素Ｏ１群霍乱弧菌。应用ＰＣＲ技术和常规分离培养方法对９０９份腹泻患者粪便标本和１８份环境水样标本进行平行检测。结果表明，两种方法的检测结果一致，粪便标本阳性率为４．２％（３８／９０９）；水样标本为２２．２％（４／１８），其中１份粪便标本和１份水样标本，是经过第２次增菌培养后，检出用性，而ＰＣＲ方法未见假阳性及假阴性结果。表明ＰＣＲ方法准确、快速、灵敏，并可在２、３小时内检测出含３个菌细胞的标本。因此，该方法可广泛应用于检测各种临床、环境标本中的产ＣＴ肠毒素Ｏ１群霍乱弧菌。     

聚合酶链反应扩增结核杆菌的临床应用

采用PCR技术扩增人型结核分枝杆菌特异的158 bp DNA片段靶基因,检测60例肺结核病人痰标本,结果表明,阳性率达58.3%,对照的常规培养法阳性率为11.7%。20例非结核病患者痰标本两种检测结果均为阴性.研究结果表明,PCR 扩增检测结核杆菌技术比常规检验方法快速敏感,且有较高的特异性。     

热启动双重聚合酶链反应检测淋病奈瑟菌和沙眼衣原体

建立了蜡隔热启动双重聚合酶链反应同时检测临床泌尿生殖道样品的淋病奈瑟菌和沙眼衣原体的方法，对１７５例临床样品进行了检测，其中淋病奈瑟菌阳性２０例，占１１．４％，沙眼衣原体阳性为３９例，占２２．３％，淋病奈瑟菌和沙眼衣原体双重感染为１２例，占６．９％，做了单一ＰＣＲ与双重ＰＣＲ对照，结果完全相符，并对阳性ＰＣＲ产物进行了限制性酶切鉴定，本实验表明，双重ＰＣＲ对于临床检测淋病奈瑟菌和沙眼衣原体是一快捷     

聚合酶链反应检测真菌感染的临床评价

用聚合酶链反应 (PCR)检测真菌 ,已有较多报道[1 2 ] ,我们也曾报道过初步研究[3 ] 。为给临床提供快速、灵敏、非创伤的真菌感染诊断方法 ,本文就采用真菌通用引物PCR检测真菌DNA的灵敏度、特异性、可检测真菌范围及临床适用性作进一步评价。1　材料和方法1 1　引物　真菌 18S亚基rRNA多拷贝基因的保守序列通用引物序列为 5′ ATTGGAGGGCAAGTCTGGTG 3′和 5′ CCGATCCCTAGTCGGCATAG 3′ ,扩增产物大小因真菌病原体而异 ,为 4 82～ 5 0 3bp[4] ,白色念珠菌为 4 90bp。由北京赛百盛生物工程公司合成。1 2　临床无菌性…