原位杂交检测肝癌组织c－myc和HBx基因的表达

应用光敏生物素标记基因探针原位杂交技术（ＤＮＡ－ｍＲＮＡ）检测２３例新鲜肝癌和癌旁组织中的ｃ－ｍｙｃ和ＨＢｘ基因表达状况。结果发现，１１例肝癌和癌旁组织的ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ和ＨＢｘｍＲＮＡ均为阳性，６例均为阴性，５例仅ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ阳性，１例仅ＨＢｘｍＲＮＡ阳性。ｘ~２检验显示肝癌组织ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ和ＨＢｘｍＲＮＡ无明显相关关系（Ｐ＞０．０５），提示ＨＢｘｍＲＮＡ不能直接激话ｃ－ｍｙｃ癌基因。     

老年男性肝癌存在c－myc和p53基因过量表达

本实验应用免疫组织化学（ＡＢＣ法）对８例石蜡包埋老年男性肝癌和癌旁组织的ｐ６２ｃ－ｍｙｃ和ｐ５３蛋白进行了检测。结果显示，癌和癌旁组织的ｐ６２ｃ－ｍｙｃ弱阳性者６例，仅癌组织或癌旁组织阳性者各１例；癌及其癌旁组织均ｐ５３阴性者２例。说明ｃ－ｍｙｃ和ｐ５３基因的过量表达参与了老年人肝癌的发生发展过程。     

肝癌组织中p62~（c－myc）表达及其意义

应用免疫组织化学（ＡＢＣ法）技术对４８例原发性肝癌患者的肝癌及癌旁石蜡包埋组织中ｐ６２~（ｃ－ｍｙｃ）进行检测，结果显示ｐ６２~（ｃ－ｍｙｃ）的阳性率在肝癌中为８３．３％（４０／４８），在癌旁组织为８９．６％（４３／４８），说明ｃ－ｍｙｃ基因的激活与肝癌癌变过程有密切关系。同时对ｐ６２~（ｃ－ｍｙｃ）表达的意义进行了讨论。     

肝癌组织中p62^c—myc表达及其意义

应用免疫组织化学（ＡＢＣ法）技术对４８例原发性肝癌患者的肝癌及癌旁石蜡包埋组织中ｐ６２＾ｃ－ｍｙｃ进行检测，结果显示ｐ６２＾ｃ－ｍｙｃ的阳性率在肝癌中为８３．３％（４０／４８），在癌旁组织为８９．６％（４３／４８），说明ｃ－ｍｙｃ基因的激活与肝癌癌变过程有密切关系。同时对ｐ６２＾ｃ－ｍｙｃ表达的意义进行了讨论。     

逆转录－套式－聚合酶链反应检测HCV RNA正链和负链及与肝细胞癌的关系

为了解ＨＣＶ与肝癌的关系，采用ＨＣＶ５－ＮＣＲ正相引物和反相引物逆转录－套式－聚合酶链反应（ＲＴ－Ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ）检测了２２例肝癌手术患者血清、癌组织和癌旁组织ＨＣＶＲＮＡ正链和负链；用ＨＢＶＣ保守区引物ＰＣＲ法检测了ＨＢＶＤＮＡ。结果发现：５例抗－ＨＣＶ阳性的肝癌患者中，３例血清、癌组织和癌旁组织ＨＣＶＲＮＡ正链扩增试验均阳性；１例三者均阴性；１例血清和癌旁组织阳性。３例正链扩增试验阳性的癌组织和癌旁组织均检出了ＨＣＶＲＮＡ负链，但血清中未检出负链。在２２例ＨＣＣ中１３例血清、８例癌组织和１５例癌旁组织中检出ＨＢＶＤＮＡ。５例有ＨＣＶＲＮＡ和／或抗－ＨＣＶ阳性的肝癌患者血清、和／或癌组织、和／或癌旁组织中均伴随ＨＢＶＤＮＡ和／或ＨＢ－ＶＭ阳性。提示ＨＣＶ可在癌旁肝细胞或肝癌细胞中感染并复制；ＨＢＶ感染与肝癌发生的关系比ＨＣＶ感染更密切。     

巢式PCR证明肝癌细胞有HBV─DNA复制

目的研究肝癌细胞和癌旁组织ＨＢＶ＿ＤＮＡ复制状况。方法３２例手术肝癌标本作癌及癌旁组织巢式ＰＣＲ，用特制引物，目的基因为ＨＢＶ的ｃｃｃＤＮＡ。同时作ＨＢＡｇ免疫组化。结果５／３２（例）的肝癌组织，１０／３２的癌旁组织呈ｃｃｃＤＮＡ（＋）。阳性者其ＨＢＡｇ阳性率亦较高。结论首次证明肝癌细胞有ＨＢＶ复制模板－ｃｃｃＤＮＡ，是肝癌细胞有ＨＢＶ复制的可靠证据。     

逆转录—套式—聚合酶链反应检测HCV RNA正链和负链及与肝细胞…

为了解ＨＣＶ与肝癌的关系，采用ＨＣＶ５′－ＮＣＲ正相引物和反相引物逆转录－套式－聚合酶链反应（ＲＴ－Ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ）检测了２２例肝癌手术患者血清，癌组织和癌旁组织ＨＣＶＲＮＡ正链和负链，用ＨＢＶＣ保守区引物ＰＣＲ法检测了ＨＢＶＤＮＡ，结果发现，５例抗－ＨＣＶ阳性的肝癌患者中，３例血清，癌组织和癌旁组织ＨＣＶＲＮＡ正链扩增试验均阳性，１例三者均阴性，１例血清和癌旁组织阳性。３例正链扩增试验阳性     

胃癌中癌基因ras c-myc mRNA表达的临床意义

目的探索癌基因ｒａｓ和ｃｍｙｃｍＲＮＡ在胃癌发生中单独和协同作用关系，选择胃癌的早期诊断依据．方法应用原位分子杂交（ＩＳＨ）技术，检测８８例胃癌组织中Ｈｒａｓ，Ｋｒａｓ，ＣｍｙｃｍＲＮＡ的表达，结合临床资料综合分析．结果Ｋｒａｓ，Ｈｒａｓ，ＣｍｙｃｍＲＮＡ在肿瘤区的阳性表达分别为７８４％，７０５％和５８０％，在癌旁区的阳性表达分别为２８４％，２７３％和２０５％，呈梯度下降趋势，３种癌基因的表达与胃癌的临床分型、组织学分类及有无淋巴结转移无关，ＣｍｙｃｍＲＮＡ的表达与患者生存期关系密切（Ｐ＜００５）．结论Ｋｒａｓ，Ｈｒａｓ，ＣｍｙｃｍＲＮＡ的表达可作为胃癌早期诊断的参考依据．     

肝细胞癌及癌旁组织中c－erbB－2蛋白的表达与乙型肝炎病毒感染的关系

目的及方法应用免疫组织化学技术检测了７６例肝细胞癌（ＨＣＣ）及其癌旁组织中ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白和增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的表达。结果及结论ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白在ＨＣＣ和癌旁组织内表达的阳性率分别为５７．９％（４４／７６）和７１．９％（４１／５７），阳性表达与ＨＣＣ组织学分级及细胞增殖状态无相关性，而与ＨＢＶ感染密切相关。ＰＣＮＡ在ＨＣＣ及癌旁组织的阳性率分别为７７．６％（５９／７６）和３５．１％（２０／５７），ＰＣＮＡ标记指数与ＨＣＣ组织学分级呈正相关。     

肝细胞癌及癌旁组织中c—erbB—2—蛋白的表达与乙型肝炎病毒感 …

目的及方法 应用免疫组织化学技术检测了７６例肝细胞癌（ＨＣＣ）及其癌旁组织ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白和增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的表达，结果及结论 ｅ－ｅｒｂＢ－２蛋白在ＨＣＣ和癌旁组织内表达的阳性率分别为５７．９％（４４／７６）和７１．９％（４１／５７），阳性表达与ＨＣＣ组织学分级及细胞增殖状态无相关性，而与ＨＢＶ感染密切相关，ＰＣＮＡ在ＨＣＣ及癌旁组织阳性率分别为７７．６％（５９／７６）和３５．１％     

肝癌及癌旁组织HBV DNA定点PCR研究

目的采用定点ＰＣＲ技术，研究ＨＢＶ的Ｓ和Ｃ基因在肝癌与癌旁组织的存在状态，探讨癌旁ＨＢｓＡｇ表达与Ｓ基因的关系。方法福尔马林固定，石蜡包埋肝癌及癌旁组织２８例，ＨＢｓＡｇ免疫组化后的切片分别切割癌组织、癌旁ＨＢｓＡｇ强阳性区（Ｐ２）及癌旁ＨＢｓＡｇ阴性区（Ｐ１）各１个低倍视野，作Ｓ及Ｃ基因ＰＣＲ。结果癌组织Ｓ基因较Ｃ基因检出率高（１８／２８ｖｓ１０／２８，Ｐ＜０．０５），癌旁二者无差异；癌旁中Ｐ１与Ｐ２的Ｓ及Ｃ基因检出率无显著性差异；高分化肝癌Ｓ和／或Ｃ基因检出率较中分化者低（２／５ｖｓ２０／２８，Ｐ＜０．０５）。结论癌组织中整合的ＨＢＶＤＮＡ为残缺不全的，ＨＢｓＡｇ强阳性与阴性区的Ｓ基因检出无显著性差异。     

丙型肝炎核心抗原的肝癌及癌旁表达

利用丙型肝炎病毒核心抗原（ＨＣｃＡｇ）单克隆抗体、ＡＢＰＡＰ法对５５例肝癌手术标本（有癌旁）作免疫组化，结果８例阳性（１４．５４％），其中５例癌细胞有阳性信号，阳性细胞散在分布，浆呈棕色，核阴性。１例癌阳性为包涵体型，其ＨＥ相应部位为毛玻璃状（无毛玻璃者阴性）。５５例中ＨＢｓＡｇ（＋）４３例，８例ＨＣｃＡｇ（＋）中有６例ＨＢｓＡｇ亦阳性，对丙型肝炎致癌机制作了讨论。     

乙型肝炎病毒相关肝细胞癌P^53蛋白的免疫组织化学研究

采用免疫组化染色检测肝癌组织及癌旁肝组织ＨＢｓＡｇ，ＨＢｃＡｇ以及Ｐ＾５３蛋白的表达，结果显示：癌灶组织中Ｐ＾５３蛋白阳性率２６．７％（１２／４５），癌旁肝组织无１例Ｐ＾５３蛋白阳性，Ｐ＾５３蛋白表达与ＨＢｓＡｇ无明显关系，而与肝癌发生年龄及癌细胞分化程度有关，提示Ｐ＾５３基因突变与ＨＢＶ相关肝癌的发生有一定关系，而多数肝癌组织无并Ｐ＾５３基因突变又进一步提示肝癌发生尚涉及其它复杂机制，此外Ｐ６５     

肝癌c—myc基因研究现状

ｃ－ｍｙｃ基因是一种恶性组织维持基因，当生长因子和激素刺激信号经Ｎ－ｒａｓ４因产物从细胞膜向细胞内快速传递后，ｃ－ｍｙｃ基因表达随即发生改变。研究表明，肝癌组织和癌旁组织中均可见ｃ－ｍｙｃ表达增高。对ｃ－ｍｙｃ与肝癌发生的关系，各家意见不一。Ｍａｋｉｎｏ等认为，ｃ－ｍｙｃ表达增高可能是肝癌发生的原因之一。Ｂｅｅｒ则认为在致肝癌过程晚期观察到ｃ－ｍｖｃ表达增高，只是这一过程晚期的一种特征，它仅反映细胞持续增殖的结果。也有实验表明，ｃ－ｍｙｃ表达与细胞增生之间无任何直接联系，ｃ－ｍｙｃ在肝癌中的表达…     

乙型肝炎核酸疫苗肌注小鼠后质粒的存续及局部组织内C-myc mRNA的检测

研究乙型肝炎核酸疫苗质粒ＮＶ－ＨＢ／ｓ接种小鼠后小鼠产生体液免疫应答的规律，质粒在注射局部的存续规律及对癌基因Ｃ－ｍｙｃ的可能影响。方法 ＥＬＩＳＡ法检测小鼠外周血中的抗ＨＢｓ；分别用原位杂交和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ吸印杂交检测小鼠肌组织标本中的疫苗质粒；并以原位杂交检测肌组织中的Ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ。结果 小鼠在接种ＮＶ－ＨＢ／ｓ后１月均已产生抗原ＨＢｓ，肌组织中ＮＶ－ＨＢ／ｓＤＮＡ的原位杂交阴性，仅     

肝细胞癌中端粒酶逆转录酶表达及其与肿瘤抑制基因p53相关性研究

目的探讨肝细胞肝癌（ＨＣＣ）中端粒酶逆转录酶（ＨＴＥＲＴ）ｍＲＮＡ表达意义及其与肿瘤抑制基因ｐ５３的相关性。方法收集３４例ＨＣＣ标本,应用ＲＮＡ－ＲＮＡ原位杂交技术检测ＨＴＥＲＴ ｍＲＮＡ表达,观察其与病理特征间的关系;用免疫组织化学技术检测ｐ５３蛋白,比较ＨＴＥＲＴ与ｐ５３表达间的关系。结果３０／３４例（８８．２％） ＨＣＣ中癌细胞ＨＴＥＲＴ ｍＲＮＡ呈阳性表达,其中小肝癌６例均为阳性;分化差、肝内外转移、包膜不完整、癌旁有活动性病变及ＨＢｓＡｇ阳性者ＨＴＥＲＴ ｍＲＮＡ表达较高;侵袭灶前沿癌细胞及少数非典型性增生的肝细胞中常见阳性。 ＨＴＥＲＴ ｍＲＮＡ和ｐ５３表达一致（均阳或均阴）者占７９．４％,两者表达具有相关性, ｐ５３阳性者 ＨＴＥＲＴ ｍＲＮＡ表达较强（Ｐ＜０．０５）。正常肝组织 ＨＴＥＲＴ ｍＲＮＡ呈阴性。结论 ＨＣＣ中 ＨＴＥＲＴ ｍＲＮＡ高表达; ＨＴＥＲＴ ｍＲＮＡ表达与ＨＣＣ发生、演进有关; ｐ５３可能参与ＨＴＥＲＴ ｍＲＮＡ的表达调控。     

肝癌组织IGF－II、IGF－IIR、HBxAg的表达与细胞DNA倍体和S期的关系

为了探讨胰岛素样生长因子ＩＩ（ＩＧＦ－ＩＩ）在肝癌发生发展中的作用，采用免疫组织化学ＰＡＰ法检测了肝癌组织ＩＧＦ－ＩＩ及其受体（ＩＧＦ－ＩＩＲ）、乙型肝炎病毒Ｘ抗原（ＨＢｘＡｇ）的表达，并用流式细胞术分析了ＩＧＦ－ＩＩ表达与细胞ＤＮＡ倍体、Ｓ期的关系。结果显示：（１）ＩＧＦ－ＩＩ、ＩＧＦ－ＩＩＲ、ＨＢｘＡｇ在血清乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）标记阳性的癌组织阳性率均为９３％（ｎ＝１５），高于ＨＢＶ标记阴性的癌组织（１／５）（Ｐ＜０．０５）；（２）ＩＧＦ－ＩＩ阳性的癌组织ＤＮＡ异倍体出现率为１００％、Ｓ期比例为２８．８±６．４％，高于ＩＧＦ－ＩＩ阴性的癌组织ＤＮＡ异倍体出现率（６０％）和Ｓ期比例（１２．８±２．４％）（Ｐ＜０．０５）；（３）肝癌组织ＩＧＦ－ＩＩ、ＩＧＦ－ＩＩＲ的表达与ＨＢｘＡｇ表达一致。研究结果提示ＩＧＦ－ＩＩ可能在乙型肝炎病毒标志物（ＨＢＶ－Ｍ）阳性的肝细胞癌发生发展中有某种作用，ＨＢｘＡｇ可能是ＩＧＦ－ＩＩ基因的一种激活因子。     

IFN－γ联合rhTNF－α抑制白血病细胞c－myc原癌基因的表达

将干扰素（ＩＦＮ－ｒ）和肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）与人白血病细胞株及急性髓细胞白血病（ＡＭＬ）病人原代白血病细胞体外液相共育，用细胞，总ＲＮＡ样品与￣（３２）Ｐ标记的ｃ－ｍｙｃＤＮＡ探针打点杂交，我们观察了ＩＦＮ－ｒ联合ＴＮＦ－α作用ＨＬ－６０细胞，ＴＮＦ作用病人原代白血病细胞对其ｃ－ｍｙｃ癌基因表达的影响。结果发现：１００Ｕ／ｍｌ和５００Ｕ／ｍｌ的ＩＦＮ－ｒ可明显促进５０Ｕ／ｍｌＴＮＦ－α对ＨＬ－６０细胞ｃ－ｍｙｃ表达的抑制作用；８例ｃ－ｍｙｃ高表达的ＡＭＬ病人，经５０Ｕ／ｍｌＴＮＦ作用后，其ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ水平发生显著性减低。结果证明了ＩＦＮ－ｒ具有协同ＴＮＦ－α抑制ＨＬ－６０白血病细胞ｃ－ｍｙｃ癌基因表达的作用，ＴＮＦ－α对白血病细胞株及病人原代白血病细胞ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ水平均有明显的抑制效应。     

肝组织谷氨酰转移酶mRNA亚型的测定及其意义

目的 探讨谷氨酰转移酶（ＧＧＴ）ｍＲＮＡ亚型转化与原发性肝癌（ＨＣＣ）发生的关系。方法 以ＲＴ—ＰＣＲ方法检测正常肝组织、非癌肝病肝组织、肝癌组织、癌旁组织、远癌组织及肝转移癌癌周组织的三种ＧＧＴｍＲＮＡ亚型（Ｆ Ｈ、Ｐ亚型）、结果 正常肝组织主要的ＧＧＴ ｍＲＮＡ类型为Ｆ亚型，非癌肝病肝组织及肝转移癌癌周组织的各ＧＧＴ ｍＲＮＡ亚型与正常肝组织相似，肝癌组织、癌旁组织及远癌组织ＧＧＴ ｍＲＮＡ—Ｈ亚型的阳性率显著高于正常肝脏及非癌肝病肝组织（９６．２％与０和２０．７％，ｘ２值分别为２８．３６、２２．４２，Ｐ＜０．０５），肝癌组织ＧＧＴ ｍＲＮＡ—Ｆ亚型阳性率明显低于正常对照及非癌肝病组（５０％与１００％，ｘ２＝１８．９９，Ｐ＜０．０５）。结论 ＧＧＴｍＲＮＡ亚型转化与肝癌发生有密切关系，分析ＧＧＴ基因可望成力检测肝细胞癌变的灵敏方法。     

血清HBsAg阳性患者肝癌及癌旁组织中HBx基因的表达及p53基因的突变

本实验用ＰＣＲ，ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染方法对２４例血清ＨＢｓＡｇ患者肝癌及癌旁组织中ＨＢｘ基因表达和Ｐ５基因突变进行了检测。肝癌组织中ＨＢｘ基因表达率为１７％，Ｐ５３基因突变率为３３％，癌旁正常组织和硬化组织中均无ＨＢｘ基因表达和Ｐ５３基因突变。