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1.
甘氮酰脯氨酸二肽氨基肽酶测定及其应用   总被引:6,自引:1,他引:6  
本文介绍速率法测定血清甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶的方法,并应用于自动生化分析仪,测定的最适pH为8.6,酶活力在130U/L以下成线性,三份高、中、低值酶活力标本批内CV0.7%~1.4%,批间CV1.2%~4.4%。132例正常人GPDA为185.2±28.6(x±s)U/L,65例原发性肝癌组为408.0±216.1U/L(x±s),明显高于正常组(p<0.001),且与AFP水平无相关意义(r  相似文献   

2.
探讨用3-磷酸甘油脱氢酶偶联法测定血清中醛缩酶(ALD)活性的最佳反应条件。反应体系的终末浓度:TEA100mmol/L,FDP4mmol/L,碘乙酸0.22mmol/L,NADH0.26mmol/L,GDH≥1000U/L,TPI≥1500U/L,LD≥1000U/L。最适pH在7.8~8.0,Km为7.2×10-3mmol/L。批内CV:酶活性在7.34U/L和65.06U/L时,CV分别为5.7%和1.4%;批间CV:酶活性在11.89U/L和100.08U/L时,CV分别为6.0%和3.3%,酶活性线性范围至少可达180U/L。健康人60名,ALD活性为4.53±1.17(x±s)U/L,男女两组均值无显著性差异。本文对TEA-HCl(pH8.0)、Tris-HCl(pH8.0)和Colidine-HCl(pH7.5)三种缓冲液用于ALD活性测定效果进行了评价,结果表明在TEA缓冲液中所测ALD活性最高;TEA和Colidine两种缓冲液的浓度在25~150mmol/L范围内对ALD活性无影响,Tris缓冲液在50mmol/L时测得酶活性较高,缓冲液浓度过高或过低,酶活性均有所下降  相似文献   

3.
摘要:目的 利用人多能干细胞来源的体外神经管模型探索丙戊酸钠(VPA)导致神经管畸形的疾病发生机制。方法 悬浮 培养人多能干细胞并进行体外神经诱导,通过免疫荧光染色法检测多能性标志物八聚体结合转录因子 4(Oct 4),神经特性标 志物成对框基因 6(PAX6),E-钙黏蛋白(ECAD)、N-钙黏蛋白(NCAD),细胞骨架标志物 F-肌动蛋白(F actin)和极性标志物 蛋白激酶 λ(PKCλ)等指标的表达水平以验证体外神经管模型;采用 VPA 的药物作用试验对各实验组(VPA 0. 1、1 和 10 μmol / L组)及对照组进行进一步的验证。结果 免疫荧光染色法检测结果表明,多能性标志物 OCT4 的表达水平减少;神 经特性标志物 PAX6 的表达水平增加;ECAD 与 NCAD 的表达模式存在时空转变;F actin 和 PKCλ 均集中表达于细胞顶部;对 照组、VPA 0.1、1 和 10 μmol / L 组的细胞直径分别为(90.81±0.88)μm、(87.14±1.35)μm、(77.19±1.34)μm 和(75.63±0.86) μm,VPA 10 μmol / L及 1 μmol / L 组与对照组之间差异均具有统计学意义(P 均<0.05);VPA 1 μmol / L 组中 F actin 和 PKCλ 的 表达均未聚集在细胞顶面。结论 成功建立人多能干细胞来源的体外神经管模型;VPA 对体外神经管具有呈剂量依赖性的 生长抑制作用;VPA 通过影响细胞骨架功能和细胞极化导致 lumen 形成失败,是其导致神经管畸形的潜在疾病发生机制。  相似文献   

4.
摘要:目的 通过检测类风湿关节炎(RA)患者滑膜巨噬细胞胞外诱捕网(METs)形成情况,探讨 METs 在 RA 发病中的作用。 方法 收集 RA 及创伤手术患者的滑膜组织,采用苏木精-伊红(HE)染色检测炎症浸润情况,激光共聚焦显微镜观察巨噬细 胞(F4 / 80+ )的表达、巨噬细胞极化(F4 / 80+CD86+ ,F4 / 80+CD206+ )情况、METs(F4 / 80+ H2A+ )形成水平。 分离滑膜细胞,用蛋 白免疫印迹法检测滑膜细胞中 METs 瓜氨酸化组蛋白 H3(CH3)及肽酰基精氨酸脱亚胺酶 4(PAD4)的水平。 结果 与创伤手 术患者比较,RA 患者滑膜组织炎性浸润程度较重,炎性细胞增多,巨噬细胞总数和Ⅰ型巨噬细胞(M1)比例均显著增多(98± 7.09 vs 10±1.15,0.78±0.022 vs 0.13±0.011,P<0.001),两组间 M2 型巨噬细胞比例差异无统计学意义(0.23±0.019 vs 0.18± 0.012,P>0.05)。 RA 组 METs 形成显著高于对照组(0.65±0.023 vs 0.18±0.012,P<0.001)。 蛋白免疫印迹法显示 RA 患者滑膜 PAD4 和 CH3 水平较创伤手术患者明显增多(0.82±0.018 vs 0.20±0.015,0.83±0.013 vs 0.40±0.012,P<0.001)。 结论 RA 患者 滑膜中巨噬细胞明显增多,且以 M1 型巨噬细胞为主,METs 形成明显增多。  相似文献   

5.
目的:调查白血病和骨髓增生异常综合征(MDS)患者红细胞酶和同工酶谱改变的患病率,并研究其临床意义。方法:采用ICSH介绍的方法及PAGE电泳测定红细胞酶活性及PK和ADA同工酶,采用FPLC系统纯化ADA同工酶,分析酶蛋白的生化性质。结果:患病率:在229例白血病和MDS患者中,G6PD缺乏为43.1%,PK缺乏为27.8%。MDS患者中的酶缺乏患病率:PK缺乏为50.0%,G6PD缺乏为48.0%,PNP缺乏为39.1%;酶过多患病率:ADA过多为69.6%,ENOL过多为40.0%,ALD过多为30.4%。慢性粒细胞白血病(CML)的PK活性增高,而PK同工酶型均正常。急性白血病患者采用抗肿瘤抗生素后G6PD和6PGD活性减低(P<0.05)。MDS红细胞酶缺陷显著多于ADA2同工酶表达见于AML(M4和M5)的单个核细胞及慢性粒-单核细胞白血病(CMML)的红细胞,但ALL不表达(P<0.001)。ADA同工酶纯化分析示正常结构。结论:红细胞酶的检测可作为CML的预后参数,作为急性白血病抗肿瘤药物耐药预示指标,有助于MDS-RA和再障、CML与CMML的鉴别诊断。  相似文献   

6.
目的研究活化的蛋白 C抵抗(Activated protein C resistance,APGR)在正常妊娠中的发生情况,探讨狼疮抗凝物质(Lu-pus-like anticoagulant,LA)对妊娠性 APC-R的影响及二者与凝血酶生成、继发性纤溶的关系。方法采用 APTT-APC法检测APC-R、dRVVT法测定LA水平,并用 ELISA法测定了凝血酶原片段F1+2和D-二聚体(D-dimer,D-D)的含量。结果检测30例正常妇女对照(NC)和50例正常妊娠妇女,NC组APC-R比率为2.88±0.37,NP组为2.04±0.31(APC-R阳性率为42%);NC组 LA阳性率为 0, NP组为 36.7%; NC组 F1+2为(0.734 ± 0.42) nmol/L, NP组为( 1.05 ± 0.69) nmol/L; NC组D-D为(0.48±0.05)mg/L,NP组为(0.63±0.11)mg/L;NP组的APC比率、F1+2和D-D的测定结果均较NC组有显著性差异。结论妊娠可能发生与LA升高有关的APC-R,并导致了凝血酶激活物生成增加以及凝血酶、纤溶酶的激活和继发性纤溶的发生。  相似文献   

7.
为探讨扩张型心肌病(DCM)患者血清甘胆酸(CG)的变化,本文动态观察了27例DCM患者与30例血型心肌病(ICM)患者的血甭CG浓度及其他肝功能指标,结果:当心功能由Ⅳ级减轻至Ⅱ级(NYHA分级)时,DCM组CG由10.82±.lmg/L分别降至7.77±2.52mg/l和3.37±1.05mg/L分别降至7.77±1.05mg/L;ICM组XCG由5.46±1.2mg/L分别降至4.23±0.  相似文献   

8.
两点法测定腺苷脱氨酶及临床初步应用   总被引:4,自引:0,他引:4  
应用Trinder反应建立了两点法测定体液中腺苷脱氨酶。该方法应用方便,测定快速,灵敏,准确。对酶反应最佳条件进行了实验探讨,底物Km为0.26mmol/L,最佳pH7.4,延滞期5分钟,5-15分钟测得酶活性基本一致。批内CV2.03%,批间CV3.68%。55例健康人血清腺苷脱氨酶(ADA)21.39±4.17U/L(x±s),35例结核性胸腹水ADA活性为65.83±18.92U/L(x±s  相似文献   

9.
目的建立血清胆固醇酯转运蛋白活性测定方法。方法用14C标记的胆固醇酯合成高密度脂蛋白(HDL)样颗粒作为胆固醇酯的供体,以低密度脂蛋白为受体测定血清中胆固醇酯转运蛋白(CETP)活性,并对40例健康人、45例冠心病(CHD)、26例脑卒中患者血清CETP活性进行分析。结果 该方法线性范围为0~30%;高(26%)、低(6.8%)活性批内变异系数(CV)分别为6.0%、7.5%,批间CV分别为11.5%和12.3%;45例CHD患者血清CETP活性(x±s)为17.6%±5.4%,26例脑卒中患者为15.2%±3.8%,均明显高于健康对照(12.7%±3.9%)(P<0.01)。结论该法简便快速、精密度较高,为临床及科研工作中测定CETP活性提供了一种有效的方法。  相似文献   

10.
本文应用双功能经颅彩色多普勒超声(TCCD)对34例冠心病患者进行了脑血流动力学的检测,结果表明,冠心病患者频谱形态,第二峰高于第一峰20例,第一峰高于第二峰6例。大脑中动脉(MCA)血流速度低于正常对照组,搏动指数(PI)、阻力指数(RI)均增高P<0.001。椎动脉(VA)的PI升高P<0.001。而基底动脉(BA)Vs、Vd、Vm及PI、RI均有显著差异P<0.05和P<0.001。我们认为TCCD可以反映冠心病患者脑血流动力学变化及血管病变的程度,也可对冠心病患者并存脑动脉硬化的诊断具有一定临床应用价值  相似文献   

11.
改良凝胶吸附法制备的凝血酶原复合物   总被引:6,自引:4,他引:6  
采用DEAE-SephadexA50和DEAE-SepharoseCL-6B凝胶从人血浆中吸附制备经S/D病毒灭活处理后的PCC制品,DEAE洗脱液经S/D处理(0.3%磷酸三丁脂和1%Twen80,6~8h,24℃)后,使所加入具有感染剂量(>106)的标志病毒VSV、Sindbis、HIV均被有效灭活;PCC制品中Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ因子的比活性(U/mg)分别为0.799±0.349、0.343±0.252、0.747±0.348、0.580±0.199(n=7),均比传统PCC提高1.5~2.5倍(其中FⅨ∶C的比活性提高有显著性,t=3.105,P<0.01),同时也优于国内同类制品(t=2.360,P<0.05),对其杂蛋白(AT-Ⅲ、Fn、PKA、Plg、ⅧR∶Ag抗A、抗B凝集素)的分析也反映出PCC纯度有所提高。SDS-PAGE、IE、CIE电泳图谱及HPLC层析图谱证实上述结果,PCC中TNBP残留量≤10μg/ml,Tween80残留量≤100μg/ml,均在安全范围内。  相似文献   

12.
采用抗人凝血因子Ⅸ单克隆和多克隆两种抗体,建立了人凝血因子Ⅸ抗原(FⅨ∶Ag)酶联免疫测定法(ELISA)。标准曲线相关系数为0.993(P=0.001,n=5),测定范围(6.25~100)U/L,最低检测量1.5U/L;批内及批间变异系数分别为7.25%和4.73%,回收率99.7%;与人血浆中其它蛋白质未见交叉反应。测得20人份正常人血浆中FⅨ∶Ag为(1027±172)U/L,与FⅨ促凝活性(FⅨ∶C)测得值比较,差异无显著性(P>0.5)。重症乙型血友病人血浆FⅨ∶Ag测得值与临床诊断相符。  相似文献   

13.
从人精子中提取顶体素,制备兔抗人精子顶体素抗体,建立了定量检测顶体素的ELISA方法,本法线性范围为0.35-3.0mg/L,批内,批间CV分别为7.85-9.6%和8.4-10.8%。临床结果表明,精子密度为50×10^9/L,生育组顶体素含量为1.04±0.10mg/L,不育组顶体素含量为0.81±0.18/mg/L,两组之间有显著性差异,顶体素含量与精子密度,精子顶体完整率之间呈在。  相似文献   

14.
介绍了一种用琼脂糖凝胶电泳法分离血清腺苷脱氨酶(ADA)同工酶。利用琼脂糖凝胶缓冲液与电泳液的不连续性,成功地分离出人血清中的两条同工酶带ADA_(1+cp)、ADA_2。并对底物液中各成分的浓度进行了选择。酶促反应的最适pH为7.4,底物液中含腺苷为5.34mg/ml、XOD为0.2U/ml、PNP为0.4U/ml时呈色最佳。方法的最小检出限ADA(1+cp)为2.3~4.6U/L,ADA_2为2.7~5.4U/L;批内CV3.2%、批间CV4.3%。23份健康人血清ADA同工酶谱带的百分率为ADA_(1+cp)30.9±3.12%、ADA_2为69.1±3.12%。初步临床应用结果显示ADA同工酶谱带百分率的变化对肝炎和急性淋巴细胞白血病有辅助诊断价值,对癌性和结核性胸腹水有鉴别诊断的价值。  相似文献   

15.
不同剂量紫外线照射对血液抗氧化作用的影响   总被引:2,自引:0,他引:2  
实验用不同剂量短波紫外线(UV-C)照射家兔离体血液,采用化学发光法(CL)和分光光度法分别测定血浆超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量。未照射血液血浆SDO活力、MDA含量分别为946.67±57.65U/ml、17.76±3.39nmol/ml。小剂量(15秒)照射后SOD活力显著高于未照射血液(P<0.01),剂量增加后(30秒)SOD活力下降并接近未照射水平,照射1分钟后活力明显下降(P<0.05),并随短波UV-C剂量(3、6分钟)增大下降增多(P<0.001)。较小剂量UV-C(15秒、30秒、1分钟)照射后MDA含量无明显变化,UV-C照射3分钟时MDA含量开始出现明显升高(P<0.05),并随剂量加大(6分钟)进一步增高(P<0.001)。结果提示小剂量UV-C照射能够增强机体抗氧化能力,大剂量照射则使机体抗氧化能力下降,氧化损伤作用增强;并且说明UV-C照射所致机体脂质过氧化损伤与抗氧化能力下降,自由基生成增多、消除不足有关  相似文献   

16.
目的对缺血性心肌病(ICM)患者的左室重构(LVR)病理生理变化进行分析研究。方法应用HP 77020AC型彩色多普勒血流显像仪(探头频率3.5MHz)分别对56例ICM患者和50例正常对照组进行分析评价。结果显示ICM组的各项指标与正常组比较有显著性差异(P<0.01~0.001)。ICM组的LVEDd、EDV、ESV、ESS、PVA、LAT、LAF显著增大,EF、CO、LVSCI、MVCF、PVE、PFR及PVA/PVE显著降低(P<0.01~0.001)。结论认为ICM病人LVR的主要病因与心肌缺血引起的梗塞区膨展、左室扩张、容量负荷及室壁应力的增加有关,而ESV、EDV及EF可作为了解ICM远期预后的最佳指标  相似文献   

17.
不同病期慢性粒细胞白血病CD34阳性细胞的临床意义   总被引:4,自引:0,他引:4  
用APAAP法对34例慢性粒细胞白血病(CML)患者外周血和(或)骨髓单个核细胞(MNC)CD34抗原进行检测。CML慢性期、加速期、急变期外周血MNC的CD34抗原表达阳性率分别为7.28%±3.59%(n=20),17.55%±1.92%(n=6)和21.25%±8.25%(n=8)。慢性期与加速期、急变期相比差异显著(P<0.001)。CML慢性期患者低、中、高危组外周血MNCCD34抗原表达阳性率分别为4.06%±2.01%(n=8).8.30%±2.16%(n=8),11.65%±2.35%(n=4),差异显著(P<0.05)。CML初诊者外周血MNCCD34抗原阳性率较马利兰治疗者高。外周血和骨髓MNCCD34抗原的表达无显著性差异  相似文献   

18.
肝病患者血清Lp(a)检测的临床意义   总被引:1,自引:0,他引:1  
测定急性肝炎、慢性肝炎、肝硬化和重症肝炎患者血清中脂蛋白(a)[PL(a)]的浓度,结果分别为141.3±92.4、72.4±43.2、54.7±37.8和50.9±41.6mg/L,与正常对照组(155.6±99.1mg/L)比较差异显著(P<0.05).其含量随病情加重逐渐降低,与急性肝炎血清GPT呈负相关(r=-0.278,P<0.001).提示血清Lp(a)含量可作为反映肝脏合成功能和损害程度的指标之一。  相似文献   

19.
对偶氮肿Ⅲ(ArsenazoⅢ)比色法测定血清(浆)钙的方法学作了系统研究。结果表明:反应混合液的吸收光谱呈M型,两个吸收峰分别为600nm和650~660nm,但以660nm为适。试剂中ArsenazoIII的最适浓度为150μnol/L,试剂空白A(吸光度曾称光密度OD)受pH的影响,当pH为7.0 时A值最低。本法批内(n=20)和批间(n=40)CV分别为2.8%~2.96%、3.15%~3.37%,平均回收率为99.3%,线性高达6.0mmol/L,灵敏度为1mmol/L=0.17A。本法Y与EDTA自动滴定法X比较:Y=1.0059X-0.0141,r=0.9985、P<0.001、n=20。Mg ̄(2+)、Cu ̄(2+)、Fe ̄(2+)、Zn ̄(2+),Hb、Bil均不干扰测定。  相似文献   

20.
胆囊管低位汇合临床意义的探讨   总被引:2,自引:0,他引:2  
任旭  唐秀芬 《内镜》1996,13(2):79-81
762例ERCP中,胆囊管低位汇合(LJCD)31例(4.1%),其中合并胆囊结石16例(51.6%)与对照组1比较胆囊结石合并率差异显著(P〈0.01)》LJCD组b/a比值为0.22±0.07,对照组2(ERCP正常)其比值为0.66±0.09,LJCD组胆囊在胆管左侧壁汇合占有71%,右侧汇合为16%,对照组2左侧汇合与右侧汇合分别为5%与76%,胆囊管的长度,直径比对照组2明显增加。两组比  相似文献   

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